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苯噻啶对人肺腺癌细胞增殖、迁移与侵袭能力的影响

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苯噻啶对人肺腺癌细胞增殖、迁移与侵袭能力的影响

作者：郑江霞安徽医科大学

学位级别：硕士

目的观察不同浓度苯噻啶（Pizotifen）对人肺腺癌A549和PC9细胞的增殖、迁移与侵袭能力的影响,并初步探究其机制。方法传代培养人肺腺癌A549和PC9细胞,取对数生长期的细胞,将其分为对照组（细胞对照组为培养基直接作用于细胞、溶剂对照... 详细信息

目的观察不同浓度苯噻啶（Pizotifen）对人肺腺癌A549和PC9细胞的增殖、迁移与侵袭能力的影响,并初步探究其机制。方法传代培养人肺腺癌A549和PC9细胞,取对数生长期的细胞,将其分为对照组（细胞对照组为培养基直接作用于细胞、溶剂对照组为含有0.1%二甲基亚砜（dimethyl sulfoxide,DMSO）的培养基作用于细胞）和实验组（浓度为10、20、30、40μmol/L的苯噻啶作用于细胞）。不同浓度苯噻啶作用24h和48h后采用CCK-8法检测人肺腺癌细胞的增殖能力;不同浓度苯噻啶作用24h后采用划痕实验和Transwell迁移实验检测人肺腺癌细胞的迁移能力;不同浓度苯噻啶作用24h后采用Transwell侵袭实验检测人肺腺癌细胞的侵袭能力;不同浓度苯噻啶作用24h后采用ELISA法检测人肺腺癌细胞中Wnt3a/β-catenin信号通路蛋白、上皮-间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）相关蛋白E-钙粘蛋白（E-cadherin,E-cad）和基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase 9,MMP-9）的表达水平。比较并分析上述各实验指标的组间差异。结果各实验组检测指标与溶剂对照组相比:（1）CCK8法检测显示,实验组A549和PC9细胞活力降低,各组抑制细胞增殖的程度不一致;在相同作用时间（24h或48h）下,伴随苯噻啶浓度升高,实验组A549和PC9细胞活力越来越低,组间差异有统计学意义（24h（A549:F=210.7,P＜0.05;PC9:F=177.2,P＜0.05）和48 h（A549:F=132.3,P＜0.05;PC9:F=631.3,P＜0.05））;在相同作用浓度（20、30、40μmol/L）下,苯噻啶作用48h对细胞活力的抑制作用高于24h,差异有统计学意义（P＜0.05）。（2）划痕实验结果表明,苯噻啶作用24h后实验组划痕愈合率均低于溶剂对照组,苯噻啶浓度越高,划痕愈合率越低,差异具有统计学意义（A549:F=868.9,P＜0.05;PC9:F=921.0,P＜0.05）。（3）Transwell迁移实验结果显示,苯噻啶作用24h后实验组迁移至小室下的细胞数量均低于溶剂对照组,具有浓度依赖性,差异有统计学意义（A549:F=474.2,P＜0.05;PC9:F=784.6,P＜0.05）。（4）Transwell侵袭实验结果表明,苯噻啶作用24h后与溶剂对照组相比,实验组侵袭至小室下的肺腺癌细胞数量明显降低,具有浓度依赖性,差异有统计学意义（A549:F=354.0,P＜0.05;PC9:F=193.2,P＜0.05）。（5）ELISA结果显示,苯噻啶作用24h后与溶剂对照组相比,实验组细胞中Wnt3a（A549:F=534.62,P＜0.05;PC9:F=534.08,P＜0.05）、β-catenin（A549:F=124.51,P＜0.05;PC9:F=212.22,P＜0.05）和MMP-9（A549:F=215.96,P＜0.05;PC9:F=355.48,P＜0.05）蛋白浓度均显著降低,差异有统计学意义,且伴随苯噻啶浓度升高,Wnt3a、β-catenin和MMP-9蛋白浓度越来越低;作用24h后与溶剂对照组相比,实验组细胞中E-cad蛋白浓度大大增高,差异有统计学意义（A549:F=224.98,P＜0.05;PC9:F=534.08,P＜0.05）,伴随苯噻啶浓度升高,E-cad浓度也更高。结论在体外细胞实验中,苯噻啶对人肺腺癌A549和PC9细胞的增殖、迁移和侵袭能力具有抑制作用,抑制作用的强弱依赖于苯噻啶的浓度和作用时间,其作用机制可能是抑制Wnt3a/β-catenin-EMT通路。

关键词：苯噻啶人肺腺癌细胞增殖迁移侵袭

人肺腺癌细胞A-549和正常细胞HBE的蛋白质组差异分析

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生物化学与生物物理学报 2002年第1期34卷 50-56页

作者：詹显全关勇军李萃陈主初谢锦云陈平梁宋平中南大学湘雅医学院肿瘤研究所湖南师范大学生命科学学院湖南师范大学生命科学学院长沙410078 长沙410081

为了研究人肺腺癌细胞A 5 49和正常细胞HBE的蛋白质组差异 ,用固相pH梯度双向凝胶电泳分离人肺腺癌细胞系A 5 49和正常细胞HBE的总蛋白质 ,银染显色 ,PDQuest 2 DE软件分析 ,对部分差异蛋白质点进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 (M... 详细信息

为了研究人肺腺癌细胞A 5 49和正常细胞HBE的蛋白质组差异 ,用固相pH梯度双向凝胶电泳分离人肺腺癌细胞系A 5 49和正常细胞HBE的总蛋白质 ,银染显色 ,PDQuest 2 DE软件分析 ,对部分差异蛋白质点进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 (MALDI TOF MS)测定其胶内酶解后的肽质指纹图谱 ,用PeptIdent软件查询SWISS PROT数据库。结果获得了分辨率和重复性均较好的双向电泳银染图谱 ,图象分析探测到A 5 492 DE图谱的平均蛋白质点数为 (890± 38)个 ,HBE的平均蛋白质点数为 (75 7± 2 7)个 ,不同胶间蛋白质点的位置偏差在IEF方向为 (2 .85± 0 .48)mm ,在SDS PAGE方向为 (2 .6 9± 0 .37)mm。差异表达分析发现A 5 49和HBE图谱有5 35个蛋白质点相互匹配 ,其中A 5 49有 35 5个未被匹配 ,HBE中有 2 2 2个未被匹配 ;对A 5 49和HBE中的 18个差异蛋白质点分别进行肽质指纹分析 ,经数据库查询 ,初步鉴定为一些与物质代谢、细胞因子、信号转导有关的蛋白质。提示人肺腺癌细胞A 5 49和正常细胞HBE的蛋白质组具有差异 ,这种蛋白质组的差异分析有助于进一步研究肺腺癌的相关蛋白质及分子标记物

关键词：人肺腺癌细胞双向电泳图象分析肽质指纹分析蛋白质组比较

铁冬青酸对人肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响

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铁冬青酸对人肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响

作者：杨彩梅安徽医科大学

学位级别：硕士

目的观察铁冬青酸(RA)对人肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响,并初步探讨其机制。方法以人肺腺癌A549和PC9细胞作为研究对象,实验分为对照组和实验组。其中,对照组包括空白对照组、溶剂对照组(含0.1%DMSO)和细胞对照组(无铁冬青酸,... 详细信息

目的观察铁冬青酸(RA)对人肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响,并初步探讨其机制。方法以人肺腺癌A549和PC9细胞作为研究对象,实验分为对照组和实验组。其中,对照组包括空白对照组、溶剂对照组(含0.1%DMSO)和细胞对照组(无铁冬青酸,无DMSO),实验组则按照铁冬青酸的浓度20、40、60、80μmol/L分为四组。选取位于对数生长期的细胞,用不同浓度的铁冬青酸处理24小时后,行下列实验:CCK-8实验,检测人肺腺癌细胞的增殖能力;划痕实验,观测人肺腺癌细胞的水平迁移能力;Transwell迁移实验,检测各组A549和PC9细胞的纵向迁移能力;Transwell侵袭实验,检测人肺腺癌A549和PC9细胞的侵袭能力。此外,用ELISA检测各组细胞上清液中酪氨酸蛋白激酶2(Janus Kinase 2,JAK2)和转录激活蛋白3(Signal Transducer And Activator Of Transcription 3,STAT3)蛋白表达量,采用RT-PCR法检测各组细胞中JAK2和STAT3的m RNA水平。统计分析上述各实验观测指标的组间差异。结果(1)CCK-8实验显示,与细胞对照组相比,实验组A549和PC9细胞出现不同的增殖抑制现象。铁冬青酸的浓度越高,细胞增殖抑制现象越明显。与细胞对照组相比,溶剂对A549和PC9细胞的增殖无明显的抑制作用。实验组与细胞对照组之间的细胞活力差异具有统计学意义(A549:F=103.1,P细胞划痕实验提示,铁冬青酸对于A549和PC9细胞的水平迁移有抑制作用。随着铁冬青酸浓度的增高,实验组肺腺癌细胞的迁移面积减少,各实验组与细胞对照组之间的划痕愈合率差异具有统计学意义(A549:F=145.5,P细胞后,细胞的纵向迁移受到抑制。当铁冬青酸的浓度升高时,穿过聚碳酸酯膜的细胞数量减少,穿过聚碳酸酯膜的细胞数量在各实验组与细胞对照组之间的差异有统计学意义(A549:F=610.9,P细胞后,A549和PC9细胞的侵袭能力下降,铁冬青酸浓度越高,其对于A549和PC9细胞侵袭能力的抑制作用越强,各实验组与细胞对照组之间的穿过基质胶的细胞数量差异有统计学意义(A549:F=320.3,P细胞上清液中JAK2和STAT3蛋白表达量越低,各实验组与细胞对照组之间JAK2和STAT3蛋白表达量的差异具有统计学意义[A549(JAK2:F=21.29,P细胞中JAK2、STAT3的m RNA水平越低,各实验组与细胞对照组之间的JAK2、STAT3 m RNA水平的差异具有统计学意义[A549(JAK2:F=40.44,P人肺腺癌A549和PC9细胞株的增殖、迁移和侵袭能力均具有抑制作用,且呈一定的浓度依赖性。其作用机制,可能与抑制细胞JAK2/STAT3通路的调控有关。

关键词：铁冬青酸人肺腺癌细胞增殖迁移侵袭酪氨酸蛋白激酶2 转录激活蛋白3

腺病毒介导ING4或/和P53基因表达对人肺腺癌细胞的生长抑制作用

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上海交通大学学报（医学版） 2015年第7期35卷 953-960页

作者：何峰李帅朱霞霞杨吉成盛伟华缪竞诚苏州大学医学部细胞教研室苏州215123

目的在本室已构建Ad.RGD空载体和Ad.RGD-ING4腺病毒基础上,再构建Ad.RGD-P53和Ad.RGD-ING4-P53单双基因重组腺病毒,研究其对人肺腺癌细胞的生长抑制作用。方法 PCR克隆P53基因,构建pAd.RGD-P53和pAd.RGD-ING4-P53同源重组腺病毒质粒,用Q... 详细信息

目的在本室已构建Ad.RGD空载体和Ad.RGD-ING4腺病毒基础上,再构建Ad.RGD-P53和Ad.RGD-ING4-P53单双基因重组腺病毒,研究其对人肺腺癌细胞的生长抑制作用。方法 PCR克隆P53基因,构建pAd.RGD-P53和pAd.RGD-ING4-P53同源重组腺病毒质粒,用QBI-293A细胞进行包装扩增和检测效价。将Ad.RGD、Ad.RGD-ING4、Ad.RGD-P53、Ad.RGD-ING4-P53分别感染A549细胞后,流式细胞仪检测各组重组腺病毒对A549细胞的感染效率。Western blotting检测A549和PC-9细胞中ING4或/和P53蛋白的表达。MTT法检测A549细胞生长,流式细胞仪检测各组A549和PC-9细胞的凋亡率。real-time PCR检测A549细胞内凋亡相关基因Caspase-3、BAX及BCL-2 mRNA的表达水平。结果 PCR和酶切鉴定结果表明：成功构建了pAd.RGD-P53和pAd.RGD-ING4-P53同源重组腺病毒质粒,包装扩增后经效价检测可达1×109~1×1010pfu/m L;各组重组腺病毒感染A549细胞后,感染效率可达90%~95%。Western blotting检测结果表明ING4或/和P53蛋白可在A549和PC-9细胞中成功表达。MTT法检测发现ING4或/和P53单双基因重组腺病毒均能明显抑制A549细胞生长,流式细胞仪检测表明ING4或/和P53基因表达均可诱导A549和PC-9细胞凋亡,且Ad.RGD-ING4-P53双基因重组腺病毒组较Ad.RGD-ING4和Ad.RGD-P53单基因组更为明显（P〈0.05）。real-time PCR检测表明腺病毒介导的ING4或/和P53基因表达能够上调A549细胞内Caspase-3、BAX mRNA表达,下调BCL-2 mRNA的表达,且双基因组较单基因组更为明显（P〈0.05）。结论成功构建了Ad.RGD-P53和Ad.RGD-ING4-P53重组腺病毒。各重组腺病毒目的基因表达均能明显抑制人肺腺癌细胞的生长,诱导细胞凋亡,且双基因组较单基因组效果更优,其分子机制可能与细胞内凋亡相关基因Caspase-3、BAX表达上调及BCL-2表达下调有关。

关键词： RGD腺病毒 ING4基因 P53基因人肺腺癌细胞

尼古丁对人肺腺癌细胞和人大细胞肺癌细胞增殖和凋亡的影响

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环境与健康杂志 2016年第7期33卷 573-576页

作者：王军许雅鑫陈显久山西医科大学汾阳学院校长办公室山西吕梁032200 太原市疾病预防控制中心山西医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室

目的观察不同浓度尼古丁对人肺腺癌(NCI-H1975)细胞和人大细胞肺癌(NCI-H460)细胞增殖和凋亡的影响。方法分别取处于对数生长期的NCI-H1975细胞和NCI-H460细胞,调整细胞密度为1×104/ml,分别暴露于含终浓度为0(对照)、1、10、100、1 000... 详细信息

目的观察不同浓度尼古丁对人肺腺癌(NCI-H1975)细胞和人大细胞肺癌(NCI-H460)细胞增殖和凋亡的影响。方法分别取处于对数生长期的NCI-H1975细胞和NCI-H460细胞,调整细胞密度为1×104/ml,分别暴露于含终浓度为0(对照)、1、10、100、1 000、10 000 nmol/L尼古丁的低血清培养基培养72 h;或者分别暴露于含终浓度为0(对照)、1μmol/L尼古丁的低血清培养基培养24、48、72 h,采用CCK-8法检测细胞活性。分别取处于对数生长期的NCI-H1975细胞和NCI-H460细胞,调整细胞密度为1×104/ml,分别暴露于含终浓度为40μmol/L顺伯的低血清培养基24 h,诱导细胞发生凋亡;将诱导后的NCI-H1975细胞、NCI-H460细胞分别暴露于含终浓度为0(对照)、1、10、100、1 000、10 000 nmol/L尼古丁的低血清培养基培养72 h,或者分别暴露于含终浓度为0(对照)、1μmol/L尼古丁的低血清培养基培养24、48、72 h。采用Annexin V/PI染色法检测细胞凋亡率。结果与对照组相比,各浓度尼古丁分别染毒NCI-H1975细胞、NCI-H460细胞72 h后的细胞存活率均增加,差异有统计学意义(P细胞、NCIH460细胞暴露72 h后的细胞存活率呈明显的先上升后下降趋势。与对照组相比,1μmol/L尼古丁作用NCI-H1975细胞、NCI-H460细胞24、48、72 h后的细胞存活率均较高,差异有统计学意义(P细胞、NCI-H460细胞的细胞存活率呈明显的上升趋势。40μmol/L顺铂作用于NCI-H1975细胞、NCI-H460细胞24 h后,其细胞凋亡率显著升高,与空白组相比,差异有统计学意义(P细胞、NCI-H460细胞72 h后,其细胞凋亡率均降低,差异有统计学意义(P细胞、NCI-H460细胞暴露72 h后的细胞凋亡率呈明显的下降的趋势。与对照组相比,1μmol/L尼古丁作用于顺铂诱导后的NCI-H1975细胞、NCI-H460细胞24、48、72 h后的细胞凋亡率均降低,差异有统计学意义(P细胞、NCIH460细胞的凋亡率呈明显的下降趋势。结论尼古丁可促进NCI-H1975细胞和NCI-H460细胞增殖并抑制细胞凋亡。

关键词：细胞凋亡尼古丁增殖人肺腺癌细胞人大细胞肺癌细胞

H3N2亚型禽流感病毒及猪流感病毒感染人肺腺癌细胞后增殖的差异性变化

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动物医学进展 2017年第4期38卷 35-40页

作者：崔梦一梁佳黄晓量劳婷婷王伊玲王晋高灵茜樊晓晖广西医科大学微生物学教研室广西南宁530021

人肺腺癌细胞A549被H3N2亚型禽流感病毒和猪流感病毒感染后,探讨不同毒株跨种属感染人呼吸道组织的可能性和趋势性。通过观察病毒感染A549细胞后的细胞病变(CPE)、血凝试验(HA)和50%组织细胞感染量(TCID50)来比较不同毒株感染细胞后的... 详细信息

人肺腺癌细胞A549被H3N2亚型禽流感病毒和猪流感病毒感染后,探讨不同毒株跨种属感染人呼吸道组织的可能性和趋势性。通过观察病毒感染A549细胞后的细胞病变(CPE)、血凝试验(HA)和50%组织细胞感染量(TCID50)来比较不同毒株感染细胞后的复制差异和毒力改变,发现同一亚型不同来源的流感病毒对A549细胞感染和复制能力有较大差异,哺乳动物来源的病毒更有感染人呼吸道细胞的趋势,SW/GX/NS2783/2010有潜在的感染人细胞的能力。感染过程中的细胞因子变化和病毒基因组组成特点是进一步研究的方向,应重点关注具有跨种属感染趋势的流感病毒及其特殊分子决定簇的组成和特点。

关键词： H3N2亚型流感病毒猪流感病毒禽流感病毒人肺腺癌细胞

TLR基因在人肺腺癌细胞和支气管上皮细胞中的表达

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华中科技大学学报（医学版） 2013年第3期42卷 282-285页

作者：喻钧潘铁成魏翔李军潘友民刘立刚胡敏华中科技大学同济医学院附属同济医院心胸外科武汉430030

目的探讨Toll样受体家族(Toll-like receptors,TLRs)基因在人肺腺癌细胞(A549细胞)和人支气管上皮细胞(HBE细胞)中的表达及意义。方法通过GenBank网站查找基因全序列,根据引物设计原则应用软件Primer 5.0设计TLR2、TLR3、TLR9和内参β-a... 详细信息

目的探讨Toll样受体家族(Toll-like receptors,TLRs)基因在人肺腺癌细胞(A549细胞)和人支气管上皮细胞(HBE细胞)中的表达及意义。方法通过GenBank网站查找基因全序列,根据引物设计原则应用软件Primer 5.0设计TLR2、TLR3、TLR9和内参β-actin引物。体外培养A549细胞和HBE细胞,提取细胞总RNA并逆转录得到cDNA,采用实时定量荧光PCR检测TLRs基因mRNA在这2种细胞中的表达。琼脂糖凝胶电泳检测各扩增产物片段大小。采用Western blot检测TLR2、TLR3、TLR9蛋白的表达。结果 TLR2、TLR3、TLR9基因在A549细胞中的表达丰度均比在HBE细胞中高(P细胞中的表达相对值分别为(0.472 8±0.010 3)、(0.319 3±0.011 2)和(0.856 9±0.007 9),而在HBE细胞中的表达相对值分别为(0.258 5±0.005 7)、(0.160 7±0.003 0)和(0.699 1±0.010 0),A549细胞中TLR2、TLR3、TLR9表达的相对值均高于HBE细胞(均P细胞中的表达高于HBE细胞,提示TLRs基因可能参与人肺腺癌的发生发展。

关键词： Toll样受体人肺腺癌细胞人支气管上皮细胞基因表达

RGD修饰的腺病毒介导ING4或/和P53基因表达对人肺腺癌细胞的体内外生长抑制作用

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RGD修饰的腺病毒介导ING4或/和P53基因表达对人肺腺癌细胞的体内...

作者：何峰苏州大学

学位级别：硕士

目的:在本室已构建Ad.RGD空载体和Ad.RGD-ING4重组腺病毒的基础上,再构建Ad.RGD-P53和Ad.RGD-ING4-P53单双基因重组腺病毒,研究其对人肺腺癌细胞(A549)的体内外抑制效应及潜在分子机制。方法:PCR克隆获得P53目的基因,在本室已成功构建pA... 详细信息

目的:在本室已构建Ad.RGD空载体和Ad.RGD-ING4重组腺病毒的基础上,再构建Ad.RGD-P53和Ad.RGD-ING4-P53单双基因重组腺病毒,研究其对人肺腺癌细胞(A549)的体内外抑制效应及潜在分子机制。方法:PCR克隆获得P53目的基因,在本室已成功构建pAdTrack-CMV-PolyApromoter、pAdTrack-CMV-ING4-PolyA-promoter转移质粒的基础上,在多克隆酶切位点NotⅠ和XhoⅠ之间插入P53目的片段,构建pAdTrack-CMV-PolyApromoter-P53和pAdTrack-CMV-ING4-PolyA-promoter-P53重组转移质粒,再与RGD-4C修饰的腺病毒骨架质粒pAdeasy-1.RGD同源重组,经QBI-293A细胞包装、扩增和效价检测后获得高滴度重组腺病毒Ad.RGD-P53和Ad.RGD-ING4-P53。本项研究共分5组:PBS组、Ad.RGD空载对照组、Ad.RGD-ING4和Ad.RGD-P53单基因组、Ad.RGD-ING4-P53双基因组。将上述各组重组腺病毒分别感染A549肺癌细胞后,荧光显微镜及流式细胞仪(FCM)检测各组重组腺病毒对A549肺癌细胞的感染效率。各组重组腺病毒感染A549肺癌细胞后,RT-PCR和Western blot法检测目的基因ING4或/和P53基因在QBI-293A细胞和A549肺癌细胞中的表达,采用MTT法检测ING4或/和P53基因表达对A549肺癌细胞增殖的影响,AnexinV-PE/7-AAD双染后,FCM检测各组重组腺病毒对A549肺癌细胞的诱导凋亡效应,PI单染,FCM检测各组A549肺癌细胞的周期变化,细胞划痕实验和Transwell法检测各组重组腺病毒对A549肺癌细胞迁移及侵袭能力的影响。Real time-PCR检测A549肺癌细胞内凋亡、周期及迁移和侵袭相关基因Caspase-3、Bax、Bcl-2、P21、Cyclin E、MMP-2和MMP-9 mRNA的表达水平,Western blot法检测A549肺癌细胞内凋亡相关基因Bax、Bad和Bcl-xl的蛋白表达水平。用A549细胞建立裸鼠人肺腺癌移植瘤模型,通过观察并测量瘤体体积、重量研究ING4或/和P53基因表达对裸鼠人肺腺癌移植瘤的生长抑制作用,免疫组化检测瘤体细胞的凋亡和周期相关基因caspase-3、bax、bcl-2、p21及血管形成相关因子vegf的蛋白表达水平。结果:pcr和酶切鉴定表明成功构建了pad.rgd-p53和pad.rgd-ing4-p53同源重组腺病毒质粒,包装扩增后各组重组腺病毒经效价检测可达109-1010pfu/ml,各组重组腺病毒对a549肺癌细胞的感染效率可达90-95%。rt-pcr和westernblot法证实了腺病毒介导的ing4或/和p53基因能够在qbi-293a细胞和a549肺癌细胞中成功表达。体外实验结果表明腺病毒介导的ing4或/和p53基因表达均能抑制a549肺癌细胞的生长,诱导细胞凋亡,阻滞细胞g1期进程,抑制细胞迁移和侵袭,且ad.rgd-ing4-p53双基因组较ad.rgd-ing4和ad.rgd-p53单基因组效果更优。体内实验结果表明ing4或/和p53单双基因重组腺病毒均能抑制a549裸鼠人肺腺癌移植瘤的生长,且双基因组较单基因组呈明显的抑瘤增效效果。分子机制检测表明ing4或/和p53基因表达能够上调细胞内凋亡相关基因caspase-3、bax、bad,下调bcl-2和bcl-xl的表达,上调周期相关基因p21,下调cycline的表达,下调肿瘤迁移和侵袭相关基因mmp-2和mmp-9的表达,下调肿瘤血管形成相关因子vegf的表达,且双基因组优于单基因组。结论:1、成功构建rgd-4c修饰的单双基因重组腺病毒ad.rgd-p53和ad.rgd-ing4-p53。2、rgd修饰的ing4或/和p53重组腺病毒均能显著抑制a549肺癌细胞的生长,诱导细胞凋亡,阻滞细胞g1期进程,并抑制细胞迁移和侵袭,且ad.rgd-ing4-p53双基因共表达组较ad.rgd-ing4和ad.rgd-p53单基因组效果更为明显。3、ad.rgd-ing4-p53双基因共表达较ad.rgd-ing4或ad.rgd-p53单基因表达在体内对a549人肺腺癌裸鼠移植瘤的生长产生更加显著的抑瘤效应。4、腺病毒介导的ing4或/和p53基因表达能通过上调细胞内周期相关基因p21和下调cycline的表达阻滞细胞g1期进程,上调凋亡相关基因caspase-3、bax、bad和下调bcl-2、bcl-xl的表达诱导细胞凋亡,下调肿瘤迁移和侵袭相关基因mmp-2,mmp-9的表达抑制细胞的迁移和侵袭,下调裸鼠移植瘤内肿瘤血管形成因子VEGF的表达抑制肿瘤新血管的生成,且Ad.

关键词：腺病毒 RGD 人肺腺癌细胞 ING4 P53 抑瘤增效

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土贝母苷甲对人肺腺癌细胞增殖及凋亡的影响

临床肺科杂志 2021年第1期26卷 95-100页

作者：苏甲林赵参军郑瑾空军军医大学第二附属医院陕西西安710038

目的探讨土贝母苷甲对人肺腺癌细胞(A549)增殖及凋亡的影响。方法应用MTS法检测土贝母苷甲不同浓度、不同时间对A549细胞增殖的影响;使用1μg/mL土贝母苷甲处理A549细胞48 h作为处理组,对照组加入培养基培养48h;使用流式细胞仪分别检测... 详细信息

目的探讨土贝母苷甲对人肺腺癌细胞(A549)增殖及凋亡的影响。方法应用MTS法检测土贝母苷甲不同浓度、不同时间对A549细胞增殖的影响;使用1μg/mL土贝母苷甲处理A549细胞48 h作为处理组,对照组加入培养基培养48h;使用流式细胞仪分别检测两组细胞的周期分布及细胞凋亡率;并使用Western blot检测两组细胞凋亡相关通路Caspase蛋白的表达。结果MTS实验结果显示各组细胞随着土贝母苷甲浓度的增加A549细胞的增殖速度降低,并在培养48h后,各组细胞的增殖能力出现显著差异(P细胞仪检测土贝母苷甲处理A549细胞48 h后比对照组细胞凋亡率显著增高(P细胞更多的阻滞于G0/G1期(P细胞Caspase通路蛋白表达显示处理组比对照组Caspase-9、Caspase-3和Parp蛋白表达增加(P人肺腺癌细胞增殖,并诱导人肺腺癌细胞凋亡,具有一定的抗肿瘤作用,为中医药土贝母在临床应用中奠定基础。

关键词：土贝母苷甲人肺腺癌细胞细胞增殖细胞凋亡