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人肝细胞 l-02/聚丙烯杂化界面的初步研究:肝细胞球形聚集体培养

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中华肝胆外科杂志 2006年第3期12卷 210-212页

作者：彭承宏韩宝三高长有马祖伟王涌刘宏赵之明唐喆浙江大学医学院附属二院普外科浙江大学高分子复合材料研究所杭州市310027

生物人工肝（bioartificial liver，BAl）在肝功能衰竭中的治疗价值已得到肯定，大量高活性的人肝细胞是细胞型体外BAl支持系统的核心原材料。球形聚集体是一种立体、高密度、高活性培养肝细胞的方法，但操作较复杂。我们采用生物材料... 详细信息

生物人工肝（bioartificial liver，BAl）在肝功能衰竭中的治疗价值已得到肯定，大量高活性的人肝细胞是细胞型体外BAl支持系统的核心原材料。球形聚集体是一种立体、高密度、高活性培养肝细胞的方法，但操作较复杂。我们采用生物材料表面接枝功能化学基团的方法，对人肝细胞l-02／聚丙烯杂化界面进行了研究，并通过简单的静止培养实现了肝细胞的球形聚集体培养方式，极大的简化了既往的肝细胞球形聚集体培养方法。

关键词：人肝细胞l-02 聚集体培养聚丙烯球形杂化步研究生物人工肝 liver 肝功能衰竭培养肝细胞

来源于海洋真菌的Oxalicumone A诱导肝细胞l-02凋亡的毒性作用机制研究

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中药新药与临床药理 2016年第1期27卷 44-49页

作者：石思郭坤彬王翔宇闵剑斌李伟荣广州中医药大学临床药理研究所广东广州510405

目的评价来源于海洋真菌Penicillium sp.的新药候选化合物Oxalicumone A(POA)对人正常肝细胞l-02的细胞毒性作用,初步探讨POA诱导其凋亡的作用机制。方法以体外培养的l-02为实验对象,CCK-8检测细胞存活率;Hoechst 33258染色观察细胞形... 详细信息

目的评价来源于海洋真菌Penicillium sp.的新药候选化合物Oxalicumone A(POA)对人正常肝细胞l-02的细胞毒性作用,初步探讨POA诱导其凋亡的作用机制。方法以体外培养的l-02为实验对象,CCK-8检测细胞存活率;Hoechst 33258染色观察细胞形态学的改变;流式细胞仪检测细胞凋亡率和增殖周期;Western blot检测凋亡相关蛋白Fas、Bax以及Bcl-2的表达。结果 CCK-8检测结果表明,POA对l-02细胞有一定的时间、浓度依赖性的抑制作用;Hoechst 33258染色可见细胞出现核固缩、碎裂、浓染等典型的凋亡细胞形态学改变;流式细胞仪检测显示细胞早期凋亡率和Sub-G1、S、G2/M期出现了相应比例的增加;Western blot法表明POA显著增加了凋亡蛋白Fas、Bax表达(Pl-2表达(Pl-02细胞毒活性,产生凋亡并经过线粒体信号通路,其作用机制与Bcl-2表达下调以及Fas、Bax表达上调有关。

关键词： Oxalicumone A(POA) 细胞毒人肝细胞l-02 细胞凋亡

雷公藤甲素诱导肝细胞l-02凋亡的作用机制研究

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中国药房 2013年第11期24卷 964-967页

作者：姚金成刘颖胡领张陆勇饶健曾令贵江振洲何玲湖南省药品审评认证与不良反应监测中心长沙410013 中南大学湘雅二医院长沙410011 中国药科大学国家新药筛选中心南京210009

目的:研究雷公藤甲素诱导肝细胞l-02凋亡的作用机制。方法:体外培养l-02细胞,MTT法检测雷公藤甲素对l-02细胞的毒性作用,Hoechst33258染色观察凋亡细胞核形态的改变,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Westernblot法检测人抗兔p53、B细胞淋巴瘤... 详细信息

目的:研究雷公藤甲素诱导肝细胞l-02凋亡的作用机制。方法:体外培养l-02细胞,MTT法检测雷公藤甲素对l-02细胞的毒性作用,Hoechst33258染色观察凋亡细胞核形态的改变,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Westernblot法检测人抗兔p53、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)与线粒体、胞浆中细胞色素C(Cyt-c)的表达。结果:不同浓度雷公藤甲素(60、120、180nmol/l)与同样浓度(120nmol/l)不同作用时间(12、24、48h)作用l-02细胞,雷公藤甲素对细胞的抑制作用与浓度或时间呈正相关;Hoechst33258染色可见细胞出现典型的凋亡细胞形态学改变;Westernblot法显示120nmol/l雷公藤甲素作用后,细胞p53、Bax与胞浆中Cyt-c表达显著增强(Pl-2与线粒体中Cyt-c表达显著减弱(Pl-02细胞凋亡,其作用机制可能与Bcl-2与线粒体中Cyt-c表达下调和p53、Bax与胞浆中Cyt-c表达上调有关。

关键词：雷公藤甲素人肝细胞l-02 凋亡

凋亡素基因在人肝细胞和肝癌细胞中的定位观察及对线粒体膜电位的影响

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广东医学 2011年第18期32卷 2379-2381页

作者：张园朱惠明李银鹏张娟孙传涛暨南大学第二临床医学院广东省深圳市人民医院消化内科 518000

目的观察转染的pEGFP-VP3融合基因在人肝细胞l-02及肝癌细胞HepG-2中的定位表达及其与线粒体膜电位关系的研究。方法构建pEGFP-VP3融合基因,利用人源正常肝细胞株l-02及肝癌细胞株HepG-2,经lipofectamine 2000转染细胞,在激光共聚焦显... 详细信息

目的观察转染的pEGFP-VP3融合基因在人肝细胞l-02及肝癌细胞HepG-2中的定位表达及其与线粒体膜电位关系的研究。方法构建pEGFP-VP3融合基因,利用人源正常肝细胞株l-02及肝癌细胞株HepG-2,经lipofectamine 2000转染细胞,在激光共聚焦显微镜下观察pEGFP-VP3融合基因的表达,DAPI染色成功观测该蛋白在细胞中的定位,线粒体膜电位染色观察膜电位的变化。结果 pEGFP-VP3融合基因转染后可观察到在人肝细胞l-02及肝癌细胞HepG-2细胞核中的高表达,及线粒体膜电位下降的改变。结论凋亡素诱导线粒体途径的凋亡,为后期进一步研究VP3的凋亡机制及其抗肿瘤治疗奠定了基础。

关键词： pEGFP-VP3融合基因线粒体膜电位人肝细胞l-02 肝癌细胞HepG-2