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全国首届动物生物技术学术研讨会

作者：严琳牟帆陈焕春华中农业大学畜牧兽医学院动物病毒室华中农业大学畜牧兽医学院动物病毒室华中农业大学畜牧兽医学院动物病毒室

白细胞介素2（Interleukin 2,IL-2）是重要的免疫调控因子,能以非特异性的方式增强针对特异性抗原的免疫力。众多试验结果与临床应用表明IL-2作为疫苗佐剂在治疗多种感染性疾病时具有良好的佐剂效应。本试验以两种猪IL-2重组蛋白（rIL-2... 详细信息

白细胞介素2（Interleukin 2,IL-2）是重要的免疫调控因子,能以非特异性的方式增强针对特异性抗原的免疫力。众多试验结果与临床应用表明IL-2作为疫苗佐剂在治疗多种感染性疾病时具有良好的佐剂效应。本试验以两种猪IL-2重组蛋白（rIL-2,包括大肠杆菌表达的IL-2,ErIL-2与酵母表达的IL-2,YrIL-2）连同伪狂犬病毒（Pseudorabies Virus,PrV）灭活疫苗一起免疫小鼠,检测rIL-2对该疫苗的佐剂效应。试验中,20只小鼠被随机等分为4组,分别接种生理盐水,PrV灭活苗与生理盐水,PrV灭活苗与ErIL-2,PrV灭活苗与YrIL-2。首免2w后加强免疫,分别在首免2、4及6w进行小鼠尾静脉采血用于检测体液免疫水平,于第6w提取小鼠脾脏淋巴细胞用于检测细胞免疫水平。通过ELISA方法检测了小鼠免疫后血清中IgG效价,结果发现rIL-2在对PrV灭活苗体液免疫方面促进作用并不明显。而CTL反应与淋巴细胞增殖试验结果显示,rIL-2有良好的促进细胞免疫反应作用,其中以EIL-2效应为更好。本试验证明rIL-2对PrV灭活疫苗确有一定佐剂活性。

关键词：白细胞介素2 佐剂伪狂犬病毒灭活疫苗体液免疫细胞免疫

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免疫增强剂对猪伪狂犬灭活疫苗的免疫增强作用

引用

浙江农业学报 2016年第11期28卷 1828-1833页

作者：耿文学唐波华涛侯继波张道华许家荣南京农业大学动物医学院江苏南京210095 江苏省农业科学院国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

为了评价免疫增强剂VA5对猪伪狂犬病毒灭活疫苗的免疫增强作用,将VA5与灭活疫苗混合并制成疫苗。通过常规Bartha-K61株灭活疫苗、含免疫增强剂灭活疫苗和Bartha-K61活疫苗3组免疫效力对比试验,首次免疫后14和35 d对猪进行采血,并且进行... 详细信息

为了评价免疫增强剂VA5对猪伪狂犬病毒灭活疫苗的免疫增强作用,将VA5与灭活疫苗混合并制成疫苗。通过常规Bartha-K61株灭活疫苗、含免疫增强剂灭活疫苗和Bartha-K61活疫苗3组免疫效力对比试验,首次免疫后14和35 d对猪进行采血,并且进行中和实验以及对相关细胞因子进行检测。结果表明,该免疫增强剂能够显著地提高猪伪狂犬灭活疫苗血清中抗体产生,同时能显著提高猪外周血淋巴细胞(PBMC)中IL-2和IFN-γ mRNA表达。交叉中和试验表明,VA5能够显著地提高猪伪狂犬灭活疫苗对伪狂犬流行变异株的中和作用。试验表明,VA5能够显著提升猪伪狂犬病毒灭活疫苗体液与细胞免疫,为研制免疫效果更好的灭活疫苗提供了依据。

关键词：免疫增强剂伪狂犬病毒灭活疫苗 Bartha-K61株免疫效力

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人参茎叶总皂苷联合亚硒酸钠对猪伪狂犬病灭活疫苗免疫的增强作用

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中国兽医学报 2021年第2期41卷 231-235,272页

作者： MAQBOOL Babar 王勇崔雪梅袁丽佳胡松华浙江大学动物科学学院浙江杭州310058

为了探讨人参茎叶总皂苷(ginseng stem-leaf saponins,GSLS)联合亚硒酸钠(Na2SeO3,简称Se)对伪狂犬病病毒(PRV)灭活疫苗免疫的增强作用,本试验给小鼠口服GSLS后,接种添加了Se的PRV灭活疫苗,并检测免疫后小鼠血清中PRV gB抗体及其亚类(I... 详细信息

为了探讨人参茎叶总皂苷(ginseng stem-leaf saponins,GSLS)联合亚硒酸钠(Na2SeO3,简称Se)对伪狂犬病病毒(PRV)灭活疫苗免疫的增强作用,本试验给小鼠口服GSLS后,接种添加了Se的PRV灭活疫苗,并检测免疫后小鼠血清中PRV gB抗体及其亚类(IgG1和IgG2a)水平、淋巴细胞增殖水平、淋巴细胞分泌细胞因子(IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-6)水平以及野毒(fPRV)攻毒后小鼠的存活率。结果显示,与仅仅免疫PRV灭活疫苗的小鼠相比,口服GSLS联合疫苗中添加Se(GSLS-Se)能够显著提高小鼠血清中PRV gB抗体及其亚类(IgG1和IgG2a)水平,淋巴细胞增殖水平和细胞因子(IFN-γ、IL-2和IL-6)水平。此外,GSLS-Se还提高了免疫小鼠对野毒感染的抵抗力。结果表明,GSLS-Se对PRV灭活疫苗具有免疫增强作用,值得在本动物上进一步研究。

关键词：人参茎叶总皂苷亚硒酸钠伪狂犬病毒灭活疫苗佐剂

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猪伪狂犬流行株分离鉴定及免疫增强剂对其灭活疫苗的增效作用

猪伪狂犬流行株分离鉴定及免疫增强剂对其灭活疫苗的增效作用

引用

作者：耿文学南京农业大学

学位级别：硕士

猪伪狂犬病(Pseudorabies,PR)由伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)引起,是养猪业中重要的传染病之一,给我国养猪业带来了巨大的经济损失。目前,对于该病的防控主要依靠疫苗免疫和淘汰阳性猪等综合措施,许多欧洲国家和美国依靠疫苗免... 详细信息

猪伪狂犬病(Pseudorabies,PR)由伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)引起,是养猪业中重要的传染病之一,给我国养猪业带来了巨大的经济损失。目前,对于该病的防控主要依靠疫苗免疫和淘汰阳性猪等综合措施,许多欧洲国家和美国依靠疫苗免疫结合猪群净化等根除了伪狂犬病。近几十年来,我国使用伪狂犬弱毒疫苗等防控该病,其中Bartha-K61的使用最为更广泛,取得了很好的免疫效果。然而,自2011年底以来,我国许多使用PRV弱毒疫苗的猪场开始出现妊娠母猪流产、弱仔、死胎,生产猪出现呼吸道症状,仔猪出现神经症状甚至死亡等疑似伪狂犬病症状。本研究从南京某疑似发生猪伪狂犬病的猪场的猪组织内分离到了一株PRV,对其进行gE、TK和gB基因进行测序和遗传进化分析,并使用加免疫增强剂的伪狂犬灭活疫苗对猪进行免疫,采用该PRV流行毒株进行攻毒,观察其免疫特性,为PRV流行毒株的进化机制的研究和新型PRV疫苗的研发奠定了基础。1猪伪狂犬流行株的分离鉴定2014年从南京免疫过Bartha-K61疫苗的某猪场中分离到1株病毒,将处理后的组织上清液接种BHK-21细胞分离培养后,对其进行gE、TK和gB的PCR鉴定,结果均为阳性。将命名为NJ-2014的毒株进行gE、TK和gB测序并与以往毒株进行进化树分析,核苷酸和氨基酸的同源性比较。结果显示,该毒株的gE基因与Bartha株的gE亲缘性较近,TK基因与SDWF1-China-2012株和TJ-China-2012株的亲缘关系较近,gB基因与SDWF1-China-2012的亲缘关系较近。通过对gE、TK和gB与参考序列的同源性比较发现,三个基因均存在不同程度的变异,其中gE与参考序列的核苷酸同源性为97.2%-99.6%,氨基酸的同源性与核苷酸同源性比较类似,为95.0%-99.5%;TK与参考序列的核苷酸同源性为99.1%-99.9%,氨基酸同源性为98.7%-99.7%;gB与参考序列的同源性为98.2%-99.7%,氨基酸同源性为96.6%-99.5%。研究表明,南京此猪场流行的伪狂犬病毒发生了一定的变异。2免疫增强剂在接伪狂犬灭活疫苗中增效作用在本次研究中,对猪伪狂犬灭活疫苗与免疫增强剂VA5进行混合制成疫苗,以此来评价加VA5免疫增强剂的猪伪狂犬灭活疫苗的免疫增加作用。通过对Bartha-K61活疫苗、Bartha-K61灭活疫苗以及含有免疫增强剂的Bartha-K61灭活疫苗的免疫效力对比试验,在首次免疫后14和35d分别对猪进行采血,并进行相关细胞因子和中和抗体的检测试验,在首次免疫后35d使用伪狂犬流行毒株对猪进行攻毒,进行免疫保护试验。结果表明,VA5免疫增强剂能够明显提升猪伪狂犬灭活疫苗的血清中和抗体水平,与此同时,对于猪外周血淋巴细胞(PBMC)中IL-2和IFN-γmRNA有着显著的提升作用。在交叉中和试验中,加增强剂的灭活疫苗组能够针对伪狂犬流行变异株产生很好的中和作用。对猪进行攻毒后,加免疫增强剂的灭活疫苗组有着100%的存活率,动物体重能够稳定增长,体温正常,鼻腔排毒情况以及脑肺组织含毒量最少,与常规的灭活疫苗以及活疫苗相比有着明显的优势。试验表明,VA5对于猪伪狂犬病毒灭活疫苗细胞和体液免疫均有很好的提升作用,这就为研制效果更好的疫苗提供了基础。

关键词：伪狂犬病毒分离鉴定伪狂犬病毒灭活疫苗免疫增强剂免疫效力

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