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多房棘球绦虫亮氨酰氨肽酶抗原表位的生物信息学预测

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中国高原医学与生物学杂志 2017年第4期38卷 223-234页

作者：杨宝良洛桑达哇刘文磊庞明泉阳丹才让王海久汤锋樊海宁青海大学附属医院肝胆胰外科青海西宁810001 青海大学高原人畜共患病研究所青海西宁810001 青海红十字医院耳鼻咽喉-睡眠医学-甲状腺外科青海西宁810000 青海省包虫病研究重点实验室青海西宁810001 青海大学高原医学研究中心青海西宁810001

目的分析鉴定多房棘球绦虫亮氨酰氨肽酶(Echinococcus multilocularis leucyl aminopeptidase,EmLAP)蛋白质二级结构并预测其优势抗原表位。方法从GenBank中获得多房棘球绦虫亮氨酰氨肽酶氨基酸序列,并通过生物信息学软件SOPMA分析多房... 详细信息

目的分析鉴定多房棘球绦虫亮氨酰氨肽酶(Echinococcus multilocularis leucyl aminopeptidase,EmLAP)蛋白质二级结构并预测其优势抗原表位。方法从GenBank中获得多房棘球绦虫亮氨酰氨肽酶氨基酸序列,并通过生物信息学软件SOPMA分析多房棘球绦虫亮氨酰氨肽酶的蛋白质二级结构特征。进一步通过生物信息学软件IEDB、Syfpeithi、Bcepred、ABCpred预测分析多房棘球绦虫亮氨酰氨肽酶潜在的T细胞及B细胞抗原表位。结果分析出多房棘球绦虫亮氨酰氨肽酶的蛋白质二级结构中α螺旋占比为45.42%、β折叠占比为16.57%、β转角占比为8.58%、无规则卷曲占比为29.43%。预测出亮氨酰氨肽酶具有9个T细胞潜在优势抗原表位,分别为L65-73、L75-84、L174-186、L233-240、L301-308、L333-343、L392-400、L445-454、L482-490;预测出多房棘球绦虫亮氨酰氨肽酶具有20个B细胞潜在优势抗原表位,分别为L13-22、L39-47、L75-84、L98-110、L146-154、L174-186、L183-191、L233-240、L247-254、L281-288、L295-306、L319-328、L330-337、L339-347、L392-400、L397-410、L421-428、L464-473、L493-504、L504-512。结论通过使用生物信息学软件预测出多房棘球绦虫亮氨酰氨肽酶存在有潜在的优势抗原表位,分别为9个T细胞抗原表位和20个B细胞抗原表位,为后续多房棘球绦虫相关亮氨酰氨肽酶的抗原性研究和多表位疫苗的研制奠定了基础。

关键词：多房棘球绦虫亮氨酰氨肽酶生物信息学抗原表位 T细胞表位 B细胞表位

脱氧胆酸钠-环糊精联用促进鼻对胰岛素的吸收(英文)

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Acta Pharmacologica Sinica 2001年第11期22卷 93-98页

作者：张奕蒋新国姚洁中国 200032 复旦大学药学院药剂学研究室复旦大学药学院药剂学研究室上海

目的:评价β-环糊精(β-CD)或二甲基-β-环糊精与脱氧胆酸钠(SDC)联用对胰岛素的吸收促进作用。方法:通过胰岛素降血糖作用来反映其吸收效果;用扫描电镜观察单次给药后的鼻纤毛毒性;测定亮氨酰氨肽酶的活性。结果:0.75％ SDC/β-CD(1:2... 详细信息

目的:评价β-环糊精(β-CD)或二甲基-β-环糊精与脱氧胆酸钠(SDC)联用对胰岛素的吸收促进作用。方法:通过胰岛素降血糖作用来反映其吸收效果;用扫描电镜观察单次给药后的鼻纤毛毒性;测定亮氨酰氨肽酶的活性。结果:0.75％ SDC/β-CD(1:2)联用时,鼻腔给予胰岛素产生的降血糖作用相对缓慢而持久,血糖最低值为初始的(72.6±2.1)％,血糖-时间曲线在1至4h内较平稳。虽然与0.75％ SDC组比较,两组的最低血糖水平有显著性差异,但血糖-时间曲线上面积AOC0-t值无显著性差异(P>0.05)。扫描电镜结果显示大鼠鼻腔给药4h后粘膜纤毛无明显改变。0.01％ SDC促吸收能力很弱,但仍有纤毛毒性。SDC与β-环糊精或二甲基-β-环糊精联用后,亮氨酰氨肽酶的活性抑制率由89.2％下降至60％-70％。结论:β-环糊精与SDC联用后,降低了SDC的纤毛毒性,但仍保留了较强的胰岛素吸收促进作用。这种促进作用并不是由于SDC浓度的降低,而是与亮氨酰氨肽酶的活性被抑制有关。

关键词：脱氧胆酸环糊精类胰岛素吸收鼻粘膜亮氨酰氨肽酶

尿γ-谷氨酰转移酶和亮氨酸氨基肽酶检测在唑来膦酸致肾损伤早期诊断中的作用

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药物不良反应杂志 2015年第6期17卷 412-414页

作者：刘大为刘星张娇蕊郭占文谢晓冬李佳英媛媛郑振东张丽辉季发和沈阳军区总医院浑南门诊部 110168 沈阳军区总医院放射治疗科沈阳军区总医院肿瘤科

目的探讨尿γ-谷氨酰转移酶（γ-GT）和亮氨酸氨基肽酶（LAP）检测在唑来膦酸致肾损伤早期诊断中的作用。方法研究对象为2012年2月至2014年7月在沈阳军区总医院应用唑来膦酸治疗的恶性肿瘤骨转移患者。患者接受唑来膦酸注射液4mg静脉滴... 详细信息

目的探讨尿γ-谷氨酰转移酶（γ-GT）和亮氨酸氨基肽酶（LAP）检测在唑来膦酸致肾损伤早期诊断中的作用。方法研究对象为2012年2月至2014年7月在沈阳军区总医院应用唑来膦酸治疗的恶性肿瘤骨转移患者。患者接受唑来膦酸注射液4mg静脉滴注，1次／25—35d，30min滴完，连续应用3次。每次用药前和用药次日留取患者清晨尿液及静脉血，检测并比较尿γ-GT、LAP和血清肌酐（Scr）水平。结果100例患者纳入研究，男48例，女52例，年龄25—82岁，平均（604-11）岁。第1次应用唑来膦酸前、后尿γ-GT、LAP和Scr分别为（7±5）、（84-5）U／L，（3324-110）、（375±113）nmol·s-1·L-1和（52±12）、（54±12）mol／L；第2次用药前、后分别为（10±4）、（12±5）U／L，（407±104）、（460±126）nmol·S-1·L-1和（51±13）、（53±13）μmol／L；第3次用药前、后分别为（16±8）、（19±9）U／L，（549±159）、（662±199）nmol·S-1·L-1和（52±15）、（53±14）umol／L，3次用药前、后比较尿γ-GT、LAP水平差异均有统计学意义（均P〈0．05），而Scr水平差异均无统计学意义（均P〉0．05）。3次用药后尿γ-GT、LAP水平两两比较差异均有统计学意义（均P〈0．05），Scr水平差异均无统计学意义（均P〉0．05）。结论唑来膦酸致肾损伤患者尿γ-GT、LAP水平变化早于Scr；尿γ-GT、LAP可作为。肾损伤的早期诊断指标。

关键词：唑来膦酸 γ-谷氨酰转移酶亮氨酰氨肽酶急性肾损害

血清亮氨酸氨基肽酶和γ-谷氨酰转肽酶在酒精性肝病诊断中的应用

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国际检验医学杂志 2006年第12期27卷 1146-1147页

作者：朱一堂孙艳李福坤王景阳于庆杰张雷河北省沧州市中心医院检验科 061001

目的探讨亮氨酸氨基肽酶(LAP)和γ-谷氨酰转肽酶(GGT)在酒精性肝病患者诊断和治疗中的意义。方法使用全自动生化分析仪对382例不同临床分型的酒精性肝病患者和100例正常人血清LAP和GGT进行检测,对检测结果进行统计学分析。结果酒精性肝... 详细信息

目的探讨亮氨酸氨基肽酶(LAP)和γ-谷氨酰转肽酶(GGT)在酒精性肝病患者诊断和治疗中的意义。方法使用全自动生化分析仪对382例不同临床分型的酒精性肝病患者和100例正常人血清LAP和GGT进行检测,对检测结果进行统计学分析。结果酒精性肝病患者血清LAP和GGT均有不同程度的增高,以酒精性肝炎组增高最为显著,酒精性肝炎组LAP和GGT的曲线下面积(AUC)分别为0.874和0.715,阳性率分别为87.0%和82.9%。结论血清LAP和GGT对诊断酒精性肝炎具有较高应用价值,二者呈正相关。

关键词：亮氨酰氨肽酶 γ-谷氨酰转移酶肝疾病酒精性

参照CLSI EP方案评价亮氨酸氨基肽酶试剂性能

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国际检验医学杂志 2013年第14期34卷 1872-1874页

作者：沃燕波邹继华黄幸雷张桂春宁波美康生物科技股份有限公司浙江宁波315100

目的参照CLSI EP方案对自主研发的亮氨酸氨基肽酶(LAP)试剂分析性能进行评价,了解其是否满足临床需求。方法参照文件测定试剂空白吸光度、检测限、分析灵敏度、精密度、准确度、线性范围、干扰试验和稳定性等技术指标。结果试剂空白吸... 详细信息

目的参照CLSI EP方案对自主研发的亮氨酸氨基肽酶(LAP)试剂分析性能进行评价,了解其是否满足临床需求。方法参照文件测定试剂空白吸光度、检测限、分析灵敏度、精密度、准确度、线性范围、干扰试验和稳定性等技术指标。结果试剂空白吸光度为0.05,检测限为0.065U/L,分析灵敏度为0.015,高、低值血清批内变异系数分别为0.07%和0.08%,方法比对实验结果Y=1.006 4 X+1.851 4,r2=0.999 6;线性范围为0～300U/L,0.855mmol/L结合胆红素,0.855mmol/L非结合胆红素,0.3g/L维生素C,9.4g/L血红蛋白浓度,14 500FTU乳糜对检测结果无干扰,试剂稳定。结论该试剂分析性能可满足临床实验室的需要。

关键词：亮氨酰氨肽酶性能评价实验室技术和方法

异柠檬酸脱氢酶及亮氨酸氨基肽酶在肝病中的应用

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中国误诊学杂志 2004年第6期4卷 913-914页

作者：孟宪玲吉林市吉林北华大学附属医院检验科 132011

2003-01～2004-01我们对不同肝病136例血清中异柠檬酸脱氢酶(ICDH),亮氨酸氨基肽酶(LAP)进行了检测,结果分析如下.1对象和方法1.1对象本组男81例,女55例.其中急性黄疸性肝炎39例,慢性活动性肝炎22例,肝硬化22例,脂肪肝24例,酒精肝21例,... 详细信息

2003-01～2004-01我们对不同肝病136例血清中异柠檬酸脱氢酶(ICDH),亮氨酸氨基肽酶(LAP)进行了检测,结果分析如下.1对象和方法1.1对象本组男81例,女55例.其中急性黄疸性肝炎39例,慢性活动性肝炎22例,肝硬化22例,脂肪肝24例,酒精肝21例,肝癌8例.正常对照组为本院健康查体合格者30例,两组年龄均在20～70岁.平均年龄58.8岁.

关键词：肝炎病毒性人血液异柠檬酸脱氢酶血液亮氨酰氨肽酶血液

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亮氨酸氨肽酶的种类及临床应用

国际检验医学杂志 2010年第12期31卷 1408-1410页

作者：高应东王书奎南京医科大学附属南京第一医院医学检验科南京医科大学第三临床医学院临床检验诊断学教研室江苏南京210006

亮氨酸氨肽酶是一大类能水解以亮氨酸残基为氨基末端的蛋白质或多肽的酶类,在肝胆疾病及正常妊娠时,其血清浓度升高;当肾小管刷状缘受损时尿液中排泄增加;另外它还可能参与血压调节、主要组织相容性复合物(MHC)抗原递呈等,对亮氨酸氨肽... 详细信息

亮氨酸氨肽酶是一大类能水解以亮氨酸残基为氨基末端的蛋白质或多肽的酶类,在肝胆疾病及正常妊娠时,其血清浓度升高;当肾小管刷状缘受损时尿液中排泄增加;另外它还可能参与血压调节、主要组织相容性复合物(MHC)抗原递呈等,对亮氨酸氨肽酶及其抑制剂的深入研究对临床有实际应用价值。

关键词：亮氨酰氨肽酶胎盘肝疾病肾病

多房棘球绦虫可溶性抗原分离纯化及免疫学鉴定

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多房棘球绦虫可溶性抗原分离纯化及免疫学鉴定

作者：杨宝良青海大学

学位级别：硕士

目的主要对多房棘球绦虫原头节可溶性蛋白进行分离纯化并富集蛋白微量组份,并对各组份进行免疫学鉴定,获得可用于多房棘球蚴病早期诊断的特异性抗原,进一步对其特异性抗原的二级结构及优势抗原表位进行鉴定、分析和预测。方法1.通过使用... 详细信息

目的主要对多房棘球绦虫原头节可溶性蛋白进行分离纯化并富集蛋白微量组份,并对各组份进行免疫学鉴定,获得可用于多房棘球蚴病早期诊断的特异性抗原,进一步对其特异性抗原的二级结构及优势抗原表位进行鉴定、分析和预测。方法1.通过使用HiTrap Q FF及Mono Q 5/50 GL阴离子交换柱,将多房棘球绦虫原头节可溶性抗原进行分离,再将各组份抗原与多房棘球蚴患者、细粒棘球蚴患者及健康人血清进行免疫印迹及质谱鉴定,进一步通过BLAST等生物信息学方法比对以获得特异性高的多房棘球蚴抗原。2.将获得的特异性抗原氨基酸序列通过生物信息学软件SOPMA预测其蛋白二级结构,进一步通过生物信息学软件IEDB、SYFPEITHI、Bcepred和ABCpred预测其潜在的T细胞和B细胞表位。结果1.经HiTrap Q FF及Mono Q 5/50 GL阴离子交换柱富集共获得9个组份,进一步Western-blot结果显示在55kDa处具有良好免疫原性及较高特异性的目的蛋白,经质谱鉴定后,根据其物种来源、得分、氨基酸覆盖率、总氨基酸数、蛋白分子量等筛选出20个蛋白(Top20),进一步对Top20蛋白序列进行BLAST比对,发现多房棘球绦虫来源亮氨酰氨肽酶(leucyl aminopeptidase,LAP)与细粒棘球绦虫来源的氨基酸序列差异最大,相似度为62.63%,且无相似序列的人源及其他寄生虫来源蛋白。2.分析出多房棘球绦虫亮氨酰氨肽酶的蛋白质二级结构中α螺旋占比为45.42%、β折叠占比为16.57%、β转角占比为8.58%、无规则卷曲占比为29.43%。预测出亮氨酰氨肽酶具有9个T细胞潜在优势抗原表位,分别为L65-73、L75-84、L174-186、L233-240、L301-308、L333-343、L392-400、L445-454、L482-490;预测出多房棘球绦虫亮氨酰氨肽酶具有20个B细胞潜在优势抗原表位,分别为L13-22、L39-47、L75-84、L98-110、L146-154、L174-186、L183-191、L233-240、L247-254、L281-288、L295-306、L319-328、L330-337、L339-347、L392-400、L397-410、L421-428、L464-473、L493-504、L504-512。结论1.多房棘球绦虫中LAP具有较高的特异性,其氨基酸序列与细粒棘球绦虫及其他寄生虫相似度较低,可能是潜在的多房棘球蚴病免疫诊断的理想候选抗原;2.多房棘球绦虫亮氨酰氨肽酶具有9个T细胞潜在优势抗原表位及20个B细胞潜在优势抗原表位,并且其中存在4个同时具有B/T双细胞表位,分别为L75-84、L174-186、L233-240、L392-400。可为后续多房棘球绦虫相关亮氨酰氨肽酶的血清学检测、免疫预防及多表位疫苗研发奠定理论基础。

关键词：多房棘球绦虫分离纯化亮氨酰氨肽酶生物信息学抗原表位

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甘胆酸在常见肝脏疾病中的应用

中国医师杂志 2019年第3期21卷 387-391页

作者：梁运来谢旭林任煜培马雅婷王堃易斌中南大学湘雅医院检验科长沙410008

目的观察甘胆酸(CG)在肝脏疾病中的变化情况,评估CG联合总胆汁酸(TBA)及亮氨酸氨基肽酶(LAP)对各类肝病的诊断价值。方法收集本院2016年10月至2017年3月健康体检者、无症状HBV携带者、肝炎患者、胆道梗阻患者、肝硬化患者及原发性肝癌... 详细信息

目的观察甘胆酸(CG)在肝脏疾病中的变化情况,评估CG联合总胆汁酸(TBA)及亮氨酸氨基肽酶(LAP)对各类肝病的诊断价值。方法收集本院2016年10月至2017年3月健康体检者、无症状HBV携带者、肝炎患者、胆道梗阻患者、肝硬化患者及原发性肝癌患者血清样本共210例,分别采用相应试剂盒检测CG及LAP,同时收录患者肝功能、凝血功能等指标,并进行统计学分析。结果 CG水平在各肝病组中均有升高,与正常组及无症状HBV携带组比较差异均具有统计学意义(P<0.05);CG与LAP呈正相关(r=0.380,P<0.01);在肝功能指标中,CG与TB、DB、TBA及AKP等存在相关;在凝血常规中与Fib、TT等相关;多元线性回归分析CG的影响因素,最终引入的变量为LAP及TBA,回归方程为Y=-0.835+0.157X_1+0.312X_2(X_1:LAP;X_2:TBA,R^2=0.685);ROC曲线分析表明CG联合LAP诊断各组肝病的能力最强。结论 CG水平的变化在各种肝病中均具有重要意义,联合LAP诊断各组肝病的能力最强,具有较好的临床应用价值。

关键词：甘胆酸亮氨酰氨肽酶胆汁酸类和盐类肝疾病