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人牙周膜细胞在弹性牵张力作用下核心结合因子的表达

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第四军医大学学报 2003年第9期24卷 779-781页

作者：张云飞段银钟刘鑫王宁冯雪第四军医大学口腔医学院正畸科陕西西安710033

目的 :探讨人牙周膜细胞在张应力作用下的成骨特性和核心结合因子 (core bindingfactorα1,cbfa1)在正畸成骨中的作用机制 .方法 :人牙周膜细胞体外原代培养 ,弹性膜及体外培养细胞加载系统加载弹性牵张力 ,免疫组化方法检测cbfa1多克... 详细信息

目的 :探讨人牙周膜细胞在张应力作用下的成骨特性和核心结合因子 (core bindingfactorα1,cbfa1)在正畸成骨中的作用机制 .方法 :人牙周膜细胞体外原代培养 ,弹性膜及体外培养细胞加载系统加载弹性牵张力 ,免疫组化方法检测cbfa1多克隆抗体在人牙周膜细胞的表达 .结果 :未加力的正常人牙周膜细胞cbfa1抗体检测为阴性 ,弹性牵张力作用下人牙周膜细胞有cbfa1阳性表达 .结论 :弹性牵张力可以诱导人牙周膜细胞向成骨样细胞分化 ;cbfa1可能是正畸成骨的调控途径之一 .

关键词：人牙周膜细胞核心结合因子应力正畸学

富血小板纤维蛋白对人牙周膜细胞成骨能力、炎症因子表达和Wnt/β-catenin信号通路的影响

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现代生物医学进展 2022年第6期22卷 1180-1185,1097页

作者：何杨肖帅李逦曾婷艳唐俊长沙市第三医院(湖南中医药大学附属长沙医院)口腔科湖南长沙410035

目的:探究富血小板纤维蛋白(PRF)对人牙周膜细胞(hPDLCs)成骨能力、炎症因子表达和Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)信号通路的影响。方法:通过刮取法、组织块法获取2019年1月至2020年1月期间我院口腔科收治的10例正畸患者拔除健康阻生... 详细信息

目的:探究富血小板纤维蛋白(PRF)对人牙周膜细胞(hPDLCs)成骨能力、炎症因子表达和Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)信号通路的影响。方法:通过刮取法、组织块法获取2019年1月至2020年1月期间我院口腔科收治的10例正畸患者拔除健康阻生牙或正畸牙的牙周组织作为研究样本。将hPDLCs细胞分为干预1组、干预2组、对照组、肿瘤细胞坏死因子-α(TNF-α)组,各组均采用含有10% FBSDMEM培养基培养,TNF-α组加用10ng/mL TNF-α诱导液,干预1组加用50%PRF培养,干预2组加用10 ng/mL TNF-α诱导液和50% PRF。对比各组的细胞增殖、碱性磷酸酶(ALP)活性、炎症因子、Wnt/β-catenin信号通路关键因子的表达差异。结果:(1)相比于其他3组,干预1组的吸光度值(OD)明显升高,相比于TNF-α组,干预2组、对照组的OD值均明显升高(P细胞周期蛋白D1(CyclinD1)mRNA、β-catenin mRNA表达水平明显升高,相比于TNF-α组,干预2组、对照组的CyclinD1 mRNA、β-catenin mRNA表达水平均明显升高(P细胞增殖和成骨,并减少炎症因子表达,提升ALP活性,其可能是通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进CyclinD1、β-catenin mRNA表达加快hPDLCs细胞成骨。

关键词：富血小板纤维蛋白人牙周膜细胞成骨能力炎症因子 Wnt/β-catenin信号通路

人牙周膜细胞与BIO-OSS胶原体外三维复合体的构建

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实用口腔医学杂志 2006年第3期22卷 412-413页

作者：韩劼孟焕新唐军民张凤秋唐岩李盛林北京大学口腔医学院牙周科 100081 北京大学医学部组织胚胎系北京大学口腔医学院口腔颌面外科实验室

牙周炎治疗成功的关键在于促使被炎症破坏的牙周支持组织再生。传统的治疗方法只能部修复破坏的组织，而利用组织工程技术有望解决这一难题。

关键词：人牙周膜细胞 BIO-OSS 复合体三维体外胶原组织工程技术组织再生治疗方法牙周炎

动态牵张应变对人牙周膜细胞的细胞骨架的影响

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上海交通大学学报（医学版） 2012年第1期32卷 42-47页

作者：马佳音胥春郝轶张富强上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔修复科上海市口腔医学重点实验室上海200011

目的研究动态牵张应变下人牙周膜细胞(HPDLCs)细胞骨架的变化。方法体外培养HPDLCs,利用动态牵张应变细胞加载装置对HPDLCs分别加载1%、10%和20%的牵张应变,每种应变分别加载7个时间段(0.5、1、2、4、6、12、24 h),应用激光共聚焦显微... 详细信息

目的研究动态牵张应变下人牙周膜细胞(HPDLCs)细胞骨架的变化。方法体外培养HPDLCs,利用动态牵张应变细胞加载装置对HPDLCs分别加载1%、10%和20%的牵张应变,每种应变分别加载7个时间段(0.5、1、2、4、6、12、24 h),应用激光共聚焦显微镜观察HPDLCs细胞骨架的形态结构;收集图像并运用Image-Pro Plus 4.***.0.29软件进行分析,测定HPDLCs的面积、长度与宽度比(长宽比)以及细胞骨架蛋白F-actin的积分荧光强度。结果激光共聚焦显微镜观察发现:随着加载牵张应变的作用时间延长和应变值提高,HPDLCs细胞逐渐呈现栅栏状相互平行排列趋势,且排列方向垂直于牵张力方向,胞体被拉长。图像分析结果显示:加载动态牵张应变后,HPDLCs的细胞面积、长宽比及F-actin的表达量均发生相应的变化。结论动态牵张应变可引起HPDLCs细胞骨架的变化,并且与施加应变的大小和应变作用时间有关。

关键词：牵张应变人牙周膜细胞细胞骨架

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虾青素抑制脂多糖诱导人牙周膜细胞炎症反应

中南大学学报（医学版） 2021年第3期46卷 227-233页

作者：谢丛蔓林敏田浩楠张林任嫒姝重庆医科大学附属口腔医院正畸科重庆401147 口腔疾病与生物医学重庆市重点实验室重庆401147 重庆市高校市级口腔生物医学工程重点实验室重庆401147

目的:人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,hPDLCs)是牙周组织重建的重要来源。在慢性炎症时,hPDLCs的多向分化潜能及趋化能力降低。因此,抑制炎症微环境,提高干细胞的功能特性,能更好地促进牙周组织重建。本研究探讨虾青素(... 详细信息

目的:人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,hPDLCs)是牙周组织重建的重要来源。在慢性炎症时,hPDLCs的多向分化潜能及趋化能力降低。因此,抑制炎症微环境,提高干细胞的功能特性,能更好地促进牙周组织重建。本研究探讨虾青素(astaxanthin,AST)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的hPDLCs炎症因子分泌的作用及其机制。方法:在体外分离、培养hPDLCs,采用免疫化学细胞染色法行波形蛋白和角蛋白染色以鉴定hPDLCs。采用CCK-8法检测1、5、10、20、50、100、200μmol/L AST对hPDLCs增殖的影响,定量RT-PCR(RTqPCR)和ELISA法检测对照(Con)组、LPS组、LPS+AST(5、10、20、50μmol/L)组炎症因子IL-6、IL-1β及TNF-αmRNA和蛋白质的表达,蛋白质印迹法检测Con组、LPS组、AST(20μmol/L)组、LPS+AST(20μmol/L)组IKBα、磷酸化的IKBα(p-IKBα)和p65蛋白质的表达。经NF-κB抑制剂PDTC(10μmol/L)处理后,采用RT-qPCR和ELISA法检测IL-6、IL-1β及TNF-αmRNA和蛋白质的表达。结果:细胞形态及免疫化学细胞染色结果表明培养的细胞符合hPDLCs特性。AST能够促进hPDLCs的增殖,且在20μmol/L时达到峰值。LPS组细胞IL-6、IL-1β及TNF-α的mRNA和蛋白质表达水平均高于Con组(均P细胞IL-6、IL-1β及TNF-α的mRNA和蛋白质的表达水平均低于LPS组(均P细胞质中IKBα和p65水平显著下调(均P细胞质中p-IKBα和细胞核中p65水平显著上调(均P细胞质中IKBα和p65水平显著上调(均P细胞质中p-IKBα和细胞核中p65水平显著下调(均P<0.05)。LPS+PDTC(10μmol/L)组IL-6、IL-1β及TNF-α的mRNA和蛋白质的表达水平均低于LPS组(均P<0.05)。结论:AST能促进hPDLCs增殖,可能与通过NF-κB信号通路抑制LPS介导的炎症因子分泌有关。

关键词：人牙周膜细胞虾青素脂多糖炎症因子

牵张应力对人牙周膜细胞MMP-13/TIMP-1表达的影响及其信号转导途径研究

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医用生物力学 2010年第6期25卷 422-427页

作者：李永明唐林张晓东丁寅第四军医大学口腔医学院正畸科西安710032

目的研究不同强度机械牵张应力对人牙周膜细胞基质金属蛋白酶-13(MMP-13)及其组织抑制因子-1(TIMP-1)表达的影响,并探讨机械牵张应力作用下人牙周膜细胞MMP-13/TIMP-1表达变化的信号转导途径。方法通过细胞牵张应力加载系统对体外培养... 详细信息

目的研究不同强度机械牵张应力对人牙周膜细胞基质金属蛋白酶-13(MMP-13)及其组织抑制因子-1(TIMP-1)表达的影响,并探讨机械牵张应力作用下人牙周膜细胞MMP-13/TIMP-1表达变化的信号转导途径。方法通过细胞牵张应力加载系统对体外培养的人牙周膜细胞同时施加0%、6%、12%和18%形变率的机械牵张应力,作用24 h后,用RT-PCR方法检测细胞受力后MMP-13/TIMP-1 mRNA表达的变化,用免疫印迹法检测其蛋白表达的变化。另外,通过使用不同信号途径的特异性抑制剂,用RT-PCR方法分别检测不同抑制剂对牵张应力作用下牙周膜细胞MMP-13/TIMP-1 mRNA表达的变化。结果人牙周膜细胞受力后,MMP-13/TIMP-1 mRNA及蛋白表达随牵张应力强度的增大明显增加。PD098059可抑制机械牵张应力作用下牙周膜细胞MMP-13 mRNA表达的增加。放线菌酮可抑制机械牵张应力作用下TIMP-1 mRNA表达的增加。结论不同强度机械牵张应力可以影响人牙周膜细胞MMP-13/TIMP-1的表达,进而影响牙周组织细胞外基质代谢。机械牵张应力作用下MMP-13表达的增加是通过ERK-MAPK途径。机械牵张应力作用下TIMP-1表达的增加是通过新生蛋白途径。

关键词：机械牵张应力人牙周膜细胞信号转导蛋白细胞培养

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丹酚酸B对人牙周膜细胞成骨分化的影响

华西口腔医学杂志 2016年第5期34卷 468-473页

作者：马玥任嫒姝付钢重庆医科大学附属口腔医院正畸科口腔疾病与生物医学重庆市重点实验室重庆市高校市级口腔生物医学工程重点实验室重庆401147

目的探讨中药丹参主要活性成分丹酚酸B(Sal B)对人牙周膜细胞(h PDLCs)成骨分化的影响。方法取第3代h PDLCs进行实验,运用甲基噻唑基四唑(MTT)法检测不同浓度丹酚酸B对h PDLCs增殖活性影响,通过检测碱性磷酸酶(ALP)活性、矿化结节染色... 详细信息

目的探讨中药丹参主要活性成分丹酚酸B(Sal B)对人牙周膜细胞(h PDLCs)成骨分化的影响。方法取第3代h PDLCs进行实验,运用甲基噻唑基四唑(MTT)法检测不同浓度丹酚酸B对h PDLCs增殖活性影响,通过检测碱性磷酸酶(ALP)活性、矿化结节染色、骨钙素(OCN)m RNA表达来探讨丹酚酸B对h PDLCs成骨分化的影响。结果丹酚酸B对h PDLCs增殖活性无影响。当丹酚酸B浓度为0.5、1、5μmol·L-1时均能增加h PDLCs的ALP活性和OCN m RNA表达,与OIM组比较差异有统计学意义(P<0.05);且当丹酚酸B浓度为0.5、1、5μmol·L-1时h PDLCs形成矿化结节数量明显高于OIM组。结论适宜浓度的丹酚酸B能有效促进h PDLCs成骨分化。

关键词：丹酚酸B 人牙周膜细胞成骨分化碱性磷酸酶活性矿化结节

牵张应变诱导人牙周膜细胞凋亡过程中caspase蛋白酶表达的初步研究

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医用生物力学 2017年第2期32卷 181-187页

作者：吴雅琴赵丹庄嘉宝胥春上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔修复科上海200011 上海市口腔医学研究所上海市口腔医学重点实验室上海200011

目的研究在牵张应变诱导人牙周膜细胞凋亡过程中caspase蛋白酶表达的变化。方法对体外培养的人牙周膜细胞分别施加20%牵张应变6、24 h,采用流式细胞术测定细胞凋亡率,采用免疫印迹技术检测caspase-3、-5、-7、-8、-9的蛋白表达,并采用... 详细信息

目的研究在牵张应变诱导人牙周膜细胞凋亡过程中caspase蛋白酶表达的变化。方法对体外培养的人牙周膜细胞分别施加20%牵张应变6、24 h,采用流式细胞术测定细胞凋亡率,采用免疫印迹技术检测caspase-3、-5、-7、-8、-9的蛋白表达,并采用分光光度比色法测定caspase-3、-5、-8、-9的蛋白酶活性变化。结果 20%牵张应变加载6、24 h可诱导人牙周膜细胞发生凋亡。caspase-3的蛋白表达及蛋白酶活性和caspase-7的蛋白表达在24 h牵张应变作用下较对照组增加,caspase-5、-8、-9的蛋白表达及蛋白酶活性在6、24 h牵张应变作用下较对照组增加。结论 20%牵张应变能诱导体外培养的人牙周膜细胞凋亡,此过程中伴随发生了caspase-3、-5、-7、-8、-9蛋白酶的活化。

关键词：人牙周膜细胞牵张细胞凋亡 caspase蛋白酶

骨化三醇对人牙周膜细胞维生素D受体、RANKL和骨保护因子表达的调节

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中华口腔医学杂志 2008年第12期43卷 732-736页

作者：唐晓琳孟焕新张立北京大学口腔医学院·口腔医院牙周科 100081 中国医科大学口腔医学院牙周科沈阳110002

目的探讨骨化三醇（又称1α，25-二羟维生素D3，以下简称VD3）对人牙周膜细胞（human periodontal ligament cells，hPDLC）维生素D受体（vitamin D receptor，VDR）、核因子KB受体活化因子配体（receptor activator of nuclear factor—kappa B ligand，RANKL）和骨保护因子（osteoprotegerin，OPG）表达的调节作用及相关机制。方法原代培养12个供体来源的hPDLC群，传代培养至第3代，分别以10～moL／LVD，（VD，组）和0．1％无水乙醇处理（对照组），6d后用实时荧光定量反转录聚合酶链反应（RT—PCR）法检测VDR、RANKL和OPGmRNA的表达水平。分析12个细胞群RANKL基因转录起始位点上游调控区DNA碱基序列。结果VD，组与对照组相比，VDRmRNA表达水平显著上调（P=0．003），为对照组的（3．04±1．06）倍；RANKLmRNA表达水平显著升高（P=0．001），为对照组的9．82（0．75～119．18）倍；OPGmRNA表达水平为对照组的（94．48±39．15）％，P=0．136；OPG／RANKL比值显著下调（P=0．003），为对照组的10．36％（1．01％-138．00％）。未发现RANKL基因上游调控区序列突变位点；-1832（rs7984870，C／G）多态性位点基因型与RANKLmRNA的表达和调节之间无显著相关性。结论在hPDLC中，VD，可以促进VDRmRNA的表达；VD3可显著上调RANKLmRNA的表达从而降低OPG／RANKL比值，而对OPGmRNA的表达水平影响较小。在VD3作用下，细胞群间RANKLmRNA表达的差异性可能与RANKL基因上游调控区碱基序列无关。

关键词：骨化三醇核因子KB受体活化因子骨保护素人牙周膜细胞