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人乳头瘤病毒16型E5基因在宫颈癌发生进程中的动态研究

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四川大学学报（医学版） 2019年第5期50卷 666-671页

作者：李茂圆简洁梁开如喻景瑞李明唐凤祝李婉宜四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室成都610041 贵阳市疾病预防控制中心贵阳550003 四川省妇幼保健院宫颈癌防治中心成都610031

目的观察人乳头瘤病毒(HPV)16型E5基因在宫颈癌发生发展过程中的动态变化情况,探讨E5 mRNA在宫颈癌早期筛查中的临床意义。方法收集2015年9月至2017年12月在四川省妇幼保健院宫颈门诊就诊或行宫颈癌机会性筛查人群的宫颈病变组织石蜡标... 详细信息

目的观察人乳头瘤病毒(HPV)16型E5基因在宫颈癌发生发展过程中的动态变化情况,探讨E5 mRNA在宫颈癌早期筛查中的临床意义。方法收集2015年9月至2017年12月在四川省妇幼保健院宫颈门诊就诊或行宫颈癌机会性筛查人群的宫颈病变组织石蜡标本49例(HPV阳性),按照FIGO标准将收集的宫颈病变标本进行分期:宫颈炎13例,宫颈上皮内瘤样病变(CIN)Ⅰ5例,CINⅡ18例,CINⅢ5例,宫颈癌8例。利用实时荧光定量PCR检测不同病理分级宫颈组织中E5基因的完整度及E5、E6、E7 mRNA的表达水平。结果在49例HPV16阳性感染患者中,CINⅠ宫颈病变组织中E5基因的完整度比宫颈炎、CINⅡ及宫颈癌组织更高(P16阳性感染患者的病变组织中,E5基因的完整度可能与宫颈疾病的发生、发展有关。E5基因有望成为宫颈癌早期筛查的靶基因。

关键词：人乳头瘤病毒16 宫颈病变 E5基因实时荧光定量PCR

人乳头瘤病毒16早期基因E2和E6与核不均一核糖核蛋白E2在宫颈癌变中的作用及其交互效应

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中华预防医学杂志 2020年第1期54卷 92-98页

作者：高雯丁玲宋志超冯美娟刘春亮李小雪宋丽吕元婧王金桃山西医科大学公共卫生学院流行病学教研室太原030001

目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)16早期基因E2和E6与核不均一核糖核蛋白(hnRNP)E2在宫颈癌变中的作用及其交互效应。方法研究对象来源于课题组在山西省介休市建立的"自然人群宫颈病变队列",以2014年6—9月经病理学确诊的正常宫颈(NC)女性、... 详细信息

目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)16早期基因E2和E6与核不均一核糖核蛋白(hnRNP)E2在宫颈癌变中的作用及其交互效应。方法研究对象来源于课题组在山西省介休市建立的"自然人群宫颈病变队列",以2014年6—9月经病理学确诊的正常宫颈(NC)女性、低度宫颈上皮内瘤变(CINⅠ)、高度宫颈上皮内瘤变(CINⅡ/Ⅲ)以及同期在山西医科大学第二医院确诊的宫颈鳞状细胞癌(SCC)病例为研究对象。共纳入257名研究对象,NC、CINⅠ、CINⅡ/Ⅲ、SCC组分别为67名(26.07%)、69例(26.85%)、68例(26.46%)、53例(20.62%)。采用问卷调查收集人口学特征、生活卫生习惯及宫颈病变相关信息,并采集宫颈脱落细胞和宫颈活检组织,检测HPV16的感染、hnRNP E2、HPV16 E2和E6的蛋白表达水平。根据NC组的hnRNP E2、HPV16 E2、E6蛋白表达量及E2/E6比值的M值,将研究对象分为高、低表达组/比值组,采用多因素logistic回归模型分析HPV16早期基因E2和E6、hnRNP E2与宫颈癌变的关联,并应用广义多因子降维模型(GMDR)评价其交互作用。结果NC、CINⅠ、CINⅡ/Ⅲ、SCC组的年龄分别为(47.00±9.07)、(47.64±7.35)、(46.37±8.67)和(51.26±8.03)岁。多因素logistic回归模型分析结果显示,HPV16 E2低表达、E6高表达及E2/E6低比值可导致CINⅡ/Ⅲ[OR(95%CI)值分别为11.11(1.63~75.56)、8.00(1.28~50.04)、9.75(1.22~77.72)]和SCC[OR(95%CI)值分别为14.22(2.11~95.88)、10.33(1.67~64.00)、12.38(1.56~97.91)]的患病风险增加;hnRNP E2低表达可导致CINⅡ/Ⅲ、SCC风险增加[OR(95%CI)值为3.35(1.39~8.10)、5.53(1.54~19.88)]。GMDR模型交互作用分析结果显示,hnRNP E2低表达、HPV16 E2低表达、HPV16 E6高表达在CINⅡ/Ⅲ和SCC组均存在交互作用(P值均16早期基因的异常表达和hnRNP E2低表达均可能增加宫颈癌变的发病风险,且在宫颈癌变的发生发展中存在交互作用。

关键词：人乳头瘤病毒16 子宫肿瘤核糖核蛋白类,核不均一交互效应

人乳头瘤病毒16型融合蛋白的大肠杆菌高效表达及对肿瘤生长的抑制作用

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中华肿瘤杂志 2012年第11期34卷 810-815页

作者：赵莉高孟高见任皎张卉田厚文谭文杰阮力中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所病毒病应急技术中心北京102206

目的在原核表达系统高效表达人乳头瘤病毒（HPV）16型L2N120E7E6融合蛋白，获得具有高表达水平和强免疫原性的HPV治疗性融合蛋白疫苗。方法利用重叠PCR方法构建经密码子优化的HPVl6L2N120E7E6融合基因，然后将其插入pETga原核表达载体... 详细信息

目的在原核表达系统高效表达人乳头瘤病毒（HPV）16型L2N120E7E6融合蛋白，获得具有高表达水平和强免疫原性的HPV治疗性融合蛋白疫苗。方法利用重叠PCR方法构建经密码子优化的HPVl6L2N120E7E6融合基因，然后将其插入pETga原核表达载体中，采用Westernblot法对表达蛋白进行鉴定。对HPVl6L2N120E7E6融合蛋白免疫的小鼠进行特异性抗体和细胞免疫反应的检测，评价其对肿瘤生长的抑制作用。结果密码子优化的HPVl612N120E7E6基因能在原核表达载体pET9a中高效表达，表达水平约占全菌蛋白的48．6％。HPVl6L2N120E7E6融合蛋白免疫的小鼠可检测到针对L2、E7和E6的高滴度抗体，抗体滴度分别为1：40317、1：16000和1：800。CPGl826佐剂和HPVl6L2N120E7E6融合蛋白免疫小鼠后，可产生较强的针对HPVl6E749-57肽特异性T细胞免疫反应和较弱的E6特异性T细胞免疫反应，其分泌γ-干扰素的效应T细胞斑点数分别为（464．00±35．52）个和（47．00±11．67）个。HPVl6L2N120E7E6融合蛋白对小鼠移植瘤生长有明显的抑制作用，有80．0％（8／10）的小鼠不成瘤。结论HPVl6L2N120E7E6融合蛋白可作为治疗HPVl6慢性感染和宫颈癌手术后辅助治疗的候选疫苗。

关键词：人乳头瘤病毒16 宫颈肿瘤疫苗免疫疗法小鼠

人乳头瘤病毒16/18阳性联合阴道镜检查在宫颈细胞学阴性宫颈病变诊断中的应用

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山西医药杂志 2023年第4期52卷 265-269页

作者：宋文榕崔焱潘琳北京市和平里医院妇科 100013

目的观察人乳头瘤病毒(HPV)16/18阳性联合阴道镜检查在宫颈细胞学阴性的宫颈病变诊断中的应用。方法选取我院妇科门诊2018年6月至2021年6月收治的宫颈细胞学检测结果为阴性且HPV 16/18阳性结果的患者120例,所有患者均接受阴道镜检查及... 详细信息

目的观察人乳头瘤病毒(HPV)16/18阳性联合阴道镜检查在宫颈细胞学阴性的宫颈病变诊断中的应用。方法选取我院妇科门诊2018年6月至2021年6月收治的宫颈细胞学检测结果为阴性且HPV 16/18阳性结果的患者120例,所有患者均接受阴道镜检查及宫颈活检联合宫颈管搔刮术(ECC),以病理学诊断为标准,分析诊断效果。结果组织病理学结果显示,120例患者中宫颈炎85例(70.8%),宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅰ15例(12.5%),CINⅡ13例(10.8%),CINⅢ5例(4.2%),宫颈癌2例(1.7%)。120例宫颈细胞学检测结果为阴性且HPV 16/18阳性的患者中,HPV 16型感染90例(75.0%),HPV18型感染20例(16.7%),HPV16/18型同时阳性感染10例(8.3%)。90例HPV 16阳性患者中,宫颈炎72例,CIN 8例,CINⅡ6例,CINⅢ3例,宫颈癌1例;20例HPV 18阳性患者中,宫颈炎10例,CINⅠ5例,CINⅡ4例,CINⅢ1例,宫颈癌0例;10例HPV 16/18同时阳性患者中,宫颈炎3例,CINⅠ2例,CINⅡ3例,CINⅢ1例,宫颈癌1例。HPV 16/18 HPV同时阳性患者≥CINⅡ级比例为50.0%,高于HPV16/18单一阳性患者的11.1%和25.0%,差异具有统计学意义(P16/18阳性患者的宫颈病变准确率为95.0%,灵敏度为96.0%,特异度为85.5%。结论对于宫颈细胞学阴性、HPV 16/18阳性患者宜进一步行阴道镜宫颈活检,以减少宫颈高级别鳞状CIN甚至癌变的漏诊。

关键词：宫颈疾病技术细胞学人乳头瘤病毒16 人乳头瘤病毒18 阴道镜检查

人乳头瘤病毒16型甲基化水平与子宫颈病变程度关系的研究

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中国医科大学学报 2016年第4期45卷 293-297页

作者：王微刘建华王桂丽齐特阮强孙峥嵘中国医科大学附属盛京医院病毒研究室沈阳110004 中国医科大学附属盛京医院病毒检验科沈阳110004

目的定量检测位于人乳头瘤病毒16(HPV16)L1基因3′端和LCR基因18个CpG甲基化水平,了解HPV 16甲基化与子宫颈病变的关系。方法选取本院就诊HPV16阳性正常/低度病变、高度病变、子宫颈癌标本各10例患者,采用重硫酸盐-焦磷酸测序方法分析HP... 详细信息

目的定量检测位于人乳头瘤病毒16(HPV16)L1基因3′端和LCR基因18个CpG甲基化水平,了解HPV 16甲基化与子宫颈病变的关系。方法选取本院就诊HPV16阳性正常/低度病变、高度病变、子宫颈癌标本各10例患者,采用重硫酸盐-焦磷酸测序方法分析HPVl6甲基化与子宫颈病变的关系。结果 Ll基因3′端的位点7089在正常/低度病变标本的甲基化率最高,其次是子宫颈癌,高度病变标本的甲基化率最低,3组比较差异有统计学意义(P=0.006);3组在位点7 134中甲基化率差异有统计学意义(P=0.01),与正常/低度病变标本比较,子宫颈癌及高度病变甲基化率差异均具有统计学意义(P分别为0.038、0.017)。结论 HPVl6 L1基因3′端甲基化位点7089、7134的甲基化水平与子宫颈病变程度存在相关性,HPVl6型DNA甲基化检测可用于临床上子宫颈病变筛查。

关键词：人乳头瘤病毒16 甲基化 CpG位点子宫颈病变焦磷酸测序

人乳头瘤病毒16型转化基因在不同阶段宫颈上皮病变组织中的分布及基因变异特点

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中华肿瘤杂志 2010年第2期32卷 107-110页

作者：张帆丁晓华蔡红兵王华陈长春张帅武汉大学中南医院妇瘤科肿瘤生物学行为湖北省重点实验室 430071 武汉大学医学院医学病毒研究所湖北省肿瘤医院CT室

目的研究人乳头瘤病毒（HPV）16E6、E7和E5基因在湖北地区不同阶段宫颈上皮病变患者组织中的分布以及E6、E7基因的变异特点。方法从124例宫颈癌、17例宫颈上皮内瘤变（CIN）Ⅰ＋CINⅡ级、23例CINDⅠ级和36例慢性宫颈炎患者活检或手术切... 详细信息

目的研究人乳头瘤病毒（HPV）16E6、E7和E5基因在湖北地区不同阶段宫颈上皮病变患者组织中的分布以及E6、E7基因的变异特点。方法从124例宫颈癌、17例宫颈上皮内瘤变（CIN）Ⅰ＋CINⅡ级、23例CINDⅠ级和36例慢性宫颈炎患者活检或手术切除标本中提取组织DNA，用HPV16E6、E7和E5特异性引物进行PCR扩增，对部分扩增的E6和E7产物片段进行测序分析。结果在宫颈炎、CINⅠ＋CINⅡ级、CINⅢ级和宫颈癌组织中，E6基因的阳性率分别为25．0％、29．4％、60．9％和76．6％；E7基因的阳性率分别为16．7％、41．2％、43．5％和61．3％；E5基因的阳性率分别为5．6％、5．9％、30．4％和40．3％。E6、E7和E5基因在不同阶段宫颈上皮病变组织中的阳性率差异均有统计学意义（均P〈0．01）。在80例宫颈癌测序组织中，有47例发生E6基因178位点的T—C突变，突变率为58．8％，相应氨基酸由天冬氨酸（Asp）改变为谷氨酸（Glu）；而在20例宫颈炎和22例CINⅠ～Ⅲ级测序组织中，E6基因178位点的突变率分别为25．0％和31．8％。在30例宫颈癌测序组织中，有21例发生E7基因647位点的A—G突变，突变率为70．0％，相应氨基酸由天冬酰胺（Asn）改变为丝氨酸（Ser）；而在20例宫颈炎和22例CINⅠ～Ⅲ级测序组织中，E7基因647位点的突变率分别为35．0％和40．9％。结论HPV16E6、E7和E5基因与宫颈癌的发生和发展有高度的相关性，但E5基因在不同阶段宫颈上皮病变中可能存在不同程度的缺失。中国湖北地区流行的HPV16病毒株可能为HPV16亚洲型变异株。

关键词：宫颈疾病人乳头瘤病毒16 序列分析突变

人乳头瘤病毒16/18E6蛋白检测在子宫颈癌筛查中的应用

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肿瘤研究与临床 2017年第3期29卷 164-167页

作者：张玉孙立新赵宏伟张永贞王丽霞马朝辉许翊苏芳张瑞锋山西医科大学研究生院太原030001 山西省肿瘤医院妇科太原030013 山西省肿瘤医院流行病室太原030013 山西省肿瘤医院病理科太原030013

目的评价检测人乳头瘤病毒（HPV）16/18 E6蛋白诊断子宫颈癌前病变及子宫颈癌的准确性和有效性.方法选取2014年5月至2015年1月在山西省肿瘤医院妇科就诊的有性生活史的女性439例,其中子宫颈上皮内瘤变（CIN）Ⅱ及以上（CINⅡ、CINⅢ及... 详细信息

目的评价检测人乳头瘤病毒（HPV）16/18 E6蛋白诊断子宫颈癌前病变及子宫颈癌的准确性和有效性.方法选取2014年5月至2015年1月在山西省肿瘤医院妇科就诊的有性生活史的女性439例,其中子宫颈上皮内瘤变（CIN）Ⅱ及以上（CINⅡ、CINⅢ及子宫颈癌）患者299例（病例组）,其余患者为对照组（140例）,所有研究对象均接受了液基薄层细胞检测（TCT）、HPV DNA、HPV 16/18 E6蛋白检测和阴道镜检查.结果病例组TCT、HPV DNA、HPV 16/18 E6蛋白检测的阳性率分别为97.0%（290/299）、94.3%（282/299）、66.9%（200/299）,对照组分别为44.3%（62/140）、21.4%（30/140）、2.9%（4/140）,两组差异均有统计学意义（均P〈0.05）;HPV DNA与HPV 16/18 E6蛋白检测对诊断的灵敏度分别为94.3%、66.9%,特异度分别为78.6%和97.1%;一致率为71.9%（κ=0.21）.病例组中,TCT与HPV DNA联合检测灵敏度为98.9%,特异度为82.8%,准确度为81.7%;TCT与HPV 16/18 E6蛋白联合检测灵敏度为97.9%,特异度为97.1%,准确度为95.0%.结论HPV 16/18 E6蛋白检测可提高子宫颈癌筛查的特异度,可作为HPV DNA检测无法开展或开展困难的欠发达地区的初筛方法,或作为HPV DNA阳性患者分流的方法,以更合理地分配有限的卫生资源.

关键词：人乳头瘤病毒16 人乳头瘤病毒18 宫颈肿瘤普查 E6蛋白

人乳头瘤病毒16型E5蛋白在宫颈癌中表达及其作用的研究进展

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现代预防医学 2017年第5期44卷 950-953页

作者：简洁杨嘉洁李婉宜左凤琼四川大学华西基础医学与法医学院微生物教研室四川省成都市树德中学

宫颈癌是常见的女性恶性肿瘤,其发生发展与HPV的感染密切相关。HPV16是宫颈癌患者中感染率最高的亚型,其编码的早期蛋白E5、E6、E7可刺激宫颈上皮细胞转化成肿瘤细胞。E6、E7蛋白在宫颈癌晚期表达,E5可能在早期表达。E5蛋白的是否表达... 详细信息

宫颈癌是常见的女性恶性肿瘤,其发生发展与HPV的感染密切相关。HPV16是宫颈癌患者中感染率最高的亚型,其编码的早期蛋白E5、E6、E7可刺激宫颈上皮细胞转化成肿瘤细胞。E6、E7蛋白在宫颈癌晚期表达,E5可能在早期表达。E5蛋白的是否表达及其致癌机制与多种因子相关。E5蛋白可作用于细胞生长因子受体通路,下调miRNA196a,并通过与HLAⅠ类分子结合协助感染细胞免疫逃逸,从而促进肿瘤的发生。E5蛋白与E6、E7蛋白协同会发挥更强的致宫颈癌作用。本研究对E5蛋白表达与病毒整合的关系及其对宫颈癌的作用进行了综述。

关键词：人乳头瘤病毒16 宫颈癌 E5蛋白病毒整合

高危型人乳头瘤病毒16阳性患者阴道灌洗液辅助性T细胞、调节性T细胞相关细胞因子变化及其对子宫颈癌发生的预测效果

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肿瘤研究与临床 2023年第7期35卷 500-504页

作者：申鑫鑫豆贝贝刘质斌焦亚楼邢台市人民医院妇三科邢台054000

目的探讨高危型人乳头瘤病毒16(HR-HPV16)阳性患者阴道灌洗液辅助性T细胞(Th)、调节性T细胞(Treg细胞)相关细胞因子变化及其对子宫颈癌发生的预测效果。方法选择2022年1月至12月于邢台市人民医院就诊的200例HR-HPV16阳性患者作为试验组... 详细信息

目的探讨高危型人乳头瘤病毒16(HR-HPV16)阳性患者阴道灌洗液辅助性T细胞(Th)、调节性T细胞(Treg细胞)相关细胞因子变化及其对子宫颈癌发生的预测效果。方法选择2022年1月至12月于邢台市人民医院就诊的200例HR-HPV16阳性患者作为试验组,根据病理检查结果将试验组患者分为无病变组(78例)、低级别鳞状上皮内病变(LSIL)组(49例)、高级别鳞状上皮内病变(HSIL)组(39例)和子宫颈癌组(34例)。选择同期健康体检者100名作为健康对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)双抗夹心法检测各组阴道灌洗液白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-12、IL-17、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素γ(IFN-γ)、转化生长因子β(TGF-β)水平。采用多因素logistics回归分析子宫颈癌发生的危险因素,建立列线图模型。以病理结果为金标准,绘制受试者工作(ROC)曲线,计算曲线下面积(AUC)以评价列线图模型的预测能力。结果试验组患者阴道灌洗液中IL-6、IL-10、IL-17、TNF-α及TGF-β均高于健康对照组,IL-2、IL-12及IFN-γ水平均低于健康对照组,差异均有统计学意义(均P0.05)。无病变组、LSIL组、HSIL组及子宫颈癌组IL-6、IL-10、IL-17、TNF-α、TGF-β、IL-2、IL-12及IFN-γ水平差异均有统计学意义(均P0.05)。logistics回归分析结果显示,HR-HPV16阳性患者阴道灌洗液中低IL-2、高IL-4、高IL-6、高IL-10、低IL-12、高IL-17、高TNF-α、低IFN-γ及低TGF-β表达均为发生子宫颈癌的独立危险因素(均P16阳性患者发生子宫颈癌的因素。ROC曲线分析结果显示,列线图模型预测HR-HPV16阳性患者发生子宫颈癌的AUC为0.945(95%CI 0.901~0.988),预测效能较好。结论HR-HPV16阳性患者阴道灌洗液Th、Treg细胞相关细胞因子水平在子宫颈癌患者中呈现病理性改变,且具有较高的预测子宫颈癌发生的价值。

关键词：宫颈肿瘤子宫颈鳞状上皮内病变人乳头瘤病毒16 T淋巴细胞调节性