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亮菌多糖对AOM/DSS炎症相关性结肠癌小鼠模型及其肠道菌群的影响

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现代肿瘤医学 2024年第12期32卷 2161-2170页

作者：刘利叶映泉桂仲旋张爽爽张泉张梅安徽医科大学第一附属医院中西医结合肿瘤科安徽合肥230000 安徽医科大学中西医结合肿瘤中心安徽合肥230000 安徽中医药大学研究生院安徽合肥230000

目的:探讨亮菌多糖对氧化偶氮甲烷(AOM)/葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的炎症相关性结肠癌小鼠模型及其肠道菌群的影响。方法:将18只6~8周龄小鼠通过随机数字法分为对照组(Control)、模型组(Model),亮菌多糖干预组(ATPS60 mg/kg)。Model和ATPS... 详细信息

目的:探讨亮菌多糖对氧化偶氮甲烷(AOM)/葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的炎症相关性结肠癌小鼠模型及其肠道菌群的影响。方法:将18只6~8周龄小鼠通过随机数字法分为对照组(Control)、模型组(Model),亮菌多糖干预组(ATPS60 mg/kg)。Model和ATPS组一次性腹腔注射AOM 10 mg/kg,对照组注射等量生理盐水,Model和ATPS组以饮用1.8%DSS水溶液5 d,普通水14 d为个一周期,进行三个循环周期。对照组全程饮用普通饮用水。Model组饮用自由水期间ATPS组小鼠每天进行灌胃处理;71天实验结束。收集小鼠结肠并观察其长度和出血情况,记录肿瘤大小和数目,并对结直肠进行HE和Ki-67染色。Elisa检测Control、Model和ATPS组arrb1、IL-10和TNF-α的表达情况。蛋白免疫印迹法(Western blot,WB)检测各组arrb1蛋白表达情况。同时,采集小鼠粪便,进行DNA提取和菌群测序。结果:AOM/DSS处理后小鼠体重明显下降,与Control组相比Model组小鼠结肠长度缩短明显,P=0.002。ATPS干预一定程度上可以抑制小鼠结肠长度的缩短,P=0.046,差别具有统计学意义。病理组织结果显示,对照组小鼠结肠隐窝形态结构正常,排列整齐,均匀分布。模型组小鼠结肠隐窝结构破坏明显,腺体结构扭曲变形,细胞核深染增大,结肠肿瘤形成。ATPS组可见结肠隐窝基本排列整齐,腺体扭曲变形有所改善,未见核大深染的异性细胞,提示ATPS存在抑制炎癌转化的药理作用。同时,Ki-67染色结果显示ATPS能够抑制结肠细胞异常增殖。Elisa和WB结果显示:Model组较Control组相比arrb1和TNF-α水平升高,IL-10水平降低。经过ATPS治疗后arrb1与TNF-α水平明显下降,IL-10水平表达升高。表明ATPS能够通过干预arrb1的表达治疗结肠炎相关性结肠癌。16S rDNA基因测序发现三组微生物区系丰富度和多样性存在显著差异。Control组、Model组和ATPS组共有的物种数量为69个,Model组特有的物种数量为11个,ATPS组特有的物种数量为6个。小鼠在经过AOM/DSS处理后普雷沃菌科_UCG-001菌属较对照组明显增多。ATPS组较Model组拟普雷沃菌属增加明显。结果发现普雷沃菌科_UCG-001是接受亮菌多糖的小鼠中最丰富的属,在小鼠炎癌转化发展过程中明显减少,表明该属的有益作用。结论:亮菌多糖能够通过调节arrb1和恢复AOM/DSS造成的Alpha多样性指数和群落构成变化,治疗慢性非可控性结肠炎,抑制慢性结肠炎炎癌转化。

关键词：亮菌多糖炎症相关性结肠癌肠道菌群 AOM/DSS

亮菌多糖IPS-B2对小鼠腹腔巨噬细胞活性及其相关基因转录的影响

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中国中药杂志 2008年第11期33卷 1305-1308页

作者：罗霞余梦瑶许晓燕曾瑾江南郑林用四川省中医药科学院中药细胞与分子生物学实验室四川成都610041 四川省农业科学院

目的:观察亮菌多糖IPS-B2对巨噬细胞分泌细胞因子、一氧化氮(NO)生成以及巨噬细胞中白介素-1β(IL-1β),白介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和NO合成关键酶诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因转录的影响。方法:采用ELISA和Griess法检测I... 详细信息

目的:观察亮菌多糖IPS-B2对巨噬细胞分泌细胞因子、一氧化氮(NO)生成以及巨噬细胞中白介素-1β(IL-1β),白介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和NO合成关键酶诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因转录的影响。方法:采用ELISA和Griess法检测IPS-B2对小鼠腹腔巨噬细胞生成细胞因子IL-1β,IL-6,TNF-α和细胞毒效应分子NO的影响;采用SYBR GreenⅠ指示的Real-time RT-PCR技术研究IPS-B2对小鼠腹腔巨噬细胞中IL-1β,IL-6,TNF-α和NO合成关键酶iNOS基因在mRNA转录水平上的作用。结果:IPS-B2能显著提高小鼠腹腔巨噬细胞培养上清液中IL-1β,IL-6,TNF-α和NO的含量,增强IL-1β,IL-6,TNF-α和NO合成关键酶iNOS基因的转录水平。结论:IPS-B2可能是通过提高巨噬细胞分泌生物活性物质,并促进此类生物活性物质的基因转录,从而实现其抗肿瘤的重要作用。

关键词：亮菌多糖腹腔巨噬细胞细胞因子一氧化氮荧光定量PCR

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亮菌多糖对顺铂致小鼠肠黏膜损伤的保护作用

中国新药杂志 2013年第22期22卷 2683-2687,2691页

作者：尤伟张梅李平张峰利苏丽徐媛媛安徽医科大学附属省立医院中医科合肥230001

目的:探讨亮菌多糖(ATPS)对顺铂(DDP)致小鼠小肠黏膜损伤的保护作用。方法:90只雄性小鼠随机分为空白对照组,模型组,ATPS低、中、高剂量组(30,60,120 mg·kg-1),瑞巴派特(45 mg·kg-1)组;腹腔注射DDP 10 mg·kg-1建立小鼠小肠黏膜损伤模... 详细信息

目的:探讨亮菌多糖(ATPS)对顺铂(DDP)致小鼠小肠黏膜损伤的保护作用。方法:90只雄性小鼠随机分为空白对照组,模型组,ATPS低、中、高剂量组(30,60,120 mg·kg-1),瑞巴派特(45 mg·kg-1)组;腹腔注射DDP 10 mg·kg-1建立小鼠小肠黏膜损伤模型,分别用HE染色和免疫组化观察小鼠小肠黏膜病理学改变与小肠黏膜增殖核抗原(PCNA)阳性细胞表达情况;采用ELISA法检测小鼠小肠黏膜组织表皮生长因子(EGF)含量。结果:与空白对照组比较,模型组小鼠小肠黏膜病理损伤积分显著增高;与模型组比较,ATPS 60,120 mg·kg-1组小肠病理损伤积分均显著降低。与模型组比较,ATPS 60,120 mg·kg-1组EGF含量和PCNA阳性细胞率也均显著增高;随着EGF含量增高,黏膜病理损伤和PCNA阳性细胞率分别有下降和增高趋势。EGF与PCNA阳性细胞率之间存在线性相关。结论:ATPS能刺激DDP致小鼠肠黏膜损伤后细胞增殖修复,对肠黏膜损伤起到保护作用,其机制与EGF调节有关。

关键词：亮菌多糖顺铂黏膜损伤表皮生长因子细胞增殖核抗原

亮菌多糖对S_(180)荷瘤小鼠免疫功能的研究

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免疫学杂志 2006年第Z1期22卷 146-148页

作者：赵弋清罗霞刘高阳杨志荣四川大学生命科学学院遗传学系成都610064

目的研究亮菌多糖对荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法用S180瘤细胞建立动物模型,通过腹腔注射观察亮菌多糖对荷瘤小鼠淋巴细胞增殖反应、NK细胞活性及IL-2诱生的影响。结果亮菌多糖能够显著提高荷瘤小鼠淋巴细胞的增殖能力、NK细胞活性、... 详细信息

目的研究亮菌多糖对荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法用S180瘤细胞建立动物模型,通过腹腔注射观察亮菌多糖对荷瘤小鼠淋巴细胞增殖反应、NK细胞活性及IL-2诱生的影响。结果亮菌多糖能够显著提高荷瘤小鼠淋巴细胞的增殖能力、NK细胞活性、显著促进脾细胞产生IL-2。结论亮菌多糖能够显著提高机体免疫调节功能。

关键词：亮菌多糖荷瘤小鼠免疫

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亮菌多糖的分离纯化

中草药 2009年第2期40卷 231-234页

作者：罗霞许晓燕余梦瑶江南曾瑾杨志荣郑林用四川省中医药科学院中药细胞与分子生物学实验室四川成都610041 四川大学四川成都610064 四川省农业科学院四川成都610066

目的通过醇沉、色谱等分离提取技术对发酵得到的亮菌胞内多糖进行分离纯化,并对纯化的多糖进行结构及部分性质研究。方法采用水提、醇沉、除蛋白等方法得到亮菌胞内粗多糖,然后通过离子交换色谱、分子筛色谱对粗多糖进行进一步的分离纯... 详细信息

目的通过醇沉、色谱等分离提取技术对发酵得到的亮菌胞内多糖进行分离纯化,并对纯化的多糖进行结构及部分性质研究。方法采用水提、醇沉、除蛋白等方法得到亮菌胞内粗多糖,然后通过离子交换色谱、分子筛色谱对粗多糖进行进一步的分离纯化,得到单一多糖。同时采用红外光谱法、紫外光谱法、核磁共振法对该单一多糖进行结构研究,确定其单糖组成及糖链的连接方式。结果通过去蛋白、醇沉、离子交换色谱和凝胶滤过色谱的方法得到亮菌胞内多糖IPS-B2,该多糖为直链α-D-(1→6)-吡喃型葡聚糖,不含蛋白质、多肽和氨基酸。结论通过纯化得到了直链α-(1→6-葡聚糖(IPS-B2),该多糖在体内具有较好的抑瘤效果。

关键词：亮菌多糖分离纯化结构

亮菌多糖对S_(180)荷瘤小鼠免疫功能的研究

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四川大学学报（自然科学版） 2007年第4期44卷 887-890页

作者：罗霞赵弋清陈东辉刘高阳许晓燕杨志荣四川大学生命科学学院

通过对荷瘤小鼠腹腔注射亮菌多糖后,观察其对荷瘤小鼠淋巴细胞增殖反应、NK细胞活性及对IL-1I、L-2、TNF-α、IFN-γ诱生的影响.研究结果表明:亮菌多糖能够显著提高荷瘤小鼠NK细胞杀伤活性、对ConA刺激的小鼠淋巴细胞有明显的促进作用,... 详细信息

通过对荷瘤小鼠腹腔注射亮菌多糖后,观察其对荷瘤小鼠淋巴细胞增殖反应、NK细胞活性及对IL-1I、L-2、TNF-α、IFN-γ诱生的影响.研究结果表明:亮菌多糖能够显著提高荷瘤小鼠NK细胞杀伤活性、对ConA刺激的小鼠淋巴细胞有明显的促进作用,提高荷瘤小鼠脾细胞产生IL-2的能力;促进荷瘤小鼠机体细胞分泌TNF-α;明显提高荷瘤小鼠血清中IFN-γ的含量.提示亮菌多糖可通过调节机体免疫功能而间接起到抗肿瘤的作用.

关键词：亮菌多糖荷瘤小鼠免疫

亮菌多糖对GES-1细胞发生EMT的影响及机制研究

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安徽医科大学学报 2018年第6期53卷 868-874页

作者：赵莉莉朱耀东李平张梅安徽医科大学第一附属医院中西医结合肿瘤科合肥230022

目的探讨亮菌多糖(ATPS)对人胃黏膜上皮细胞(GES-1)发生上皮-间质转化(EMT)的影响及相关机制。方法利用IL-8诱导GES-1细胞建立EMT模型,实验设空白对照组、模型组(IL-8诱导组)、实验组[ATPS低剂量组(IL-8诱导1 h后加入ATPS 30 mg/L)、ATP... 详细信息

目的探讨亮菌多糖(ATPS)对人胃黏膜上皮细胞(GES-1)发生上皮-间质转化(EMT)的影响及相关机制。方法利用IL-8诱导GES-1细胞建立EMT模型,实验设空白对照组、模型组(IL-8诱导组)、实验组[ATPS低剂量组(IL-8诱导1 h后加入ATPS 30 mg/L)、ATPS中剂量组(IL-8诱导1 h后加入ATPS 60 mg/L)、ATPS高剂量组(IL-8诱导1 h后加入ATPS 120 mg/L)]。应用光学显微镜观察GES-1细胞形态学变化,Western blot法检测EMT相关蛋白及PDCD4蛋白表达水平,MTT法检测不同浓度ATPS对GES-1细胞存活率影响,细胞划痕实验检测各组GES-1细胞侵袭能力变化。结果光学显微镜观察到IL-8作用24 h后GES-1细胞形态由不规则多边形向梭形转化,细胞排列紊乱,侵袭能力增强,不同剂量亮菌多糖作用后细胞形态可部分恢复,侵袭能力降低。Western blot结果提示:与模型组相比,实验组上皮标记物E-钙黏蛋白增多(P<0.05),间质标志物N-钙黏蛋白、波形蛋白减少(P<0.05),PDCD4表达增多(P<0.05)。细胞划痕实验观察到模型组GES-1细胞与空白组相比侵袭扩散能力明显增强,实验组与模型组相比侵袭扩散能力明显减弱。结论 ATPS可通过抑制GES-1细胞EMT的发生逆转胃癌前病变,其机制可能与促进抑癌基因PDCD4表达有关。

关键词：亮菌多糖胃黏膜上皮细胞 EMT

亮菌多糖对LPS诱导的肠上皮细胞炎性损伤的保护作用及机制探讨

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安徽医科大学学报 2021年第4期56卷 533-538页

作者：张梅吴悦苏丽朱耀东李平王婷安徽医科大学中西医结合肿瘤中心合肥230022 安徽医科大学第一附属医院中西医结合肿瘤科合肥230022

目的观察在脂多糖(LPS)诱导的IEC-6肠上皮细胞损伤的情况下,亮菌多糖(ATPS)对细胞活性、闭合素(Occludin)、细胞紧密连接蛋白1(ZO-1)的影响,并探讨ATPS对肠黏膜屏障损伤的保护机制。方法利用LPS构建的IEC-6肠上皮细胞体外损伤模型,将细... 详细信息

目的观察在脂多糖(LPS)诱导的IEC-6肠上皮细胞损伤的情况下,亮菌多糖(ATPS)对细胞活性、闭合素(Occludin)、细胞紧密连接蛋白1(ZO-1)的影响,并探讨ATPS对肠黏膜屏障损伤的保护机制。方法利用LPS构建的IEC-6肠上皮细胞体外损伤模型,将细胞随机分为对照组、LPS组、LPS+ATPS组、LPS+Matrine组(阳性对照),使用普通显微镜和MTT法观察细胞的活性;免疫荧光和流式细胞术检测细胞的凋亡情况;Western blot检测膜蛋白ZO-1和跨膜蛋白Occludin的表达水平。同时Western blot检测与介导细胞凋亡密切相关的内质网应激(ERS)通路上磷酸化蛋白激酶R样内质网调节激酶(p-PERK)、磷酸化真核细胞翻译起始因子(p-eIF2α)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、内质网应激相关蛋白(CHOP)以及调节肠黏膜损伤重要分子β-抑制蛋白1(Arrb1)的表达水平。结果与对照组、LPS组比较,随着ATPS的浓度增加,LPS+ATPS组中细胞的活性越多且免疫荧光和流式检测也表明细胞的凋亡率减少;Occludin、ZO-1的表达水平增多,明显高于LPS组;与LPS组相比,LPS+ATPS组中p-PERK、p-eIF2α、GRP78、CHOP及Arrb1蛋白的水平降低。结论ATPS可通过抑制Occludin、ZO-1的破坏来保护LPS介导的肠上皮细胞炎性损伤,其机制可能与介导细胞凋亡的内质网应激蛋白以及调节肠黏膜损伤的重要分子Arrb1有关。

关键词： IEC-6肠上皮细胞损伤脂多糖亮菌多糖紧密连接

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亮菌多糖提取工艺优化及体外抗肿瘤活性研究

基因组学与应用生物学 2014年第5期33卷 1104-1109页

作者：蔡凤李铁军解彦刚黄纯高向东南通职业大学化学与生物工程学院南通226007 中国药科大学南京211100

本研究进行了亮菌多糖水提、醇沉工艺条件优选并对其体外抗肿瘤活性进行了研究。以多糖含量为指标,设计正交试验考察料液比、浸提温度、浸提时间、浸提次数对亮菌多糖提取工艺的影响;以多糖得率为评价指标,选乙醇浓度、乙醇加入量、醇... 详细信息

本研究进行了亮菌多糖水提、醇沉工艺条件优选并对其体外抗肿瘤活性进行了研究。以多糖含量为指标,设计正交试验考察料液比、浸提温度、浸提时间、浸提次数对亮菌多糖提取工艺的影响;以多糖得率为评价指标,选乙醇浓度、乙醇加入量、醇沉时间为考察因素,通过正交试验优选醇沉工艺;采用MTT法测定多糖对4种肿瘤细胞增殖的抑制作用。结果显示亮菌多糖最佳浸提工艺为料液比1:10,提取次数为2次,浸提温度100℃,时间6 h;最佳醇沉条件为加4倍量95%乙醇沉淀15 h;醇沉后多糖得率11.768%。活性测试结果显示ATPS对人红白血病细胞和人肺癌细胞株的生长具有抑制作用。优选的提取工艺条件稳定,可为ATPS的生产提供实验依据;亮菌多糖对体外肿瘤细胞的生长具有抑制作用。

关键词：亮菌多糖提取工艺正交试验抗肿瘤活性