检索结果-南通市图书馆

中国组织工程研究 2020年第7期24卷 1130-1137页

作者：任春梅刘玉芳许诺邵苗苗何建亚李晓杰大连医科大学口腔医学院辽宁省大连市116044 大连医科大学中山学院辽宁省大连市116000

背景:人牙髓干细胞是一种重要的口腔间充质干细胞,具有很强增殖和多向分化能力。随着人类基因组计划的不断深入,人们逐渐意识到功能性非编码RNAs在调节基因表达方面有着至关重要的作用。目的:对非编码RNAs在人牙髓干细胞中的研究进展进... 详细信息

背景:人牙髓干细胞是一种重要的口腔间充质干细胞,具有很强增殖和多向分化能力。随着人类基因组计划的不断深入,人们逐渐意识到功能性非编码RNAs在调节基因表达方面有着至关重要的作用。目的:对非编码RNAs在人牙髓干细胞中的研究进展进行论述。方法:由第一作者以“ncRNAs,human dental pulp stem cell,regenerative medicine”为英文关键词,以“长链非编码RNAs,人牙髓干细胞,再生医学”为中文关键词,检索2005至2019年期间收录在PubMed、Medline、中国知网、万方等数据库中的文献,排除与文章研究目的无关及重复性的文献,纳入符合标准的71篇文献进行综述。结果与结论:目前普遍认为,非编码RNAs可以作为特定细胞状态的信号,为临床提供预后价值,甚至为患者提供治疗选择。随着再生医学应用的不断发展,人牙髓干细胞将越来越受到关注,研究非编码RNAs与人牙髓干细胞的关系,将为人牙髓干细胞的临床应用研究寻觅了一条新的途径。

关键词：非编码RNAs 人牙髓干细胞组织再生人类基因组计划转录 microRNAs lncRNAs PIWI蛋白

金属蛋白酶解离素28对人牙髓干细胞生物学功能的影响

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上海口腔医学 2010年第3期19卷 262-269页

作者：赵征刘洪臣鄂玲玲王懿王东胜解放军总医院口腔医学研究所北京100853 解放军第401医院口腔科山东青岛266071

目的:探讨金属蛋白酶解离素28(ADAM28)基因对人牙髓干细胞(HDPSCs)增殖、分化、凋亡特性的影响和可能的作用机制。方法:体外分离培养、鉴定人牙髓干细胞(HDPSCs),应用基因重组构建ADAM28真核表达质粒并转染HDPSCs,应用四唑盐(MTT)比色... 详细信息

目的:探讨金属蛋白酶解离素28(ADAM28)基因对人牙髓干细胞(HDPSCs)增殖、分化、凋亡特性的影响和可能的作用机制。方法:体外分离培养、鉴定人牙髓干细胞(HDPSCs),应用基因重组构建ADAM28真核表达质粒并转染HDPSCs,应用四唑盐(MTT)比色法、酶动力学法和流式细胞术(FCM)检测ADAM28对HDPSCs生物学特性的影响。应用免疫细胞化学和图像分析技术检测ADAM28对HDPSCs表达牙本质涎磷蛋白(DSPP)、骨涎蛋白(BSP)、骨桥蛋白(OPN)的影响。采用SPSS13.0软件包的SNK检验进行统计学分析。结果:成功构建并转染ADAM28真核质粒,真核质粒转染组HDPSCs的增殖活性、增殖指数显著低于空载体组和未转染组,碱性磷酸酶(ALP)分泌水平及凋亡细胞百分比明显上升,差异显著(P<0.05);HDPSCs内DSPP的表达水平显著提高(P<0.05)。结论:ADAM28可显著抑制HDPSCs增殖,促进ALP的分泌活性和HDPSCs内DSPP的表达,显著诱导HDPSCs的凋亡。

关键词：金属蛋白酶解离素28 人牙髓干细胞增殖分化凋亡

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成体人牙髓干细胞的分离与鉴定

中华口腔医学杂志 2005年第3期40卷 244-247页

作者：杨雪超樊明文武汉大学口腔医学院口腔生物医学工程教育部重点实验室 430079

目的从成体人牙髓组织中分离培养牙髓干细胞,初步探讨其分化潜能。方法选取年轻患者因正畸或阻生拔除的健康第三磨牙,取出牙髓,采用酶消化及过滤法得到单细胞悬液,有限稀释法原代培养。扩大培养细胞克隆,检测STRO1的表达。体外诱导分化... 详细信息

目的从成体人牙髓组织中分离培养牙髓干细胞,初步探讨其分化潜能。方法选取年轻患者因正畸或阻生拔除的健康第三磨牙,取出牙髓,采用酶消化及过滤法得到单细胞悬液,有限稀释法原代培养。扩大培养细胞克隆,检测STRO1的表达。体外诱导分化后对各克隆从碱性磷酸酶(ALP)活性、矿化结节形成、牙本质涎蛋白(DSP)表达、OilRedO染色、PPARr2基因表达等方面进行检测。结果克隆来源细胞STRO1表达阳性。在矿化液诱导下,克隆细胞呈现明显高的ALP活性;能够形成矿化结节;可以分泌表达DSP,已向成牙本质细胞方向发生了分化。成脂肪诱导后,OilRedO染色阳性,可检测到PPARr2基因表达。结论从成体人牙髓组织中可以分离培养出干细胞,在体外能有效增殖并保持低分化状态。

关键词：人牙髓干细胞分离与鉴定成体人牙髓组织体外诱导分化牙本质涎蛋白成牙本质细胞分离培养基因表达单细胞悬液有限稀释法碱性磷酸酶 ALP活性分化潜能初步探讨第三磨牙年轻患者原代培养细胞克隆扩大培养

脂肪干细胞外泌体对人牙髓干细胞增殖与成骨分化的影响

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中国临床药理学杂志 2021年第21期37卷 2910-2913页

作者：李婧张发奎邓智元常群安青海大学附属医院口腔颌面外科青海西宁810001 青海大学附属医院口腔内科青海西宁810001 中南大学湘雅口腔医院口腔颌面外科湖南长沙410000

目的观察人脂肪间充质干细胞来源外泌体对人牙髓干细胞增殖与成骨分化的影响。方法制备人脂肪来源的间充质干细胞和外泌体。将人牙髓干细胞随机分为3组,正常组进行常规培养,对照组进行成骨诱导分化,实验组在成骨诱导分化时添加5μg·mL^... 详细信息

目的观察人脂肪间充质干细胞来源外泌体对人牙髓干细胞增殖与成骨分化的影响。方法制备人脂肪来源的间充质干细胞和外泌体。将人牙髓干细胞随机分为3组,正常组进行常规培养,对照组进行成骨诱导分化,实验组在成骨诱导分化时添加5μg·mL^(-1)外泌体。用CCK-8法检测细胞增殖活性,用酶联免疫吸附实验法检测碱性磷酸酶活性,用Western blot法检测骨钙素和骨桥蛋白的表达情况。结果实验组、对照组和正常组的细胞相对增殖活性(光密度值)分别为0.54±0.02,0.34±0.01和0.32±0.01,碱性磷酸酶相对活性(光密度值)分别为10.37±1.26,4.89±0.94和0.71±0.03,骨钙素蛋白相对表达量分别为0.59±0.10,0.23±0.05和0,骨桥蛋白相对表达量分别为0.63±0.12,0.61±0.04和0,实验组的上述指标与对照组和正常组比较,差异均有统计学意义(均P人脂肪间充质干细胞来源的外泌体可促进人牙髓干细胞的增殖和成骨分化。

关键词：人牙髓干细胞人脂肪间充质干细胞成骨分化

构建siRNA慢病毒载体调控人牙髓干细胞Delta1表达的实验研究

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第三军医大学学报 2010年第1期32卷 30-32页

作者：王雪飞张纲裘松波何飞谭颖徽汪蕾吴小波第三军医大学新桥医院口腔科重庆400037

目的构建Notch配体Delta1基因慢病毒干扰载体及建立Delta1基因稳定干扰的人牙髓干细胞系。方法将Delta1基因特异性siRNA靶序列与双酶切慢病毒载体pGCSIL-GFP连接,转化,挑取阳性克隆进行PCR鉴定;利用包装细胞293T获得重组的慢病毒,感染... 详细信息

目的构建Notch配体Delta1基因慢病毒干扰载体及建立Delta1基因稳定干扰的人牙髓干细胞系。方法将Delta1基因特异性siRNA靶序列与双酶切慢病毒载体pGCSIL-GFP连接,转化,挑取阳性克隆进行PCR鉴定;利用包装细胞293T获得重组的慢病毒,感染人牙髓干细胞,分为DPSCs/Delta1-RNAi组、DPSCs/vector组和DPSCs/wt组;RT-PCR和Western blot分别检测Delta1 mRNA及蛋白的表达。结果经PCR和DNA测序鉴定,成功构建Delta1特异性siRNA的慢病毒载体,并感染牙髓干细胞;经检测DPSCs/Delta1-RNAi组Delta1 mRNA及蛋白表达较DPSCs/vector组和DPSCs/wt组明显降低,DPSCs/vector组和DPSCs/wt组之间无明显差异。结论通过成功构建的Delta1特异性siRNA慢病毒载体对人牙髓干细胞的转染实现了对其Delta1 mRNA和蛋白的调控。

关键词： Delta1 Notch信号通路 RNA干扰慢病毒人牙髓干细胞

EMPs作用下DSP、DMP-1在人牙髓干细胞中的表达

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中国老年学杂志 2012年第6期32卷 1220-1222页

作者：崔玲玲张辉周晓平辽宁医学院附属第一医院口腔科辽宁锦州121001

目的应用釉基质蛋白(EMPs)作用于人牙髓干细胞(hDPSC),测定牙本质涎蛋白(DSP)、牙本质基质蛋白1(DMP-1)表达,探讨EMPs对人牙髓干细胞的作用。方法将浓度为200μg/ml的EMPs加入培养中的人牙髓干细胞中,分别于3、5、7、9、11 d对细胞进行... 详细信息

目的应用釉基质蛋白(EMPs)作用于人牙髓干细胞(hDPSC),测定牙本质涎蛋白(DSP)、牙本质基质蛋白1(DMP-1)表达,探讨EMPs对人牙髓干细胞的作用。方法将浓度为200μg/ml的EMPs加入培养中的人牙髓干细胞中,分别于3、5、7、9、11 d对细胞进行免疫组化染色,检测细胞爬片DSP、DMP-1表达。结果未经EMPs诱导的人牙髓干细胞DSP少量细胞阳性表达,DMP-1表达阴性,经200μg/ml的EMPs诱导5 d后,人牙髓干细胞DSP、DMP-1染色呈阳性表达。结论 EMPs对人牙髓干细胞具有诱导分化作用,为探讨影响人牙髓干细胞分化的因素提供了参考依据。

关键词：釉基质蛋白人牙髓干细胞牙本质涎蛋白(DSP) 牙本质基质蛋白1(DMP-1)

脂多糖调控Notch信号通路作用于人牙髓干细胞增殖、分化、凋亡的实验研究

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中国免疫学杂志 2017年第10期33卷 1483-1486,1497页

作者：项海东李浩渤陈惠珍河北医科大学第二医院口腔内科石家庄050000

目的:探讨脂多糖调控Notch信号通路对人牙髓干细胞增殖、分化、凋亡的影响及机制。方法:从牙髓组织中分离出人牙髓干细胞(h DPSCs),CCK8实验检测0、0.1、1、10μg/ml的脂多糖处理h DPSCs 1、3、5、7 d后细胞的增殖情况;RTPCR检测1μg/m... 详细信息

目的:探讨脂多糖调控Notch信号通路对人牙髓干细胞增殖、分化、凋亡的影响及机制。方法:从牙髓组织中分离出人牙髓干细胞(h DPSCs),CCK8实验检测0、0.1、1、10μg/ml的脂多糖处理h DPSCs 1、3、5、7 d后细胞的增殖情况;RTPCR检测1μg/ml的脂多糖处理h DPSCs 0、3、7、14、21 d后矿化相关基因ALP、DSPP、DMP1的mRNA表达情况;流式细胞仪检测1μg/ml的脂多糖处理h DPSCs 0、7、14、21 d后的细胞凋亡情况;Western blot检测Cleaved caspase3、Notch1、Hes1的蛋白表达。结果:不同浓度的脂多糖刺激h DPSCs 1、3、5 d后细胞的增殖均无显著差异,培养至第7天时,0.1、1、10μg/ml的脂多糖组细胞的增殖均显著低于0μg/ml的脂多糖组(P0.05),7、14、21 d时ALP、DSPP、DMP1的mRNA表达均显著高于对照组(P细胞的凋亡率及Cleaved caspase3、Notch1、Hes1蛋白表达均显著高于对照组(P细胞凋亡率和Cleaved caspase3、Notch1、Hes1蛋白表达均有下降趋势。结论:脂多糖可降低h DPSCs的增殖,促进其矿化和凋亡,其机制与激活Notch信号通路有关。

关键词：脂多糖 Notch信号通路人牙髓干细胞增殖分化凋亡

RA和bFGF体外诱导人牙髓干细胞向神经细胞分化的研究

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实用口腔医学杂志 2011年第5期27卷 676-681页

作者：张智慧胡伟平郭阳曹潇方哈尔滨医科大学附属第二医院口腔修复科 150086

目的:探讨全反式维甲酸(all-trans-retinoic acid,RA)、碱性成纤维生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)体外诱导人牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs)分化为神经细胞的可行性。方法:体外分离培养DPSCs并进行克隆化,检测STRO-1的表达。将DPSCs分别接种于含有不同浓度RA、bFGF或二者结合的诱导液,MTT法检测细胞增殖能力,免疫荧光法检测微管相关蛋白(microtubule-associated protein-2,MAP-2)、神经元烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)、胶质原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acid protein,GFAP)的表达。透射电镜观察诱导前后细胞超微结构。结果:克隆来源细胞的STRO-1表达阳性。0.5μg/ml RA或20 ng/ml bFGF单独应用促增殖作用最强(P细胞。RA作用各组检测到阳性细胞。而0.5μg/ml RA与20 ng/ml bFGF联合应用的增殖和分化效应均优于其它组。透射电镜观察到幼稚神经元样细胞。结论:RA和bFGF联合应用可在体外有效诱导人DPSCs转化为神经细胞。

关键词：人牙髓干细胞全反式维甲酸成纤维生长因子-2 分化

基于MAPK信号通路Nell-1蛋白对人牙髓干细胞神经向诱导分化的作用

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实用口腔医学杂志 2021年第5期37卷 691-695页

作者：闫雪萍吴杉杉王利婷史璐北京瑞程医院管理有限公司瑞泰口腔医院分公司综合科 100070 河南洛阳市嵩县人民医院口腔科河南省口腔医院牙体牙髓科

目的:研究Nell-1蛋白基于MAPK信号通路对人牙髓干细胞(hDPSCs)神经向诱导分化的调控作用及机制。方法:体外分离培养及鉴定hDPSCs,神经向诱导分化。免疫荧光检测hDPSCs表面神经标志物β-tubulin-II、GFAP表达;Western blot检测hDPSCs诱... 详细信息

目的:研究Nell-1蛋白基于MAPK信号通路对人牙髓干细胞(hDPSCs)神经向诱导分化的调控作用及机制。方法:体外分离培养及鉴定hDPSCs,神经向诱导分化。免疫荧光检测hDPSCs表面神经标志物β-tubulin-II、GFAP表达;Western blot检测hDPSCs诱导分化后p38MAPK、cREB-1、p-p38MAPK、p-cREB-1蛋白表达。结果:分离培养的hDPSCs外形均匀,流式细胞术测得hDPSCs CD105、CD90表达阳性,CD34、CD45表达阴性。hDPSCs经神经诱导后可见成神经元样生长。免疫荧光检测显示,Nell-1干预后的hDPSCs中β-tubulin-III、GFAP相对荧光强度值更高(P<0.001)。Western blot法结果显示Nell-1干预后hDPSCs的p-p38MAPK/p38MAPK、p-cREB-1/cREB-1蛋白表达更高(P<0.001)。结论:Nell-1蛋白可促进hDPSCs神经向分化,其机制与MAPK信号通路中p38MAPK、cREB-1蛋白磷酸化激活有关。

关键词：人牙髓干细胞神经向分化尼尔样-1型分子丝裂原活化蛋白激酶信号通路