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人ⅡA型磷脂酶A_2衍生肽P26抗菌作用与结构修饰的研究

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中国药理学通报 2011年第9期27卷 1300-1304页

作者：何睿林梁宁生广西医科大学附属肿瘤医院临床药学科广西南宁530021

目的比较人ⅱa型磷脂酶a2(phospholipase a2,PLa2)C末端衍生的多肽和经修饰后的环肽对不同细菌在体外的杀菌效应,了解其作用机制。方法根据人ⅡA型PLa2氨基酸顺序C末端26个氨基酸残基,合成直链肽P26,同时将其修饰为环肽P26。采用琼脂铺... 详细信息

目的比较人ⅱa型磷脂酶a2(phospholipase a2,PLa2)C末端衍生的多肽和经修饰后的环肽对不同细菌在体外的杀菌效应,了解其作用机制。方法根据人ⅡA型PLa2氨基酸顺序C末端26个氨基酸残基,合成直链肽P26,同时将其修饰为环肽P26。采用琼脂铺板计数法,将不同浓度的两种多肽分别与6种细菌在37℃孵育2 h,然后铺板并置于37℃恒温箱培养18～24 h,记录每一琼脂板上的菌落数(CFU),并计算多肽作用后的杀菌率。结果两种多肽对革兰阳性菌金黄色葡萄球菌、枯草杆菌和炭疽杆菌有较强的杀菌活性,环肽P26的作用比直链肽P26强4倍左右;对革兰阴性菌大肠杆菌、变形杆菌和绿脓杆菌的杀菌作用较弱,而环肽P26的作用更弱。结论衍生自人ⅡA型PLa2 C末端26个氨基酸残基的肽P26和修饰得到的环肽P26对G+菌有较强的杀菌活性,经修饰成环肽后作用更强,可能与环肽分子带的正电荷更集中有关。

关键词：人ⅱa型磷脂酶a2 C末端抗菌肽直链肽环肽抗菌活性结构修饰

人ⅡA型磷脂酶A_2衍生多肽M17杀菌作用的研究

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中国实验方剂学杂志 2013年第20期19卷 216-219页

作者：淳于柳爽梁宁生广西医科大学附属肿瘤医院药学部南宁530021

目的：研究和比较人ⅱa型磷脂酶a2（phospholipase a2,PLa2）衍生多肽M17,P26和N1-11对不同细菌在体外的杀菌效应.方法：根据人ⅡA型PLa2氨基酸顺序分别设计合成3个肽分子M17（p51-67）,P26（p99-124）,N1-11（p1-11）.采用琼脂铺板计... 详细信息

目的：研究和比较人ⅱa型磷脂酶a2（phospholipase a2,PLa2）衍生多肽M17,P26和N1-11对不同细菌在体外的杀菌效应.方法：根据人ⅡA型PLa2氨基酸顺序分别设计合成3个肽分子M17（p51-67）,P26（p99-124）,N1-11（p1-11）.采用琼脂铺板计数法测定杀菌活性,将不同浓度衍生肽分别与革兰阳性菌（G＋）金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、屎肠球菌和革兰阴性菌（G-）大肠杆菌、绿脓杆菌、鲍曼不动杆菌在37℃孵育2.5h,然后铺板并置于37℃恒温箱培养18 ～24 h,记录每一琼脂板上的菌落数（CFU）,并计算多肽作用后的杀菌率.结果：ⅡA型PLa2M17对枯草杆菌、金黄色葡萄球菌、屎肠球菌的杀菌回归方程分别为：Y=1.464X＋3.795（ED50 6.65 mg·L-1）,Y=1.152X ＋3.419（ED50 23.57 mg·L-1）,Y 0.836X＋3.832（ED50 24.95mg·L-1）；对大肠杆菌、鲍曼不动杆菌、绿脓杆菌的杀菌回归方程分别为：Y=0.877X＋4.054（ED5012.00 mg·L-1）,Y=1.094X＋3.371 （ED50 30.83 mg·L-1）,Y=1.027X＋3.626（ED5021.77 mg·L-1）;M17肽分子对G＋菌与G-菌均有较强的杀菌活性.P26和N1-11对金黄色葡萄球菌的杀菌回归曲方程分别为：Y=0.915X ＋2.766（ED50276.39 mg·L-1）,Y=1.389X＋1.668（ED50250.52 mg·L-1）,P26和N1-11对大肠杆菌的杀菌回归方程为：Y=1.327X＋1.437（ED50 484.18 mg·L-1）,Y =0.881X ＋2.903（ED50 240.02 mg·L-1）；N1-11和P26对G＋菌有较强的杀菌活性,但对G-菌杀菌活性较弱.M17肽分子对金黄色葡萄球菌的杀菌活性强于P26及N1-11,M17肽分子对大肠杆菌的杀菌活性明显强于P26及N1-11.结论：衍生自人ⅡA型PLa2保守区域17个氨基酸残基的肽M17对G＋菌和G-菌均有较强的杀菌活性,这可能与M17肽分子更易于与细菌结合并发挥作用有关.

关键词：人ⅱa型磷脂酶a2 保守区域抗菌肽衍生肽

人ⅡA型磷脂酶A_2N端15肽及其衍生肽的杀菌活性

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广西医学 2019年第6期41卷 729-733页

作者：郭娟李永杰梁宁生广西医科大学附属肿瘤医院药学部南宁市530021

目的研究人ⅱa型磷脂酶a2(PLa2) N端15肽及其衍生肽的杀菌活性。方法以人ⅡA型PLa2一级结构N末端的15个氨基酸残基为模板,分别合成结构不同的多肽,包括PLa2-N15、PLa2-H6R、PLa2-H6R-T12R、PLa2-H6R-T12V、PLa2-N4R-H6R、PLa2-N4R-H6R-T13R、PLa2-N1A-H6R-T12L。采用琼脂铺板计数法,记录并计算不同浓度(8、40、200、1 000μg/ml)的多肽对革兰阳性菌(金黄色葡萄球菌)和革兰阴性菌(大肠埃希菌)的杀菌率。结果多肽浓度为200μg/ml和1 000μg/ml时,6种衍生肽对革兰阳性菌的杀菌率均高于PLa2-N15(均P a2-H6R-T12V与PLa2-N1A-H6R-T12L对革兰阳性菌的杀菌率均高于其他4种衍生肽(均P a2-H6R外,其他5种衍生肽对革兰阴性菌的杀菌率均高于PLa2-N15(均P a2-H6R-T12V与PLa2-N1A-H6R-T12L对革兰阴性菌的杀菌率均高于其他4种衍生肽(均P 人ⅡA型PLa2N端衍生肽的杀菌活性与疏水性氨基酸比例和位置密切相关,将衍生肽第12位氨基酸替换为疏水性氨基酸时杀菌活性最强,在多肽分子结构中的某些位置增加碱性氨基酸亦有助于增强其杀菌活性。

关键词：人ⅱa型磷脂酶a2 N末端衍生肽分子结构杀菌活性

衍生自人ⅡA型磷脂酶A_2碳末端的多肽C-26杀菌作用研究

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中国药房 2011年第25期22卷 2330-2332页

作者：何睿林梁宁生广西医科大学附属肿瘤医院南宁市530021

目的:考察衍生自人ⅡA型磷脂酶A(2ⅡA型PLa2)碳(C)末端的多肽C-26对不同细菌的体外杀菌作用。方法:根据人ⅡA型PLa2C末端26个氨基酸残基的顺序,合成多肽C-26。采用琼脂铺板计数法,将不同浓度的多肽C-26分别与6种细菌(金黄色葡萄球菌、... 详细信息

目的:考察衍生自人ⅡA型磷脂酶A(2ⅡA型PLa2)碳(C)末端的多肽C-26对不同细菌的体外杀菌作用。方法:根据人ⅡA型PLa2C末端26个氨基酸残基的顺序,合成多肽C-26。采用琼脂铺板计数法,将不同浓度的多肽C-26分别与6种细菌(金黄色葡萄球菌、炭疽杆菌、枯草杆菌、大肠杆菌、变形杆菌和绿脓杆菌)在37℃孵育2h,然后铺板并置于37℃恒温箱培养18～24h,记录每一琼脂板上的菌落形成单位(cfu),计算出多肽C-26作用后对细菌的杀菌率。结果:多肽C-26对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、炭疽杆菌等革兰阳性(G+)细菌的杀菌作用较强,其杀灭99%细菌的浓度在250～1000mg·L-1之间;对大肠杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌等革兰阴性(G-)细菌的杀菌作用较弱,其浓度在500mg·L-1时对三者的杀菌率为41%～52%。结论:多肽C-26有杀菌作用,推测其具有与ⅡA型PLa2及其他抗菌多肽相似的杀菌机制。

关键词：人ⅱa型磷脂酶a2 碳末端多肽C-26 杀菌作用

衍生自人ⅡA型磷脂酶A_2 N-端的多肽hPLA_2N_(1-11)杀菌活性的研究

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广西医学 2012年第6期34卷 689-691页

作者：安娜梁宁生广西医科大学附属肿瘤医院药学部南宁市530021

目的观察衍生自人ⅱa型磷脂酶a2(PLa2)N-端的多肽hPLa2N1-11对不同细菌在体外的杀菌效应。方法根据人ⅡA型PLa2N-端11个氨基酸残基的顺序,合成hPLa2N1-11。将不同浓度的多肽分别与革兰阳性菌和革兰阴性菌在温度为37℃中水浴2 h,取出铺板... 详细信息

目的观察衍生自人ⅱa型磷脂酶a2(PLa2)N-端的多肽hPLa2N1-11对不同细菌在体外的杀菌效应。方法根据人ⅡA型PLa2N-端11个氨基酸残基的顺序,合成hPLa2N1-11。将不同浓度的多肽分别与革兰阳性菌和革兰阴性菌在温度为37℃中水浴2 h,取出铺板,置于37℃培养18～24 h,取出并记录每块琼脂板的菌落生成数(CFU),计算杀菌率。结果 hPLa2N1-11对同属革兰阳性(G+)菌的金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、炭疽杆菌的杀菌作用较强;对同属革兰阴性(G-)菌的大肠杆菌、变形杆菌和绿脓杆菌的杀菌作用较弱,人ⅡA型PLa2衍生肽虽然只有原分子1/10的大小,但仍具有与ⅡA型PLa2类似的杀菌效应。结论多肽hPLa2N1-11对革兰阳性菌杀菌作用强,对革兰阴性菌杀菌作用弱,可能具有与ⅡA型PLa2类似的杀菌机制。

关键词：人ⅱa型磷脂酶a2 N-端抗菌活性革兰阳性菌革兰阴性菌