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人肝癌组织胰岛素样生长因子Ⅱ基因P4启动子甲基化变化及其意义

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中华医学杂志 2006年第8期86卷 565-567页

作者：汤绍辉杨冬华黄卫周鸿科卢筱华叶刚暨南大学附属第一医院消化科广州510630

胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)是肝细胞产生的一种多功能调节因子,其基因含4个不同的启动子(P1～P4).在胎肝和新生儿肝,IGF-ⅡmRNA表达量最高,其中P3活性最大,其次分别为P4及P2,P1失活;在成人肝脏,IGF-ⅡmRNA水平显著下调,约为新生儿峰值... 详细信息

胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)是肝细胞产生的一种多功能调节因子,其基因含4个不同的启动子(P1～P4).在胎肝和新生儿肝,IGF-ⅡmRNA表达量最高,其中P3活性最大,其次分别为P4及P2,P1失活;在成人肝脏,IGF-ⅡmRNA水平显著下调,约为新生儿峰值的1/10,其中P1活性最大,P2～P4活性明显降低或失活[1].近年发现,IGF-Ⅱ在人类肝脏的癌前病变及肝癌中呈过量表达[2,3],但其详细机制尚未明确.本研究探讨了肝癌组织中P4是否存在低甲基化及其与P4转录子表达变化的关系,旨在阐明IGF-ⅡP4启动子在肝细胞癌变中的作用及其临床病理意义。

关键词：人胰岛素样生长因子Ⅱ 启动子甲基化人肝癌组织 Ⅱ基因 P4 其意义 mRNA表达量 IGF-Ⅱ mRNA水平调节因子

人肝癌组织GRP、GRPR的表达及临床意义

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中华普通外科杂志 2011年第6期26卷 509-510页

作者：李新秋王玉明杜正文吕云福湖北医药学院附属人民医院甲状腺乳腺外科湖北省十堰市442000 海南省人民医院普外科

胃泌素释放肽（gastrin-releasing peptide，GRP）是与蛙皮素同源的小的调节肽，GRP和GRP受体（gastrin-releasing peptide receptor，GRPR）在较大范围的人类肿瘤高度表达，GRP作为有丝分裂因子促进肿瘤的进展。我们利用人肝癌组织标... 详细信息

胃泌素释放肽（gastrin-releasing peptide，GRP）是与蛙皮素同源的小的调节肽，GRP和GRP受体（gastrin-releasing peptide receptor，GRPR）在较大范围的人类肿瘤高度表达，GRP作为有丝分裂因子促进肿瘤的进展。我们利用人肝癌组织标本，通过免疫组化检测肝癌组织中GRP、GRPR的表达，分析表达与肝癌临床病理指标的关系。

关键词：人肝癌组织 GRP 临床意义 peptide receptor 胃泌素释放肽有丝分裂因子免疫组化检测

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人肝癌组织多药耐药特性裸鼠模型的建立

中华实验外科杂志 2005年第4期22卷 492-493页

作者：郜永顺陈孝平李开艳吴在德华中科技大学同济医学院附属同济医院肝脏外科中心

目的　在裸鼠肝脏建立人肝癌组织多药耐药(MDR)模型。方法　用组织学完整的原发性多药耐药人肝癌组织种植于裸鼠肝脏。然后分别用免疫组织化学方法(SP法)和逆转录聚合酶链反应(RT PCR)法检测瘤源及裸鼠种植瘤组织中MDR1、LRP蛋白及其m... 详细信息

目的　在裸鼠肝脏建立人肝癌组织多药耐药(MDR)模型。方法　用组织学完整的原发性多药耐药人肝癌组织种植于裸鼠肝脏。然后分别用免疫组织化学方法(SP法)和逆转录聚合酶链反应(RT PCR)法检测瘤源及裸鼠种植瘤组织中MDR1、LRP蛋白及其mRNA的表达。结果　裸鼠原位种植瘤保持了人肝癌组织MDR特性。瘤源MDR1、LRP蛋白表达分别为3 1.2 6%和2 7.18% ;其mRNA量分别为61.47%和5 6.71%。裸鼠种植瘤MDR1、LRP蛋白表达分别为(2 9.2 0±2 .81) %和(2 5 .44±2 .43 ) % ;其mRNA量分别为(65 .42±13 .5 9) %和(5 8.63±9.3 7) % ,两种组织中MDR1、LRP蛋白及其mRNA表达量差异无统计学意义(P >0 .0 5 )。结论　人肝癌组织裸鼠原位种植瘤可保持瘤源的MDR生物学特征,是体内研究人肝细胞癌MDR。

关键词：人肝癌组织裸鼠模型耐药特性逆转录-聚合酶链反应多药耐药(MDR) 免疫组织化学方法 mRNA表达量 MDR1 蛋白表达 RNA量生物学特征人肝细胞癌 LRP 种植瘤 PCR) 体内研究化疗药物原发性组织学瘤组织 SP法统计学肝脏白及原位

人肝癌组织父系表达基因10印记状态与差异性DNA甲基化区甲基化状态的关系

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中华消化杂志 2013年第4期33卷 279-280页

作者：高燕张厚德林菊生广东医学院附属南山医院消化科深圳518052 华中科技大学同济医学院附属同济医院消化科

父系表达基因10（paternally expressed gene 10,PEG10）是一个新的父系表达的遗传印记基因，在大多数肝癌组织中有表达，与肝癌发生和发展密切相关。大多数肝癌组织存在PEGIO印记异常，主要表现为双等位基因同时表达的印记丢失。差异性... 详细信息

父系表达基因10（paternally expressed gene 10,PEG10）是一个新的父系表达的遗传印记基因，在大多数肝癌组织中有表达，与肝癌发生和发展密切相关。大多数肝癌组织存在PEGIO印记异常，主要表现为双等位基因同时表达的印记丢失。差异性DNA甲基化区（differentially methylated region，DMR）的甲基化状态与印记调控密切相关。一、材料与方法1．组织标本：40份肝癌及其癌旁组织标本来自广西医科大学第一附属医院肝胆血管外科标本库，其所属患者中男36例，女4例，年龄29-76岁，平均（47．3±11．7）岁。每份组织标本均经病理检查证实。2．PEGIO基因型分析：通过DNA-PCR产物测序法从肝癌组织标本中挑选出PEGl0杂合子标本。按通用基因组DNA提取试剂盒[宝生物工程（大连）有限公司]说明书提取40份肝癌组织基因组DNA。

关键词：遗传印记基因人肝癌组织 DNA甲基化甲基化状态父系广西医科大学第一附属医院异性 DNA提取试剂盒

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人肝癌组织α-L-岩藻糖苷酶的提取和鉴定

世界华人消化杂志 2005年第9期13卷 1089-1093页

作者：李超林菊生陈孝平易继林陶璐薇华中科技大学同济医学院附属同济医院肝病研究所湖北省武汉市430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院普通外科湖北省武汉市430030

目的:提取人肝癌组织的α-L-岩藻糖苷酶(α-L-fucosidase,AFU)经纯化和鉴定后,为制备特异性多克隆抗体提供纯化的抗原.方法:运用超滤和离子交换层析等方法提取、纯化人肝癌组织的AFU,并经SDS-PAGE检测蛋白纯度及相对分子质量.根据荧光底... 详细信息

目的:提取人肝癌组织的α-L-岩藻糖苷酶(α-L-fucosidase,AFU)经纯化和鉴定后,为制备特异性多克隆抗体提供纯化的抗原.方法:运用超滤和离子交换层析等方法提取、纯化人肝癌组织的AFU,并经SDS-PAGE检测蛋白纯度及相对分子质量.根据荧光底物4-甲基微型酮-α-L-岩藻糖苷(4-methvlumbelliferyl-α-L-fucopyranoside,4-MU-fucoside)和纯化的蛋白在特定条件下反应生成产物4-甲基微型酮(4-methylum]belliferone,4-MU)的量来检测酶活性.检测蛋白浓度用Bradford方法.结果:提纯并纯化的AFU经SDS-PAGE鉴定有一个亚单位Mr55000.经过一系列纯化步骤后,肝癌组织的AFU可得到74倍纯化,15%收率.结论:肝癌组织的AFU可通过离子交换层析法提取和纯化并可用于制备抗体.

关键词：人肝癌组织提取鉴定 α-L-岩藻糖苷酶离子交换层析法相对分子质量 PAGE 多克隆抗体 AFU 荧光底物蛋白纯度蛋白浓度 SDS 纯化特异性检测亚单位酶活性制备微型甲基

人肝癌组织中DR4和DR5的表达及其临床意

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中国实验诊断学 2011年第3期15卷 525-526页

作者：李领明孙国华付玉东王曼中国人民解放军95988部队医院伊通满族自治县人民医院

最近报道死亡受体（death receptor,DR）在人类多种恶性肿瘤细胞表面表达,如结直肠癌、胃癌及肝癌等。死亡受体包括TRAIL-R1（DR4）和TRAIL-R2（DR5）,均含有死亡结构域并能向细胞内传递死亡信号。当肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（tumo... 详细信息

最近报道死亡受体（death receptor,DR）在人类多种恶性肿瘤细胞表面表达,如结直肠癌、胃癌及肝癌等。死亡受体包括TRAIL-R1（DR4）和TRAIL-R2（DR5）,均含有死亡结构域并能向细胞内传递死亡信号。当肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（tumor necrosis factor-related apoptosis—inducing ligand，TRAIL）与DR结合后能激活细胞内的胱天蛋白酶家族（caspases）的信号级联（cascade），

关键词：人肝癌组织 DR5 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 DR4 apoptosis receptor 临床死亡受体

用欧蔓陀罗凝集素分离纯化人肝癌组织中强结合的γ-谷氨酰转移酶

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临床检验杂志 2006年第5期24卷 332-334页

作者：王念跃赵伟李勇端木浩黄宇峰东南大学医学院附属南京第二医院检验科南京210003 南京军区南京总医院全军医学检验中心南京210002

目的用欧蔓陀罗凝集素分离纯化人肝癌组织中强结合的γ-谷氨酰转移酶(γGT),为进一步制备其抗血清提供抗原,以期对肝癌早期诊断进行研究。方法人肝癌组织经匀浆、溶解、盐析、透析、层析等步骤进行分离纯化;纯化过程中用IFCC推荐方法测... 详细信息

目的用欧蔓陀罗凝集素分离纯化人肝癌组织中强结合的γ-谷氨酰转移酶(γGT),为进一步制备其抗血清提供抗原,以期对肝癌早期诊断进行研究。方法人肝癌组织经匀浆、溶解、盐析、透析、层析等步骤进行分离纯化;纯化过程中用IFCC推荐方法测定洗脱物的γGT催化活性,用紫外法监测蛋白出峰图谱,用Lowry法测定蛋白含量。结果经过粗提、DEAE阴离子交换层析、凝胶过滤层析及凝集素亲和层析等纯化步骤得到电泳纯的γGT,其比活为10.56U/mg蛋白,纯化倍数为84.9,得率为1.60%。结论该分离纯化方法能够较好地分离纯化人肝癌组织中欧蔓陀罗凝集素强结合的γGT。

关键词： γ-谷氨酰转移酶人肝癌组织凝集素层析

从人的肝癌组织中快速分离纯化γ-谷氨酰转移酶

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中国生化药物杂志 2006年第6期27卷 326-328页

作者：李勇王念跃赵伟孟泽史力宁宋熠春严明南京军区南京总医院医学检验中心江苏南京210002 东南大学医学院附属南京第二医院江苏南京210003 江苏大学医学技术学院江苏镇江212001 南京工业大学制药与生命科学院江苏南京210008

目的应用KTATMexplorer 100蛋白质快速色谱纯化系统从人肝癌组织中分离纯化特异性γ-谷氨酰转移酶(GGT),为制备其抗血清提供抗原材料,以便对肝癌早期诊断进行研究。方法人肝癌组织经匀浆、离心、溶解、透析和色谱等步骤进行纯化;纯化过... 详细信息

目的应用KTATMexplorer 100蛋白质快速色谱纯化系统从人肝癌组织中分离纯化特异性γ-谷氨酰转移酶(GGT),为制备其抗血清提供抗原材料,以便对肝癌早期诊断进行研究。方法人肝癌组织经匀浆、离心、溶解、透析和色谱等步骤进行纯化;纯化过程中用国际临床化学学会推荐方法测定GGT催化活性,用紫外法监测蛋白质出峰图谱,考马斯亮蓝法测定蛋白质含量。结果人肝癌组织经过粗提、疏水色谱、DEAE阴离子交换色谱等纯化步骤得到电泳纯的GGT,其比活为0.36 U/mg蛋白质,纯化倍数为24,回收率为5.0%。结论该纯化方法能较好且有效地分离纯化肝癌特异性GGT。

关键词： γ-谷氨酰转移酶人肝癌组织色谱纯化抗原

人肝癌组织中miR-20b的表达水平及其与临床病理关系

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肝脏 2017年第3期22卷 250-252页

作者：刘忆华成善泉郑安斌罗燕湖北省阳新县人民医院病理科湖北435200 湖北省阳新县人民医院消化内科湖北435200 湖北省肿瘤医院胸部放疗科

目的检测人肝癌组织中miR-20b的表达水平,分析miR-20b的表达与临床病理参数的关系,探究miR-20b的临床意义。方法收集本院肝癌组织标本80例,正常肝组织80例,分别作为实验组和对照组,提取肝癌组织及正常组织中的总RNA,并逆转录合成cDNA;通... 详细信息

目的检测人肝癌组织中miR-20b的表达水平,分析miR-20b的表达与临床病理参数的关系,探究miR-20b的临床意义。方法收集本院肝癌组织标本80例,正常肝组织80例,分别作为实验组和对照组,提取肝癌组织及正常组织中的总RNA,并逆转录合成cDNA;通过RT-PCR(Real Time PCR)分别检测实验组和对照组中miR-20b的表达水平,然后以miR-20b在实验组的表达水平为依据,将肝癌患者分为低表达组以及高表达组,并运用SPSS软件分析miR-20b的表达水平与肝癌患者临床病理参数的关系。结果与对照组相比,在实验组中大部分肝癌组织中的miR-20b的表达显著增高,差异有统计学意义(P肝癌患者的预后情况时,miR-20b的表达水平可作为一项独立的预测因子。结论 miR-20b在肝脏组织中的表达与肿瘤的转移以及复发紧密相关,因此可将miR-20b的表达水平作为一个预测指标,判断肝癌患者的预后情况。

关键词：人肝癌组织 miR-20b 表达水平病理参数