检索结果-南通市图书馆

作者：周芳天津医科大学

学位级别：硕士

目的：空气污染是导致肺部疾患的重要原因。柴油机废气是空气污染的重要来源。本研究是将柴油机废气作用于正常支气管上皮细胞和肺腺癌细胞,从miR-21表达量的变化初步探讨柴油机废气是否促进肿瘤发生及其机制。方法：本研... 详细信息

目的：空气污染是导致肺部疾患的重要原因。柴油机废气是空气污染的重要来源。本研究是将柴油机废气作用于正常支气管上皮细胞和肺腺癌细胞,从miR-21表达量的变化初步探讨柴油机废气是否促进肿瘤发生及其机制。方法：本研究以正常人支气管上皮细胞（16HBE）和肺腺癌细胞A549为研究对象,miR-21为研究指标。先提取正常未处理人正常支气管上皮细胞16HBE及A549细胞中总RNA,进行实时定量PCR检测miR-21在两种细胞中表达的差别,然后将柴油机废气颗粒溶解于1640培养基至浓度为100μg/ml,后加入待研究人正常支气管上皮细胞16HBE,处理48小时后并提取细胞总RNA,逆转录进行实时定量PCR检测miR-21在未处理及经48小时柴油机废气颗粒处理的人正常支气管上皮细胞16HBE中表达量的变化,用Western blot检测在上述细胞中PTEN、 PI3K、AKT\p-AKT的表达量的变化。柴油机废气颗粒联合miR-21的反义寡核苷酸（As-miR-21）作用后再次对以上指标进行检测,以分析miR-21在柴油机废气颗粒致癌过程的潜在作用。检测人正常支气管上皮细胞16HBE和肺腺癌细胞A549经柴油机废气颗粒处理48小时后迁移,侵袭及周期凋亡的变化,用划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力,流式细胞术检测细胞周期和凋亡变化。结果：未处理肺腺癌细胞A549中miR-21的表达量较未处理人正常支气管上皮细胞16HBE中的表达量明显上升,PTEN表达量较低,而PI3K,AKT, p-AKT的表达量均较人正常支气管上皮细胞16HBE中升高,且有明显统计学意义（p＜0.05）。加入柴油机废气颗粒后的人正常支气管上皮细胞16HBE处理组miR-21的表达量明显高于对照组。PTEN, PI3K, AKT, p-AKT的表达量也出现上述变化,而当柴油机废气颗粒联合miR-21的反义寡核苷酸处理人正常支气管上皮细胞16HBE后,miR-21的表达量较对照组下降,PTEN表达量上升,逆转了柴油机废气颗粒作用引起的PTEN表达量下降趋势,而P13K和AKT的表达也表现出逆转趋势,明显下降。结果也显示,加入柴油机废气颗粒的16HBE和A549细胞的迁移能力均下降,增殖能力均下降,细胞周期均阻滞于G0/G1期,人正常支气管上皮细胞16HBE凋亡率增加而肺腺癌细胞A549未见有意义变化,A549细胞侵袭能力稍有增强,16HBE侵袭能力下降。结论： miR-21的上升可能在可能致癌物柴油机废气颗粒导致肺癌变的过程中起到了重要的作用,其作用机制可能与导致PTEN/PI3K/AKT通路的激活有关。但是短期大量柴油机废气颗粒的暴露在细胞周期,凋亡,增殖,侵袭上并未引起明显细胞癌变或者加重癌症的迹象。

关键词：柴油机废气颗粒人正常支气管上皮细胞 16HBE 肺腺癌细胞 A549miR-21 miR-21反义核苷酸

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PGE2诱导人正常支气管上皮细胞增殖及PDK1表达的机制研究

PGE2诱导人正常支气管上皮细胞增殖及PDK1表达的机制研究

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作者：吴峰妹苏州大学

学位级别：硕士

研究目的环氧合酶2来源的前列腺素E2（PGE2）是一种具有生物活性的类二十烷酸，其参与了包括生殖、炎症及肿瘤生长在内的多个生物学过程。3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1（PDK1）信号在肿瘤细胞的生长、生存和肿瘤血管生成中起关键作用。... 详细信息

研究目的环氧合酶2来源的前列腺素E2（PGE2）是一种具有生物活性的类二十烷酸，其参与了包括生殖、炎症及肿瘤生长在内的多个生物学过程。3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1（PDK1）信号在肿瘤细胞的生长、生存和肿瘤血管生成中起关键作用。然而，目前仍不清楚PDK1在正常气道上皮细胞向肿瘤转化及异常增殖是否发挥作用，亦不清楚PGE2是否参与了这一过程的调控。本研究拟探讨PGE2在人正常上皮细胞生长中的作用及可能机制。研究方法采用CellTiter-Glo发光法细胞活力检测试剂盒检测PGE2、PDK1抑制剂OSU-03012对正常气道上皮细胞株BEAS-2B细胞增殖的影响。应用Real-time PCR检测人正常气道上皮细胞PDK1mRNA的表达水平，使用Western blot检测PDK1及磷酸化PDK1的含量。研究结果研究显示PGE2可以通过诱导PDK1的产生促进正常支气管上皮细胞的增殖。正常人支气管上皮细胞的细胞活力随PGE2浓度的增加而呈现上升趋势，在dmPGE2的浓度为1μM时达到高峰，细胞活力比值高达1.59±0.07，与对照组相比差异有统计学意义（P 人正常支气管上皮细胞的生长。加入PDK1抑制剂OSU-03012后，PGE2促进人正常支气管上皮细胞生长的作用被部分阻断，同时PGE2可以诱导PDK1mRNA的表达增加，差异有统计学意义（P人气道上皮细胞异常增殖过程，其可能促进正常气道上皮细胞向非小细胞肺癌细胞转化、并参与非小细胞肺癌细胞的异常增殖。针对PDK1信号进行干预，可能成为治疗非小细胞肺癌的新靶点。

关键词：前列腺素E2 3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1 增殖人正常支气管上皮细胞

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组蛋白乙酰化抑制哮喘易感基因ADRB2的表达

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医学研究杂志 2024年第1期53卷 126-130页

作者：郝忠分杜娟杭芸杨涓智束进江苏大学第四附属医院儿科镇江212001

目的研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitors,HDACi)及组蛋白乙酰化转移酶(histone acetyltransferase,HAT)调控的组蛋白乙酰化修饰对β2肾上腺素受体(β2-drenergic receptor,ADRB2)基因的影响。方法将ADRB2启动子质粒(pADRB2-1918)转染到人正常支气管上皮细胞(BEAS-2B)细胞后,分别加入丁酸钠(sodium butyrate,SoB)和曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA),将pADRB2-1918质粒和腺病毒E1A相关的300kDa蛋白(p300)质粒共转染到BEAS-2B细胞,使BEAS-2B细胞中组蛋白乙酰化,利用双荧光素酶报告基因检测经SoB、TSA及p300处理后BEAS-2B细胞中ADRB2启动子活性。向BEAS-2B细胞中分别加入SoB和TSA,或向BEAS-2B细胞中转染p300质粒,使BEAS-2B细胞中组蛋白乙酰化,利用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测BEAS-2B细胞中ADRB2mRNA的相对表达,利用Western blot法检测BEAS-2B细胞中ADRB2蛋白的表达。结果在BEAS-2B细胞中分别加入SoB、TSA和转染p300质粒,参与BEAS-2B细胞中组蛋白乙酰化,发现BEAS-2B细胞中ADRB2启动子活性、mRNA和蛋白的表达均较对照组下降(P<0.05),差异均有统计学意义。结论组蛋白乙酰化可下调哮喘易感基因ADRB2的表达。

关键词：哮喘 β2肾上腺素受体组蛋白乙酰化修饰人正常支气管上皮细胞

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