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人工智能识别60 Coγ射线照射诱导人外周血微核的剂量⁃效应曲线建立

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中华放射医学与防护杂志 2024年第1期44卷 7-12页

作者：吴梦云李炜张华东袁方谭秀洪重庆市疾病预防控制中心公共卫生所职业与放射卫生放射检验科重庆400707

目的根据扫描显微镜搭配玻片扫描软件(Metafer4),在松弛素B(CB)阻断微核法试验中识别和鉴定微核,建立^(60)Co γ射线照射剂量与人外周血淋巴细胞微核率的剂量-效应曲线。方法采集4名健康人(2男2女)肘静脉血样品,用0、0.25、0.5、1、2、3... 详细信息

目的根据扫描显微镜搭配玻片扫描软件(Metafer4),在松弛素B(CB)阻断微核法试验中识别和鉴定微核,建立^(60)Co γ射线照射剂量与人外周血淋巴细胞微核率的剂量-效应曲线。方法采集4名健康人(2男2女)肘静脉血样品,用0、0.25、0.5、1、2、3、4和5Gy ^(60)Co γ射线(剂量率0.74Gy/min)离体照射,胞质分裂阻断微核法培养、收获和制备标本玻片,人工智能彩色识别分析系统分析并记录双核细胞和微核数。应用CABAS软件拟合基于微核率的剂量-效应曲线。2份照射后的盲样进行生物剂量估算验证。结果在0~5Gy剂量范围内,拟合的微核剂量-效应曲线符合二次多项式模型,回归方程为y=0.0321D^(2)+0.0237D+0.0127(R^(2)=0.998,D为剂量)。用拟合曲线对验证样本的剂量估算结果与实际照射剂量基本接近。结论成功建立基于人工智能识别微核的剂量-效应曲线,为估算辐射生物剂量提供了可行方法。

关键词：人工智能剂量-效应曲线松弛素B阻断微核法人外周血

人外周血CD4^+T细胞F-actin的超分辨SIM成像

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华中农业大学学报 2016年第1期35卷 120-125页

作者：任敏张先恩崔宗强张吉斌华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 中国科学院武汉病毒研究所武汉430070

通过合成lifeact序列,将其克隆到pEGFP-C1载体上,构建了pEGFP-C1-Lifeact质粒,转染原代CD4+T细胞,实现对CD4+T细胞F-actin的荧光标记,结合超分辨3D-SIM荧光成像技术,研究人外周血CD4+T细胞F-actin的精细结构,并对其动力学过程进行连续... 详细信息

通过合成lifeact序列,将其克隆到pEGFP-C1载体上,构建了pEGFP-C1-Lifeact质粒,转染原代CD4+T细胞,实现对CD4+T细胞F-actin的荧光标记,结合超分辨3D-SIM荧光成像技术,研究人外周血CD4+T细胞F-actin的精细结构,并对其动力学过程进行连续观察。结果表明,CD4+T细胞F-actin分布在细胞膜周围,处于解聚和聚合的动态平衡状态,与普通荧光显微镜相比,超分辩SIM成像F-actin结构更加清晰,分辨率提高2~4倍。

关键词： CD4+T细胞人外周血 F-actin 超分辨 SIM成像

人外周血白细胞处理后CD分子的变化及免疫原性

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国际生物制品学杂志 2022年第2期45卷 85-89页

作者：邹浩勇张智殷文曲程文进薛红刚武汉中生毓晋生物医药有限责任公司质量控制室武汉430207

目的检测人外周血中白细胞培养后主要CD分子的变化,验证其作为免疫原制剂的可行性。方法以白细胞滤盘为原料,对比分析白细胞滤盘中淋巴细胞培养前后CD2、CD3、CD4、CD8、CD44、CD45、CD98、CD99、CD107a、CD38、CD25、CD56、CD147、CD50... 详细信息

目的检测人外周血中白细胞培养后主要CD分子的变化,验证其作为免疫原制剂的可行性。方法以白细胞滤盘为原料,对比分析白细胞滤盘中淋巴细胞培养前后CD2、CD3、CD4、CD8、CD44、CD45、CD98、CD99、CD107a、CD38、CD25、CD56、CD147、CD50、CD49d、CD82、HLA-ABC共17种CD分子的变化,并与胸腺细胞、Jurkat细胞和外周血细胞进行对比。用培养的淋巴细胞进行免疫原的制备,进行E玫瑰花环抑制试验和淋巴细胞毒试验,制定并验证免疫程序。结果白细胞滤盘中的淋巴细胞培养后,检测的17种CD分子均未发生丢失,其中CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+阳性率分别从培养前的59.81%、32.73%、22.15%变为98.80%、18.32%、75.31%。免疫原性分析结果显示,第3次免疫后6~15 d血浆抗体的E玫瑰花环抑制试验100%合格,9 d时淋巴细胞毒试验合格率最高。另用10头猪进行了免疫程序的验证,结果显示效价100%合格。结论人外周血白细胞处理后作为免疫原制剂可行。

关键词：人外周血白细胞抗原免疫原制剂

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γδT细胞在恶性脑肿瘤治疗中的研究现状

中华神经外科杂志 2023年第12期39卷 1284-1288页

作者：王燚孙涛张力伟北京航空航天大学生物与医学工程学院北京100083 首都医科大学附属北京天坛医院神经外科学中心北京100070

γδT细胞是天然免疫与获得性免疫的"桥梁"。近年来,γδT细胞的抗肿瘤、抗感染的相关研究表明,γδT细胞在肿瘤免疫与感染免疫中具有重要功能和临床应用价值。其中Vγ9Vδ2亚群是只存在于人外周血的一类γδT细胞,其数量虽少,但功能全... 详细信息

γδT细胞是天然免疫与获得性免疫的"桥梁"。近年来,γδT细胞的抗肿瘤、抗感染的相关研究表明,γδT细胞在肿瘤免疫与感染免疫中具有重要功能和临床应用价值。其中Vγ9Vδ2亚群是只存在于人外周血的一类γδT细胞,其数量虽少,但功能全面且强大。相比肿瘤患者自体γδT细胞的功能被抑制或"后天不足",健康人来源的同种异体γδT细胞由于功能健康,因此具有更强的临床应用价值。本文针对γδT在抗恶性脑肿瘤中的应用,综述了人γδT细胞的生物学特点、识别肿瘤细胞的机制、在免疫中的不同作用及其临床价值。

关键词：感染免疫恶性脑肿瘤 γδT细胞同种异体肿瘤免疫人外周血获得性免疫生物学特点

体外扩增人外周血来源免疫细胞对MDA-MB-231细胞的杀伤作用

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细胞与分子免疫学杂志 2019年第8期35卷 682-688页

作者：杨柳楼敏铭刘微微冯郸程腾马洁天津市康婷生物工程集团有限公司

目的探讨人外周血来源的细胞因子诱导杀伤(CIK)细胞、树突状细胞-细胞因子诱导杀伤(DC-CIK)细胞和自然杀伤(NK)细胞对人MDA-MB-231乳腺癌细胞的体外杀伤作用。方法采用含红色荧光蛋白标签(RFP)和萤光素酶报告基因(Luc)的慢病毒感染MDA-M... 详细信息

目的探讨人外周血来源的细胞因子诱导杀伤(CIK)细胞、树突状细胞-细胞因子诱导杀伤(DC-CIK)细胞和自然杀伤(NK)细胞对人MDA-MB-231乳腺癌细胞的体外杀伤作用。方法采用含红色荧光蛋白标签(RFP)和萤光素酶报告基因(Luc)的慢病毒感染MDA-MB-231细胞,通过荧光显微镜检测MDA-MB-231细胞感染率。分离人外周血单个核细胞(PBMC),诱导获得CIK细胞、DC-CIK细胞、NK细胞,体外扩增培养。采用流式细胞术检测免疫细胞的扩增效果及表型,并检测体外扩增的人外周血来源免疫细胞在不同效靶比下对MDA-MB-231肿瘤细胞的抑制作用。结果DC-CIK细胞、NK细胞及CIK细胞对MDA-MB-231肿瘤细胞的杀伤作用随效靶比的增加以及作用时间的延长而增强。共培养72 h后,免疫细胞对靶细胞的杀伤率均达到90%以上。结论体外扩增的CIK细胞、DC-CIK细胞、NK细胞对乳腺癌细胞具有杀伤作用。

关键词：人外周血细胞因子诱导杀伤(CIK)细胞树突状细胞-细胞因子诱导杀伤(DC-CIK)细胞自然杀伤(NK)细胞乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞体外杀伤

基于人外周血转录组数据的辐射分子标志物挖掘及辐射剂量评估模型研究

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基于人外周血转录组数据的辐射分子标志物挖掘及辐射剂量评估模型...

作者：隆飞大连海事大学

学位级别：硕士

随着核能在军事和医学领域的广泛应用,核辐射事故发生风险逐渐增加,并受到广泛的关注。在发生大规模核辐射事故时,需要立即启动核事故医学应急救援行动,主要包括对受核辐射暴露人群的辐射剂量监测、疾病风险预警与医学治疗等,以最大限... 详细信息

随着核能在军事和医学领域的广泛应用,核辐射事故发生风险逐渐增加,并受到广泛的关注。在发生大规模核辐射事故时,需要立即启动核事故医学应急救援行动,主要包括对受核辐射暴露人群的辐射剂量监测、疾病风险预警与医学治疗等,以最大限度地减轻核事故造成的不良后果。基于外周血的辐射分子标志物挖掘及辐射剂量评估被认为是影响核事故医学应急救援的关键技术之一,然而为此展开的相关研究存在明显的不足。为建立快速、准确和高效的辐射生物剂量评估方法,本研究基于不同剂量率辐射条件下的人外周血转录组数据,系统开展辐射分子标志物挖掘及辐射剂量评估模型研究。首先,利用特征选择和相关性分析结合算法,对多个高剂量率辐射条件下人外周血转录组整合数据进行分析,分别筛选得到了CDKN1A、MDM2、EBI3等38个早期(≤6 h)以及SLC7A6、BBC3、PCNA等37个晚期(≥24 h)高剂量率辐射分子标志物。对其进行生物学通路分析,发现这些辐射响应基因大多与DNA损伤响应通路相关。基于这些辐射分子标志物的基因表达数据,构建并优化了基于四种统计回归(包括多元线性回归、逐步回归、岭回归和弹性网络回归)和两种机器学习(支持向量机回归和随机森林回归)的高剂量率条件下辐射剂量评估模型。通过比较不同辐射剂量评估模型的预测性能,结果发现相较于统计回归模型,机器学习模型具有更好的预测性能。其次,基于辐射条件下基因表达动力学方程,推导获得了基于单个辐射响应基因表达的辐射剂量评估模型(以下简称“单基因模型”),并对高剂量率辐射条件下晚期辐射分子标志物的基因表达数据进行拟合,利用多种模型评价指标对该模型的拟合性能进行分析。结果发现,相较于多项式模型,该模型在残差平方和、调整的R、均方根误差等多项指标中显著优于多项式模型,这表明该单基因模型较已有的多项式模型具有更好的拟合优度,能更好地描述高剂量率条件下晚期辐射分子标志物的剂量效应关系,适用于高剂量率条件下辐射剂量评估。进一步,利用加权基因共表达网络分析算法,对低剂量率辐射条件下人外周血转录组整合数据进行数据挖掘,得到CD70、BAX、AEN等23个早期低剂量率辐射分子标志物;利用基于特征分析算法,筛选并获得GDNF、LCP2、XRN1等54个晚期低剂量率辐射分子标志物。基于此,进一步构建并优化了相应的辐射剂量评估模型,并通过模型评价指标分析筛选了最佳的低剂量率辐射剂量评估模型。结果表明,在低剂量率辐射暴露的早期条件下,随机森林回归模型的预测性能显著优于其它模型;在低剂量率辐射暴露的晚期条件下,支持向量机模型相较于其它模型具有更高的准确性和鲁棒性。最后,本研究通过单基因模型分别对早期和晚期低剂量率辐射分子标志物的基因表达数据进行拟合,并利用多项模型评价指标对该模型的拟合性能进行分析。结果表明,相较于多项式模型,这些单基因模型在低剂量率条件下早期和晚期辐射分子标志物的剂量效应数据中具有更高的拟合优度,这表明该单基因模型同样适用于低剂量率条件下的辐射剂量评估。综上所述,本研究基于高/低剂量率辐射暴露条件下的人外周血转录组数据,分别建立了基于特征选择和加权基因共表达网络分析的辐射分子标志物筛选方法,系统地挖掘了高/低剂量率条件下早期和晚期辐射分子标志物;并基于这些分子标志物的基因表达变化,构建了相应的辐射剂量评估模型;通过模型预测性能比较分析,分别获得了高/低剂量率条件下最优的辐射剂量评估模型。进一步,本研究还推导并建立了基于单个辐射分子标志物基因表达的辐射剂量预测模型,对上述发现的高/低剂量率辐射分子标志物分别进行数据拟合,结果发现这些单基因模型亦具有很好的预测效果。总之,这些新的辐射分子标志物的发现和辐射剂量评估模型的建立为辐射暴露事故后为紧急医疗救援中的快速检测、剂量评估和伤员分类等提供有效的方法支撑以及新的研究思路。

关键词：人外周血转录组数据高/低剂量率辐射分子标志物辐射剂量评估模型

Effects of mild-warming moxibustion on Bcl-2 and PKC expressions of peripheral blood in elderly people

同方学位论文库评论

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Journal of Traditional Chinese Medicine 2012年第1期32卷 45-51页

作者：施茵崔云华吴焕淦张卫赵琛刘慧荣国兰琴吴蓓玲余爱珍张英英 Shanghai University of TCM

OBJECTIVE:To explore the anti-aging effects of mild-warming moxibustion on Bcl-2 and PKC expression in peripheral blood and general symptoms in elderly people.METHODS:A total of 61 elderly people and 30 non-elderly people were enrolled.The total effective rate of mild-warming moxibustion was assessed by symptom scores,and Bcl-2 and PKC expression in peripheral blood was detected by flow cytometry.RESULTS:The total effective rate in the mild-warming moxibustion group was significantly higher than in the blank control group(P<0.01).Bcl-2 and PKC expression rates in peripheral blood in the blank control group were lower than in the normal control group(P<0.01),but higher after mild-warming moxibustion(P<0.01).CONCLUSION:The anti-aging effects of mild-warm-ing moxibustion may be due to increased Bcl-2 and PKC expression in peripheral blood in aged people.

关键词： Bcl-2 人外周血气候变暖 PKC 老年抗衰老作用流式细胞仪对照组

Mitochondria DNA 4977 bp Common Deletion in Peripheral Whole Blood from Healthy Donors

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Biomedical and Environmental Sciences 2013年第12期26卷 990-993页

作者： WANG Ping LIU Yu Long HAN Lin ZHAO Feng Ling GUO Fei WANG Xi Ai LV Yu Min Henan Institute of Occupational Medicine The Second Affiliated Hospital of Suzhou University School of Public Health Zhengzhou University

调查线粒体 DNA 4 的分发 977 bp 删除，普通删除(CD ) 在汉语的正常人口，从六十个健康施主的人的外部血样品从样品在 genomic DNA CD 被收集，并且铺平用即时 PCR 被检测。结果证明 CD 在 27 个健康施主被发现，与它是的积极的率 45%(... 详细信息

调查线粒体 DNA 4 的分发 977 bp 删除，普通删除(CD ) 在汉语的正常人口，从六十个健康施主的人的外部血样品从样品在 genomic DNA CD 被收集，并且铺平用即时 PCR 被检测。结果证明 CD 在 27 个健康施主被发现，与它是的积极的率 45%(27/60 ) 。CD 比率在 0 和 0.000308% 之间，并且没在六十个健康施主到年龄和性影响。我们的研究显示 CD 比率是低的，并且不从正常中国人口在外部整个血显示出年龄依赖者累积和任何性差别。

关键词：线粒体DNA 人外周血献血者健康全血 bp 删除基因组DNA

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人外周血树突状细胞低温保存的优化研究

中国输血杂志 2011年第3期24卷 206-210页

作者：李素萍杨宏友王震吕蓉郭晓婕方勤李敏刘忠合肥市红十字会中心血站安徽合肥230031 Progenics Cord Blood Cryobank Toronto Ontariuo.Canada

目的探寻冻存树突状细胞(DCs)优化的冷冻保护剂组合。方法配制含不同浓度二甲基亚砜(DM-SO)的3种冷冻保护剂组合,A组:5%DMSO+6%羟乙基淀粉(HES)+4%人血清白蛋白(HAS);B组:10%DMSO+40%FCS;C组:12%DMSO+40%FCS,比较3组冷冻保护剂对人外周... 详细信息

目的探寻冻存树突状细胞(DCs)优化的冷冻保护剂组合。方法配制含不同浓度二甲基亚砜(DM-SO)的3种冷冻保护剂组合,A组:5%DMSO+6%羟乙基淀粉(HES)+4%人血清白蛋白(HAS);B组:10%DMSO+40%FCS;C组:12%DMSO+40%FCS,比较3组冷冻保护剂对人外周血CD14+单个核细胞诱导产生的成熟树突状细胞(mDCs)的冻存效果:采用两步法将mDCs冻存于-80℃冰箱过夜后转移至-196℃液氮气相中放置24 h,再将冻存的mDCs复苏后继续培养,并检测、比较冻存前后DC的形态、存活率、细胞表型及其对同种异体T细胞刺激活性的差异。结果 3组不同组合冷冻保护剂冷冻保存的mDCs复苏后其存活的细胞的形态没有发生明显改变,仍保留其成熟表型,并具备对T细胞的刺激活性。结论 3种不同浓度的DMSO冷冻保存mDCs,5%DMSO+6%HES+4%HSA组合更适宜。

关键词：树突状细胞人外周血冷冻保存 CD14^+ 单个核细胞混合淋巴细胞反应