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人单核细胞对煤焦沥青烟提取物诱导BEAS-2B细胞TRAF2 mRNA表达的影响

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卫生研究 2017年第3期46卷 439-442,460页

作者：闫英洁宋金燕刘文佳梁肖王威周舫燕贞郑州大学公共卫生学院劳动卫生学教研室郑州450001 新疆巴州轮台县人民医院

目的探讨人单核细胞(THP-1)对煤焦沥青烟提取物(CTPE)诱导BEAS-2B细胞肿瘤坏死因子受体相关因子2(TRAF2)mRNA表达的影响。方法构建THP-1细胞和BEAS-2B细胞的共培养模型,用终浓度3μg/m L的CTPE处理共培养模型,细胞培养至第9代时加入肿... 详细信息

目的探讨人单核细胞(THP-1)对煤焦沥青烟提取物(CTPE)诱导BEAS-2B细胞肿瘤坏死因子受体相关因子2(TRAF2)mRNA表达的影响。方法构建THP-1细胞和BEAS-2B细胞的共培养模型,用终浓度3μg/m L的CTPE处理共培养模型,细胞培养至第9代时加入肿瘤坏死因子-α(TNF-α)中和抗体和C-Jun氨基端激酶(JNK)抑制剂SP600125,继续培养至第15代(CC15),设立共培养模型CC15组、TNF-α中和抗体组、JNK激酶抑制剂SP600125组,同代培养的BEAS-2B细胞为对照组,用Real-time PCR方法检测各组细胞中TRAF2 mRNA的相对表达水平。结果与CC10组相比,TNF-α中和抗体对共培养细胞作用不同时间时TRAF2 mRNA的相对表达量均降低(P细胞不同时间时c-Jun mRNA的相对表达水平与CC10组相比差异均有统计学意义(P细胞中TRAF2 mRNA的表达水平,TRAF2和AP-1之间可能存在负反馈作用。

关键词：人单核细胞煤焦沥青烟提取物肿瘤坏死因子肿瘤坏死因子受体相关因子2 激活蛋白-1

人单核细胞和外周血单个核细胞衍生的巨噬细胞极化特性的比较

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国际口腔医学杂志 2020年第3期47卷 286-292页

作者：刘晔洪润丹王志国刘涵云孟琛达王茹徐全臣青岛大学附属医院口腔内科青岛266003 青岛大学口腔医学院青岛266003 青岛大学附属医院美容整形科青岛266003 青岛大学附属医院感染性疾病科青岛266003

目的在成功建立巨噬细胞(Mφ)体外培养模型基础上,比较不同来源Mφ的极化特性。方法采用密度梯度离心法和免疫磁珠法体外分离并培养外周血单个核细胞(PBMC),经人重组巨噬细胞集落刺激因子诱导后培养出PBMC Mφ。人单核细胞系THP-1在100 ... 详细信息

目的在成功建立巨噬细胞(Mφ)体外培养模型基础上,比较不同来源Mφ的极化特性。方法采用密度梯度离心法和免疫磁珠法体外分离并培养外周血单个核细胞(PBMC),经人重组巨噬细胞集落刺激因子诱导后培养出PBMC Mφ。人单核细胞系THP-1在100 nmol·L^-1佛波酯刺激下分化为THP-1 Mφ。上述两种来源的Mφ分别采用不同的极化因子进行诱导,经50 ng·mL^-1脂多糖+20 ng·mL^-1干扰素-γ诱导形成M1型Mφ(M1 Mφ),经20 ng·mL^-1白细胞介素-4诱导形成M2型Mφ(M2 Mφ)。观察两种来源Mφ的细胞形态,比较两种细胞表面极化标记物(CD86和CD206)和细胞因子[白细胞介素-1β(IL^-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、甘露糖受体C1样蛋白(MRC1)、白细胞介素-10(IL^-10)等]的表达情况。结果两种来源的Mφ经M1极化因子刺激后,TNF-α、IL^-1β的mRNA水平显著上调,CD86表达量增加,与PBMC Mφ相比,THP-1 Mφ中的TNF-α、IL^-1β分泌水平更高;两种Mφ在M2极化因子刺激后MRC1、IL^-10 mRNA水平上调,CD206在PBMC Mφ中表达显著增强,而在THP-1 Mφ中表达没有明显变化。结论THP-1可能更适合进行M1极化的研究,而PBMC可能更适合进行M2极化的研究。

关键词：巨噬细胞极化人单核细胞外周血单个核细胞

降钙素基因相关肽诱导人单核细胞合成趋化因子白细胞介素8的研究

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中华医学杂志 2002年第2期82卷 131-134页

作者：何焱玲丁桂凤夏冬岚朱铁君范少光北京大学人民医院皮肤科北京大学皮肤性病防治中心 100044 北京大学医学部免疫学系北京大学医学部生理学系

目的　探讨神经肽对免疫细胞的神经免疫调节作用。方法　以人单核细胞株为体外实验模型 ,将降钙素基因相关肽 (CGRP)作用于脂多糖活化的单核细胞 ,用ELISA测定其分泌趋化因子白细胞介素 8(IL 8) ,采用逆转录多聚酶联链反应 (RT PCR)检测... 详细信息

目的　探讨神经肽对免疫细胞的神经免疫调节作用。方法　以人单核细胞株为体外实验模型 ,将降钙素基因相关肽 (CGRP)作用于脂多糖活化的单核细胞 ,用ELISA测定其分泌趋化因子白细胞介素 8(IL 8) ,采用逆转录多聚酶联链反应 (RT PCR)检测IL 8mRNA的表达 ,利用 4 8孔微型趋化小室分析单核细胞对中性粒细胞和淋巴细胞的趋化活性 ,并通过受体拮抗剂CGRP8 37了解CGRP对人单核细胞趋化功能的调节作用。结果　CGRP诱导活化的单核细胞分泌表达IL 8蛋白(112 0pg/ml± 15pg/ml)和IL 8mRNA增加 (IL 8/肌动蛋白比值为 1 84 5± 0 5 87) ,用受体拮抗剂CGRP8 37后IL 8减少 (6 70pg/ml± 15pg/ml) ,IL 8/肌动蛋白比值为 1 339± 0 4 34。CGRP增加活化的单核细胞对中性粒细胞和淋巴细胞的趋化活性 ,其趋化指数分别是CI =3 78± 0 0 8和CI =3 4± 0 2 7;受体拮抗剂CGRP8 37则使趋化作用减弱。结论　外周感觉神经末梢的神经肽CGRP通过受体介导 ,作用于单核细胞 ,在一定条件下诱导其合成和分泌趋化因子IL 8。

关键词： CGRP IL-8 人单核细胞趋化因子受体拮抗剂白细胞介素8 降钙素基因相关肽趋化活性分泌表达肌动蛋白

人单核细胞对煤焦沥青烟提取物诱导人永生化支气管上皮细胞c-Jun mRNA表达的影响

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环境与职业医学 2015年第8期32卷 786-789页

作者：刘文佳宋金燕杨维超晋乐飞王威姚武吴卫东吴逸明燕贞郑州大学公共卫生学院劳动卫生学教研室河南450001

[目的]探讨人单核细胞对煤焦沥青烟提取物(CTPE)处理人永生化支气管上皮细胞中c-Jun m RNA表达的影响。[方法]用3μg/m L CTPE刺激人永生化支气管上皮细胞(CTPE组),及人单核细胞共培养的人永生化支气管上皮细胞(CC组),设立二甲基亚砜对... 详细信息

[目的]探讨人单核细胞对煤焦沥青烟提取物(CTPE)处理人永生化支气管上皮细胞中c-Jun m RNA表达的影响。[方法]用3μg/m L CTPE刺激人永生化支气管上皮细胞(CTPE组),及人单核细胞共培养的人永生化支气管上皮细胞(CC组),设立二甲基亚砜对照组;分别收集各组1、5、10、15、20代细胞。将CC组第9代细胞分别常规培养至10代(CC10组)、15代(CC15组),加入100μg/m L肿瘤坏死因子-α中和抗体培养至15代(中和抗体组)。应用实时荧光定量聚合酶链式反应检测各组细胞中c-Jun m RNA的表达水平。[结果]15、20代CC组人永生化支气管上皮细胞c-Jun m RNA相对表达水平高于CTPE组和二甲基亚砜对照组(均P人单核细胞可能通过肿瘤坏死因子-α调控CTPE诱导人永生化支气管上皮细胞c-Jun m RNA的表达。

关键词：煤焦沥青烟提取物 c-Jun mRNA 人单核细胞肿瘤坏死因子-α

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人单核细胞中替代型炎症小体负调控机制研究

人单核细胞中替代型炎症小体负调控机制研究

作者：高玉辉上海大学

学位级别：硕士

先天免疫系统在宿主防御感染中起着关键作用。模式识别受体（pattern recognition receptors,PRRs）对病原体相关分子模式（pathogen-associated molecular patterns,PAMPs）的识别是启动人体先天免疫反应的第一步。一些模式识别受体也... 详细信息

先天免疫系统在宿主防御感染中起着关键作用。模式识别受体（pattern recognition receptors,PRRs）对病原体相关分子模式（pathogen-associated molecular patterns,PAMPs）的识别是启动人体先天免疫反应的第一步。一些模式识别受体也能识别内源性危险相关分子模式（danger-associated molecular patterns,DAMPs）,并引发炎症反应。NLRP3(NOD-like receptor（NLR）family pyrin domain-containing 3)是NOD样受体（NOD-like Receptor,NLR）家族中的一员,由3个结构域构成,包括一个位于羧基末端的亮氨酸重复序列（leucine-rich repeat,LRR）,一个具有ATP酶活性的中心核苷酸结合结构域（Nucleotide-binding and oligomerization domain,NACHT domain）,氨基末端吡啶结构域（pyrin domain,PYD）。目前,NLRP3炎症小体的激活可分为三种途径。经典型和非经典型炎症小体激活的负调控分子机制已经得到了很好的研究。然而,目前对于人类单核细胞中替代型炎症小体激活的负调控机制知之甚少。在本篇论文中,我们使用热灭活的革兰氏阴性菌代替LPS作为刺激物,研究替代型NLRP3炎症小体激活的负调控机制。虽然LPS已被用作激动剂来研究人单核细胞替代型NLRP3炎症小体激活,但目前尚不清楚灭活细菌是否也利用相同的途径来产生轻度炎症反应。与可溶性LPS相比,灭活革兰氏阴性菌作为完整的颗粒存在,因此更具有生理相关性。此外,目前尚不清楚人类先天免疫细胞如何对环境中的非侵入性革兰氏阴性细菌做出反应,以最大限度地减少细胞死亡和局部炎症。尽管生理性炎症对保护性免疫至关重要,但不受控制的炎症可能导致组织破坏和自身炎症或自身免疫疾病。我们首先使用热灭活的革兰氏阴性菌刺激人单核细胞,对热灭活革兰氏阴性菌介导的替代型NLRP3炎症小体激活特征进行了表征。我们发现,热灭活革兰氏阴性菌所介导的替代型NLRP3炎症小体激活表现出与LPS刺激相似的特征,NLRP3炎症小体的激活仅会导致微弱的细胞死亡,这一过程伴随着轻度的IL-1β释放。在刺激的后期,NLRP3炎症小体的激活强度维持不变,表明细胞内负调控机制发挥功能,阻碍了炎症小体的持续激活。通过添加相应的抑制剂,我们证明了caspase-8的切割对于热灭活革兰氏阴性菌所诱导的炎症小体激活是必须的,这一特征同样是LPS刺激所具备的。在小鼠巨噬细胞中,长亚型cFLIP(Long isoforms of Cellular FLICE（FADD-like IL-1β-converting enzyme）-inhibitory protein,cFLIPL)可以抑制LPS所诱导的caspase-8切割。在本研究中,我们构建了特异性过表达cFLIP相应剪切体蛋白的人单核细胞系。通过对相应过表达细胞系添加相应刺激,结果显示,cFLIPL仅部分抑制了替代型炎症小体的激活,这与小鼠巨噬细胞中cFLIPL的功能是不同的。进一步的结果表明,短亚型cFLIP(Short isoforms of Cellular FLICE（FADD-like IL-1β-converting enzyme）-inhibitory protein,cFLIPS)对于人单核细胞中替代型炎症小体的激活起着更加明显的抑制作用,这是通过抑制caspase-8切割成p43/41形式实现的。此外,我们的结果同样证明,转化生长因子激酶1（TGF-Beta Activated Kinase 1,TAK1）在人单核细胞中不仅参与了cFLIP的表达调控,还起着调控caspase-8切割的功能。本研究对于人单核细胞中替代型炎症小体激活特征做了进一步的解释。替代型炎症小体激活后,负调控机制的存在使得炎症反应的激活强度控制在细胞可以承受的范围内,从而使得细胞可以在存活状态下响应外界弱刺激。我们的结论是对替代型炎症小体激活途径细胞死亡方面的进一步理解与补充。

关键词： cFLIPS 革兰氏阴性菌 NLRP3炎症小体人单核细胞

GM-CSF在登革病毒感染人单核细胞中的作用

同方学位论文库评论

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同方学位论文库

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中华微生物学和免疫学杂志 1997年第4期17卷 302-304页

作者：曹艳英郭辉玉暨南大学组织移植与免疫实验中心中山医科大学微生物教研室

以正常人外周血和脐带血单核细胞作为登革Ⅱ型病毒（Ｄ２Ｖ）感染的靶细胞，研究了粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）对Ｄ２Ｖ复制的影响以及单核细胞感染Ｄ２Ｖ后ＧＭ－ＣＳＦ产生能力的变化。结果表明，ＧＭ－ＣＳＦ能增加... 详细信息

以正常人外周血和脐带血单核细胞作为登革Ⅱ型病毒（Ｄ２Ｖ）感染的靶细胞，研究了粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）对Ｄ２Ｖ复制的影响以及单核细胞感染Ｄ２Ｖ后ＧＭ－ＣＳＦ产生能力的变化。结果表明，ＧＭ－ＣＳＦ能增加Ｄ２Ｖ的复制，Ｄ２Ｖ感染能引起人单核细胞产生ＧＭ－ＣＳＦ，它们的量与Ｄ２Ｖ感染量呈正相关。结果提示，ＧＭ－ＣＳＦ在病毒感染过程中起重要作用。

关键词：登革Ⅱ型病毒人单核细胞 GM-CSF

穿透支原体脂质相关膜蛋白诱导人单核细胞产生炎症性细胞因子

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中华传染病杂志 2006年第4期24卷 251-253页

作者：吴移谋曾焱华邓仲良詹利生李忠玉陈超群南华大学医学院病原生物学研究所湖南衡阳421001

穿透支原体（***，Mpe）是从感染人类免疫缺陷病毒的患者球液中分离出来的，被称为艾滋病相关支原体。Mpe能依靠其特殊的顶端结构黏附和入侵宿主的红细胞、CD4^＋T细胞和巨噬细胞等，但关于其对宿主的致病性及其可能的致病机制还不十分... 详细信息

穿透支原体（***，Mpe）是从感染人类免疫缺陷病毒的患者球液中分离出来的，被称为艾滋病相关支原体。Mpe能依靠其特殊的顶端结构黏附和入侵宿主的红细胞、CD4^＋T细胞和巨噬细胞等，但关于其对宿主的致病性及其可能的致病机制还不十分清楚。脂质相关膜蛋白（LAMPs）是暴露在Mpe表面与周围环境各种成分不断相互作用因而影响机体的免疫系统的一种主要蛋白。我们的研究证实，Mpe LAMPs能诱导小鼠巨噬细胞表达诱导性一氧化氮合酶和产生一氧化氮。

关键词：穿透支原体蛋白诱导炎症性细胞因子人单核细胞诱导性一氧化氮合酶脂质人类免疫缺陷病毒 CD4^+T细胞

糖基化终产物对人单核细胞源树突状细胞清道夫受体A表达的影响及其机制的研究

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中华心血管病杂志 2004年第10期32卷 888-892页

作者：贾庆哲葛均波梁春罗育坤黄东王克强陈灏珠上海市心血管病研究所复旦大学附属中山医院心内科 200032 第二军医大学长征医院心内科

目的　探讨糖基化终产物 (AGEs)对人单核细胞源树突状细胞 (MDCs)清道夫受体A(SR A)表达的影响及其机制。方法　用免疫磁珠分离人外周血CD14 + 单核细胞 ,经含重组人粒巨噬细胞集落刺激因子 (rhGM CSF ,10 0ng/ml)和重组人白细胞介素 ... 详细信息

目的　探讨糖基化终产物 (AGEs)对人单核细胞源树突状细胞 (MDCs)清道夫受体A(SR A)表达的影响及其机制。方法　用免疫磁珠分离人外周血CD14 + 单核细胞 ,经含重组人粒巨噬细胞集落刺激因子 (rhGM CSF ,10 0ng/ml)和重组人白细胞介素 4 (rhIL 4 ,5 0ng/ml)的RPMI16 4 0培养 ,使其分化为MDCs,采用RT PCR和Western Blot法 ,分别观察糖基化白蛋白 (AGE BSA)不同蛋白浓度 (0、5 0、10 0、2 0 0、30 0 μg/ml)和不同时间 (0、6、12、2 4、36h)干预 ,以及酪氨酸蛋白激酶抑制剂金雀异黄素 (genistein)干预后 ,MDCsSR A基因和蛋白的表达。结果　与空白对照相比 ,蛋白浓度为 5 0 μg/ml和 10 0 μg/ml干预 2 4h即可分别上调SR AmRNA和蛋白的表达 (P <0 0 5 ) ,2 0 0 μg/ml时达峰值 (P <0 0 1) ,在干预的不同时间组 ,12h和 2 4h可分别上调SR AmRNA和蛋白的表达 (P<0 0 5 ) ,36h达峰值 (P <0 0 1) ,呈明显的浓度和时间依赖性 ,genistein能够完全抑制其作用。结论AGEs能够上调DCsSR A的表达 ,是与其激活酪氨酸蛋白激酶有关 ,这可能是DCs参与动脉粥样硬化发生的机制之一。

关键词：表达干预人单核细胞糖基化终产物树突状细胞上调不同时间清道夫受体A 蛋白浓度 RNA

金属颗粒引起人单核细胞内氧化应激水平变化研究

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医学研究生学报 2014年第8期27卷 842-846页

作者：辛林伟唐际存李朝旭王梨明桂林医学院附属医院创伤手外科桂林医学硕士541001

目的金属假体以其良好的性质在关节置换中得到广泛应用。文中探讨金属假体使用过程中产生的金属颗粒刺激对人单核细胞内氧化应激水平的影响。方法抽取15名健康志愿者外周血,离心后吸取单个核细胞,将细胞进行体外培养,分别加入将钴颗粒... 详细信息

目的金属假体以其良好的性质在关节置换中得到广泛应用。文中探讨金属假体使用过程中产生的金属颗粒刺激对人单核细胞内氧化应激水平的影响。方法抽取15名健康志愿者外周血,离心后吸取单个核细胞,将细胞进行体外培养,分别加入将钴颗粒、铬颗粒、铁颗粒、钛颗粒形成钴、铬、铁、钛颗粒组,并使颗粒浓度最终约达到20×109个/mL。对照组加入等渗盐水。分别在刺激后6、12、24、36、48h检测细胞内活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽氧化物酶(GSH)含量。结果单核细胞与金属颗粒共培养6、12、24、36、48h后,经统计学分析各颗粒组MDA、ROS水平均高于对照组水平(P单核细胞细胞内氧化应激水平升高,降低细胞内的抗氧化物酶水平,钴、铬、铁颗粒的诱导活性强于钛颗粒。氧化应激在金属颗粒介导的骨溶解中可能起到了关键作用。

关键词：金属颗粒人单核细胞氧化应激人工关节