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人参根提取物对小鼠脾淋巴细胞自噬、增殖和细胞因子分泌的影响及机制研究

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中国药房 2020年第21期31卷 2597-2602页

作者：李芳宇齐滨边帅赵月卢姝言王佳雯赵大庆长春中医药大学药学院长春130117 长春中医药大学人参科学研究院长春130117

目的:研究人参根提取物对小鼠脾淋巴细胞自噬、增殖及细胞因子分泌的影响,并研究其作用机制。方法:将小鼠脾淋巴细胞分为空白对照组、阳性对照组(刀豆蛋白A,5μg/mL)和不同质量浓度人参根提取物组(32、125、500μg/mL,以冻干粉末计)。... 详细信息

目的:研究人参根提取物对小鼠脾淋巴细胞自噬、增殖及细胞因子分泌的影响,并研究其作用机制。方法:将小鼠脾淋巴细胞分为空白对照组、阳性对照组(刀豆蛋白A,5μg/mL)和不同质量浓度人参根提取物组(32、125、500μg/mL,以冻干粉末计)。各组细胞加入相应药物培养48 h后,分别采用吖啶橙染色法检测细胞的自噬情况;采用CCK-8法检测细胞的增殖情况;采用酶联免疫吸附法测定细胞培养液中白细胞介素4(IL-4)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平;采用Western blotting法检测细胞中微管相关蛋白轻链β3(LC3B)、酵母ATG6同源物(Beclin-1)的表达水平以及腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、蛋白激酶B(AKT)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的磷酸化水平。结果:与空白对照组比较,32、125、500μg/mL人参根提取物均能够增加小鼠脾淋巴细胞酸性自噬体的数量(P人参根提取物均可显著提高细胞存活率,显著提高细胞中IL-4、IL-6和TNF-α的水平,显著促进细胞中LC3BⅠ向LC3BⅡ转化,显著上调细胞中Beclin-1蛋白表达水平,显著提高AMPK蛋白的磷酸化水平,显著降低AKT和mTOR蛋白的磷酸化水平,差异均有统计学意义(P人参根提取物能通过激活AMPK、抑制AKT活化来抑制mTOR活性,从而诱导小鼠脾淋巴细胞发生自噬、激活脾淋巴细胞活性、调节细胞因子分泌以发挥免疫增强作用。

关键词：人参根提取物脾淋巴细胞自噬细胞因子免疫增强作用

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人参根提取物增强巨噬细胞RAW264.7的自噬水平并提高其增殖和吞噬能力

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天然产物研究与开发 2021年第3期33卷 380-385页

作者：李芳宇齐滨边帅赵月卢姝言迟迅王佳雯长春中医药大学药学院长春中医药大学人参科学研究院长春中医药大学科研处长春130117

研究人参根提取物对巨噬细胞RAW264.7的增殖能力、吞噬能力和自噬水平的影响以及其相关性。用细胞计数试剂(CCK-8)检测不同浓度的人参根以及加入对巨噬细胞RAW264.7增殖的影响;采用中性红吞噬实验检测人参根提取物对巨噬细胞吞噬活性的... 详细信息

研究人参根提取物对巨噬细胞RAW264.7的增殖能力、吞噬能力和自噬水平的影响以及其相关性。用细胞计数试剂(CCK-8)检测不同浓度的人参根以及加入对巨噬细胞RAW264.7增殖的影响;采用中性红吞噬实验检测人参根提取物对巨噬细胞吞噬活性的影响;采用吖啶橙染色法(AO染色法)检测自噬体的形成;采用免疫印迹法(Western blot)检测自噬相关蛋白LC3B、ATG7的表达变化以及自噬通路相关蛋白AMPK、AKT、mTOR及ULK1磷酸化的变化。引入自噬诱导剂rapamycin和自噬抑制剂CQ探讨人参根提取物影响细胞自噬与细胞增殖、吞噬能力的相关性。结果显示,与空白对照组比较,各组人参根提取物可促进巨噬细胞RAW264.7的增殖及吞噬作用;参根提取物能够增加巨噬细胞RAW264.7酸性自噬体的数量,提高LC3B、ATG7的表达、增加AMPK和ULK1的蛋白磷酸化水平,时降低AKT,mTOR的磷酸化水平。Rapamycin进一步增强巨噬细胞的增殖以及吞噬能力,而CQ则减弱了人参根提取物所引起的巨噬细胞的增殖以及吞噬能力提高。以上结果表明人参根提取物可能通过增强巨噬细胞RAW264.7的自噬水平,提高其增殖和吞噬能力,具有激活巨噬细胞增强机体免疫力的潜在作用。

关键词：人参根提取物巨噬细胞自噬吞噬能力

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人参根提取物及其发酵产物对巨噬细胞RAW264.7氧化损伤的保护机制研究

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人参根提取物及其发酵产物对巨噬细胞RAW264.7氧化损伤的保护机制...

作者：李芳宇长春中医药大学

学位级别：硕士

目的:本研究通过建立体外LPS诱导的RAW264.7细胞氧化损伤模型,开展人参根提取物及其发酵产物对氧化损伤的保护作用研究。在此基础上,探索人参根提取物抗氧化损伤的机制。为人参抗氧化作用进一步研究提供数据支撑。方法:1采用植物乳杆菌... 详细信息

目的:本研究通过建立体外LPS诱导的RAW264.7细胞氧化损伤模型,开展人参根提取物及其发酵产物对氧化损伤的保护作用研究。在此基础上,探索人参根提取物抗氧化损伤的机制。为人参抗氧化作用进一步研究提供数据支撑。方法:1采用植物乳杆菌进行发酵工艺研究,通过考察pH、接菌量、发酵时间三个因素,采用正交试验法筛选最佳发酵工艺,并检测发酵前后人参根提取物的抗氧化活性。2采用荧光探针检测法检测各组细胞内活性氧、超氧化物阴离子、线粒体数目及线粒体膜电位的变化。3人参根提取物对抗氧化相关通路蛋白的表达影响研究采用Western blot法检测Nrf2、Keap1、HO-1、GCLC和GCLM的蛋白表达变化,并研究p62-Keap1-Nrf2通路的关键因子p62沉默前后,细胞内ROS含量和相关蛋白表达变化。4人参根提取物对巨噬细胞RAW264.7细胞自噬水平的影响研究采用AO染色检测法检测各个给药组中细胞酸性囊泡的数目,通过蛋白免疫印迹法检测与自噬相关蛋白p62、LC3B、p-AKT和p-mTOR等的蛋白表达变化。5细胞自噬过程在人参根提取物减弱氧化损伤中起到的作用人参根提取物与自噬调节剂共同作用,采用Western blot法检测抗氧化通路中p62、Keap1和Nrf2核蛋白的表达量。结果:1通过正交试验筛选出人参根提取物发酵最佳工艺为发酵pH5.5,接菌量3.5%,发酵时间24 h,对比发酵前后抗氧化活性,结果显示发酵前后的样品均具有显著的抗氧化活性,发酵前的人参根提取物效果更好。2与LPS对照组相比,随着人参根提取物的浓度增加,细胞内ROS和O的含量降低,并抑制细胞氧化损伤导致的线粒体功能障碍。3人参根提取物可促使p62磷酸化,降低Keap1的蛋白表达量,同时促进Nrf2进入细胞核,并增加HO-1、GCLC和GCLM等抗氧化蛋白的表达量;沉默p62后可显著抑制人参根提取物的抗氧化活性。4人参根提取物可促使自噬相关蛋白LC3B、Beclin1及Atg7的蛋白表达水平增加,降低AKT及mTOR的磷酸化程度。5自噬诱导剂Rapamycin可明显促进p62-Keap1-Nrf2信号通路,而加入自噬抑制剂3-MA则抑制了Nrf2的入核表达。结论:人参根提取物可通过介导p62磷酸化提高Nrf2抗氧化活性,增加相应抗氧化因子的表达量,降低细胞内ROS和O的表达水平,恢复线粒体功能,从而减少LPS诱导的细胞氧化损伤。通过基因沉默实验证明p62在此过程中起到了重要的作用,同时人参根提取物可增加RAW264.7细胞的自噬水平,从而更好地发挥降低氧化损伤的作用。

关键词：人参根提取物 RAW264.7 氧化损伤抗氧化自噬

从分子生物学角度看一些“扶正培本”药物研究的进展

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生理科学进展 1979年第2期 117-123页

作者：刘耕陶中国医学科学院药物研究所药理室

中医的扶正培本理论和滋补药日益引入注意和受到重视。本文从核酸和蛋白质生物合成的调节、药酶诱导和抗应激以增强机体抵抗力三个方面,介绍了人参、五味子、灵芝、黄芪、刺五加等以及几种补阳和滋阴药的药理研究进展。从这些研究结果... 详细信息

中医的扶正培本理论和滋补药日益引入注意和受到重视。本文从核酸和蛋白质生物合成的调节、药酶诱导和抗应激以增强机体抵抗力三个方面,介绍了人参、五味子、灵芝、黄芪、刺五加等以及几种补阳和滋阴药的药理研究进展。从这些研究结果可看出,不少扶正药物对关系到生命过程的细胞的某些代谢和功能有着明显的调节作用,其中一些药物的作用所涉及的问题属于当前分子生物学正在研究的领域。在开展中西医药结合特别是理论上的结合研究中,从分子生物学方面去探讨扶正培本药物作用的本质,是十分重要的。

关键词：人参根提取物大鼠蛋白质扶正培本五仁醇药物作用药物效应刺五加祛风湿药内质网膜抗应激滋阴药补阴药小鼠血清五味子肾上腺皮质激素激素类药物生物合成生化反应动物肝脏肝细胞核戊巴比妥钠分子生物学

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人参茎叶皂甙抗疲劳作用的研究

中医杂志 1981年第9期 57-59+67页

作者：王本祥崔景朝刘爱晶吴素坤吉林省中医中药研究所药理室长春中医学院药理教研室进修生

中医认为人参(Panax ginseng C.A.Mey.)具有“大补元气,生津止渴”之功效,现代药理学研究证明,人参能增强机体的抗应激作用。许多学者均认为人参具有抗疲劳作用,我们曾撤告人参茎叶乙醇提取物同样具有抗疲劳作用,但关于人参茎叶皂甙是... 详细信息

中医认为人参(Panax ginseng C.A.Mey.)具有“大补元气,生津止渴”之功效,现代药理学研究证明,人参能增强机体的抗应激作用。许多学者均认为人参具有抗疲劳作用,我们曾撤告人参茎叶乙醇提取物同样具有抗疲劳作用,但关于人参茎叶皂甙是否具有抗疲劳作用至今未见报告。本文旨在探讨人参茎叶皂甙的抗疲劳作用,现将研究结果报告如下。实验材料实验动物为体重100～120克的雄性大鼠。人参茎叶皂甙为我所植化室从人参茎叶中提得。本品为棕黄色粉未,具有吸湿性,用时以生理盐水配成所需浓度,供口服。

关键词：抗疲劳给药对照组人参茎叶大鼠人参根提取物

反相大孔吸附树脂/亲水相互作用色谱正交法分离纯化人参皂苷

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反相大孔吸附树脂/亲水相互作用色谱正交法分离纯化人参皂苷