检索结果-南通市图书馆

人肿瘤坏死因子(hTNFα)30位和42位突变体生物活性差异的结构机制

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国医学科学院学报 2002年第2期24卷 144-148页

作者：胡方董少忠刘龙丁和绍清赵树栋李琦涵中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所免疫室昆明650118

目的探索人肿瘤坏死因子(hTNFα)结构与功能活性的关系。方法利用免疫沉淀试验、mRNA差异显示等方法初步探索了所构建的几个突变体的结构特点和其作用于细胞后所导致的基因反应差异。结果表现不同生物学活性的突变体其结构存在一定的差... 详细信息

目的探索人肿瘤坏死因子(hTNFα)结构与功能活性的关系。方法利用免疫沉淀试验、mRNA差异显示等方法初步探索了所构建的几个突变体的结构特点和其作用于细胞后所导致的基因反应差异。结果表现不同生物学活性的突变体其结构存在一定的差异,并且所导致的细胞基因反应程度和种类不完全一致。结论hTNFα诱导的细胞凋亡过程是通过一整套的基因反应来实现的,hTNFα突变体导致的不同生物活性,一些是以其结构因素诱导不同程度的凋亡基因反应来实现的,而另一些则是通过程度各异且种类不同的基因反应而实现的。

关键词：人肿瘤坏死因子 hTNFα 突变体结构与功能细胞凋亡基因反应

人肿瘤坏死因子可溶性受体I cDNA的克隆及其在原核和真核细胞中的表达

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

复旦学报（自然科学版） 1998年第2期37卷 129-134页

作者：修梅朱琛戴卫列王顺友赵寿元李昌本复旦大学遗传工程国家重点实验室上海

以人的胎盘总ＲＮＡ为模板，用ＲＴ－ＰＣＲ的方法，获得人肿瘤坏死因子可溶性受体Ｉ（ｓｈＴＮＦＲ－Ｉ）的ｃＤＮＡ，并对其进行全序列分析，在此基础上构建了原核及真核的表达载体。

关键词：人肿瘤坏死因子可溶性受体免疫系统无性系

人肿瘤坏死因子cDNA衍生物在大肠杆菌中的表达及活性测定

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

厦门大学学报（自然科学版） 1996年第5期35卷 787-789页

作者：黄健强曾桂生陈亚兵郭本昌俞春东蔡毓温龙平肿瘤细胞工程国家专业实验室

应用基因工程方法构建了含人肿瘤坏死因子ＣＤＮＡ衍生物的重组体．转化大肠杆菌后酶切鉴定．转化菌经摇瓶培养及温度调控，获得高效表达．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ结果表明，表达的ＴＮＦ分子量约为１７ｋＤ，蛋白量约为菌体可溶性蛋白的２０... 详细信息

应用基因工程方法构建了含人肿瘤坏死因子ＣＤＮＡ衍生物的重组体．转化大肠杆菌后酶切鉴定．转化菌经摇瓶培养及温度调控，获得高效表达．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ结果表明，表达的ＴＮＦ分子量约为１７ｋＤ，蛋白量约为菌体可溶性蛋白的２０％．用Ｌ９２９细胞毒性测定法测得菌液ＴＮＦ的表达为２×１０８ｕ／ｍＬ．抗ＴＮＦ的单克隆抗体可以中和大肠杆菌表达的ＴＮＦ对Ｌ９２９细胞的细胞毒性．

关键词：人肿瘤坏死因子 cDNA 基因表达大肠杆菌

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

用计算机模拟研究人肿瘤坏死因子的结构功能

高技术通讯 2000年第2期10卷 6-12,5页

作者：陈建军孙苗陈常庆王德宝中国科学院上海生物工程研究中心上海200233 中国科学院上海生物化学研究所上海200031

人肿瘤坏死因子(humantumornecrosisfactor,hTNFα)的生物学活性是由两种不同受体(TNFR1/R55和TNFR2/R75)介导的。为了了解hTNFα与这两种受体相互作用的异同之处,以便指导hTNFα的蛋白质工程改造,根据LT与R55受体胞外区复合物的晶体结... 详细信息

人肿瘤坏死因子(humantumornecrosisfactor,hTNFα)的生物学活性是由两种不同受体(TNFR1/R55和TNFR2/R75)介导的。为了了解hTNFα与这两种受体相互作用的异同之处,以便指导hTNFα的蛋白质工程改造,根据LT与R55受体胞外区复合物的晶体结构及hTNFα和LT与两种受体结合的相似性,预测了hTNFα与其两种受体胞外区形成复合物的三维结构模型。并根据所得的计算机模型,分析了hTNFα和受体结合前后的溶剂可及表面积的变化,以及受体与hTNFα之间可能形成的氢键、明显的静电作用和疏水作用。然后根据模型对hTNFα的结构-功能关系进行了分析,并以此为基础设计了几个新的hTNFα突变体。

关键词：人肿瘤坏死因子计算机模拟结构功能关系

低毒且高效杀伤人肿瘤细胞的新型人肿瘤坏死因子突变体的构建

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国科学（C辑） 2002年第4期32卷 379-384,T002页

作者：刘惠卢芳陈建军任红玉陈常庆中国科学院上海生命科学院生物工程研究中心上海200233

采用定点突变的方法构建了两株新型人肿瘤坏死因子突变体MT1（32Trp157Phe）和MT2（2Lys30Ser32Trp157Phe）,并在大肠杆菌中得以高效表达,表达量占菌体总蛋白的50％且为可溶性蛋白.表达产物经蛋白印清法检测,均能与抗野生型hTNF-α单抗... 详细信息

采用定点突变的方法构建了两株新型人肿瘤坏死因子突变体MT1（32Trp157Phe）和MT2（2Lys30Ser32Trp157Phe）,并在大肠杆菌中得以高效表达,表达量占菌体总蛋白的50％且为可溶性蛋白.表达产物经蛋白印清法检测,均能与抗野生型hTNF-α单抗结合且经分离纯化后样品的纯度在95％以上.各突变体虽然对鼠成纤维瘤细胞L929的生物学活性比野生型下降了4～5个数量级,但却能高效杀伤人肿瘤细胞,杀伤程度与野生型相差不明显.测定突变体MT1的LD50值降至野生型的0.34％,而MT2对小鼠30％致死剂量则低于野生型LD50的1/700.

关键词：人肿瘤细胞突变体人肿瘤坏死因子定点突变细胞毒活性蛋白印渍 LD50 杀伤作用生物活性肿瘤治疗

检测重组人源抗人肿瘤坏死因子单克隆抗体甲氨蝶呤残留量的反相高效液相色谱法的建立及验证

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国生物制品学杂志 2018年第12期31卷 1393-1396页

作者：刘素霞杜力任华景华北制药集团新药研究开发有限责任公司

目的建立重组人源抗人肿瘤坏死因子单克隆抗体中甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)残留量检测甲反相高效液相色谱(reversed-phase high performance liquid chromatography,RP-HPLC)法,并进行验证。方法样品经饱和硫酸铵法沉淀蛋白,取上清液... 详细信息

目的建立重组人源抗人肿瘤坏死因子单克隆抗体中甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)残留量检测甲反相高效液相色谱(reversed-phase high performance liquid chromatography,RP-HPLC)法,并进行验证。方法样品经饱和硫酸铵法沉淀蛋白,取上清液进样检测。色谱柱为Waters/ACQUITY UPLC BEH C18(1. 7μm,2. 1 mm×100 mm),流动相为乙腈-甲醇-0. 054 mol/L磷酸二氢钾缓冲液(体积比6∶2∶92),pH 6. 5,检测波长302 nm,柱温:30℃,流速:0. 25 mL/min,进样体积:10μL,洗脱时间:15 min。同时验证方法的线性、特异性、准确度、定量限、精密性及耐用性。结果该方法特异性良好;MTX浓度在4~200 ng/mL范围内线性良好,R2> 0. 999;检测限为4 ng/mL;MTX浓度为20. 0、50. 0、100. 0 ng/mL 3个加标样品的回收率分别为102. 83%、100. 33%、99. 23%,3次重复检测结果RSD分别为1. 56%、1. 50%、0. 42%,两位实验员6次检测结果的RSD分别为2. 46%、1. 27%、1. 49%;MTX浓度为50. 0 ng/mL的加标样品在流动相p H 6. 3、6. 5、6. 7条件下测定结果的RSD为2. 02%。结论本实验建立的方法具有良好的特异性、精密性及准确度,且操作简便,可用于重组蛋白药物研发及生产过程中残留MTX的监测。

关键词：甲氨蝶呤人肿瘤坏死因子单克隆抗体反相高效液相色谱

RGD特异性结合多肽与重组改构人肿瘤坏死因子融合基因的克隆表达及其抑瘤活性

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国生物制品学杂志 2005年第3期18卷 185-189页

作者：王慧颜真赵宁张英起第四军医大学生物技术中心西安710032

目的构建RGD多肽与重组改构人肿瘤坏死因子融合基因,进一步提高rmhTNF的临床疗效。方法应用基因重组技术构建了CRGDC与rmhTNF的融合基因,在***5α中诱导表达重组蛋白RGDrmhTNF,采用溶菌酶法裂解菌体,裂解上清经硫酸铵沉淀、阴阳离子交... 详细信息

目的构建RGD多肽与重组改构人肿瘤坏死因子融合基因,进一步提高rmhTNF的临床疗效。方法应用基因重组技术构建了CRGDC与rmhTNF的融合基因,在***5α中诱导表达重组蛋白RGDrmhTNF,采用溶菌酶法裂解菌体,裂解上清经硫酸铵沉淀、阴阳离子交换层析纯化后,用S180荷瘤小鼠模型和L929细胞体外杀伤实验测定纯化的重组蛋白RGDrmhTNF的体内、外杀伤活性。结果正确构建了编码RGDrmhTNF融合基因,重组工程菌升温诱导后以部分可溶形式表达RGDrmhTNF,纯化后纯度为96.88%,体外对L929细胞杀伤作用的比活性为3.6×108IUmg,与rmhTNF相当(3.0×108IUmg)。在S180荷瘤小鼠模型中,当RGDrmhTNF剂量为12×105IUkg时,对肿瘤的生长抑制率为84.9%,显著高于相同剂量的rmhTNF(肿瘤抑制率为59.09%,P肿瘤抑制率为71.21%,P<0.01)。结论重组蛋白RGDrmhTNF可以提高rmhTNF的治疗效果。

关键词：人肿瘤坏死因子融合基因 RGD 特异性结合抑瘤活性克隆表达多肽基因重组技术重组蛋白 L929细胞小鼠模型 S180 硫酸铵沉淀阳离子交换生长抑制率临床疗效方法应用诱导表达层析纯化实验测定杀伤作用环磷酰胺

核磁共振研究人肿瘤坏死因子α衍生物a(hTNF α Da)的变性过程

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

分析测试学报 1998年第4期17卷 8-11页

作者：戴林森林丽珠王力平吴泰琉李昌本赵寿元徐静斐劳霞飞吴厚铭复旦大学上海有机化学研究所生命有机化学国家重点实验室

用Ｂｒｕｋｅｒ公司的ＡＭ－６００和ＭＳＬ－３００核磁共振波谱仪分别做了天然态和在不同浓度尿素作用下人肿瘤坏死因子α衍生物ａ（ｈＴＮＦαＤａ）的质子核磁共振实验。发现在尿素的作用下，ｈＴＮＦαＤａ的结构发生了变化，当尿... 详细信息

用Ｂｒｕｋｅｒ公司的ＡＭ－６００和ＭＳＬ－３００核磁共振波谱仪分别做了天然态和在不同浓度尿素作用下人肿瘤坏死因子α衍生物ａ（ｈＴＮＦαＤａ）的质子核磁共振实验。发现在尿素的作用下，ｈＴＮＦαＤａ的结构发生了变化，当尿素浓度增加到４～６ｍｏｌ／Ｌ时，ｈＴＮＦαＤａ逐渐解聚为单体和无规线团。

关键词：人肿瘤坏死因子衍生物 NMR 变性 hTNFαDa

人肿瘤坏死因子相关弱凋亡诱导因子可促进心肌细胞增殖

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

生理科学进展 2011年第3期42卷 174-174页

作者：刘娟

哺乳动物的心肌细胞在出生后几周内停止增殖,这提示心脏在受损伤后很难再生。但是,新近的研究发现,诱导心肌细胞增殖可以促进哺乳动物心脏的再生。人肿瘤坏死因子相关弱凋亡诱导因子（TNF-related weak inducer of apoptosis，TWEAK）... 详细信息

哺乳动物的心肌细胞在出生后几周内停止增殖,这提示心脏在受损伤后很难再生。但是,新近的研究发现,诱导心肌细胞增殖可以促进哺乳动物心脏的再生。人肿瘤坏死因子相关弱凋亡诱导因子（TNF-related weak inducer of apoptosis，TWEAK）是一种细胞因子，它可以调节多种细胞的增殖。

关键词：人肿瘤坏死因子凋亡诱导因子细胞增殖心肌细胞 apoptosis 哺乳动物细胞因子再生