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人乳牙牙髓干细胞体外表达和分泌胶质细胞源性神经营养因子的研究

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北京口腔医学 2011年第5期19卷 245-248页

作者：王劲松汪璇王松灵首都医科大学医学实验与测试中心北京100069 首都医科大学基础医学院生理学系教育部神经变性病重点实验室首都医科大学口腔医学院涎腺疾病中心及基因治疗牙再生分子生物学实验室

目的研究人乳牙牙髓干细胞(SHED)表达和分泌胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)的能力及规律,为进一步探讨SHED治疗帕金森病的作用机制提供依据。方法通过酶消化法体外分离培养人乳牙牙髓中的干细胞,当传代至第3代时,加入神经干细胞的特殊... 详细信息

目的研究人乳牙牙髓干细胞(SHED)表达和分泌胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)的能力及规律,为进一步探讨SHED治疗帕金森病的作用机制提供依据。方法通过酶消化法体外分离培养人乳牙牙髓中的干细胞,当传代至第3代时,加入神经干细胞的特殊培养基Neurobasal A和细胞因子进行神经球诱导培养,通过Real-Time PCR、免疫荧光和ELISA等方法,分别从mRNA和蛋白水平检测体外培养SHED和神经球中GDNF的表达。结果 Real-Time PCR检测结果显示,在mRNA水平,SHED和神经球中都有GDNF的表达。在蛋白水平,免疫荧光结果可见SHED和神经球中都有GDNF的表达;采用ELISA法在培养第3天的SHED培养液和神经球的培养上清中均可检测到GDNF,并随着时间的延长,培养液中GDNF浓度明显升高。结论 SHED具有表达和分泌GDNF的能力。

关键词：人乳牙牙髓干细胞神经球胶质细胞源性神经营养因子

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人乳牙牙髓干细胞治疗肝硬化小鼠模型的研究

肝脏 2021年第5期26卷 510-513页

作者：陆观珠包玉洁白玉盘焉雷许洁上海交通大学医学院附属第九人民医院感染科 200011

目的研究人乳牙牙髓干细胞(SHED)治疗肝硬化小鼠的效果。方法建立CCl4诱导的肝硬化模型,治疗组和对照组小鼠分别经尾静脉注射SHED和0.9%NaCl溶液,4周后评价肝功能指标及肝脏病理学表现。结果SHED治疗组与对照组小鼠总胆红素为(4.73±0.... 详细信息

目的研究人乳牙牙髓干细胞(SHED)治疗肝硬化小鼠的效果。方法建立CCl4诱导的肝硬化模型,治疗组和对照组小鼠分别经尾静脉注射SHED和0.9%NaCl溶液,4周后评价肝功能指标及肝脏病理学表现。结果SHED治疗组与对照组小鼠总胆红素为(4.73±0.06)μmol/L比(6.27±0.50)μmol/L、ALT为(48.33±5.13)U/L比(64.33±3.06)U/L、AST为(107.67±17.56)U/L比(149.00±7.55)U/L和碱性磷酸酶为(142.00±28.93)mmol/L比(240.00±30.51)mmol/L,均较对照组显著好转。治疗组小鼠的体质量为(25.80±1.02)g比(22.86±0.97)g、肝脏湿重为(2.16±0.11)g比(1.88±0.15)g均较对照组显著增加,差异均有统计学意义(t=3.347、4.668,均P<0.05)。SHED治疗组小鼠肝脏组织纤维化及炎症浸润程度较对照组明显改善。结论在肝硬化小鼠模型中,经SHED治疗组小鼠的肝功能及肝脏病理学表现较对照组显著改善。提示SHED对肝硬化具有治疗作用。

关键词：肝硬化肝纤维化人乳牙牙髓干细胞动物模型

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人乳牙牙髓干细胞分化的研究进展

口腔颌面外科杂志 2012年第2期22卷 136-139页

作者：郝永明邹德荣上海交通大学医学院附属第六人民医院口腔科上海200233

人乳牙牙髓干细胞（stem cells from human exfoliated deciduous teeth,SHED）是口腔来源的干细胞,因高度增殖能力和多分化的潜能,而成为再生医学的热点。本文就其多方向分化潜能进行综述。

关键词：人乳牙牙髓干细胞多分化再生医学

转化生长因子β3联合肝素在人乳牙牙髓干细胞向成牙本质样细胞分化中的作用

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实用医学杂志 2014年第12期30卷 1887-1890页

作者：任飞周慧刘建平章锦才徐平平杨勤陈晓春广东省口腔医院南方医科大学附属口腔医院广州市510260 广东省珠海市口腔医院 519000 中山大学孙逸仙纪念医院广州市510120

目的:探讨转化生长因子β3(TGF-β3)诱导人乳牙牙髓干细胞(SHED)向成牙本质样细胞分化的能力。方法:采用酶消化法将人乳牙牙髓分离培养,获得SHED;对体外培养的第3代SHED分别单独加入25 ng/mL的重组TGF-β3,或与肝素联合进行培养;通过Q-... 详细信息

目的:探讨转化生长因子β3(TGF-β3)诱导人乳牙牙髓干细胞(SHED)向成牙本质样细胞分化的能力。方法:采用酶消化法将人乳牙牙髓分离培养,获得SHED;对体外培养的第3代SHED分别单独加入25 ng/mL的重组TGF-β3,或与肝素联合进行培养;通过Q-PCR和Western-blotting方法,分别观察SHED表达成牙本质细胞特异性标志物-牙本质涎磷蛋白(DSPP)基因及其基因表达产物-牙本质涎蛋白(DSP)的情况;通过碱性磷酸酶(AKP)试剂盒检测SHED的AKP活性的改变;细胞爬片行免疫化学染色和茜素红染色。结果:SHED在诱导体系中生长状态良好。25 ng/mL TGF-β3联合10 U/mL肝素作用组的AKP活性明显增强,与TGF-β3单独作用组、肝素单独作用组以及对照组相比差异具有统计学意义(P细胞。

关键词：人乳牙牙髓干细胞转化生长因子β3 肝素成牙本质样细胞

二氢杨梅素对人乳牙牙髓干细胞活性及成骨分化能力影响的初步探究

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二氢杨梅素对人乳牙牙髓干细胞活性及成骨分化能力影响的初步探究

作者：李夏宁郑州大学

学位级别：硕士

目的本研究拟通过体外分离、培养及鉴定人乳牙牙髓干细胞后,探讨二氢杨梅素对人乳牙牙髓干细胞的活性及成骨分化能力的影响,浅探二氢杨梅素与乳牙牙髓干细胞在治疗牙周疾病中的可能性。方法1.采用组织块法及有限稀释法获取人乳牙牙髓干... 详细信息

目的本研究拟通过体外分离、培养及鉴定人乳牙牙髓干细胞后,探讨二氢杨梅素对人乳牙牙髓干细胞的活性及成骨分化能力的影响,浅探二氢杨梅素与乳牙牙髓干细胞在治疗牙周疾病中的可能性。方法1.采用组织块法及有限稀释法获取人乳牙牙髓干细胞,在倒置显微镜下观察细胞的生长状况,免疫荧光组织化学及流式细胞仪检测细胞表面标志物来鉴定细胞来源,CCK-8法绘制细胞生长曲线,并对细胞进行成脂及成骨诱导分化;2.采用CCK-8法、碱性磷酸酶试剂盒及实时荧光定量PCR检测0.02μM、0.1μM、0.5μM、2μM、10μM及50μM浓度的二氢杨梅素对人乳牙牙髓干细胞的活性及骨向分化能力的影响。结果1.镜下观察见细胞在第7 d左右从组织块中爬出,细胞生长状态良好;免疫荧光组织化学结果为:第3代SHED波形丝蛋白在胞浆内表达阳性,角蛋白表达阴性;流式细胞仪检测发现细胞CD146、CD105表达阳性,CD34、CD45表达阴性;第4代SHED生长曲线呈现“S”型;SHED成脂诱导3周后油红O染色见细胞中有红色脂滴形成;SHED成骨诱导4周后茜素红染色形成红染的矿化结节。2.二氢杨梅素对SHED细胞活性的影响CCK-8结果显示:0.02μM、0.1μM、0.5μM、2μM、10μM及50μM浓度的二氢杨梅素在第24 h、48 h及72 h时与不含二氢杨梅素对照组相比,增值能力无显著差异（P＞0.05）,说明试验设置的各浓度的二氢杨梅素对SHED无明显的细胞毒性。3.二氢杨梅素对SHED成骨分化能力的影响⑴二氢杨梅素对SHED碱性磷酸酶活性的影响10μM及50μM浓度的二氢杨梅素组与对照组相比,可促进SHED碱性磷酸酶的活性（P＜0.05）;而0.02μM、0.1μM、0.5μM及2μM浓度的二氢杨梅素组的ALP活性与对照组相比无统计学差异（P＞0.05）。⑵二氢杨梅素对SHED RUNX2及OCN mRNA表达的影响RUNX2 mRNA表达结果为:0.5μM、2μM、10μM及50μM浓度的二氢杨梅素组RUNX2 mRNA的表达与对照组相比要高（P＜0.05）;OCN mRNA表达变化为:2μM、10μM及50μM浓度的二氢杨梅素组与对照组相比,OCN mRNA的表达成上调趋势（P＜0.05）。结论1.组织块法及有限稀释法可成功培养出人乳牙牙髓干细胞,人乳牙牙髓干细胞在一定诱导条件下可向成骨及成脂方向分化;2.一定浓度的二氢杨梅素对人乳牙牙髓干细胞无明显的细胞毒性;3.一定浓度的二氢杨梅素可促进人乳牙牙髓干细胞的骨向分化能力;4.本实验为二氢杨梅素与人乳牙牙髓干细胞结合应用于牙周组织的再生提供了一定的参考价值,但其中的作用机制还需进一步的研究。

关键词：人乳牙牙髓干细胞二氢杨梅素细胞活性成骨分化

不同途径移植人乳牙牙髓干细胞治疗糖尿病大鼠疗效观察

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西北国防医学杂志 2021年第4期42卷 199-208页

作者：谢俊豪金百翰刘婷婷宋敬云霍翠兰井杰黄勤解放军海军军医大学第一附属医院上海长海医院内分泌科上海200433 解放军海军军医大学第一附属医院上海长海医院实验诊断科上海200433

目的:对比不同途径移植人乳牙牙髓干细胞(stem cells from human exfoliated deciduous teeth,SHED)对糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠的疗效,为DM的干细胞疗法寻找合适的移植途径。方法:选取48只SD大鼠单次腹腔注射链佐菌素(streptoz... 详细信息

目的:对比不同途径移植人乳牙牙髓干细胞(stem cells from human exfoliated deciduous teeth,SHED)对糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠的疗效,为DM的干细胞疗法寻找合适的移植途径。方法:选取48只SD大鼠单次腹腔注射链佐菌素(streptozotocin,STZ)建立DM模型后,随机分为1型糖尿病对照组(T1DM组,n=14)、尾静脉输注组(MSC组,n=16)和胰背动脉输注组(DPASC组,n=18);另选12只正常SD大鼠为正常对照组(NC组)。MSC组输注5×106个SHED,DPASC组经胰背动脉输注等量干细胞,T1DM组和NC组通过尾静脉输注0.5 ml生理盐水。1周后,MSC组再次输注5×106个SHED,其余各组输注等量生理盐水。1周后处死大鼠,取胰腺组织行病理学检查。全程记录大鼠日均食量、空腹体质量、空腹血糖变化,成模后及处死前分别行口服葡萄糖耐量试验(oral glucose tolerance test,OGTT)并留取大鼠血清测定糖化血清蛋白(glycosylated serum protein,GSP)、C肽,进行比较。结果:尾静脉和胰背动脉输注SHED均能明显减少DM大鼠食量(均P细胞浸润,增加胰岛素分泌,减少胰高血糖素分泌。结论:不同途径移植SHED,输注相同次数,在相同糖代谢水平,观察相同时间,对血糖改善作用类似,且2次尾静脉移植疗效可能优于单次胰背动脉移植。

关键词：糖尿病人乳牙牙髓干细胞胰背动脉细胞疗法移植途径

富血小板血浆对人乳牙牙髓干细胞的增殖与向成骨分化的调控作用

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临床和实验医学杂志 2019年第13期18卷 1372-1375页

作者：丁钰武志贤惠宏斌陕西省宝鸡市中医医院口腔科陕西宝鸡721000 延安大学附属医院口腔医院口腔内科陕西延安716000

目的探讨富血小板血浆(mPRP)对人乳牙牙髓干细胞(SHED)的增殖与向成骨分化的调控中的作用。方法收集陕西省宝鸡市中医医院门诊6~8岁儿童拔除的乳牙,酶消化法培养SHED,将细胞随机分为:对照组、3μmol/L组和10μmol/L组,依照分组依次以0μ... 详细信息

目的探讨富血小板血浆(mPRP)对人乳牙牙髓干细胞(SHED)的增殖与向成骨分化的调控中的作用。方法收集陕西省宝鸡市中医医院门诊6~8岁儿童拔除的乳牙,酶消化法培养SHED,将细胞随机分为:对照组、3μmol/L组和10μmol/L组,依照分组依次以0μmol/L、3μmol/L、10μmol/LmPRP作用于SHED。采用MTT法检测mPRP对SHED增殖能力的影响,采用碱性磷酸酶(ALP)试剂盘检测mPRP作用于SHED后ALP活性的改变,RT-PCR方法检测细胞内骨涎蛋白与骨钙素mRNA含量的改变。结果①采用mPRP培养的SHED生长形态良好,单细胞形式的成纤维细胞样形态,体积较小,大多数细胞为长梭型或多角型,有些细胞呈现出立方形,细胞胞质均匀,胞体丰满。每5~7天汇合可传代。②mPRP对SHED细胞具有促进其增殖的能力,3μmol/L组与10μmol/L组SHED细胞测得的OD值均高于对照组(P细胞中骨涎蛋白和骨钙素的mRNA含量均高于对照组,且随着mPRP的浓度升高,促进作用逐渐增强(P细胞的增殖和向成骨分化均具有一定的促进作用,随着浓度的增大和作用时间的延长,其促进增殖的能力也随之增强,可见mPRP促进SHED的增殖和向成骨分化具有一定效果。

关键词：人乳牙牙髓干细胞细胞增殖骨向分化牙齿再生

二氢杨梅素对人乳牙牙髓干细胞活性及成骨分化能力影响的初步探究

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二氢杨梅素对人乳牙牙髓干细胞活性及成骨分化能力影响的初步探究

糖尿病对系统移植人乳牙牙髓干细胞归巢和骨再生的影响

中华口腔医学会全科口腔医学专业委员会第八次学术会议

作者：赵红宇李夏宁王一飞刘飞肖剑礴赵哲钟巍潘有条郑州大学第一附属医院郑州大学第一附属医院/郑州大学口腔医学院广州暨南大学生物医药研究开发基地

目的:本研究拟通过体外分离、培养及鉴定人乳牙牙髓干细胞后,探讨二氢杨梅素对人乳牙牙髓干细胞的活性及成骨分化能力的影响,浅探二氢杨梅素与乳牙牙髓干细胞在治疗牙周疾病中的可能性。方法:采用组织块法及有限稀释法获取人乳牙牙髓干... 详细信息

目的:本研究拟通过体外分离、培养及鉴定人乳牙牙髓干细胞后,探讨二氢杨梅素对人乳牙牙髓干细胞的活性及成骨分化能力的影响,浅探二氢杨梅素与乳牙牙髓干细胞在治疗牙周疾病中的可能性。方法:采用组织块法及有限稀释法获取人乳牙牙髓干细胞,采用CCK-8法、碱性磷酸酶试剂盒及实时荧光定量PCR检测0.02μM-50μM浓度的二氢杨梅素对人乳牙牙髓干细胞的活性及骨向分化能力的影响。结果:CCK-8结果显示:0.02μM-50μM浓度的二氢杨梅素在第24 h、48 h及72 h时与不含二氢杨梅素对照组相比,增值能力无显著差异(P>0.05);10μM及50μM浓度的二氢杨梅素组与对照组相比,可促进SHED碱性磷酸酶的活性(P0.05);RUNX2 mRNA表达结果为:0.5μM-50μM浓度的二氢杨梅素组RUNX2 mRNA的表达与对照组相比要高(P人乳牙牙髓干细胞;一定浓度的二氢杨梅素对人乳牙牙髓干细胞无明显的细胞毒性;一定浓度的二氢杨梅素可促进人乳牙牙髓干细胞的骨向分化能力。二氢杨梅素与人乳牙牙髓干细胞结合应用为牙周组织的再生提供了一定的参考价值。

关键词：人乳牙牙髓干细胞二氢杨梅素细胞活性成骨分化

来源： cnki会议评论

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糖尿病对系统移植人乳牙牙髓干细胞归巢和骨再生的影响