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生物医学工程学杂志 2007年第6期24卷 1334-1337,1342页

作者：宿文辉张哲张杰于秉治中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室沈阳110001

为探讨人睾丸精子结合蛋白(TSBP)在精子获能及顶体反应中可能发挥的作用,检测了TSBP重组蛋白在体外转染细胞系中对蛋白激酶A活性的影响。构建真核表达载体pcDNA3.1/myc-His(-)B/tsbp,稳定转染HEK293细胞后,蛋白免疫印迹检测到培养细胞... 详细信息

为探讨人睾丸精子结合蛋白(TSBP)在精子获能及顶体反应中可能发挥的作用,检测了TSBP重组蛋白在体外转染细胞系中对蛋白激酶A活性的影响。构建真核表达载体pcDNA3.1/myc-His(-)B/tsbp,稳定转染HEK293细胞后,蛋白免疫印迹检测到培养细胞中融合蛋白的表达。选择表达量高的细胞克隆,扩增并用金属亲和层析柱(IMAC)从细胞裂解液中纯化融合蛋白His6-TSBP。用放射自显影法检测HEK293细胞中蛋白激酶A(PKA)活性,发现重组质粒转染组PKA活性高于对照组,确定了TSBP对PKA活性的促进作用。

关键词：人睾丸精子结合蛋白蛋白纯化蛋白激酶A

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重组人睾丸精子结合蛋白对人精子运动参数的影响

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中华男科学杂志 2009年第9期15卷 783-787页

作者：宿文辉刘欣春冯晨张杰武迪迪于秉治中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室辽宁沈阳110001 中国医科大学附属第一医院骨科辽宁沈阳110001

目的:探讨重组人睾丸精子结合蛋白(TSBP)对体外培养人精子运动参数的影响。方法:将22例生育男性的精液经Percoll密度梯度离心后,分别与0.01mg/ml及0.1mg/ml的重组His6-TSBP在体外共同孵育1h或3h,同时设立对照组,Western印迹检测重组His6... 详细信息

目的:探讨重组人睾丸精子结合蛋白(TSBP)对体外培养人精子运动参数的影响。方法:将22例生育男性的精液经Percoll密度梯度离心后,分别与0.01mg/ml及0.1mg/ml的重组His6-TSBP在体外共同孵育1h或3h,同时设立对照组,Western印迹检测重组His6-TSBP与精子膜的结合情况,计算机辅助精液分析(CASA)系统测定重组His6-TSBP对精子运动参数的影响。将12例弱精子症患者的精液按同样方法处理,检测重组His6-TSBP对弱精子症患者精子运动参数的影响。结果:0.1mg/ml重组His6-TSBP与生育男性精子作用1h可以提高体外培养精子的前向运动百分率(a+b级精子百分率),培养3h后前向运动百分率和活率均有所提高,差异具有显著性(P精子症患者精子作用3h可以提高精子前向运动百分率(P精子的前向运动百分率和活率及弱精子症患者精子的前向运动百分率。

关键词：人睾丸精子结合蛋白精子精子运动参数重组

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重组人睾丸精子结合蛋白对人精子获能及膜功能的影响

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生殖与避孕 2007年第5期27卷 334-337,350页

作者：宿文辉崔城张哲李宏图王彦于秉治中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室中国医科大学基础医学院生理学教研室沈阳110001 中国医科大学基础医学院辽宁省计划生育科研院沈阳110031

目的:探讨重组人睾丸精子结合蛋白(testis sperm binding protein,TSBP)对人精子获能及膜功能的影响。方法:采集22例健康生育男性新鲜精液样本,精子经Percoll密度梯度离心法优化处理后与不同浓度的重组人睾丸精子结合蛋白分别孵育培养1h... 详细信息

目的:探讨重组人睾丸精子结合蛋白(testis sperm binding protein,TSBP)对人精子获能及膜功能的影响。方法:采集22例健康生育男性新鲜精液样本,精子经Percoll密度梯度离心法优化处理后与不同浓度的重组人睾丸精子结合蛋白分别孵育培养1h或3h,取培养后精子进行孕酮诱导顶体反应与精子膜低渗肿胀功能检测。结果:0.1mg/mlTSBP处理组孕酮诱导精子顶体反应率及精子膜尾部低渗肿胀率均明显高于对照组(P人睾丸精子结合蛋白在体外可以促进人精子获能,对精子的膜功能具有保护作用。

关键词：人睾丸精子结合蛋白人精子获能膜功能

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重组人睾丸精子结合蛋白对人精子蛋白激酶A及蛋白激酶C活性的影响

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细胞生物学杂志 2008年第5期30卷 655-659页

作者：宿文辉王国丽张杰金博冯晨张哲徐小燕于秉治中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室沈阳110001

为探讨人睾丸精子结合蛋白(human testis sperm binding protein,hTSBP)促进人精子获能的分子机制,检测了重组hTSBP对人精子蛋白激酶A(PKA)和蛋白激酶C(PKC)活性的影响。用重组载体pcDNA3.1/myc-His(-)B-tsbp转染真核细胞后,金属亲和层... 详细信息

为探讨人睾丸精子结合蛋白(human testis sperm binding protein,hTSBP)促进人精子获能的分子机制,检测了重组hTSBP对人精子蛋白激酶A(PKA)和蛋白激酶C(PKC)活性的影响。用重组载体pcDNA3.1/myc-His(-)B-tsbp转染真核细胞后,金属亲和层析纯化表达的重组蛋白质His6-TSBP;重组蛋白质处理健康成人精子后,分别提取精子胞浆及胞膜蛋白组分,发现重组蛋白质可以与精子胞膜结合;经放射自显影检测,发现0.1mg/ml重组蛋白质可以提高人精子中PKA的活性,对精子膜PKC活性无显著影响。

关键词：人睾丸精子结合蛋白精子功能蛋白激酶A 蛋白激酶C

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