检索结果-南通市图书馆

miR-143-3p靶向IL-6R/STAT3通路抑制IL-6诱导的人肺微血管内皮细胞血管生成

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

免疫学杂志 2018年第3期34卷 200-206页

作者：程玮闫堃陈瑶西安市儿童医院呼吸二科 710003 西安交通大学第二附属医院普通外科 710004

目的探究miR-143-3p在IL-6诱导的人肺微血管内皮细胞(HLMVEC)血管生成中的作用和机制。方法首先使用100 ng/ml重组IL-6蛋白处理HLMVEC细胞,管腔形成实验分析IL-6对细胞管腔形成数目的影响,Real-time PCR检测IL-6对miR-143-3p和VEGF mRN... 详细信息

目的探究miR-143-3p在IL-6诱导的人肺微血管内皮细胞(HLMVEC)血管生成中的作用和机制。方法首先使用100 ng/ml重组IL-6蛋白处理HLMVEC细胞,管腔形成实验分析IL-6对细胞管腔形成数目的影响,Real-time PCR检测IL-6对miR-143-3p和VEGF mRNA表达的影响。Western blot检测VEGF蛋白水平的变化。然后使用miR-143-3p mimics过表达miR-143-3p,按照上述方法检测miR-143-3p对IL-6诱导的管腔形成数目、VEGF mRNA和蛋白表达的影响。此外,使用双荧光素酶报告基因检测法分析miR-143-3p和IL-6R的关系,Real-time PCR检测miR-143-3p过表达对IL-6R mRNA表达的影响,Western blot检测IL-6R、STAT3和磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白水平的变化。结果 IL-6能够增加管腔形成数目和VEGF的表达,降低miR-143-3p的表达。过表达miR-143-3p能够抑制IL-6诱导的管腔形成、VEGF、IL-6R和p-STAT3的表达水平,但是不影响STAT3的表达。此外还发现IL-6R是miR-143-3p的一个靶基因。结论 miR-143-3p能够抑制IL-6诱导的内皮细胞血管生成,这可能是通过抑制IL-6R/STAT3通路发挥作用的。

关键词： miR-143-3p IL-6R/STAT3 IL-6 人肺微血管内皮细胞血管生成

人重组C5a对微血管内皮细胞表达组织因子的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国急救医学 2010年第4期30卷 318-321,I0001页

作者：姜巧陈蕊郭振辉广州军区广州总医院MICU科广州510010

目的研究人重组C5a（human—recombinant C5a，rh—C5a）对人肺微血管内皮细胞（human pulmonary microvascular endothelial cells，HPMECs）表达组织因子（tissue factor，TF）的影响。方法用不同浓度（100、200、300μg／L）的rh—C5a刺激HPMECs 8h和同一浓度（200μg／L）的rh—C5a刺激HPMECs 4、8、12h。采用实时荧光定量PCR和Western blot方法检测TF基因和蛋白表达情况。选取刺激浓度为200μg／L，作用时间为8h组进行C5a反义肽R4干预，相同的方法检测TF基因和蛋白表达并用免疫组织化学方法定性检测NF—κB p65变化。结果正常的HPMECs基本不表达TF，rh—C5a刺激后，TF mRNA和蛋白开始表达，刺激的12h内呈现出时效和量效关系（P〈0．05）。用C5a反义肽R4干预后，TF mRNA水平降至未干预组的68％（P〈0．05），蛋白表达也有下降。免疫组织化学示p65在胞浆内明显增加并有部分人核。结论在刺激的12h内，C5a对HPMECs表达TF存在时间-浓度的依赖关系，机制可能是C5a与其受体结合后，通过细胞信号转导途径活化NF—κB，从而调节基因和蛋白的表达。

关键词：人重组-C5a 人肺微血管内皮细胞组织因子 C5a反义肽R4 核转录因子-κB p65

重组人白细胞介素-10对缺氧条件下人肺微血管内皮细胞凋亡的影响

维普期刊数据库评论

在线全文

维普期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

实用儿科临床杂志 2012年第14期27卷 1107-1110页

作者：莫镜崔其亮姚君张费通谭小华广州医学院第三附属医院儿科广州510150 暨南大学第二临床医学院深圳市人民医院消化内科广东深圳518020

目的研究低氧条件下,重组人IL-10(rhIL-10)对人肺微血管内皮细胞(HPMVEC)凋亡和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)活性的影响。方法常规培养HPMVEC细胞株,分为5组:正常对照组(常规培养);缺氧对照组(50 mL·L-1CO2,950mL·L-1N2);缺... 详细信息

目的研究低氧条件下,重组人IL-10(rhIL-10)对人肺微血管内皮细胞(HPMVEC)凋亡和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)活性的影响。方法常规培养HPMVEC细胞株,分为5组:正常对照组(常规培养);缺氧对照组(50 mL·L-1CO2,950mL·L-1N2);缺氧培养并加入rhIL-10,并按rhIL-10剂量(10×103ng.L-1、50×103ng.L-1、100×103ng.L-1)分为rhIL-10低剂量干预组、rhIL-10中剂量干预组、rhIL-10高剂量干预组。培养4 h、12 h、24 h、48 h离心收集细胞,化学比色法检测细胞核内Caspase-3活性,24 h核荧光染色并在荧光显微镜下观察荧光强度,并进行统计学分析。结果 4 h,凋亡蛋白Caspase-3相对活性各组间无明显差异(P>0.05);12 h,缺氧对照组,rhIL-10低、中剂量干预组与正常对照组比较显著升高(Pa0.05),rhIL-10各剂量干预组与缺氧对照组比较显著降低(Pa0.05);缺氧凋亡峰值见于24 h。24 h,各组行凋亡细胞核Hoechst荧光染色,缺氧对照组和rhIL-10低、中、高剂量干预组灰度值与正常对照组比较均显著升高(Pa<0.05);rhIL-10低、中、高剂量rhIL-10干预组与缺氧对照组比较显著降低(Pa<0.05)。结论缺氧可促进HPMVEC凋亡,rhIL-10可一定程度地抑制HPMVEC凋亡,这些变化可能与急性缺氧性各器官疾病密切相关。

关键词：重组人白细胞介素-10 缺氧凋亡人肺微血管内皮细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3

芪冬活血饮药物血清对脂多糖刺激下人肺微血管内皮细胞E-selectin和IP-10表达的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华中医药杂志 2016年第6期31卷 2251-2253页

作者：马春芳王寅孟丽蔡宛如浙江中医药大学附属第二医院浙江省新华医院杭州310005

目的:研究芪冬活血饮药物血清对人肺微血管内皮细胞(HPMEC)表达E-selectin和IP-10的影响。方法:将细胞随机分为5组,空白组,LPS组,正常大鼠血清+LPS组,5%药物血清+LPS组,10%药物血清+LPS组,用不同浓度的药物血清培养HPMEC 4h后,再加入1μ... 详细信息

目的:研究芪冬活血饮药物血清对人肺微血管内皮细胞(HPMEC)表达E-selectin和IP-10的影响。方法:将细胞随机分为5组,空白组,LPS组,正常大鼠血清+LPS组,5%药物血清+LPS组,10%药物血清+LPS组,用不同浓度的药物血清培养HPMEC 4h后,再加入1μg/mL LPS刺激HPMEC,用RT-PCR方法检测E-selectin和IP-10的mRNA表达,ELISA法检测细胞上清液中E-selectin和IP-10蛋白水平。结果:LPS刺激HPMEC细胞后E-selectin和IP-10的表达和分泌显著高于空白对照(P细胞因子的表达和释放(P<0.05)。结论:芪冬活血饮药物血清能明显抑制HPMEC的活化,降低E-selectin和IP-10的释放,减轻炎性反应损伤。

关键词：芪冬活血饮药物血清人肺微血管内皮细胞细胞因子

盐酸戊乙奎醚对内毒素刺激的肺微血管内皮细胞的作用及对β-抑制蛋白-2的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

武汉大学学报（医学版） 2017年第5期38卷 740-744页

作者：姚曙东郑菲詹佳鄂东医疗集团黄石市中心医院麻醉科湖北黄石435000 武汉大学中南医院麻醉科湖北武汉430071

目的:探讨在内毒素(LPS)作用下盐酸戊乙奎醚(PHCD)对肺微血管内皮细胞的作用及β-抑制蛋白-2(β-arrestin-2)表达的影响。方法:培养人肺微血管内皮细胞,用随机数字表法将其分为4组:正常对照组(C组)、LPS诱导组(L组)、PHCD+LPS组(PL组)及... 详细信息

目的:探讨在内毒素(LPS)作用下盐酸戊乙奎醚(PHCD)对肺微血管内皮细胞的作用及β-抑制蛋白-2(β-arrestin-2)表达的影响。方法:培养人肺微血管内皮细胞,用随机数字表法将其分为4组:正常对照组(C组)、LPS诱导组(L组)、PHCD+LPS组(PL组)及PHCD对照组(P组)。P组和PL组加入终浓度为2μg/ml的PHCD,L组及PL组加入终浓度为0.1μg/ml的LPS,PL组于加入PHCD后60min再加入LPS,C组加入同等体积的培养基。加入LPS 60min后,测细胞LDH水平、VCAM-1、VE-cadherin表达及β-arrestin-2的表达。结果:与C组比较,L组细胞LDH水平、VCAM-1表达升高,VE-cadherin和β-arrestin-2表达降低;与L组比较,PL组细胞LDH水平、VCAM-1表达降低,而VE-cadherin和β-arrestin-2表达增加。结论:盐酸戊乙奎醚预处理,可以通过上调β-arrestin-2的表达,减轻LPS引起的肺微血管内皮细胞损伤。

关键词：盐酸戊乙奎醚人肺微血管内皮细胞血管内皮细胞黏附分子-1 血管内皮钙黏蛋白 β-抑制蛋白-2 内毒素

前列地尔对缺氧损伤的人肺微血管内皮细胞中VEGF和eNOS表达的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国药房 2016年第25期27卷 3518-3520页

作者：王友俊张玲美莱芜钢铁集团有限公司医院传染科山东莱芜271126

目的:研究前列地尔对缺氧损伤的人肺微血管内皮细胞(HPMECs)中血管内皮生长因子(VEGF)和内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)表达的影响。方法:将HPMECs分为A组(正常培养)、B组(3%O_2培养)、C组(3%O_2培养+15μg/L前列地尔)及D组(3%O_2培养+45μ... 详细信息

目的:研究前列地尔对缺氧损伤的人肺微血管内皮细胞(HPMECs)中血管内皮生长因子(VEGF)和内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)表达的影响。方法:将HPMECs分为A组(正常培养)、B组(3%O_2培养)、C组(3%O_2培养+15μg/L前列地尔)及D组(3%O_2培养+45μg/L前列地尔),相应培养24 h。观察各组细胞形态,MTT比色法检测细胞活力(以吸光度计),流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blot法检测细胞中VEGF、eNOS相对表达量。结果:A、D组细胞密度较高,B、C组细胞密度较低。与A组比较,B、C、D组细胞活力降低、凋亡率升高、VEGF与eNOS表达增强、eNOS/VEGF减少(P细胞活力增加、VEGF表达减弱(P细胞凋亡率降低、eNOS表达减弱、eNOS/VEGF增加(P细胞凋亡率降低、VEGF表达减弱、eNOS/VEGF增加(P<0.05)。结论:前列地尔可能通过上调HPMECs的eNOS/VEGF发挥保护作用。

关键词：前列地尔缺氧损伤人肺微血管内皮细胞血管内皮生长因子内皮型一氧化氮合成酶

HLA-A2抗体活化PMN介导肺微血管内皮细胞损伤的作用机制研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

HLA-A2抗体活化PMN介导肺微血管内皮细胞损伤的作用机制研究

作者：吴承高南昌大学

学位级别：硕士

研究目的输血相关急性肺损伤(TRALI)是较为常见的严重输血不良反应,是导致输血相关性死亡的首要原因。约85～90%TRALI的发生与人白细胞抗原(HLA)抗体、人粒细胞抗原(HNA)抗体等免疫因素有关。已证实血液制剂中HLA-A2抗体可诱发TRALI,但... 详细信息

研究目的输血相关急性肺损伤(TRALI)是较为常见的严重输血不良反应,是导致输血相关性死亡的首要原因。约85～90%TRALI的发生与人白细胞抗原(HLA)抗体、人粒细胞抗原(HNA)抗体等免疫因素有关。已证实血液制剂中HLA-A2抗体可诱发TRALI,但其作用机制仍不清楚。中国人群HLA-A2抗原频率总体大于30%,HLA-A2抗体阳性率在中国献血人群中大约为3.4%,因此,揭示HLA-A2抗体诱发TRALI的发病机制对疾病的基础防治具有重要的意义。本研究通过筛选HLA-A2抗体阳性血浆,体外处理表达HLA-A2抗原的中性粒细胞(PMN),检测PMN粘附特性和细胞因子分泌情况:1)验证HLA-A2抗体直接活化PMN并促进PMN粘附特性增强和细胞因子分泌;2)探讨酪氨酸激酶Src磷酸化(p-Src)在HLA-A2抗体活化PMN过程中的作用及其下游信号通路;3)细胞水平验证抑制酪氨酸激酶Src磷酸化可有效预防HLA-A2抗体介导人肺微血管内皮细胞(HPMECs)损伤。研究方法(1)采用酚抽提法提取PMN供者基因组DNA,PCR-SSP检测HLA分型;选择经产妇献血者的血浆,使用群抗体筛选试剂盒和HLA特异性抗体检测试剂盒检测献血者HLA抗体。补体依赖微量淋巴细胞毒试验(CDC)验证上述血浆与PMN是否具有反应性。(2)体外将PMN与HLA-A2抗体阳性及HLA-A2抗体阴性血浆分别孵育处理,显微镜下观察两组PMN贴壁差异;流式细胞术检测PMN表面P-选择素糖蛋白配体1(PSGL-1)和淋巴细胞功能相关抗原1(LFA-1)的表达;化学发光法测定PMN释放的NADPH氧化酶活性;酶联免疫吸附试验(ELISA)定量检测PMN分泌的细胞因子CXCL8、CCL4和IL-1ra表达水平。(3)在上述实验基础上,设置HLA-A2抗体阳性血浆+Dasatinib(p-Src抑制剂)组,与HLA-A2抗体阳性血浆、HLA-A2抗体阴性血浆分别处理PMN,Western blot检测不同组PMN中Src和p-Src表达水平。(4)Western blot检测HLA-A2抗体阳性血浆组、HLA-A2抗体阴性血浆组和HLA-A2抗体阳性血浆+Dasatinib组PMN中核因子κB(NF-κB)信号通路IκBα、p-IκBα、p65、p-p65 和 NLRP3 信号通路 Pro-caspase-1、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、pro-IL-1β、IL-1β蛋白表达水平。(5)脂多糖(LPS)预处理HPMECs,并将其与HLA-A2抗体阳性血浆、HLA-A2抗体阴性血浆、HLA-A2抗体阳性血浆+Dasatinib分别处理的PMN共培养,建立PMNs介导的细胞毒性模型。流式细胞术检测HPMECs凋亡,Transwell小室单层细胞法检测HPMECs通透性。研究结果(1)PCR-SSP检测PMN供者HLA分型,显示PMN供者纯合表达HLA-A2抗原;HLA特异性抗体检测经产妇血浆,结果提示血浆中含有HLA-A2抗体,且不含其他HLA抗体。补体依赖微量淋巴细胞毒试验结果显示,阳性细胞数占比64%,确认上述血浆和PMN供者HLA-A2抗原具有良好反应性。(2)与HLA-A2抗体阴性血浆组对比,HLA-A2抗体阳性血浆组PMN贴壁更明显,表面PSGL-1和LFA-1表达显著增多,NADPH氧化酶活性增强,细胞因子CXCL8、CCL4和IL-1ra的表达显著增加。(3)检测HLA-A2抗体阳性组和HLA-A2抗体阴性组PMN中Src和p-Src的表达,结果显示,HLA-A2抗体阳性血浆处理的PMN中Src无显著变化,p-Src显著增加。在加入Dasatinib时,Src无显著变化,p-Src则显著降低。(4)与HLA-A2抗体阴性组相比,HLA-A2抗体阳性组PMN中IκBα表达显著降低,p65表达无显著变化,p-IκBα和p-p65表达显著增加;同时,NLRP3、Pro-caspase-1、ASC、pro-IL-1β 和 IL-1β 的表达显著增加;加入 Dasatinib 处理后,p-IκBα 和 p-p65 表达则显著减少,同时,NLRP3、Pro-caspase-1、ASC、pro-IL-1β和IL-1β的表达显著减少。(5)PMN与HPMECs共培养结果显示,与HLA-A2抗体阴性组相比,HLA-A2抗体阳性组HPMECs的凋亡率和细胞通透性均显著增加;加入Dasatinib处理后,HPMECs的凋亡率和通透性则显著降低。研究结论(1)HLA-A2抗体可直接活化PMN并促进PMN粘附特性增强和细胞因子分泌。(2)p-Src是HLA-A2抗体促进PMN粘附特性增强和细胞因子分泌的关键信号。(3)HLA-A2抗体通过上调p-Src调控NF-κB和NLRP3炎症小体信号通路,进而调控PMN粘附特性改变和细胞因子分泌。(4)抑制PMN p-Src可有效预防

关键词： HLA-A2抗体中性粒细胞酪氨酸激酶Src磷酸化人肺微血管内皮细胞细胞损伤

榄香烯对人气道成纤维细胞诱导的人肺微血管内皮细胞增殖状态的影响及其机制的探讨

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

榄香烯对人气道成纤维细胞诱导的人肺微血管内皮细胞增殖状态的影...

作者：林连顺福建医科大学

学位级别：硕士

目的:观察榄香烯对人气道成纤维细胞(Human airway fibroblast,HAFB)诱导的人肺微血管内皮细胞(Human pulmonary microvascular endothelial cells,HPMEC)增殖状态和凋亡影响,并通过检测HPMEC中含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Caspase-3)、B细胞淋巴瘤/白血病2(B cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)、B细胞淋巴瘤/白血病2相关的X蛋白(B cell lymphoma/leukemia-2-Associateds X,Bax)的蛋白表达水平探讨其可能的分子机制,为局部应用榄香烯治疗良性气道狭窄提供新的基础实验依据。方法:(1)体外培养HAFB和HPMEC。HAFB随机分为5组:A1:对照组,DMEM干预;A2:30ug/ml榄香烯干预;A3:60ug/ml榄香烯干预;A4:90ug/ml榄香烯干预;A5:120ug/ml榄香烯干预。24h后移去旧培养基,加入DMEM继续培养24h后取出HAFB培养上清液保存备用。HPMEC随机分为6组:B1:对照组,DMEM干预;B2:常规培养的HAFB上清液干预;B3:30ug/ml榄香烯处理的HAFB上清液干预;B4:60ug/ml榄香烯处理的HAFB上清液干预;B5:90ug/ml榄香烯处理的HAFB上清液干预;B6:120ug/ml榄香烯处理的HAFB上清液干预。(2)倒置显微镜下观察不同培养基培养24h、48h、72h后HPMEC的生长情况和形态变化,MTT法检测HPMEC的增殖活性,Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术检测不同培养基处理24h后HPMEC的细胞凋亡率。(3)体外培养HPMEC,随机分为3组:G1:对照组,DMEM干预;G2:常规培养的HAFB上清液干预;G3:60ug/ml榄香烯处理的HAFB上清液干预。处理24h后提取HPMEC的总蛋白,Western blot法检测HPMEC中Caspase3、Bcl-2、Bax的表达水平。结果:(1)与对照组相比,常规培养的HAFB上清液对HPMEC增殖状态的影响没有统计学差异(P>0.05),且不具有时间依赖性(P>0.05)。与对照组相比,榄香烯处理的HAFB上清液能抑制HPMEC增殖(P0.05)。(2)与对照组相比,常规培养的HAFB上清液干预HPMEC后,HPMEC细胞形态没有明显改变。与对照组相比,不同浓度的榄香烯处理的HAFB上清液使HPMEC细胞形态发生改变,且随着榄香烯浓度的升高,HPMEC细胞排列变得不规则,细胞间隙逐渐变大。(3)与对照组相比,常规培养的HAFB上清液干预HPMEC后,HPMEC细胞早期凋亡率有所上升(P细胞早期凋亡率明显升高(P0.05)、Bcl-2表达下调(P细胞凋亡,从而抑制HPMEC细胞增殖;其分子机制可能与Bax、Caspase-3表达水平的上调和Bcl-2表达水平的下调有关。

关键词：榄香烯良性气道狭窄人气道成纤维细胞人肺微血管内皮细胞

miR-34a对CSE诱导的人肺微血管内皮细胞凋亡的影响

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

miR-34a对CSE诱导的人肺微血管内皮细胞凋亡的影响

作者：陈珊珊中南大学

学位级别：硕士

目的：探讨CSE干预对HPMEC凋亡及miR-34a表达的影响;并进一步研究miR-34a对CSE诱导的HPMEC凋亡的影响。方法：体外培养HPMEC,给予不同浓度(0%、0.5%、1%、2.5%、5%)及不同时间(Oh、6h、12h、24h)的CSE干预,采用Annexin-V FITC/PI双染法流式细胞术检测细胞凋亡率,Real-time PCR检测miR-34a-5p与miR-34a-3p的表达,并分析HPMEC早期凋亡率和miR-34a-5p与miR-34a-3p表达之间的相关性。进一步将HPMEC分为四组,各组细胞处理如下：对照组(CSE组)不予处理;miR-34a inhibitor阴性对照转染组(N+CSE组)转染miR-34a inhibitor的阴性对照;miR-34a-3p inhibitor转染组(3p+CSE组)转染miR-34a-3p inhibitor;miR-34a-5p inhibitor转染组(5p+CSE组)转染miR-34a-5p inhibitor。各组细胞予以相应处理后再均以1%CSE干预12h,然后检测各组细胞的凋亡率及miR-34a的表达水平。各组计量资料以(M±SD)表示,采用SPSS18.0对相关数据进行统计分析,P0.05);5%CSE组HPMEC早期凋亡率较2.5%CSE组下降(P0.05)。2.随着CSE干预浓度从0%增加到2.5%,miR-34a-5p、 miR-34a-3p的相对表达量增加(P0.05)。3. HPMEC早期凋亡率与miR-34a表达的相关性分析结果显示HPMEC中miR-34a-5p的相对表达量与其早期凋亡率呈正相关(r=0.97,P<0.001), miR-34a-3p的相对表达量与其早期凋亡率呈正相关(r=0.92,P<0.01)。4.5p+CSE组和3p+CSE组HPMEC早期凋亡率分别为(34.08±1.29)%、(33.58±0.93)%,较N+CSE组HPMEC早期凋亡率(44.52±1.39)%明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论：1.CSE诱导HPMEC早期凋亡率和miR-34a的表达增加,且具有CSE干预的浓度和时间依赖性。2.CSE诱导的HPMEC早期凋亡率和miR-34a的表达呈正相关。3.miR-34a抑制物能减少CSE所致的HPMEC早期凋亡率,miR-34a在CSE所致HPMEC凋亡中可能具有重要作用。

关键词：人肺微血管内皮细胞凋亡 miR-34a 香烟提取物