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LAMP扩增产物检测方法研究进展及基因编辑技术在其中的应用

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农业生物技术学报 2021年第10期29卷 2016-2030页

作者：白榕白琳琳汪少芸张芳福州大学生物科学与工程学院福建省检验检疫技术研究重点实验室

随着恒温扩增技术的快速发展,扩增产物的检测成为限制该技术快速推广和应用的关键。本文结合环介导恒温扩增技术(loop mediated isothermal amplification, LAMP)特点以及传统检测方法,探究了近几年发展起来的新型产物检测方法,如基于... 详细信息

随着恒温扩增技术的快速发展,扩增产物的检测成为限制该技术快速推广和应用的关键。本文结合环介导恒温扩增技术(loop mediated isothermal amplification, LAMP)特点以及传统检测方法,探究了近几年发展起来的新型产物检测方法,如基于反应体系中副产物生成分析的方法、多重靶标检测为目标的方法,以及利用CRISPR/Cas等的序列特异性的可视化检测方法的原理和应用现状,解析了LAMP产物检测面临的机遇和挑战,旨在为核酸分析产业以及基于核酸扩增分析的应用提供支撑。

关键词：环介导等温扩增技术(LAMP) 产物检测核酸恒温扩增

蔗糖与浓硫酸反应实验的改进及反应产物的定性检测

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化学教学 2017年第6期 60-62页

作者：何婧乔金锁刘延华晋中学院化学化工学院

人教版高中化学教材中，浓硫酸与蔗糖反应实验存在不足之处，反应过程有污染室内环境的有毒气体排出及无法检验蔗糖炭化后的产物。为改进该演示实验，进行了实验探究。把该实验设计在相对封闭的体系中进行，并可对实验中产生的有毒气体... 详细信息

人教版高中化学教材中，浓硫酸与蔗糖反应实验存在不足之处，反应过程有污染室内环境的有毒气体排出及无法检验蔗糖炭化后的产物。为改进该演示实验，进行了实验探究。把该实验设计在相对封闭的体系中进行，并可对实验中产生的有毒气体及水蒸气进行定性检测。结果表明，该反应产物有C、C0、C02、SO2和水蒸气，且产物炭经洗涤、干燥与研磨后，可作为还原CuO的原料，也可用于吸附气体或有色溶液中的色素。

关键词：浓硫酸与蔗糖反应实验改进产物检测实验探究

环介导等温扩增终端产物检测及结果判断的研究进展

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浙江农业科学 2016年第5期57卷 725-729页

作者：付振芳汪小福徐俊锋李玥莹沈阳师范大学化学与生命科学学院辽宁沈阳110034 浙江省农业科学院农产品质量标准研究所浙江杭州310021

环介导等温扩增(LAMP)技术在2000年被日本学者Notomi等提出,并用琼脂糖凝胶电泳及SYBR GreenⅠ荧光定量的方法对其产物、扩增灵敏度进行了分析。为了使LAMP终产物检测更加简单、直观、省时,国内外科学家进行了大量的研究,先后提出浊度... 详细信息

环介导等温扩增(LAMP)技术在2000年被日本学者Notomi等提出,并用琼脂糖凝胶电泳及SYBR GreenⅠ荧光定量的方法对其产物、扩增灵敏度进行了分析。为了使LAMP终产物检测更加简单、直观、省时,国内外科学家进行了大量的研究,先后提出浊度分析法、HNB指示剂、蜡丸染料等简便易操作的LAMP终产物检测及结果判断方法,目前应用较多的是琼脂糖凝胶电泳、浊度分析法、HNB指示剂法与SYBR GreenⅠ指示剂法。本文就近年来LAMP终产物检测及结果判断进行了综述,汇总了近年来LAMP终产物检测方法,以期为未来LAMP终产物检测方法的发展提供新的思路。

关键词：环介导等温扩增(LAMP) 产物检测结果判断

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桦褐孔菌乙酸乙酯提取物柱层析分离产物检测

广州化工 2019年第13期47卷 117-119,122页

作者：李咏欣朱长俊张运洋孙俪容茆轩宇李子龙朱红薇嘉兴学院生物与化学工程学院浙江嘉兴314001 安徽省五河县中医院安徽五河233300

利用超声破壁处理桦褐孔菌子实体,粉末于90%乙醇浸泡168h后过滤。用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取上层溶液得到石油醚、乙酸乙酯、正丁醇粗提物。经检测乙酸乙酯粗提物有较好的抑菌和抗氧化效果。将乙酸乙酯粗提物在硅胶柱中进行梯... 详细信息

利用超声破壁处理桦褐孔菌子实体,粉末于90%乙醇浸泡168h后过滤。用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取上层溶液得到石油醚、乙酸乙酯、正丁醇粗提物。经检测乙酸乙酯粗提物有较好的抑菌和抗氧化效果。将乙酸乙酯粗提物在硅胶柱中进行梯度洗脱得到4种组分,确定其中1,2,3号产物有抑菌作用,4种均有抗氧化作用,2号分离产物抗氧化效果最好。核磁共振检测显示均为萜类化合物。

关键词：桦褐孔菌硅胶柱色谱法产物检测

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激素及代谢产物检测与临床

中国医学文摘（检验与临床） 2006年第2期20卷 121-124页

血清甲状腺激素对判断肝硬化患者肝储备功能及预后的临床价值；AM、CYFRA21-1、NSE和CEA联合检测对恶性与结核性胸腔积液的鉴别诊断价值;

关键词：血清甲状腺激素临床价值产物检测肾素-血管紧张素系统 CYFRA21-1 结核性胸腔积液代谢肝储备功能肝硬化患者多态性研究

SF_6绝缘气体产物检测及吸附处理学习和实践

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通信电源技术 2018年第9期35卷 91-92,95页

作者：任乔林肖洒肖亚平陈黎任贝婷国网湖北省电力有限公司孝感供电公司湖北孝感432000 三峡大学湖北宜昌443002 国网湖北省电力有限公司随州供电公司湖北随州441300

针对SF6绝缘气体产物检测提出了具体检测方法。文中简单介绍了SF6气体的特性及其在电力行业的应用情况,通过对SF6绝缘气体分解产物进行分析,列举了SF6绝缘气体产物检测方法。通过现场试验,运用色谱法对SF6分解产物进行检测,并对SF6分解... 详细信息

针对SF6绝缘气体产物检测提出了具体检测方法。文中简单介绍了SF6气体的特性及其在电力行业的应用情况,通过对SF6绝缘气体分解产物进行分析,列举了SF6绝缘气体产物检测方法。通过现场试验,运用色谱法对SF6分解产物进行检测,并对SF6分解产物吸附处理方法进行了介绍。

关键词： SF6 绝缘气体产物检测吸附处理

呼出气中真菌次级代谢产物检测诊断侵袭性肺曲霉病

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中华结核和呼吸杂志 2015年第2期38卷 92-92页

作者： Koo S Thomas HR Daniels SD 牟向东关键不详北京大学第一医院呼吸和危重症医学科 100034 石河子大学医学院第一附属医院呼吸科 832008

背景：侵袭性肺曲霉病（IPA）是免疫抑制宿主死亡的一个主要原因，部分是由于这种感染早期诊断困难。IPA现有的诊断方法均存在明显的局限性。曲霉菌可产生挥发性的次级代谢产物，可检测患者呼出气中曲霉代谢产物来诊断IPA。方法：应用... 详细信息

背景：侵袭性肺曲霉病（IPA）是免疫抑制宿主死亡的一个主要原因，部分是由于这种感染早期诊断困难。IPA现有的诊断方法均存在明显的局限性。曲霉菌可产生挥发性的次级代谢产物，可检测患者呼出气中曲霉代谢产物来诊断IPA。方法：应用呼出气采集器收集疑诊为IPA患者的呼出气标本，直接应用热解吸气相色谱／质谱仪对最常见的烟曲霉以及其他致病曲霉的挥发性代谢产物进行体外分析。

关键词：侵袭性肺曲霉病次级代谢产物早期诊断产物检测呼出气热解吸气相色谱真菌免疫抑制宿主

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有机农药异丙隆的级联生物降解体系的构建

高等学校化学学报 2017年第8期38卷 1362-1367页

作者：王凤娇李雪莲胡满成李淑妮翟全国蒋育澄陕西师范大学化学化工学院西安710062 陕西师范大学大分子科学陕西省重点实验室西安710062

构建了一个酶促氧化结合活性淤泥处理的级联生物降解有机农药异丙隆的体系.首先,建立了氯过氧化物酶(CPO)催化H_2O_2氧化降解异丙隆的酶处理体系.在最佳反应条件下,异丙隆的降解率可在10 min内达到100%.反应在室温下进行,pH=3.0,所需H_2... 详细信息

构建了一个酶促氧化结合活性淤泥处理的级联生物降解有机农药异丙隆的体系.首先,建立了氯过氧化物酶(CPO)催化H_2O_2氧化降解异丙隆的酶处理体系.在最佳反应条件下,异丙隆的降解率可在10 min内达到100%.反应在室温下进行,pH=3.0,所需H_2O_2浓度为0.2 mmol/L,酶用量极少,仅7 nmol/L.降解体系高效、温和、绿色,无二次污染,极具应用潜力.CPO酶促氧化降解异丙隆的产物用HPLC-MS测定,并进一步根据主要产物推测了降解的途径.结果表明,异丙隆经CPO催化H_2O_2氧化处理后,被分解成较小的4-异丙基苯胺和4-乙基苯胺苄基正离子碎片分子.如果将CPO-H_2O_2酶促氧化作为一种前处理手段,后续与活性淤泥微生物降解过程结合,通过这种二级处理方法可实现含异丙隆污水的化学需氧量(COD)的有效去除,达到含异丙隆污水深度治理的目的.进一步以绿藻Chlorella pyrenoidosa的生长抑制率为评价指标对异丙隆酶催化氧化降解的产物进行了毒性评估,结果表明,随着底物降解率的逐渐增大,降解产物对绿藻的生长抑制率逐渐减小,说明经酶法降解后得到的产物与异丙隆相比毒性降低.

关键词：氯过氧化物酶异丙隆级联生物降解产物检测毒性评估

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环介导等温扩增技术检测醋化醋杆菌

中国食品学报 2016年第5期16卷 230-237页

作者：周巍付晓华章晶晶杨岚王红张岩张志胜河北农业大学食品科技学院河北保定071000 河北省食品质量监督检验研究院河北省食品安全重点实验室石家庄050071 河北师范大学生命科学院石家庄050024

为实现醋酸菌的快速灵敏检测,以醋化醋杆菌为代表菌株,首次使用环介导等温扩增技术(LAMP)进行16S-23S ITS r RNA核酸扩增,通过特异性检测后对反应条件进行优化,并对扩增产物的检测方法进行比较。结果表明,该组引物特异性强,优化的25μL... 详细信息

为实现醋酸菌的快速灵敏检测,以醋化醋杆菌为代表菌株,首次使用环介导等温扩增技术(LAMP)进行16S-23S ITS r RNA核酸扩增,通过特异性检测后对反应条件进行优化,并对扩增产物的检测方法进行比较。结果表明,该组引物特异性强,优化的25μL体系为:6 mmol/L Mg Cl2,1.4 mmol/L d NTPs,内引物(FIP和BIP)各0.8μmol/L,外引物(F3和B3)各0.2μmol/L,1×Bst DNA聚合酶反应缓冲液,8U Bst DNA聚合酶,0.8 mmol/L甜菜碱,2μL DNA模板,用灭菌蒸馏水补足体系。62℃反应30 min即可完成扩增反应,产物经琼脂糖凝胶电泳后检测灵敏度达3.63×101CFU/m L。用肉眼观察白色焦磷酸镁沉淀,仅观察到3.63×102 CFU/m L以上的阳性产物,而在终产物中加入10 000×0.1μL SYBR GreenⅠ后,可通过肉眼观察产物颜色变化,得到与琼脂糖凝胶电泳法相同的检出限,并且缩短了检测时间。

关键词：醋酸菌醋化醋杆菌 LAMP 灵敏度产物检测