检索结果-南通市图书馆

石斛酚对同型半胱氨酸诱导的人微血管内皮细胞NLRP3炎性体激活的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国药理学通报 2020年第8期36卷 1089-1094页

作者：王伟陈亚军耿明徐忠东戴敏合肥师范学院生命科学学院安徽合肥230601 安徽中医药大学药学院安徽省中药研究与开发重点实验室新安医学教育部重点实验室安徽合肥230031

目的观察石斛酚(gigantol)对同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)诱导的人微血管内皮细胞(HMEC-1)NLRP3炎性体激活的影响,分析石斛酚对血管内皮细胞炎症反应的抑制作用及机制。方法采用形态学观察和MTT法检测细胞活性;采用ELISA法检测白细... 详细信息

目的观察石斛酚(gigantol)对同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)诱导的人微血管内皮细胞(HMEC-1)NLRP3炎性体激活的影响,分析石斛酚对血管内皮细胞炎症反应的抑制作用及机制。方法采用形态学观察和MTT法检测细胞活性;采用ELISA法检测白细胞介素-1β(IL^-1β)浓度;采用Western blot法分析NLRP3、ASC、Caspase-1和TXNIP蛋白表达;采用流式细胞仪检测细胞活性氧(ROS)水平。结果Hcy(100μmol·L^-1)、石斛酚(1~10μmol·L^-1)对HMEC-1细胞活性未观察到明显影响;Hcy可明显增加细胞ROS水平,诱导TXNIP、NLRP3、ASC和Caspase-1蛋白表达,促进HMEC-1细胞IL^-1β分泌;石斛酚能明显逆转Hcy上调的HMEC-1细胞ROS和上清液IL^-1β水平,抑制Hcy诱导的TXNIP蛋白过表达和NLRP3炎性体激活。结论石斛酚能逆转Hcy激活的HMEC-1细胞NLRP3炎性体,抑制血管内皮细胞炎症反应,ROS/TXNIP通路可能参与石斛酚对Hcy诱导的NLRP3炎性体激活的抑制作用。

关键词：石斛酚同型半胱氨酸人微血管内皮细胞 NLRP3炎性体活性氧物质硫氧还蛋白互作蛋白

线粒体凋亡参与EV-71感染致人微血管内皮细胞损伤的机制

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

病毒学报 2024年第2期40卷 357-364页

作者：李爽梁若楠朱培育纪望全晋乐飞段广才郑州大学公共卫生学院流行病学系郑州450001

肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)是一种嗜神经性肠道病毒,主要通过粪-口途径传播。然而,EV71感染导致微血管内皮细胞凋亡的机制尚未完全阐明。本研究使用临床分离的EV71毒株体外感染人微血管内皮细胞(Human microvascular endothelia... 详细信息

肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)是一种嗜神经性肠道病毒,主要通过粪-口途径传播。然而,EV71感染导致微血管内皮细胞凋亡的机制尚未完全阐明。本研究使用临床分离的EV71毒株体外感染人微血管内皮细胞(Human microvascular endothelial cells,HMEC-1),探讨线粒体损伤在EV71感染损伤HMEC-1的作用机制。MTT法检测结果发现,HMEC-1感染EV71 24 h后细胞活力下降到47%(P 细胞线粒体活性氧(Reactive oxygen species,ROS)水平明显升高;随着EV71感染时间的增加,EV71-VP1、Cleaved-caspase 3、Cleaved-caspase 8、Cleaved-caspase 9、Bax蛋白水平逐渐升高,并且细胞中的Cyt C蛋白从线粒体转移到了细胞质;此外,实时荧光定量PCR法结果显示,随着感染时间增加,HMEC-1表达TNF-α、IL-6、IL-1β的mRNA表达水平逐渐升高。而通过N-乙酰半胱胺酸干预后,可显著降低病毒感染诱导内皮细胞促凋亡蛋白和TNF-α、IL-6、IL-1β mRNA的表达(P <0.01)。因此,本研究发现EV71感染通过线粒体途径诱导HMEC-1凋亡,且这一过程受ROS介导。

关键词：肠道病毒71型人微血管内皮细胞凋亡线粒体膜电位活性氧

山楂活性成分对氧化低密度脂蛋白损伤人微血管内皮细胞的防治作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

上海大学学报（自然科学版） 2007年第6期13卷 751-756页

作者：何秋艳翁新楚上海大学生命科学学院上海200444

对山楂中有效成分进行分离提取，并研究其保护人微血管内皮细胞（HMEC）抑制氧化低密度脂蛋白（oxLDL）损伤和对损伤的修复作用．对山楂石油醚和氯仿提取物，经过反复硅胶柱层析，分离得到3种化合物，经理化性质和波谱分析，鉴定为：（... 详细信息

对山楂中有效成分进行分离提取，并研究其保护人微血管内皮细胞（HMEC）抑制氧化低密度脂蛋白（oxLDL）损伤和对损伤的修复作用．对山楂石油醚和氯仿提取物，经过反复硅胶柱层析，分离得到3种化合物，经理化性质和波谱分析，鉴定为：（1）胡萝卜苷（Daucosterol）、（Ⅱ）熊果酸（Ursolicacid）、（Ⅲ）β-谷甾醇（β—sitoster01）．实验以山楂依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、95％乙醇提取的各种提取物和化合物Ⅰ～Ⅲ为研究对象，以洛伐他汀（Lovastatin）作为阳性对照，MTT法考察样品对保护HMEC抑制oxLDL损伤和对损伤的修复作用．结果表明：山楂各种溶剂提取物和洛伐他汀在3．12～25μg／mL时，保护细胞抑制氧化损伤；乙酸乙酯、95％乙醇提取物在浓度6．25～25μg/mL时对氧化损伤细胞有修复作用，效果好于洛伐他汀；胡萝卜苷、β-谷甾醇在0．39～12．5μg／mL下有保护作用；熊果酸在0．39～1．56μg／mL下有保护作用；胡萝卜苷在浓度6．25～12．5μg／mL下表现出很强的修复作用，熊果酸在浓度0．39～3．12μg／mL时表现出的修复作用和洛伐他汀相当．

关键词：山楂胡萝卜苷熊果酸 β-谷甾醇人微血管内皮细胞氧化损伤

小鼠脊髓背根神经节细胞与人微血管内皮细胞共培养对细胞增殖的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华实验外科杂志 2015年第1期32卷 135-138页

作者：原泉程扬杨亚帆孙立郭金明中国医科大学附属盛京医院骨科沈阳110004 沈阳市骨科医院中国医科大学附属第一医院肾内科

目的观察小鼠脊髓背根神经节细胞（DRGC）与人微血管内皮细胞（HMVEC）共培养对细胞增殖的影响,并探讨其机制.方法分离培养小鼠DRGC,并与HMVEC进行共培养,设为DRGC组、HMVEC组、DRGC＋ HMVEC组.噻唑蓝（MTT）法检测细胞增殖,实时定量... 详细信息

目的观察小鼠脊髓背根神经节细胞（DRGC）与人微血管内皮细胞（HMVEC）共培养对细胞增殖的影响,并探讨其机制.方法分离培养小鼠DRGC,并与HMVEC进行共培养,设为DRGC组、HMVEC组、DRGC＋ HMVEC组.噻唑蓝（MTT）法检测细胞增殖,实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）及Western blot检测血管内皮生长因子（VEGF）、神经生长因子（NGF）、增殖细胞核抗原（PCNA）和细胞周期蛋白D1（Cyclin Dl） mRNA及蛋白的表达.结果细胞培养24h后,DRGC＋ HMVEC组相对于DRGC组和HMVEC组的细胞增殖率分别为136.29％和137.45％,细胞增殖能力显著提高（P＜0.05）.VEGF、NGF、PCNA和Cyclin Dl mRNA和蛋白的表达在DRGC＋HMVEC组中最高,与其他两组比较差异有统计学意义（P＜0.05）.结论共培养DRGC和HMVEC能够促进VEGF和NGF的表达,并可能通过调控PCNA和Cyclin D1的表达促进共培养体系细胞增殖能力.

关键词：小鼠脊髓背根神经节细胞人微血管内皮细胞神经生长因子血管内皮细胞生长因子增殖

血红素对高氧条件下人微血管内皮细胞的作用及机制的初步研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

血红素对高氧条件下人微血管内皮细胞的作用及机制的初步研究

作者：兰健中国人民解放军陆军军医大学

学位级别：硕士

研究背景:早产儿视网膜病变(ROP)在病理上分为两期,高氧介导的眼内血管内皮生长因子(VEGF)抑制是I期ROP血管生成受阻的主要原因。血管内皮细胞在视网膜血管生成和功能发挥的过程中发挥着重要作用,是研究ROP病理生理发展机制的关键性细... 详细信息

研究背景:早产儿视网膜病变(ROP)在病理上分为两期,高氧介导的眼内血管内皮生长因子(VEGF)抑制是I期ROP血管生成受阻的主要原因。血管内皮细胞在视网膜血管生成和功能发挥的过程中发挥着重要作用,是研究ROP病理生理发展机制的关键性细胞之一。之前的研究已经证实碱性亮氨酸拉链转录因子1(BACH1)可以抑制VEGF和血管生成,而血红素可以降解生物体内BACH1。然而,血红素对ROP的影响尚不清楚。目的:1、研究40%高氧对人微血管内皮细胞(HMEC-1)生长与活力的作用。2、观察不同浓度的血红素对HMEC-1细胞增殖的作用。3、研究血红素对40%高氧下HMEC-1细胞的生长与活力的影响。4、初步探索血红素对40%高氧环境下HMEC-1细胞的作用机制。方法:1、体外培养HMEC-1,建立40%高氧诱导环境下HMEC-1细胞生物模型,加入不同浓度的血红素及阴性对照(溶剂),观察各组实验结果。2、采用高效液相色谱法(HPLC)检测细胞内血红素浓度。3、分别用细胞计数试剂盒(CCK8)和5-乙炔-2-脱氧尿苷荧光标记法(Ed U)检测细胞增殖数目和增殖能力。4、细胞划痕实验用来检测细胞迁移能力。5、开展Matrigel基质胶小管成形实验检测细胞小管形成能力。6、蛋白免疫印迹(WB)和免疫荧光(IF)实验用来检测和定位BACH1和VEGF蛋白相对表达水平。结果:1、40%高氧环境下,HMEC-1细胞的增值、迁移、血管形成等生物学行为受到抑制。2、常氧或40%高氧条件下,加入20μM血红素后,HMEC-1细胞内血红素含量增加。3、适量的血红素(常氧下10-40μM,40%高氧下5-40μM)可以促进HMEC-1细胞增殖,过量(常氧下超过160μM,40%高氧下超过80μM)则表现为抑制。20μM血红素对HMEC-1细胞的增殖作用达到峰值,可以缓解40%高氧对HMEC-1细胞增殖的抑制作用。4、20μM血红素能够降低40%高氧对HMEC-1细胞迁移的抑制作用。5、20μM血红素减轻了40%高氧对HMEC-1细胞血管形成的抑制作用。6、20μM血红素抑制HMEC-1细胞BACH1表达,同时高表达VEGF。结论:40%高氧条件下,HMEC-1细胞增殖、迁移和小管成型能力下降,20μM血红素可能通过抑制HMEC-1的BACH1来促进VEGF的表达,缓解40%高氧对HMEC-1细胞的抑制,这一发现有望为ROP的早期预防治疗提供一种潜在药物。

关键词：早产儿视网膜病变血红素碱性亮氨酸拉链转录因子1 血管内皮生长因子人微血管内皮细胞

RNA干扰抑制DLL4基因表达对人血管内皮细胞增殖的影响

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国组织工程研究与临床康复 2009年第24期13卷 4700-4703页

作者：李文林石小玉刘弘晟周莹熊丽霞赵林南昌大学医学院病理生理学教研室江西省南昌市330006 南昌大学医学院江西省医学科学研究所医学生物高技术重点实验室江西省南昌市330006 南昌大学医学院组织学与胚胎学教研室江西省南昌市330006

背景:Delta-like4(DLL4)是近年新发现的血管生长调控因子,研究表明抑制DLL4可导致过度无效的血管生成。目的:研究RNA干扰抑制DLL4基因表达对人血管内皮细胞增殖的影响。设计、时间及地点:随机分组,对比观察,于2007-07/2008-09在南昌大... 详细信息

背景:Delta-like4(DLL4)是近年新发现的血管生长调控因子,研究表明抑制DLL4可导致过度无效的血管生成。目的:研究RNA干扰抑制DLL4基因表达对人血管内皮细胞增殖的影响。设计、时间及地点:随机分组,对比观察,于2007-07/2008-09在南昌大学医学院和江西省医学生物高技术重点实验室完成。材料:人微血管内皮细胞由上海细胞生物和生物化学研究所提供。方法:设计和化学合成靶向DLL4基因的siRNA序列,lepofectamineTM2000介导DLL4siRNA转染人微血管内皮细胞。提取细胞总RNA,进行反转录-聚合酶链反应扩增,琼脂糖电泳检测DLL4mRNA。提取细胞总蛋白,进行聚丙烯酰胺凝胶电泳。采用四甲基偶氮唑盐法检测DLL4siRNA对人微血管内皮细胞增殖的影响,实验分4组:①85nmol/LDLL4siRNA-duplex组。②85nmol/LDLL4siRNA-scrambled阴性对照组。③lepofectamine组。④未经处理组。主要观察指标:RNA干扰后,人微血管内皮细胞DLL4的转录和蛋白表达及人微血管内皮细胞的增殖。结果:反转录-聚合酶链反应和Westernblot实验结果显示,人微血管内皮细胞转录DLL4和表达DLL4蛋白;85nmol/LDLL4siRNA完全抑制人微血管内皮细胞DLL4转录和DLL4蛋白的表达。DLL4siRNA抑制人微血管内皮细胞DLL4表达的有效浓度为85nmol/L。四甲基偶氮唑盐实验结果显示,85nmol/L DLL4 siRNA-duplex组的细胞增殖率为190.00%,未经处理组的细胞增殖率为110.00%。结论:人微血管内皮细胞表达DLL4,DLL4siRNA抑制人微血管内皮细胞表达DLL4并促进人微血管内皮细胞增殖,DLL4对人微血管内皮细胞增殖具有抑制作用。

关键词： DLL4 人微血管内皮细胞 RNA干扰细胞增殖

合欢皮中抑制血管内皮细胞增殖活性组分的分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

华西药学杂志 2011年第3期26卷 229-231页

作者：花慧冯磊张小平张莲芬金坚无锡卫生高等职业技术学校江苏无锡214028 江南大学医药学院江苏无锡214122 江南大学工业生物技术教育部重点实验室江苏无锡214122

目的研究合欢皮中抑制血管生成的活性组分。方法在抑制人微血管内皮细胞(HMEC)增殖实验的跟踪下,采用大孔树脂吸附、硅胶常压、反相C18色谱柱层析分离纯化合欢皮的醇提物。结果分离得到白色混合物,其抑制HMEC的IC50为2.81μg·mL-1。结... 详细信息

目的研究合欢皮中抑制血管生成的活性组分。方法在抑制人微血管内皮细胞(HMEC)增殖实验的跟踪下,采用大孔树脂吸附、硅胶常压、反相C18色谱柱层析分离纯化合欢皮的醇提物。结果分离得到白色混合物,其抑制HMEC的IC50为2.81μg·mL-1。结论合欢皮中抑制血管内皮细胞增殖的活性组分群为皂苷类化合物。

关键词：合欢皮分离纯化人微血管内皮细胞皂苷类化合物

晚期糖基化终产物引起的RhoA和ROCK在人皮肤微血管内皮细胞的分布变化

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国动脉硬化杂志 2010年第5期18卷 341-344页

作者：王吉萍陈波李强郭晓华王陵军黄巧冰南方医科大学基础医学院病理生理教研室广东省医学休克微循环重点实验室广东省广州市510515 广东湛江农垦医院肾内科

目的观察在晚期糖基化终产物修饰的人血清白蛋白作用下,小G蛋白RhoA及其激活的激酶ROCK在人微血管内皮细胞中分布的变化。方法培养人皮肤微血管内皮细胞株,分别以糖基化修饰的人血清白蛋白(AGE-HSA)处理不同的浓度和时间,用免疫荧光染... 详细信息

目的观察在晚期糖基化终产物修饰的人血清白蛋白作用下,小G蛋白RhoA及其激活的激酶ROCK在人微血管内皮细胞中分布的变化。方法培养人皮肤微血管内皮细胞株,分别以糖基化修饰的人血清白蛋白(AGE-HSA)处理不同的浓度和时间,用免疫荧光染色法、激光共聚焦显微镜观察RhoA和磷酸化ROCK在细胞中的分布变化;并用活性型RhoA L63或失活型的RhoA N19转染细胞后再给予AGE-HSA刺激,观察磷酸化ROCK细胞内分布的变化。结果 AGE-HSA刺激可以导致RhoA在胞浆中分布增多,其变化随着AGE-HSA作用时间的延长和剂量的增加更加明显。RhoA的下游激酶被活化的磷酸化ROCK在人微血管内皮细胞中的分布与RhoA类似;用失活型RhoAN19先处理细胞后,AGE-HSA介导的ROCK分布变化被抑制。结论晚期糖基化终产物刺激引起小G蛋白RhoA在细胞内分布变化,并导致其下游激酶ROCK磷酸化和定位变化。

关键词：晚期糖基化终产物人微血管内皮细胞 RhoA ROCK

SP1和HIF1-α联合干扰对缺氧诱导下微血管内皮细胞（HMEC-1）活化的抑制作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

SP1和HIF1-α联合干扰对缺氧诱导下微血管内皮细胞（HMEC-1）活化...

作者：艾李倩玉第三军医大学

学位级别：硕士

研究背景和意义视网膜新生血管性疾病是危害视力,致盲的重要疾病之一。目前普遍认为视网膜局部缺氧状态是诱导视网膜新生血管形成的主要原因之一,其发病机制研究是国内外的研究热点。研究证实缺氧刺激下多种转录因子活性增加可促进微血... 详细信息

研究背景和意义视网膜新生血管性疾病是危害视力,致盲的重要疾病之一。目前普遍认为视网膜局部缺氧状态是诱导视网膜新生血管形成的主要原因之一,其发病机制研究是国内外的研究热点。研究证实缺氧刺激下多种转录因子活性增加可促进微血管内皮细胞活化,导致新生血管形成,其中除血管内皮生长因子(VEGF)外,特殊蛋白1(SP1)和缺氧诱导因子1-α(HIF1-α)的血管生成作用也逐渐受到关注。近几年研究发现,VEGF的启动子上存在SP1和HIF1-α结合位点,从而可被其调控引起转录增强;除此之外,课题组研究发现,缺氧诱导下腺苷水平与人微血管内皮细胞(HMEC-1)的活化相关,而SP1和HIF1-α已被证实可以调节腺苷生成的关键核苷酸酶:三磷酸腺苷酶(CD39)和5′核苷酸酶(CD73)。本课题希望通过证实同时干扰SP1和HIF1-α基因可以较单基因干扰SP1/HIF1α或传统抗VEGF药物(雷珠单抗注射液),更能有效抑制人微血管内皮细胞(HMEC-1)活化,从而为进一步治疗视网膜新生血管性疾病提供新的方法。目的:1、证实缺氧诱导模型下,HMEC-1细胞株SP1和HIF1-α表达水平增高,且通过单因素或双因素siRNA干扰能成功抑制缺氧下细胞内SP1或/和HIF1-α的表达。2、证实联合干扰较单因素干扰是否更能有效抑制缺氧诱导下的HMEC-1细胞株活化效应。3、证实联合干扰效应是否是通过抑制VEGF促血管内皮细胞活化通路的同时抑制CD39和CD73激活腺苷促血管内皮细胞活化通路而产生。4、证实联合干扰较临床抗VEGF药物(雷珠单抗注射液)是否更能有效抑制缺氧诱导下的HMEC-1细胞株活化效应。方法:1、将实验分为缺氧组(缺氧培养箱:37℃,体积分数1%O2,94%N2和5%CO2)和常氧组(常氧培养箱:37℃,体积分数5%CO2),培养时间分别为12小时和24小时,通过Western blot法检测缺氧诱导模型下人HMEC-1细胞株SP1和HIF1-α表达水平,是否高于常氧状态;再通过该检测法验证单因素或联合siRNA干扰是否能成功抑制缺氧下HMEC-1细胞株SP1或/和HIF1-α的表达。2、将实验分为缺氧组、常氧组、si RNA-Control组(Control-si)、siRNA-SP1组(SP1-si)、siRNA-HIF1-α组(HIF1-α-si)、siRNA-联合干扰组(SP1-si+HIF1-α-si),培养时间为24小时,通过细胞计数试剂盒-8(CCK8),EDU法和Transwell法,比较SP1或HIF1-α单因素干扰以及SP1和HIF1-α联合干扰对缺氧诱导下的HMEC-1细胞株活化的抑制效应。3、将实验分为si RNA-Control组、si RNA-SP1组、si RNA-HIF1-α组、si RNA-联合干扰组,缺氧下培养24小时,通过Western blot法和免疫荧光法,观察联合干扰对VEGF促血管内皮细胞活化通路的抑制以及CD39和CD73激活腺苷促血管内皮细胞活化通路的抑制作用。4、将实验分为si RNA-联合干扰组、抗VEGF组(0.5mg/ml雷珠单抗注射液),缺氧下培养24小时,通过细胞计数试剂盒-8(CCK8),EDU法和Transwell法,比较SP1和HIF1-α联合干扰以及传统抗VEGF药物(雷珠单抗注射液)对缺氧诱导下的HMEC-1细胞株活化的抑制效应。结果:1、缺氧模型中,HMEC-1细胞株SP1和HIF1-α表达水平高于常氧组,且随时间增加,表达量增加;在HMEC-1细胞株加入SP1或/和HIF1-αsi RNA可有效抑制缺氧下其在细胞内的表达。2、缺氧模型中,HMEC-1细胞株活化效应高于常氧组;且对缺氧诱导下的HMEC-1细胞株活化的抑制效应,siRNA-联合干扰组高于si RNA-SP1组和siRNA-HIF1-α组;3、缺氧模型中,加入SP1或/和HIF1-αsiRNA后,可以有效抑制HMEC-1细胞株中的VEGF表达,以及CD39、CD73和腺苷的表达,且抑制效应si RNA-联合干扰组高于si RNA-SP1组和si RNA-HIF1-α组。4、缺氧模型中,siRNA-联合干扰组对HMEC-1细胞株活化效应的抑制作用较抗VEGF组(0.5mg/ml雷珠单抗注射液)更明显。结论:上述结果显示,缺氧诱导下,HMEC-1细胞株中SP1和HIF1-α表达水平增高,加入si RNA干扰SP1或/和HIF1-α基因,可通过抑制细胞中的VEGF表达以及CD39、CD73和腺苷的表达,使细胞活化效应明显降低,且联合干扰效应较单因素干扰效应以及传统抗VEGF(0.5mg/ml雷珠单抗注射液)抑制更明显。因此我们认为,SP1和HIF1-α基因对缺氧状态下人微血管内皮细胞活化有重要作用,可进一步研究双

关键词：视网膜新生血管人微血管内皮细胞 SP1 HIF1-α VEGF 腺苷 CD39 CD73