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周期性张应力对人牙周膜细胞生物学活性的影响

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中华老年口腔医学杂志 2012年第2期10卷 68-71页

作者：刘加强刘洪臣房兵李晋上海交通大学医学院附属第九人民医院正颌正畸科主治医师上海200011 解放军总医院口腔医学研究所主任主任医师教授北京100853 武警总医院临床教研室住院医师北京100039

目的:探讨周期性张应力对体外培养的人牙周膜细胞生物活性的影响。方法:对体外培养的人牙周膜细胞施加不同大小的周期性牵张力(6%、12%、20%细胞表面拉伸率),24h后检测其对细胞的总蛋白合成、ALP活性、Col-Ⅰ和OCN分泌的影响。实验结果... 详细信息

目的:探讨周期性张应力对体外培养的人牙周膜细胞生物活性的影响。方法:对体外培养的人牙周膜细胞施加不同大小的周期性牵张力(6%、12%、20%细胞表面拉伸率),24h后检测其对细胞的总蛋白合成、ALP活性、Col-Ⅰ和OCN分泌的影响。实验结果用SPSS 13.0进行统计分析。结果:较小的牵张力对人牙周膜细胞生物活性无显著影响,随力值的增大,牵张力能够呈强度依赖性抑制人牙周膜细胞的活性,减少总蛋白合成及ALP活性,抑制Col-Ⅰ及OCN的分泌。结论:周期性张应力可以抑制人牙周膜细胞的生物学活性,并呈强度依赖性。

关键词：周期性张应力人牙周膜细胞生物学活性

酒精对人牙周膜细胞RANKL/OPG基因表达的影响

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全科口腔医学电子杂志 2018年第18期5卷 10-11,18页

作者：刘贺钱君荣马海峰耿海霞济宁医学院附属医院口腔科山东济宁272029

目的研究酒精对人牙周膜细胞RANKL和OPG表达的影响。方法酶消化法结合组织块法分离培养人牙周膜细胞,取4-6代细胞,在0.05 mol/L、0.10 mol/L、0.20 mol/L等不同浓度酒精环境下培养6、12、24、48h,RT-PCR检测RANKL、OPG m RNA的表达。采... 详细信息

目的研究酒精对人牙周膜细胞RANKL和OPG表达的影响。方法酶消化法结合组织块法分离培养人牙周膜细胞,取4-6代细胞,在0.05 mol/L、0.10 mol/L、0.20 mol/L等不同浓度酒精环境下培养6、12、24、48h,RT-PCR检测RANKL、OPG m RNA的表达。采用SPSS 18.0软件包,对数据进行单因素方差分析。结果 0.05 mol/L、0.10 mol/L、0.20 mol/L浓度实验组RANKL m RNA表达量均高于对照组,具有统计学差异(P人牙周膜细胞中RANKL和OPG m RNA表达,在牙周炎骨吸收中起促进作用。

关键词：酒精人牙周膜细胞 κb受体激活物配基骨保护素

淫羊藿苷抑制牙龈卟啉单胞菌超声提取物对人牙周膜细胞增殖及骨保护素表达的影响

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北京口腔医学 2013年第5期21卷 261-264页

作者：丁茜张凤秋首都医科大学口腔医学院牙周科北京100050

目的探讨不同浓度淫羊藿苷抑制牙龈卟啉单胞菌超声提取物对人牙周膜细胞增殖及骨保护素（OPG）表达的影响.方法体外培养人牙周膜细胞,用四唑盐（MTT）法检测不同浓度淫羊藿苷（0、0.001、0.01、0.1、1 μg/ml）及50μg/ml牙龈卟啉单... 详细信息

目的探讨不同浓度淫羊藿苷抑制牙龈卟啉单胞菌超声提取物对人牙周膜细胞增殖及骨保护素（OPG）表达的影响.方法体外培养人牙周膜细胞,用四唑盐（MTT）法检测不同浓度淫羊藿苷（0、0.001、0.01、0.1、1 μg/ml）及50μg/ml牙龈卟啉单胞菌超声提取物,不同时间（24、48、72h）作用下人牙周膜细胞的增殖水平.用RT-PCR及Western blot检测48h人牙周膜细胞骨保护素mRNA和蛋白的表达.结果淫羊藿苷从0.01～1μg/ml对人牙周膜细胞增殖及骨保护素mRNA和蛋白的表达有促进作用（P＜0.01）,浓度为0.1μg/ml作用最显著.结论淫羊藿苷可抑制牙龈卟啉单胞菌超声提取物对人牙周膜细胞增殖及骨保护素mRNA和蛋白表达的影响,促进人牙周膜细胞增殖及骨保护素mRNA和蛋白表达.

关键词：淫羊藿苷牙龈卟啉单胞菌超声提取物人牙周膜细胞骨保护素

水解罗非鱼胶原促进人牙周膜细胞活力及成骨分化的效应

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口腔材料器械杂志 2017年第2期26卷 74-78页

作者：刘超孙皎上海交通大学医学院附属第九人民医院.上海生物材料研究测试中心上海200023

目的探讨水解罗非鱼胶原促进人牙周膜细胞活力及成骨分化的作用。方法制备水解罗非鱼胶原,原代分离培养人牙周膜细胞(hPDL细胞),分别利用MTT试验和real-time PCR试验检测水解罗非鱼胶原对细胞活力和成骨分化相关基因ALP,COL Ⅰ,OCN和RU... 详细信息

目的探讨水解罗非鱼胶原促进人牙周膜细胞活力及成骨分化的作用。方法制备水解罗非鱼胶原,原代分离培养人牙周膜细胞(hPDL细胞),分别利用MTT试验和real-time PCR试验检测水解罗非鱼胶原对细胞活力和成骨分化相关基因ALP,COL Ⅰ,OCN和RUNX2的表达的影响,运用激光共聚焦显微镜观察成骨分化相关蛋白骨钙蛋白的表达,进一步采用western blot技术探讨水解罗非鱼胶原对整合素-ERK信号通路的作用。结果水解罗非鱼胶原能促进hPDL细胞的增殖,使ALP,COL I,OCN和RUNX2的基因上调,诱导骨钙蛋白的产生,这些生物效应与水解罗非鱼胶原可激活整合素-ERK信号通路有关。结论水解罗非鱼胶原具有骨诱导性,具有诱导hPDL细胞成骨分化的潜能。

关键词：水解罗非鱼胶原人牙周膜细胞细胞活力成骨分化整合素-ERK通路

牵张应变对人牙周膜细胞内磷脂酶C-γ1水平的影响

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临床口腔医学杂志 2012年第11期28卷 643-647页

作者：李隽胥春郝轶刘晓峰上海交通大学医学院附属第九人民医院.口腔医学院.上海市口腔医学重点实验室口腔修复科上海200011 上海交通大学医学院附属第九人民医院.口腔医学院.上海市口腔医学重点实验室牙周病科上海200011

目的:观察在机械牵张应变作用下,人牙周膜细胞(HPDLCs)内磷脂酶C-γ1(PLC-γ1)水平的变化。方法:通过原代和传代培养,获得性状稳定的HPDLCs,使用动态机械应变细胞加载仪对细胞进行1%、10%和20%动态牵张应变加载。加载于不同的时间段,通... 详细信息

目的:观察在机械牵张应变作用下,人牙周膜细胞(HPDLCs)内磷脂酶C-γ1(PLC-γ1)水平的变化。方法:通过原代和传代培养,获得性状稳定的HPDLCs,使用动态机械应变细胞加载仪对细胞进行1%、10%和20%动态牵张应变加载。加载于不同的时间段,通过流式细胞仪和激光扫描共聚焦显微镜对细胞进行PLC-γ1水平的检测。应用SPSS 13.0软件对数据进行方差分析。结果:使用流式细胞仪对细胞内PLC-γ1水平检测发现:加载初期,细胞内的PLC-γ1水平维持在较低水平,随着牵张应变加载时间的延长,牙周膜细胞内PLC-γ1水平逐渐升高。50 min时PLC-γ1水平达到了各个应变组的最高值(P<0.01)。随着加载时间的继续延长,60 min时各应变组的PLC-γ1水平都有所下降(P<0.01)。激光扫描共聚焦显微镜检测发现:对照组和动态加载组都有PLC-γ1的表达,但加载50 min组表达相对较强。结论:机械牵张应变可以引起HPDLCs内PLC-γ1水平的变化。

关键词：人牙周膜细胞磷脂酶C-γ1 机械牵张应变

淫羊藿苷对人牙周膜细胞增殖及内毒素作用下IL-6表达的影响

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现代口腔医学杂志 2015年第2期29卷 80-83页

作者：许丽丽陈秀英刘振华北京市中关村医院口腔科 100190

目的初步研究淫羊藿苷对人牙周膜细胞（human periodontal ligament cells,h PDLC）增殖以及在内毒素（Lipopolysaccharide,LPS）作用下淫羊藿苷对h PDLC白细胞介素6（IL-6）表达的影响。方法组织块法原代培养并鉴定h PDLC,采用MTT方法... 详细信息

目的初步研究淫羊藿苷对人牙周膜细胞（human periodontal ligament cells,h PDLC）增殖以及在内毒素（Lipopolysaccharide,LPS）作用下淫羊藿苷对h PDLC白细胞介素6（IL-6）表达的影响。方法组织块法原代培养并鉴定h PDLC,采用MTT方法检测淫羊藿苷（0、10-5、10-6、10-7、10-8、10-9、10-10mol/L）作用下h PDLC增殖的变化;利用PCR、ELISA方法检测淫羊藿苷对在LPS刺激下的人牙周膜细胞IL-6分泌的情况。结果一定浓度范围下（10-6-10-7mol/L）淫羊藿苷对h PDLC的增殖具有积极作用;在10μg/m L LPS作用下h PDLC的IL-6表达增多、活性增强,加入10-6mol/L淫羊藿苷处理后,对此加强效果有一定的抑制作用。结论在一定浓度范围作用下淫羊藿苷可促进h PDLC的增殖;同时,淫羊藿苷对LPS导致h PDLC的IL-6表达增强有一定的抑制作用。

关键词：淫羊藿苷人牙周膜细胞白细胞介素6

牙龈卟啉单胞菌脂多糖对人牙周膜细胞成骨分化能力的影响

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天津医科大学学报 2015年第4期21卷 299-303页

作者：薛栋蒋少云邓嘉胤董允允张蕊天津医科大学口腔医院牙周科天津医科大学口腔医学院天津300070

目的:观察牙龈卟啉单胞菌(P.g)脂多糖(LPS)对人牙周膜细胞(HPDLCs)成骨分化的影响,探索其作用机制。方法:I型胶原酶+组织块法获得HPDLCs后,分3组培养细胞:α-MEM培养(A组)、成骨诱导液培养(B组)和1μg/m L P.g LPS+成骨诱导培养(C组)。... 详细信息

目的:观察牙龈卟啉单胞菌(P.g)脂多糖(LPS)对人牙周膜细胞(HPDLCs)成骨分化的影响,探索其作用机制。方法:I型胶原酶+组织块法获得HPDLCs后,分3组培养细胞:α-MEM培养(A组)、成骨诱导液培养(B组)和1μg/m L P.g LPS+成骨诱导培养(C组)。MTT法检测3组HPDLCs的增殖能力;碱性磷酸酶染色、茜素红染色及其OD值分析,观察HPDLCs的成骨分化能力;采用实时定量PCR检测第3天、第7天以及第14天成骨相关基因的表达。结果:B组与C组细胞增殖无明显差异(P>0.05);B组和C组ALP染色及茜素红染色均为阳性,两者茜素红OD值与A组相比明显增高(P<0.05),但C组OD值明显低于B组(P<0.05);B组与C组中成骨相关基因的表达均较A组升高,但与B组相比,C组成骨相关基因水平下降(P<0.05)。结论:P.g LPS通过抑制成骨相关基因的表达,干扰HPDLCs的成骨分化能力,从而影响牙周组织在成骨方面的自我修复。

关键词：牙龈卟啉单胞菌脂多糖人牙周膜细胞牙周炎成骨分化

病理性周期性张应力诱导人牙周膜细胞凋亡的机制研究

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现代生物医学进展 2015年第22期15卷 4210-4213,4224页

作者：王莉汪廷乐孟冉唐天鸿宋萌潘劲松上海交通大学附属第一人民医院口腔科上海200080 上海市闵行区中心医院口腔科上海201100

目的:阐明病理性周期性张应力诱导人牙周膜细胞凋亡的分子机制。方法:人牙周膜细胞取自健康前磨牙,经过3?5代传代,细胞受到20%牵张力,时间为6 h或24 h,通过用膜联蛋白异硫氰酸荧光素(V-FITC)和碘化丙啶(PI)结合流式细胞仪检测细胞凋亡,... 详细信息

目的:阐明病理性周期性张应力诱导人牙周膜细胞凋亡的分子机制。方法:人牙周膜细胞取自健康前磨牙,经过3?5代传代,细胞受到20%牵张力,时间为6 h或24 h,通过用膜联蛋白异硫氰酸荧光素(V-FITC)和碘化丙啶(PI)结合流式细胞仪检测细胞凋亡,用Western Blot法研究caspase-3,cleaved caspase-3,116 kDa PARP-1和85 k Da PARP-1蛋白的表达变化。结果:人PDL细胞受到病理性周期性张应力时存在凋亡,并以一种时间依赖的方式增加。受到病理性周期性张应力后裂解的caspase-3和PARP蛋白随着时间增加,然而抑制caspase-3的活性却可以抑制细胞的凋亡,但并不能抑制由其他通路导致的凋亡。结论:病理性周期性张应力通过caspase-3/PARP途径诱导人牙周膜细胞的凋亡。

关键词：细胞凋亡人牙周膜细胞病理性周期性张应力 caspase-3 PARP

纤维蛋白粘合胶对人牙周膜细胞贴壁率的影响初探

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黑龙江医药科学 2011年第1期34卷 34-35页

作者：邵伟然杜强李春茹佳木斯大学口腔医学院急诊科黑龙江佳木斯154003 常州市红梅医院口腔科江苏常州213017

目的：通过检测PDLCs在FG表面的贴壁率,间接的了解FG的生物相容性及其对PDLCs贴壁作用,为牙周治疗的应用提供依据。方法：通过对PDLC的原代培养,取第4-8代细胞用于实验,设立阴性对照组、对照组（e-PTFE膜）和实验组（FG组）,分别对3组... 详细信息

目的：通过检测PDLCs在FG表面的贴壁率,间接的了解FG的生物相容性及其对PDLCs贴壁作用,为牙周治疗的应用提供依据。方法：通过对PDLC的原代培养,取第4-8代细胞用于实验,设立阴性对照组、对照组（e-PTFE膜）和实验组（FG组）,分别对3组进行细胞计数,记录下各时间段下的贴壁率。结果：FG组的PDLCs在4h就已达到最大贴壁率,而ePTFE膜组、阴性对照组则分别在10、12h才达到最大贴壁率。16~24h内,FG组的贴壁率均显著高于其它2组（P〈0.01）。结论：实验结果显示,FG是一种生物相容性良好、安全可靠的组织粘合剂,具有显著的促进PDLCs贴附的作用,并可能成为细胞支架,在牙周治疗中具备广阔的应用前景。

关键词：纤维蛋白粘合胶人牙周膜细胞贴壁率