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人胚心静脉窦和传导系统的早期发育

解剖学报 2009年第4期40卷 630-636页

作者：李海荣杨艳萍李素云崔慧林刘鱼珍乔从进王彤景雅山西医科大学组织学胚胎学教研室太原030001 太原市中心医院妇产科太原030009

目的探讨早期人胚心静脉窦及传导系的发生发育机制。方法用抗α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、抗α-横纹肌肌动蛋白（-αSCA）和抗结蛋白（DES）抗体对29例C10~C16期人胚心连续切片行免疫组织化学染色。结果人胚发育C12~C13期,系统静脉汇... 详细信息

目的探讨早期人胚心静脉窦及传导系的发生发育机制。方法用抗α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、抗α-横纹肌肌动蛋白（-αSCA）和抗结蛋白（DES）抗体对29例C10~C16期人胚心连续切片行免疫组织化学染色。结果人胚发育C12~C13期,系统静脉汇集形成的静脉窦出现于心包腔尾端原始横膈间充质中,静脉窦壁间充质细胞逐渐分化为-αSCA阳性的静脉窦心肌细胞。C14期,心包腔的扩张使静脉窦进入心包腔内,参与了右心房的形成。DES阳性传导系心肌的分化始于C10期心房室管右侧壁,随发育逐渐向室间沟心肌扩展,发育为房室传导系的希氏束、左右束支及心室腔面的小梁心肌。在心房,DES表达首先出现于C11期心房背侧壁,在C13期,可见静脉窦左背侧壁-αSCA、-αSMA、DES阳性心肌带与左心房底部、房室管背侧壁相延续,这条心肌带可能参与了人胚心静脉窦至房室管传导系的发育。C14~C16期,DES强阳性染色从窦房结经左、右静脉瓣及心房的背、腹侧壁延伸至房室管右侧壁,可能是原始的心房传导通路。结论心包腔尾端原始横膈间充质是人胚静脉窦心肌发生区,原始横膈间充质细胞逐渐分化为心肌细胞,添加到人胚心管静脉端,形成心静脉窦心肌。人胚心传导系...

关键词：静脉窦心传导系 α-平滑肌肌动蛋白 α-横纹肌肌动蛋白结蛋白免疫组织化学人胚

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人胚心脏动脉端来自前心区

中国组织工程研究与临床康复 2008年第20期12卷 3801-3805页

作者：李海荣杨艳萍曹锡梅刘慧霞景雅王彤山西医科大学组织胚胎学教研室山西省太原市030001

背景:对动物胚胎的活体标记试验表明鸡和小鼠胚胎心脏流出道及右心室来自心管外的咽部中胚层。人胚是否有相似情况作者经文献检索尚未见报道。目的:观察并验证人胚心脏动脉端心肌的来源。设计、时间及地点:单一样本观察,于2005-10/2006... 详细信息

背景:对动物胚胎的活体标记试验表明鸡和小鼠胚胎心脏流出道及右心室来自心管外的咽部中胚层。人胚是否有相似情况作者经文献检索尚未见报道。目的:观察并验证人胚心脏动脉端心肌的来源。设计、时间及地点:单一样本观察,于2005-10/2006-10在山西医科大学组织胚胎学教研室完成。材料:山西医科大学各附属医院药物流产后绒毛膜保存完好的早期人胚标本25例。方法:体视显微镜下仔细分离出胚体。用Carnegie分期法对胚胎进行发育分期,其中C10期、C11期、C12期、C13期、C15期和C16期胚胎各3例,C14期胚胎7例。主要观察指标:应用免疫组织化学PAP法观察了α-平滑肌肌动蛋白和α-横纹肌肌节肌动蛋白在C10晚期至C16期人胚心脏及咽部中胚层的表达型,并用苏木精-伊红染色观察各期心脏及咽中胚层的形态学特征。结果:C10晚期至C12,流出道远端的脏层心包和心包腔的背侧壁为复层上皮,向壁层心包内延伸逐渐变为单层扁平上皮。背侧心包于C13至C15变为单层上皮。C10晚期至C13流出道远端α-平滑肌肌动蛋白和α-横纹肌肌节肌动蛋白表达可延伸至脏层心包及咽部间充质细胞。C14至C15,流出道逐渐延长,其远端的脏层心包细胞增生并迁至流出道,在近流出道心肌细胞处表达α-平滑肌肌动蛋白和α-横纹肌肌节肌动蛋白。结论:C10至C15,咽中胚层不断分化出心肌细胞添加至心脏的动脉端使流出道延长,为人胚的前心区;流出道远端心肌可诱导前心区细胞增殖分化为心肌细胞。人胚心脏动脉端心肌来自前心区。

关键词：人胚心脏前心区肌动蛋白类组织构建

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人胚神经干细胞的分离、培养与鉴定

生物医学工程学杂志 2002年第2期19卷 264-267页

作者：王兰胡火珍张承虎李小玉陶大昌陈芬四川大学华西医学中心细胞生物学教研室泸州医学院生物教研室 646000 泸州医学院计算机管理科

为了探讨人胚神经干细胞体外培养条件和分化情况 ,摸索出一种切实可行的获得较纯、多潜能人胚神经干细胞的方法。我们取三月龄人胎脑 ,用胰蛋白酶消化法分离单个细胞 ,部分冻存 ,另一部分进行细胞培养 ,加EGF、b FGF刺激生长 ,有限稀释... 详细信息

为了探讨人胚神经干细胞体外培养条件和分化情况 ,摸索出一种切实可行的获得较纯、多潜能人胚神经干细胞的方法。我们取三月龄人胎脑 ,用胰蛋白酶消化法分离单个细胞 ,部分冻存 ,另一部分进行细胞培养 ,加EGF、b FGF刺激生长 ,有限稀释法获得单细胞克隆 ,血清诱导分化 ,并用免疫组化方法进行鉴定。结果显示 ,EGF和 b FGF同时存在的无血清培养基中有大量神经干细胞团生成 ,含血清培养基则诱导神经干细胞分化成为神经元、星型胶质细胞、少突胶质细胞。这表明 ,神经干细胞的存活和分裂有赖于 EGF和 b FGF的共同作用。

关键词：人胚神经干细胞细胞培养细胞冻存 bFGF EGF

α-平滑肌肌动蛋白在人胚心流出道早期发育中的表达

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解剖学报 2009年第3期40卷 441-445页

作者：杨艳萍李素云李海荣刘鱼珍曹锡梅崔慧林乔从进景雅山西医科大学组织学胚胎学教研室太原030001 太原市中心医院妇产科太原030009

目的探讨人胚早期心流出道心肌和流出道心内膜垫内α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达规律及其意义。方法32例C10-C16期[Carnegie分期法,受精后（22±1-37）d]人胚心连续切片,经抗α-SMA、抗α-横纹肌肌动蛋白（α-SCA）、抗肌球蛋白重... 详细信息

目的探讨人胚早期心流出道心肌和流出道心内膜垫内α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达规律及其意义。方法32例C10-C16期[Carnegie分期法,受精后（22±1-37）d]人胚心连续切片,经抗α-SMA、抗α-横纹肌肌动蛋白（α-SCA）、抗肌球蛋白重链（MHC）抗体免疫组织化学染色,观察流出道重塑过程中α-SMA在心肌与心内膜垫内的表达规律。结果人胚发育C10-C15期,心包腔背侧脏壁上皮不断分化为心肌细胞添加至流出道远端,这些心肌细胞α-SMA的表达早于α-SCA和MHC。C16期,流出道嵴近心肌处出现-αSMA强阳性细胞,相邻的心肌细胞伸出突起与其相连。C12-C15期,α-SMA阳性细胞逐渐迁入流出道心内膜垫内,同时可见流出道内皮转为α-SMA阳性,向间充质细胞分化。不同来源的间充质细胞共同参与形成螺旋状流出道嵴。结论α-SMA可作为心肌细胞早期分化的标志;流出道嵴内α-SMA阳性细胞可能部分来自神经嵴,部分为正在向间充质细胞分化的内皮细胞。

关键词：心流出道 α-平滑肌肌动蛋白间充质细胞流出道嵴免疫组织化学人胚

逆转录病毒载体介导HPV16 E6E7基因转化人胚食管纤维细胞的研究

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中华实验和临床病毒学杂志 2004年第3期18卷 223-226页

作者：张拥军郭秀婵张永利赵健沈忠英曾毅中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所肿瘤与艾滋病室北京100052 四川大学华西医学院附属第二医院汕头大学医学院病理教研室

目的　研究HPV16型病毒感染与食管癌发生的关系。方法　包装含有HPV16E6E7基因重组逆转录病毒 ,以重组病毒感染人胚食管纤维细胞 ,在TPA协同下诱导SCID小鼠成瘤。结果　重组病毒感染人胚食管纤维细胞可以诱导SCID小鼠形成肉瘤 ,可以检测... 详细信息

目的　研究HPV16型病毒感染与食管癌发生的关系。方法　包装含有HPV16E6E7基因重组逆转录病毒 ,以重组病毒感染人胚食管纤维细胞 ,在TPA协同下诱导SCID小鼠成瘤。结果　重组病毒感染人胚食管纤维细胞可以诱导SCID小鼠形成肉瘤 ,可以检测到E6E7基因的存在及表达 ,流式细胞仪检测从瘤组织培养出来的纤维细胞 ,确定为异倍体 ;但未能诱导人胚食管组织成瘤。结论　建立的重组逆转录病毒系统可以成功介导HPV16E6E7基因的转移 ,可以应用于HPV致瘤性研究。

关键词： E7基因食管人胚 HPV16 纤维细胞介导 SCID小鼠重组病毒毒感染诱导

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雌激素对人胚髁突软骨细胞增殖分化的影响

华西口腔医学杂志 2013年第6期31卷 628-632页

作者：庞磊张跃蓉刘忠林遵义医学院口腔学院口腔解剖生理学教研室遵义563003 湖北医药学院人体解剖教研室十堰442000

目的观察不同浓度的雌激素作用于体外培养的人胚髁突软骨细胞(MCCs),探讨雌激素对MCCs增殖分化的影响。方法体外培养MCCs,甲苯胺蓝及Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色法鉴定;甲基噻唑基四唑(MTT)法检测不同浓度雌激素对MCCs增殖与分化的影响。... 详细信息

目的观察不同浓度的雌激素作用于体外培养的人胚髁突软骨细胞(MCCs),探讨雌激素对MCCs增殖分化的影响。方法体外培养MCCs,甲苯胺蓝及Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色法鉴定;甲基噻唑基四唑(MTT)法检测不同浓度雌激素对MCCs增殖与分化的影响。结果高浓度(10-6mol·L-1)、低浓度(10-12mol·L-1)雌二醇抑制MCCs增殖分化,生理浓度(10-10、10-8mol·L-1)雌二醇促进MCCs增殖分化,且随作用时间延长,促进或抑制作用增强。结论雌激素对体外培养的人胚MCCs增殖分化具有双向调节作用,呈时间和剂量依赖性。表明雌激素对维持颞下颌关节的正常功能具有重要意义,可能在颞下颌关节病的发生和进程中发挥作用。

关键词：髁突软骨细胞雌激素增殖人胚

人胚肺成纤维细胞与肺腺癌细胞共同培养时增殖率的变化

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解剖学杂志 1996年第6期19卷 527-530页

作者：张晶明郭崇洁张华赵天德高福云首都医科大学组织学胚胎学教研室北京100054 中日友好临床医学研究所细胞生物室

用一种新的细胞培养技术,选用人肺腺癌细胞及人胚肺成纤维细胞,将两者按一定顺序定位培养在同一容器内.用原位计数法分别测定两种细胞在12、36、60、84小时培养的细胞数,计算两种细胞在不同时相的增殖率.观察人肺腺癌细胞和成纤维细胞... 详细信息

用一种新的细胞培养技术,选用人肺腺癌细胞及人胚肺成纤维细胞,将两者按一定顺序定位培养在同一容器内.用原位计数法分别测定两种细胞在12、36、60、84小时培养的细胞数,计算两种细胞在不同时相的增殖率.观察人肺腺癌细胞和成纤维细胞的相互影响.结果显示:癌细胞在12～36小时期间可刺激成纤维细胞的生长;在36～60小时和60～84小时则抑制肺成纤维细胞的生长.成纤维细胞在60～84小时期间显示对癌细胞的生长起抑制作用.

关键词：人胚肺成纤维细胞细胞培养细胞增殖率肺肿瘤

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人胚神经干细胞的体外培养

四川大学学报（自然科学版） 2002年第S1期39卷 204-207页

作者：王兰胡火珍李小玉陶大昌陈芬四川大学生命科学院细胞生物学教研室成都610041

目的　探讨人胚神经干细胞体外培养的条件和分化情况 ,以摸索出一种切实可行的能获得较纯且多潜能人胚神经干细胞的方法 .方法　采用取 3月龄人胎脑 ,用胰蛋白酶消化法分离单个细胞 ,部分冻存 ,另一部分进行细胞培养 ,加EGF ,bFGF刺激生... 详细信息

目的　探讨人胚神经干细胞体外培养的条件和分化情况 ,以摸索出一种切实可行的能获得较纯且多潜能人胚神经干细胞的方法 .方法　采用取 3月龄人胎脑 ,用胰蛋白酶消化法分离单个细胞 ,部分冻存 ,另一部分进行细胞培养 ,加EGF ,bFGF刺激生长 ,有限稀释法获得单细胞克隆 ,血清诱导分化 ,并用免疫组化方法进行鉴定 .结果　EGF和bFGF同时存在于无血清培养基中 ,有大量神经干细胞团生成 ,含血清培养基则诱导神经干细胞分化成为神经元、星型胶质细胞、少突胶质细胞 .结论　神经干细胞的存活和分裂有赖于EGF和bFGF的共同作用 .经冻存后的胎脑细胞同样能分离培养出有活性的神经干细胞 .

关键词：人胚神经干细胞细胞培养细胞冻存 EGF bFGF

人胚早期心脏发育过程中VEGF-C及其受体的表达

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细胞与分子免疫学杂志 2007年第11期23卷 1053-1054,1057页

作者：于振海杨瑛徐宁刘蛟李爱冬羊惠君黄飞滨州医学院人体解剖学教研室山东烟台264003 烟台毓璜顶医院山东烟台264000 成都医学院四川成都610083

目的:观察人胚早期心脏VEGF-C及其受体VEG-FR-2、VEGFR-3的表达变化,探讨其在早期心脏发育过程中的作用。方法:收集第3～8周人胚,石蜡切片,免疫组化染色,光镜观察,分析心脏组织发育中VEGF-C及其受体的表达变化、心脏组织的分化和形成。... 详细信息

目的:观察人胚早期心脏VEGF-C及其受体VEG-FR-2、VEGFR-3的表达变化,探讨其在早期心脏发育过程中的作用。方法:收集第3～8周人胚,石蜡切片,免疫组化染色,光镜观察,分析心脏组织发育中VEGF-C及其受体的表达变化、心脏组织的分化和形成。结果:VEGF-C、VEGFR-2、VEGFR-3在心内膜内皮细胞及心肌细胞发育第3、4周开始表达,随胎龄增加表达先增强后逐渐减弱,第7周末基本消失。结论:VEGF-C及其受体参与了人胚早期心脏的形成过程,对早期心脏发育发挥了一定的作用。

关键词：人胚心脏发育 VEGF-C