检索结果-南通市图书馆

柑橘全爪螨田间种群抗性监测及其潜在靶标和代谢抗性机制分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

柑橘全爪螨田间种群抗性监测及其潜在靶标和代谢抗性机制分析

作者：陈婷玉西南大学

学位级别：硕士

柑橘全爪螨(Panonychus citri)是柑橘产业上的重要害螨,由于其生长周期短、繁殖快等特点,加之田间杀螨剂长期不合理使用,容易导致抗药性产生。目前,柑橘全爪螨已对多种杀螨剂产生不同程度的抗性,但田间防治中化学防治仍不可被完全替代... 详细信息

柑橘全爪螨(Panonychus citri)是柑橘产业上的重要害螨,由于其生长周期短、繁殖快等特点,加之田间杀螨剂长期不合理使用,容易导致抗药性产生。目前,柑橘全爪螨已对多种杀螨剂产生不同程度的抗性,但田间防治中化学防治仍不可被完全替代。对田间种群进行杀螨剂抗性监测及其潜在的抗性分子机制研究对杀螨剂合理使用和延长现有杀螨剂的使用年限具有重要意义。本文监测了柑橘全爪螨田间种群对螺螨酯、阿维菌素和乙螨唑等几种常用杀螨剂的抗性现状;通过基因克隆、序列比对,分析了抗性种群靶标基因突变频率;通过转录组测序、表达模式分析、RNAi以及原核表达鉴定了乙螨唑抗性种群解毒代谢相关基因,进一步分析了候选基因在抗性中的功能。主要研究结果如下:1.柑橘全爪螨的田间抗性监测利用叶碟喷雾法,测定了四川丹棱、四川石棉、广西南宁和云南玉溪4个柑橘全爪螨田间种群的卵和成螨对阿维菌素、乙螨唑、螺螨酯、唑螨酯、联苯肼酯、氟啶胺和炔螨特7种常用杀螨剂的抗性。结果表明,4个种群雌成螨对阿维菌素抗性达到中抗至极高抗水平(15.73-162.98倍),对联苯肼酯均较为敏感(2.35?3.91倍),对氟啶胺和炔螨特的抗性水平相对敏感,分别为1.55?32.08倍和2.36-16.06倍。4个种群卵对乙螨唑均达到极高抗性水平(502.06?5001.51倍),对螺螨酯和唑螨酯抗性差异明显,分别为7.46?63009.98倍和30.35?185.99倍,对联苯肼酯的抗性相对敏感(4.79?21.25倍),对氟啶胺和炔螨特均较为敏感,分别为1.38?3.80倍和1.70?2.86倍。2.抗性种群靶标突变频率分析抗性监测结果表明,广西南宁种群对阿维菌素、螺螨酯和乙螨唑均有较高抗性。根据已有文献报道的这3种杀螨剂抗性靶标,分析了柑橘全爪螨南宁种群和敏感种群相关基因序列差异。结果表明,南宁种群在几丁质合成酶1(Chitin synthase1,CHS1)上没有发现突变;乙酰辅酶A羧化酶(Acetyl coenzyme A carboxylase,ACCase)上有2个突变位点(P1486S和A2042V);谷氨酸门控氯离子通道蛋白基因(Glu Cl)上有A302E(Glu Cl3)、G314E(Glu Cl1)和G326R(Glu Cl3)3个突变位点。通过对3个种群的突变频率测定,发现ACCase基因P1486和A2042突变频率与柑橘全爪螨对螺螨酯抗性,A302E(Glu Cl3)、G314E(Glu Cl1)和G326R(Glu Cl3)突变频率与柑橘全爪螨对阿维菌素抗性具有相关性。3.抗性种群与敏感种群转录组差异分析利用转录组测序,鉴定了敏感种群和南宁种群种群若螨差异表达基因,发现398条上调基因和482条下调基因。GO富集分析表明,差异表达基因主要参与催化活性和代谢过程;KEGG通路富集表明,差异基因在溶酶体和脂肪酸代谢通路中富集最多。在上调差异表达基因中,筛选出ID为EVM0010342、EVM0003744、EVM0002476、EVM0006560、EVM0005463、EVM0010586、EVM0005858、EVM0003202和new Gene＿814这9条上调倍数较高的解毒代谢相关基因。4.候选基因表达模式分析及不同种群酶活测定利用RT-qPCR(real time quantitative-PCR)技术,分析敏感种群和南宁种群的9个候选基因在不同发育阶段的m RNA表达水平差异。结果发现,与敏感种群相比,南宁种群EVM0010342基因(PcGSTmu01)在不同发育阶段均显著上调。增效试验表明,南宁种群经1000 mg/L马来酸二乙酯(DEM)处理后,南宁种群对乙螨唑的LC值为2880.56 mg/L,与对照组相比,增效比(SR)为3.09,DEM对乙螨唑的增效明显。上述结果表明,PcGSTmu01基因上调可能与南宁种群对乙螨唑的抗性有关。5.候选基因功能分析蛋白性质预测结果表明,PcGSTmu01基因编码的蛋白不存在跨膜结构域和信号肽,蛋白亲水性较高,通过RNAi和原核蛋白系统对PcGSTmu01基因进行功能验证。结果表明,以取食dse GFP作为对照,南宁抗性种群若螨饲喂1000 ng/μL的ds PcGSTmu01 24 h后,PcGSTmu01基因表达水平下降了53.79%。经基因沉默后的南宁种群若螨,用乙螨唑(5500 mg/L)处理24 h后,死亡率为60.66%,与对照组相比死亡率上升了21.51%。进一步应用原核表达系统在体外表达出大量有活性的可溶性PcGSTmu01蛋白,该蛋白对底物二硝基氯苯(CDNB)的催化活性为1.29±0.02 U/mg pro/min。高效液相色谱分析结果表明,PcGSTmu01蛋白对乙螨唑有一定的代谢作用,3 h代谢率为12.84%。上述结果表明PcGSTmu01基因参与了柑橘全爪螨对乙螨唑的抗性。

关键词：柑橘全爪螨杀螨剂抗性监测突变频率代谢抗性

稗草CYP81A68对五氟磺草胺的代谢抗性机理研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

稗草CYP81A68对五氟磺草胺的代谢抗性机理研究

作者：郭秋霜湖南农业大学

学位级别：硕士

水稻(Oryza sativa L.)是世界的主要粮食作物之一,水稻的产量和质量对保障粮食安全具有重要意义。稗属杂草(Echinochloa crusgalli)是我国乃至全世界水稻田的主要恶性杂草,在我国各个水稻产区均有分布,严重影响水稻产量及质量。五氟磺草... 详细信息

水稻(Oryza sativa L.)是世界的主要粮食作物之一,水稻的产量和质量对保障粮食安全具有重要意义。稗属杂草(Echinochloa crusgalli)是我国乃至全世界水稻田的主要恶性杂草,在我国各个水稻产区均有分布,严重影响水稻产量及质量。五氟磺草胺(penoxsulam)被用作防治水稻田稗草及其他杂草,作用靶标酶为乙酰乳酸合成酶(Acetolactate synthase,ALS)。由于长期大量使用五氟磺草胺,稗草对其抗药性逐步发展,田间防治效果下降。本文以田间采集的稗草种群为研究对象,确定其对ALS抑制剂类除草剂五氟磺草胺的抗性水平;通过整株生物测定法确定抗五氟磺草胺稗草种群对其它除草剂的交互抗性和多抗性;通过对靶标酶ALS基因克隆及分析确定抗性种群是否存在靶标抗性;通过细胞色素P450(P450)抑制剂马拉硫磷和谷胱甘肽-S-转移酶(GST)抑制剂NBD-Cl筛选出疑似具有代谢抗性的稗草种群;通过高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用技术(HPLC-Q-TOF-MS)测定抗敏种群的代谢差异;采用转录组测序(RNA-seq)分析挖掘与稗草对五氟磺草胺抗性相关的代谢酶基因并对其进行验证,通过转基因技术在水稻中验证抗性基因CYP81A68的功能。主要研究结果如下:采用整株生物测定法,测定了稗草种群对五氟磺草胺抗药性水平,结果表明抗性种群(R)的相对抗性倍数为11.7倍;交互抗性结果表明,R种群未对ALS抑制剂类除草剂双草醚、氟吡磺隆产生抗性;多抗性结果表明,R种群对乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)抑制剂类除草剂氰氟草酯产生了12.03倍的抗性,对噁唑酰草胺产生了3.86倍的抗性。测序结果表明:R种群中没有发现已报道的ALS靶标位点突变,表明其抗性可能与非靶标抗性机理有关。P450抑制剂马拉硫磷、GST抑制剂NBD-Cl与五氟磺草胺联用研究表明:马拉硫磷可以显著提高R种群对五氟磺草胺的敏感性,R种群的GR从41 g a.***.ha降至3.8 g a.***.ha,而五氟磺草胺与NBD-Cl联用并未发现明显逆转作用。HPLC-Q-TOF-MS测定稗草对五氟磺草胺代谢研究表明:R种群M为32±1.9 h,S种群M为95±9.6 h,在施药0.5 d～6 d内,R种群对五氟磺草胺的代谢水平显著高于S种群,表明R种群可能存在着P450介导的非靶标抗性。转录组测序研究表明:筛选到4个与五氟磺草胺代谢抗性相关的候选基因,通过qRT-PCR对其进行进一步验证,发现其中CYP81A68基因上调表达11.2倍,这表明CYP81A68可能参与R种群对五氟磺草胺的抗药性。转基因水稻幼苗对除草剂敏感性测定结果表明:过表达CYP81A68转基因水稻幼苗对五氟磺草胺、氰氟草酯和噁唑酰草胺均具有抗性,对双草醚和氟吡磺隆并未产生抗性。转基因水稻的HPLC-Q-TOF-MS研究结果表明:过表达CYP81A68基因水稻代谢速率高于对照GFP水稻,并且过表达CYP81A68转基因水稻中五氟磺草胺的主要代谢物比GFP水稻高,这说明CYP81A68的过表达增强了五氟磺草胺代谢。通过同源建模和分子对接发现CYP81A68活性位点的血红素铁原子与五氟磺草胺、氰氟草酯、噁唑酰草胺之间的距离很近,结合能很低,表明CYP81A68可能具有催化作用。这也为揭示除草剂和CYP81A68相互作用机制提供了理论依据。应用聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)技术克隆了稗草CYP81A68基因的启动子全长,通过PLACE和Plant CARE对启动子全长1500 bp进行分析,根据CYP81A68启动子主要顺式作用元件的分布,分别扩增得到7个不同长度的CYP81A68启动子5’端缺失片段并构建植物表达载体,瞬时转化烟草;GUS组织染色结果初步确定CYP81A68基因启动子的核心功能区位于-380 bp～-140 bp之间;通过UCSF程序预测发现R、S种群的CYP81A68启动子的CpG岛都包含在-380 bp～-140 bp之间的区域,并且R种群CYP81A68基因的甲基化水平比S种群低2倍。这说明在R种群中,DNA甲基化可能参与了CYP81A68基因的过表达。综上所述,本研究确定了稗草对五氟磺草胺的抗性水平,并且明确了CYP81A68过表达是稗草对五氟磺草胺产生抗药性的重要代谢抗性机理,为水稻田五氟磺草胺治理提供了理论依据。

关键词：稗草五氟磺草胺代谢抗性 CYP81A68 DNA甲基化

棉花花生间作田中花生蚜对吡虫啉代谢抗性机制初步研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

棉花学报 2020年第2期32卷 151-157页

作者：杨媛雪李卓段爱玲薛超须志平赵鸣山东棉花研究中心济南250100 华东理工大学药学院上海200237

【目的】探讨棉花花生间作田中棉蚜(Aphis gossypii Glover)和花生蚜(Aphis craccivora Koch.)对吡虫啉抗性的差异以及花生蚜对吡虫啉代谢抗性的机制,以科学有效防治这一类害虫,避免其对吡虫啉的抗性快速发展。【方法】采集山东巨野和临... 详细信息

【目的】探讨棉花花生间作田中棉蚜(Aphis gossypii Glover)和花生蚜(Aphis craccivora Koch.)对吡虫啉抗性的差异以及花生蚜对吡虫啉代谢抗性的机制,以科学有效防治这一类害虫,避免其对吡虫啉的抗性快速发展。【方法】采集山东巨野和临清2个地区的棉花花生间作农田中的棉蚜和花生蚜,对这两个地区的地理种群和室内敏感品系进行了吡虫啉的室内毒力测定;使用增效剂顺丁烯二酸二乙酯(Diethyl maleate,DEM)、胡椒基丁醚(Piperomyl butoxide,PBO)和磷酸三苯酯(Triphenyl phosphate,TPP)3种增效剂进行了增效剂效果试验;并检测了2个地理种群和室内敏感品系花生蚜细胞色素P450单加氧酶(Cytochrome P450 monooxygenase,P450)、谷胱甘肽S-转移酶(Glutathione S-transferase,GST)和羧酸酯酶(Carboxylesterase,CarE)3种解毒代谢酶的活性。【结果】临清和巨野2个地区的棉蚜对吡虫啉抗性处于中等水平,抗性倍数分别为43.2倍和54.6倍;而花生蚜对吡虫啉则处于敏感或低水平抗性,2个种群抗性倍数分别为3.7倍和8.3倍。防治花生蚜的增效剂试验结果表明,巨野种群中,PBO、DEM对吡虫啉具有显著的增效作用,增效比分别达到3.63、1.95,而TPP不具有增效作用;在临清种群中,PBO对吡虫啉具有显著的增效作用,增效比达到3.05,而DEM和TPP不具有增效作用。对花生蚜的代谢酶活力测定发现,巨野种群与敏感品系相比,CarE活性没有显著差异,而P450和GST活性显著高于敏感品系;临清种群与敏感品系相比,CarE和GST活性无显著性差异,而P450活性显著高于敏感品系。【结论】间作农田中2种蚜虫对吡虫啉的敏感性差异较大,需要合理施药延缓抗药性的增强,同时推断P450和GST在花生蚜对吡虫啉的抗药性中发挥一定的作用。

关键词：棉蚜花生蚜间作农田吡虫啉代谢抗性

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

蚊虫杀虫剂代谢抗性研究进展

中国热带医学 2021年第4期21卷 375-379页

作者：李雅姝唐建霞朱国鼎江苏省血吸虫病防治研究所世界卫生组织消除疟疾研究与培训合作中心国家卫生健康委员会寄生虫病预防与控制技术重点实验室江苏省寄生虫与媒介控制技术重点实验室江苏无锡214064

蚊媒传染病在全球广泛分布,成为全球重大公共卫生问题。杀虫剂广泛应用于蚊虫的防控,然而杀虫剂的长期广泛使用导致昆虫对其适应性增强以及抗药性产生,因此,了解杀虫剂抗药性机制对蚊虫治理具有重要意义。代谢抗性是昆虫杀虫剂抗性产生... 详细信息

蚊媒传染病在全球广泛分布,成为全球重大公共卫生问题。杀虫剂广泛应用于蚊虫的防控,然而杀虫剂的长期广泛使用导致昆虫对其适应性增强以及抗药性产生,因此,了解杀虫剂抗药性机制对蚊虫治理具有重要意义。代谢抗性是昆虫杀虫剂抗性产生的主要途径之一,其过程涉及复杂的酶系反应和毒物代谢途径上的代偿改变,而对于蚊虫而言,不同种属的蚊虫所涉及的代谢抗性机制也不尽相同。近年来,随着研究技术的革新和发展,基于高通量检测组学等技术手段在杀虫剂抗性研究中的应用愈发广泛,包括杀虫剂抗性相关分子活化、转录及调控变化等代谢抗性产生机制也逐渐被揭示。本文就近年来蚊虫解毒酶在杀虫剂抗性的产生和作用机制上的研究进展进行综述和展望。

关键词：蚊虫杀虫剂抗性代谢抗性

芒果蒂腐病菌(Lasiodiplodia theobromae)对苯醚甲环唑代谢抗性生化机制研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

热带生物学报 2024年

作者：李鹏声刘锦霖杨叶海南大学热带农林学院

为探索芒果可可毛色二孢(Lasiodiplodia theobromae (Pat.) Griffon & Maubl.)对苯醚甲环唑产生代谢抗性的生化机制，针对相关的生化指标进行测定。通过菌丝生长速率法测定23株可可毛色孢对苯醚甲环唑的敏感性，结果表明：9个菌株表现... 详细信息

为探索芒果可可毛色二孢(Lasiodiplodia theobromae (Pat.) Griffon & Maubl.)对苯醚甲环唑产生代谢抗性的生化机制，针对相关的生化指标进行测定。通过菌丝生长速率法测定23株可可毛色孢对苯醚甲环唑的敏感性，结果表明：9个菌株表现抗性，EC50值在5.61-28.70 μg/mL之间。本研究选择马来酸二乙酯(DEM)、胡椒基丁醚(PBO)和磷酸三苯酯(TPP)，对苯醚甲环唑与代谢酶抑制剂的混用增效作用进行测试，结果表明，苯醚甲环唑分别与DEM (或PBO、TPP)联合处理后表现出增效作用。苯醚甲环唑处理后，菌株中的谷胱甘肽-S-转移酶(GST)、细胞色素P450酶(P450)、羧酸酯酶(CarE)的酶活普遍升高；处理12 h，抗性菌株的酶活均显著高于敏感菌株。此外，UPLC-MS/MS测试结果显示，敏感菌株中苯醚甲环唑的残留量明显高于抗性菌株。上述结果表明，解毒代谢酶GST、P450和CarE参与可可毛色二孢对苯醚甲环唑的代谢，可能是病菌对苯醚甲环唑产生抗性的重要原因。该研究结果为杀菌剂抗性机制提供了新见解，为后续探析杀菌剂代谢抗性的分子机制奠定了基础。

关键词：芒果可可毛色二孢苯醚甲环唑代谢抗性生化机制

烟草甲对高效氟氯氰菊酯的抗性测定、代谢抗性机理和抗性治理

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

烟草甲对高效氟氯氰菊酯的抗性测定、代谢抗性机理和抗性治理

作者：孙倩中国科学技术大学

学位级别：硕士

烟草甲Lasioderma serricorne(Fabrcius),作为世界性仓储害虫,也被认为是最为危害烟叶和卷烟制品的害虫。据保守估计,因虫害问题,全球烟草行业遭受的年经济损失高达30亿美元。储烟烟草甲在中国分布十分广泛,并逐渐丧失区域特征。近些年... 详细信息

烟草甲Lasioderma serricorne(Fabrcius),作为世界性仓储害虫,也被认为是最为危害烟叶和卷烟制品的害虫。据保守估计,因虫害问题,全球烟草行业遭受的年经济损失高达30亿美元。储烟烟草甲在中国分布十分广泛,并逐渐丧失区域特征。近些年,由于仓库熏蒸技术的提高及烟草工业对仓库基础建设和日常卫生管理的加强改善,烟叶贮存仓库中的烟草甲得到了良好控制。但在不适宜进行熏蒸处理的卷烟厂,除清洁卫生外,储烟烟草甲的防治主要依赖于残留和接触性气溶胶杀虫剂的使用。但是考虑到安全和健康等因素,可用于卷烟厂中防治烟草甲的杀虫剂种类十分有限,且拟除虫菊酯类杀虫剂用于防治中国卷烟厂中的烟草甲已有20多年,其抗药性水平备受关注。实际上,昆虫抗药性的产生速度远高于杀虫剂的研发速度,这就要求我们在现有杀虫剂的基础上不断探索抗性昆虫防治新策略,提高害虫防治效益。同时,对昆虫抗药性机制的研究有利于从根本上确定昆虫微进化的方向,为抗药性昆虫防治及新型杀虫剂的探索提供理论依据。本研究的主要内容及结果如下:1.本文中,使用喷雾毒性生物测定、滤纸残留接触毒性生物测定和幼虫胃毒兼触杀毒性生物测定研究了高效氟氯氰菊酯对采集自中国部分地区卷烟厂的烟草甲种群的接触毒性、残留接触毒性和胃毒兼触杀毒性,并确定了各个种群对高效氟氯氰菊酯的抗药性水平。生物测定结果表明,采集自卷烟厂中的烟草甲种群经多年暴露于拟除虫菊酯类杀虫剂,均产生了不同水平的高效氟氯氰菊酯抗药性(喷雾毒性生物测定中,施药后2 h和24 h得到的RR50范围分别为3.51-10.20和4.05-49.50;滤纸残留接触毒性生物测定中,暴露2 h后得到的RR50范围为4.74-14.47;幼虫胃毒兼触杀毒性生物测定中,当用浓度为3 mg/kg的高效氟氯氰菊酯处理的小麦饲养烟草甲时,五个采集自卷烟厂的烟草甲种群的幼虫至成虫孵化率均显著高于参考敏感品系。此外,PEARSON相关性分析结果表明,三种生物测定结果在一定程度上具有显著正相关性。2.实验室条件下,ELISA试剂盒检测和生化检测确定了五个采集自卷烟厂的烟草甲种群和参考敏感品系烟草甲的CarE,GST和CYP450活性及含量。实验结果表明,这几种解毒酶的含量增加可能对其抗药性产生贡献较小,而CYP450活性增强极有可能和烟草甲的高效氟氯氰菊酯抗药性产生有关,下一步则需从分子水平上对其抗药性机制进行研究。此外,PEARSON相关性分析结果也表明,烟草甲成虫与幼虫的CYP450活性,和生物测定结果之间具有一定程度的显著正相关性。3.通过实验室生物测定和实地试验从理论上和实际上评估了吡虫啉作替代杀虫剂对产生高效氟氯氰菊酯抗药性的烟草甲的防治效果。生物测定结果表明,对高效氟氯氰菊酯表现出12.52-25.21倍抗药性的烟草甲种群,对吡虫啉仅表现出1.00-1.46倍抗药性水平,即无交互抗性,这为吡虫啉用于实地害虫防控提供了重要理论依据。同时,实地试验结果也表明,在实际应用中,吡虫啉作替代杀虫剂可有效抑制烟草甲种群密度增长。

关键词：烟草甲高效氟氯氰菊酯吡虫啉杀虫剂抗药性代谢抗性解毒酶

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

日本看麦娘对精噁唑禾草灵的代谢抗性研究

日本看麦娘对精噁唑禾草灵的代谢抗性研究

作者：李君君安徽科技学院

学位级别：硕士

我国小麦田杂草发生情况严重,其中发生较多的杂草是禾本科杂草,而日本看麦娘(Alopecurus japonicus Steud.)的防除效果越来越差,严重影响小麦品质和产量。精噁唑禾草灵(fenoxaprop-P-ethyl)是APP类除草剂,主要应用于禾本科杂草。近几年... 详细信息

我国小麦田杂草发生情况严重,其中发生较多的杂草是禾本科杂草,而日本看麦娘(Alopecurus japonicus Steud.)的防除效果越来越差,严重影响小麦品质和产量。精噁唑禾草灵(fenoxaprop-P-ethyl)是APP类除草剂,主要应用于禾本科杂草。近几年,精噁唑禾草灵已经无法有效防除日本看麦娘,甚至一些地区已经产生了多抗性,这是大家极为关注的方向。本课题组研究发现日本看麦娘对精噁唑禾草灵的抗性与靶标突变有关,可能存在GSTs代谢酶介导的非靶标抗性。主要明确日本看麦娘对精噁唑禾草灵的抗药性水平及代谢抗性机制,为代谢抗性研究提供试验材料,延缓杂草抗药性的发生,为田间有效防治杂草提供理论依据。本试验基于课题组研究的进展上进行研究,以采自不同地区的日本看麦娘为研究对象,研究日本看麦娘对精噁唑禾草灵的代谢抗性,主要研究结果如下:(1)本试验对采自不同地区的日本看麦娘种群进行抗药性水平测定,研究发现 AH40、AH41、AH42、AH43、AH44、JS19、JS20 和 JS21 八个日本看麦娘种群已经对精噁唑禾草灵产生了不同程度的抗药性。这些抗精噁唑禾草灵的日本看麦娘种群的GR50值远远高于其推荐剂量,该结果表明,精噁唑禾草灵已经无法有效防除日本看麦娘。(2)本试验采用整株生物测定法,测定细胞色素P450氧化酶系抑制剂PBO和马拉硫磷与精噁唑禾草灵作用,其结果表明细胞色素P450氧化酶系抑制剂提高了日本看麦娘种群AH40、AH41、AH42、AH43对精噁唑禾草灵的敏感性,但仍然有一定程度的抗性,可能是抗性日本看麦娘种群还存在其他靶标抗性或非靶标抗性。(3)本试验采用整株生物测定法测定GSTs抑制剂灭草环和NBD-Cl、三聚氯氰对抗精噁唑禾草灵日本看麦娘的影响。试验结果得出,日本看麦娘种群AH40、AH41、JS19、JS20存在GSTs介导的代谢抗性,GSTs抑制剂显著提高日本看麦娘对精噁唑禾草灵的敏感性,其GR50值仍高于推荐剂量,说明可能存在靶标抗性或非靶标抗性。(4)本试验对日本看麦娘进行抗性谱测定,其结果如下:日本看麦娘种群AH41、AH42、AH43、AH44、JS19、JS20 和 JS21 对 ACCase 抑制剂类除草剂产生交互抗性。日本看麦娘种群AH40、AH41、AH42、AH43、JS18、JS19、JS21对ALS抑制剂类除草剂产生交互抗性。日本看麦娘种群AH41、AH42、AH43、JS19对ACCase抑制剂和ALS抑制剂产生多抗性。综上所述,本研究已明确日本看麦娘对精噁唑禾草灵的抗性水平。P450s酶抑制剂和GSTs抑制剂对药剂有增效作用,说明日本看麦娘的抗性机制中是存在代谢抗性,为阐述代谢抗性机理提供理论依据。日本看麦娘对ACCase抑制剂和ALS抑制剂产生交互抗性和多抗性,为农业生产制定科学合理的防治杂草策略。

关键词：日本看麦娘精噁唑禾草灵代谢抗性抗药性

稗草谷胱甘肽S-转移酶在抗噁唑酰草胺代谢抗性中的作用

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

稗草谷胱甘肽S-转移酶在抗噁唑酰草胺代谢抗性中的作用

作者：彭谦华中农业大学

学位级别：硕士

稗草（Echinochloa crus-galli）是水稻田常见杂草之一,严重影响水稻的产量和品质,目前对稗草的防治主要以化学药剂为主。噁唑酰草胺是一种稻田常用的乙酰辅酶A羧化酶抑制剂类除草剂,对于禾本科杂草表现出优异的除草活性,在稗草防治中... 详细信息

稗草（Echinochloa crus-galli）是水稻田常见杂草之一,严重影响水稻的产量和品质,目前对稗草的防治主要以化学药剂为主。噁唑酰草胺是一种稻田常用的乙酰辅酶A羧化酶抑制剂类除草剂,对于禾本科杂草表现出优异的除草活性,在稗草防治中具有重要价值。为延缓稗草对噁唑酰草胺抗药性的产生,延长噁唑酰草胺在水稻田的使用寿命,本研究监测了湖北、湖南、江苏等地区田间稗草种群对噁唑酰草胺的敏感性;研究了稗草谷胱甘肽S-转移酶（Glutathione S-Transferase,GST）在抗噁唑酰草胺代谢抗性中的作用。主要结果如下:1.在整株水平上通过茎叶喷雾法检测了2016-2018年湖北、湖南、江苏、江西、安徽采集的38个田间稗草种群对噁唑酰草胺的敏感性。结果表明,30个稗草田间种群对噁唑酰草胺敏感。进一步剂量反应曲线测定结果表明,湖北省公安县、通城县、枣阳市和安徽省六安市田间种群对噁唑酰草胺处于低抗性水平,抗性指数（RI）在3.25-5.71之间。2.在前期低剂量噁唑酰草胺筛选稗草种群基础上,筛选获得第5代抗性稗草生物型L5和敏感生物型CK5,L5种群RI为22.51,处于高抗性水平;通过转录组测序,筛选出18个抗性相关候选GST基因,结合实时荧光定量PCR测定GST基因在稗草种群L5、CK5、16LAB、16TCA、16TCB、16JLA、16JYA和16XYE中的表达水平,结果表明L5、16TCA和16LAB种群中显著上调表达GST基因分别有9个、4个和2个。3.克隆了两个GST基因EcGSTF1和EcGSTF2,基因cDNA长度分别为666 bp和660 bp,分别编码221和219个氨基酸残基,都具有典型的GST结构域。序列比对和系统发育分析表明EcGSTF1和EcGSTF2属于phi亚家族。利用真核表达获得大小约为24 kDa和25 kDa的可溶性重组蛋白,酶活性测定表明EcGSTF1对1-氯-2,4-二氯硝基苯（CDNB）具有催化活性,而EcGSTF2没有催化活性。采用高效液相色谱（high performance liquid chromatograph,HPLC）技术检测分析EcGSTF1对噁唑酰草胺及其代谢中间产物（6-CBO、6-CBOP、HPPFMA、HPFMA）的代谢,结果表明,EcGSTF1可能没有直接参与噁唑酰草胺及其代谢中间产物的代谢。

关键词：稗草代谢抗性谷胱甘肽转移酶重组表达

昆虫对拟除虫菊酯类杀虫剂的代谢抗性机制研究进展

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

农药学学报 2016年第5期18卷 545-555页

作者：陈澄宇史雪岩髙希武中国农业大学植物保护学院北京100193

随着拟除虫菊酯类杀虫剂在卫生和农业害虫防治中的广泛应用,昆虫对此类杀虫剂产生抗性的报道越来越多。目前已明确昆虫对拟除虫菊酯类杀虫剂的抗性机制包括表皮穿透率下降、靶标抗性以及代谢抗性,其中代谢抗性机制较为普遍,而且其与昆... 详细信息

随着拟除虫菊酯类杀虫剂在卫生和农业害虫防治中的广泛应用,昆虫对此类杀虫剂产生抗性的报道越来越多。目前已明确昆虫对拟除虫菊酯类杀虫剂的抗性机制包括表皮穿透率下降、靶标抗性以及代谢抗性,其中代谢抗性机制较为普遍,而且其与昆虫对多种杀虫剂的交互抗性关系密切。目前,随着基因组、转录组以及蛋白质组学等新技术的发展及应用,昆虫对拟除虫菊酯类杀虫剂的代谢抗性机制研究也取得了很多新进展。昆虫体内细胞色素P450酶(P450s)、羧酸酯酶(Car E)及谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)等重要解毒酶系的改变均与昆虫对拟除虫菊酯类杀虫剂的代谢抗性有关,其中这3类解毒酶的活性及相关基因表达量的变化是昆虫对此类杀虫剂产生代谢抗性的主要原因。明确昆虫对拟除虫菊酯类杀虫剂的代谢抗性机制,对合理使用此类杀虫剂及延缓抗药性的产生均具有重要意义。本文在总结拟除虫菊酯类杀虫剂代谢路径及相关生物酶研究概况的基础上,综述了近年来有关昆虫对此类杀虫剂代谢抗性机制研究的主要进展。

关键词：昆虫拟除虫菊酯类杀虫剂解毒酶代谢抗性