检索结果-南通市图书馆

亚洲镰孢菌（Fusarium asiaticum）对氰烯菌酯的抗药性遗传多样性及其适合度研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

亚洲镰孢菌（Fusarium asiaticum）对氰烯菌酯的抗药性遗传多样性...

作者：李斌南京农业大学

学位级别：硕士

亚洲镰孢菌(Fiusarium asiaticum)是我国小麦赤霉病发生最为严重的江淮流域和西南麦区的主要病原菌。氰烯菌酯是目前替代多菌灵防治小麦赤霉病最有效的新型杀菌剂之一。实验室前期研究表明,赤霉病菌肌球蛋白5发生点突变可产生对氰烯菌... 详细信息

亚洲镰孢菌(Fiusarium asiaticum)是我国小麦赤霉病发生最为严重的江淮流域和西南麦区的主要病原菌。氰烯菌酯是目前替代多菌灵防治小麦赤霉病最有效的新型杀菌剂之一。实验室前期研究表明,赤霉病菌肌球蛋白5发生点突变可产生对氰烯菌酯的抗药性。本文研究氰烯菌酯抗性基因型及突变频率,以及肌球蛋白5点突变对病原菌适合度关键性状的影响,对于评估氰烯菌酯抗性风险、研发抗药性分子检测技术和制定抗性治理策略具有重要意义。将亚洲镰孢菌野生型敏感菌株2021在含氰烯菌酯亚致死浓度培养基上驯化培养14天,从接种的1000个菌落上得到239个抗药性突变体,突变频率为23.9%。突变体的氰烯菌酯抗性性状能够在无药剂选择压下继代遗传。根据突变体抗药性水平的分布特征,可以将对氰烯菌酯的抗药性分为低抗、中抗和高抗三种类型。在239个突变体中,表现为低抗、中抗和高抗的比例分别为27.2%,5.0%和67.8%,高、低抗变异频率各占1/3和1/4以上。亚洲镰孢菌在离体条件下对氰烯菌酯产生较高频率的高水平抗性变异,揭示了生产上存在该杀菌剂快速产生抗药性的风险。随机测定82个氰烯菌酯抗性突变体肌球蛋白5的基因序列,与出发敏感菌株2021相比,各突变体在肌球蛋白5碱基序列的不同位置上发生了变异。其中表现为低抗的突变基因型有 A135T、V151M、P204S、I434M、A577T、R580G/H 和 I581F;表现为中抗的突变基因型有S418R、I424R和A577G;表现为高抗的突变基因型有K216R/E、S217P/L和E420K/G/D。在82个氰烯菌酯抗性突变体中,肌球蛋白5马达域的13个氨基酸残基发生了 18种变异。其中217位和420位氨基酸残基发生突变的频率及导致的抗药性水平最高。从82个测序的突变体中选取突变频率较高、导致低、中、高抗的代表性的菌株,研究了抗药性变异对菌丝生长、无性生殖、有性生殖及致病力的影响。结果表明,抗药性突变体对小麦胚芽鞘的致病力没有显著性变化,无性生殖能力有所降低,从而可能影响抗性菌株在田间的竞争力。比较敏感亲本菌株2021与其肌球蛋白5基因被不同点突变基因同源置换突变体的菌丝生长、温度敏感性、无性和有性生殖、致病力及DON毒素生物合成能力,结果表明各单点突变体保持了与原诱导突变体一致的氰烯菌酯抗性水平;突变肌球蛋白5同源置换突变体与敏感亲本菌株相比,菌丝生长速率和致病力无显著性差异,但各突变体生长速率随温度降低而下降,15℃时达显著差异;无性生殖能力与有性生殖能力降低;DON毒素生物合成能力因不同点突变基因型而异,但氰烯菌酯高抗基因型S217P/L和E420K/G/D的DON毒素含量有所降低。基于亚洲镰孢菌对氰烯菌酯抗药性的变异频率、抗药性水平、病害循环特征及对适合度关键性状的影响分析,氰烯菌酯抗性风险为中高等级。

关键词：亚洲镰孢菌氰烯菌酯抗药性遗传多样性适合度

亚洲镰孢菌（Fusarium asiaticum）三个特有基因生物学功能及其潜在药靶发掘

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

亚洲镰孢菌（Fusarium asiaticum）三个特有基因生物学功能及其潜...

作者：陶继庭南京农业大学

学位级别：硕士

小麦赤霉病(Fusarium head blight,FHB)是发生在禾谷类作物上的重要病害,在全世界各个小麦产区都有发生,且在温和潮湿的地区危害最为严重。在我国,赤霉病一直是西南冬麦区、东北春麦区和江淮流域最重要的小麦病害之一。我国的小麦赤霉... 详细信息

小麦赤霉病(Fusarium head blight,FHB)是发生在禾谷类作物上的重要病害,在全世界各个小麦产区都有发生,且在温和潮湿的地区危害最为严重。在我国,赤霉病一直是西南冬麦区、东北春麦区和江淮流域最重要的小麦病害之一。我国的小麦赤霉病的病原菌主要为亚洲镰孢菌(Fusarium asiaticum)和禾谷镰孢菌(***)。前者主要分布于我国比较温暖潮湿的长江流域,其年平均气温在15℃以上;后者主要存在于长江流域以北的区域,其年均气温小于15℃,如河北省、山东省等。本研究以亚洲镰孢菌(***)野生型菌株2021和PH-1(***)为对象,在对亚洲镰孢菌2021单孢菌株进行全基因组测序组装和分析基础上,研究了 2021菌株中的三个特有基因,即编码二氢吡啶二羧酸合成酶的FaDHDPS1、编码豌豆素脱甲基酶的FaPDA1和FaPDA2,旨在揭示其在2021菌株生长发育过程、***在我国区域化分布的机制,发掘其作为药靶的可能性。具体结果如下:(1)在植物和细菌体内,二氢吡啶二羧酸合成酶是天冬氨酸途径分支中合成L-赖氨酸途径的第一个酶,其作用是催化丙酮酸和(S)-ASA合成L-2,3-二氢吡啶二羧酸(HTPA)。但是,该酶的功能在真菌中还鲜有报道。FaDHDP1基因从白僵菌(Beauveria bassiana)水平转移而来。构建了FaDHDPS1基因的敲除体、回复体以及GFP标记回复体,结果表明:FaDHDPS1沿基因敲除体药敏性与出发菌株2021相比没有显著变化;FaDHDPS1基因的缺失,导致突变体细胞壁的完整性丧失,产生分生孢子数量、致病力下降、毒素相关基因表达量、菌丝体穿透能力、低温敏感性均显著下降;在MM培养基、缺碳或缺氮的MM培养基上,突变体均表现生长缺陷;在外源添加丙酮酸钠的MM培养基上,突变体生长速率加快,但菌落大小和出发菌株2021没有明显区别;该基因主要定位于细胞质的脂质中,在新生孢子中表达量很多,随着孢子的萌发,其逐渐弥散于细胞质中。(2)豌豆素脱甲基酶是由细胞色素P450超基因家族中的CYP57A家族编码,其主要作用是解毒植物产生的植物抗毒素豌豆素。分别构建了FaPDA1和FaPDA2的敲除体和回复体,两个基因敲除体在药敏性和产孢能力与出发菌株2021相比都没有显著变化。但两个敲除体的致病力下降显著,产毒量减少,毒素基因表达量下降,同时其穿透力明显下降。以上结果表明,这两个基因在亚洲镰孢菌的致病力方面有着重要作用。

关键词：亚洲镰孢菌功能分析 FaDHDPS1 FaPDA1 FaPDA2

亚洲镰孢菌（Fusarium asiaticum）β-微管蛋白基因的点突变及其内含子对多菌灵药敏性的调控机制研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

亚洲镰孢菌（Fusarium asiaticum）β-微管蛋白基因的点突变及其...

作者：罗舜文南京农业大学

学位级别：硕士

亚洲镰孢菌(Fusarium asiaticum)是我国小麦赤霉病发生最为严重的江淮流域和西南麦区的主要病原菌。近年来,随着全球气候变暖和耕作制度的改变,小麦赤霉病在我国长江中下游和黄淮冬麦区呈逐年加重的趋势。该病害侵染主要发生在小麦抽穗... 详细信息

亚洲镰孢菌(Fusarium asiaticum)是我国小麦赤霉病发生最为严重的江淮流域和西南麦区的主要病原菌。近年来,随着全球气候变暖和耕作制度的改变,小麦赤霉病在我国长江中下游和黄淮冬麦区呈逐年加重的趋势。该病害侵染主要发生在小麦抽穗扬花期,靠风雨传播,引起穗腐。该病害不仅会造成严重的产量损失,而且该病菌产生的DON毒素对人畜有毒害作用。当前常用的杀菌剂多菌灵防治小麦赤霉病已产生严重的抗药性,因此研究它的抗性机理并如何避免产生抗药性成了一项重大课题。已知亚洲镰孢菌中存在两个β-微管蛋白基因:β1-tub和β2-tub基因,其中β1-tub基因编码的氨基酸序列与其它真菌的β-微管蛋白基因的同源性在90%以上,但只含3个内含子;而β2-tub基因编码的氨基酸序列与β1-tub基因的同源性只有77%,内含子有6个,与其它真菌的β-微管蛋白基因数量相同。先前的研究表明,亚洲镰孢菌对多菌灵的抗药性是由于β2-tub基因的点突变引起的,β1-tub基因的缺失也会导致杀菌剂的抗性水平大大增加。然而,我们对β1-tub基因的点突变知之甚少。在本文研究中,我们证明β1-tub基因的第3位和第193位氨基酸点突变能影响对多菌灵的敏感性。实验结果显示,在敏感菌株中,β1-tub点突变S-β1E3K和S-β1V193F都能减慢菌丝生长,且影响菌株对多菌灵的药敏性,S-β1E3K对多菌灵的敏感性增加,而S-β1V193F对多菌灵的敏感性降低;在以高抗菌株JT04为出发菌株中,β1-tub点突变R-β1E3K和R-β1V193F都能减慢菌丝生长,而且对多菌灵的抗药性比亲本菌株更高。qRT-PCR结果显示,点突变S-β1E3K、R-β1E3K和R-β1-V193F,它们β1-tub的mRNA表达量水平显著上调,但在S-β1V193F突变体中是β2-tub的mRNA表达量水平显著上调。分子对接模型分析,显示点突变E3K和V193F的β1-tub与多菌灵分子亲和力下降。亚洲镰孢菌β2-tub基因是苯并咪唑类杀菌剂的重要靶基因,李雁军通过分别敲除β2-tub基因的6个内含子发现缺失第4个内含子显示对杀菌剂多菌灵的药敏性增加,缺失第1个或第2个内含子表现出对多菌灵的敏感性下降。在本章研究中,我们深入探究了第4个内含子的分子机制,通过分段敲除、序列增长和序列替换的方法获得突变体,找到了一些比较重要的内含子序列。结果表明,敲除第4个内含子的第2段(第13～24bp,命名为Δβ2i4-2)显示菌丝生长变慢,对多菌灵的药敏性增加;敲除第1段(第1～12bp,Δβ2i4-1)、第 4 段(第 37～48bp,Δβ2i4-4)和第 5 段(第 49～58bp,Aβ2i4-5)导致β2-tub基因的cDNA序列移码突变,菌丝生长显著变慢,对多菌灵变得非常敏感;而序列增长和替换对亚洲镰孢菌的生物表型和药敏性没有显著影响。此外,qRT-PCR显示β2-tub基因的mRNA转录水平在Δβ2i4-2突变体中显著下调,在序列增长突变体中显著上调;而在Δβ2i4-1等cDNA序列移码突变体中虽然不表达β2-tub基因的mRNA,但β1-tub基因的mRNA转录水平显著上调。总体而言,本章研究结果表明,亚洲镰孢菌内含子的两端含有较长的剪接识别区域,第2段(12bp)内含子序列决定了第4个内含子的调控作用。基于RIP技术,实验室前期实验发现与亚洲镰孢茵β2-tub mRNA水平互作蛋白基因有很多,但有些互作强度高的假定蛋白还没有功能性地表征。在本文研究中,我们描述了亚洲镰孢菌β2-tub mRNA水平互作蛋白FaSed1p和FaChr基因的生物学功能。结果表明,FaSed1p和FaChr基因敲除体(命名分别为AFaSed1p和ΔFaChr)菌丝生长正常,但产孢量显著下降;而且ΔFaSed1p致病力显著下降,菌丝穿透能力下降,外源添加胁迫因子过氧化氢、刚果红和氯化钠也会显著抑制菌丝生长。另外,ΔFaSed1p和ΔFaChr不影响对多菌灵和戊唑醇的药敏性,表明FaSed1p和FaChr基因虽然与β2-tub mRNA水平互作强度高,但不调控对多菌灵和戊唑醇的药敏性,而FaSed1p基因在细胞壁的稳定方面表现重要作用。

关键词：亚洲镰孢菌 β-微管蛋白基因点突变内含子多菌灵

茎基腐亚洲镰孢菌侵染抗感小麦品种的组织病理学观察

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

植物病理学报 2017年第2期47卷 203-213页

作者：赵芹张向向邓渊钰李伟孙海燕陈怀谷江苏农业科学院植物保护研究所南京210014

小麦茎基腐是由多种镰孢菌侵染的世界性土传病害,亚洲镰孢菌(Fusarium asiaticum)是我国冬小麦主产区茎基腐镰孢菌的优势种群,对小麦生产造成巨大损失。本研究利用绿色荧光蛋白报告基因标记亚洲镰孢菌,研究其侵染抗感小麦的病理组织学过... 详细信息

小麦茎基腐是由多种镰孢菌侵染的世界性土传病害,亚洲镰孢菌(Fusarium asiaticum)是我国冬小麦主产区茎基腐镰孢菌的优势种群,对小麦生产造成巨大损失。本研究利用绿色荧光蛋白报告基因标记亚洲镰孢菌,研究其侵染抗感小麦的病理组织学过程,建立了茎基腐病菌与寄主互作的直观性的研究体系,对病害防治及抗病育种具有重要意义。基于PEG-CaCl_2介导原生质体转化法将gfp导入亚洲镰孢菌株CF0915,对转化子进行荧光表达、PCR验证、遗传稳定性、生长特性及致病力分析,选取与野生型表现相近的转化子进行侵染分析。结果表明,绿色荧光蛋白基因(gfp)与潮霉素基因(hyg)PCR扩增表明gfp已整合入真菌基因组中,转化子菌丝与分生孢子表现强烈绿色荧光信号,gfp能够在转化子中稳定遗传,菌落形态、生长速度及致病力与野生型菌株无显著差异;将gfp标记病菌分生孢子接种感病品种1 d后,大量孢子附着于根毛及根表皮细胞开始萌发,接种2 d后观察到抗性品种分生孢子萌发;感病品种接种3 d后,菌丝直接侵入表皮细胞或沿表皮细胞间层定殖生长,扩展至皮层组织,8 d后菌丝从根部迅速扩展至茎基部,至第10 d大量菌丝充塞根皮层细胞,叶鞘维管束也被菌丝侵染,并产生大量大型分生孢子,植株表现褐色病斑,14 d后根部及茎维管束被大量菌丝体填充,而后产生大量厚垣孢子,至25 d大部分感病品种幼苗萎蔫死亡;与感病品种相比,抗性品种在整个侵染过程中表现时间滞后。本研究对引起茎基腐病的亚洲镰孢菌侵染小麦的组织学过程观察,为病菌致病机理的阐释及抗病资源的利用提供了重要理论依据。

关键词：小麦茎基腐病亚洲镰孢菌绿色荧光蛋白组织病理学观察侵染过程

去氢木香内酯对亚洲镰孢菌生长和产毒的影响机制研究

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

去氢木香内酯对亚洲镰孢菌生长和产毒的影响机制研究

作者：毕燕四川农业大学

学位级别：硕士

亚洲镰孢菌(Fusarium asiaticum)是小麦赤霉病的主要致病菌之一,能侵染小麦等多种禾谷类作物。该病原菌不仅使小麦产量和质量下降,而且会在小麦籽粒中积累大量的单端孢霉烯族毒素,如雪腐镰孢菌烯醇(Nivalenol,NIV),其能污染多种食品和饲... 详细信息

亚洲镰孢菌(Fusarium asiaticum)是小麦赤霉病的主要致病菌之一,能侵染小麦等多种禾谷类作物。该病原菌不仅使小麦产量和质量下降,而且会在小麦籽粒中积累大量的单端孢霉烯族毒素,如雪腐镰孢菌烯醇(Nivalenol,NIV),其能污染多种食品和饲料,危害人畜安全。去氢木香内酯(Dehydrocostus lactone,DHCL)是木香根茎中的倍半萜类化合物,本实验室前期研究发现去氢木香内酯对多种植物病原菌具有抑菌活性,其中对小麦赤霉病菌抑菌效果显著。为了研究去氢木香内酯抑制亚洲镰孢菌的生长和产毒机理,本研究在测定去氢木香内酯对亚洲镰孢菌抑菌活性的基础上,观察去氢木香内酯处理后菌丝的超微结构,分析去氢木香内酯处理对NIV的积累量及对菌丝细胞膜、细胞壁和呼吸代谢相关指标的影响,并通过转录组学方法在分子层面阐明去氢木香内酯抑制亚洲镰孢菌生长和NIV产生的作用机理。主要结果如下:1.采用菌丝生长速率法和孢子萌发法测定去氢木香内酯对产NIV的亚洲镰孢菌(Fa NIV)、产NIV的禾谷镰孢菌(Fg NIV)、产15-Ac DON的禾谷镰孢菌(Fg15-Ac DON)3株小麦赤霉病菌菌株的离体活性,结果表明去氢木香内酯抑制菌丝生长的EC分别为54.08μg/m L、78.62μg/m L、70.79μg/m L,抑制孢子萌发的EC分别为21.60μg/m L、26.40μg/m L、33.02μg/m L。3株菌株中,Fa NIV菌株对去氢木香内酯最敏感,因此选择该菌株进行机理研究。2.采用扫描电镜和透射电镜观察去氢木香内酯对亚洲镰孢菌超微结构的影响,发现去氢木香内酯处理使亚洲镰孢菌细胞膜破损、细胞壁模糊、线粒体结构不规则。采用高效液相色谱(HPLC)法测定去氢木香内酯对NIV积累的影响,结果表明去氢木香内酯对NIV的积累具有抑制作用,浓度为16.98μg/m L和54.08μg/m L时,NIV积累量分别降低了65.38%和86.50%。3.测定去氢木香内酯对亚洲镰孢菌生理生化的影响,结果表明,去氢木香内酯处理后,亚洲镰孢菌胞外电导率显著提高,抗氧化酶SOD、POD、CAT活性均被抑制,MDA含量显著增加,呼吸速率受到抑制,N-乙酰葡萄糖胺含量显著提高。该结果表明去氢木香内酯处理导致亚洲镰孢菌细胞膜通透性增加,膜脂质过氧化;呼吸代谢受到抑制;细胞壁完整性被破坏。4.利用转录组分析去氢木香内酯对亚洲镰孢菌的抑菌机制,共得到2625个显著差异表达基因,其中1346个显著上调,1279个显著下调。去氢木香内酯处理使生长发育相关基因atf1、atf B、atf21,麦角甾醇合成基因ERG6、ERG25,抗氧化酶相关基因CAT1、kat G、cat1、cat3等都发生了不同程度的下调,细胞壁水解酶基因exg D、CHIT1发生了上调;NIV合成相关基因HXK、ACAT、HMGS、Tri11、Tri101发生了下调。利用q RT-PCR技术验证HXK、Tri11、Tri101等与NIV合成和菌丝生长发育相关的13个差异表达基因的表达量,其表达结果与转录组测序结果趋势一致。该结果说明,去氢木香内酯作用后引起菌丝生长发育相关基因及NIV合成相关基因的表达水平发生变化,从而影响菌丝正常的生理代谢及次级代谢产物的合成途径。

关键词：去氢木香内酯亚洲镰孢菌 NIV毒素抑菌机理转录组学

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

链霉菌WY3拮抗亚洲镰孢菌的生防机制初探

链霉菌WY3拮抗亚洲镰孢菌的生防机制初探

作者：侯晓岩安徽农业大学

学位级别：硕士

亚洲镰孢菌(Fusarium asiaticum)可以侵染各个发育阶段的小麦,引起小麦赤霉病及茎基腐病的发生,严重降低我国小麦的产量与品质。目前对于该病原菌的防治主要依赖化学药剂,不仅逐年增强病菌的抗药性,也会对环境和食品安全产生负面影响。... 详细信息

亚洲镰孢菌(Fusarium asiaticum)可以侵染各个发育阶段的小麦,引起小麦赤霉病及茎基腐病的发生,严重降低我国小麦的产量与品质。目前对于该病原菌的防治主要依赖化学药剂,不仅逐年增强病菌的抗药性,也会对环境和食品安全产生负面影响。生物防治以其绿色、安全等优势逐渐引起关注,关于***拮抗菌的研究日益增多。本研究就亚洲镰孢菌拮抗菌的分离鉴定、生防机制、防治效果、生防菌剂等进行了初步探究,主要研究结果如下:(1)通过梯度稀释和平板对峙法分离获得一株亚洲镰孢菌的拮抗菌WY3,对其抑制率为64.44%,通过菌落形态、生理生化特征及分子鉴定WY3为链霉菌属(Streptomyces),明确了菌株WY3的分类地位。(2)通过观察链霉菌WY3对亚洲镰孢菌菌丝生长、孢子萌发率的影响,统计WY3孢子悬浮液、无菌发酵液的抑菌率,抑真菌谱的研究以及抑菌物质的稳定性研究,从而对WY3的抑菌机制进行初步探究。结果表明,WY3对病原菌菌丝生长与孢子萌发率有显著影响,能使亚洲镰孢菌菌丝肿胀、畸形和异常分枝,同时抑制其孢子的萌发;WY3孢子悬浮液抑菌率为50.91%,无菌发酵液抑菌率为68.65%;WY3具有广谱抑真菌活性,对禾谷镰孢菌(Fusarium graminearum)、立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)等病原菌的抑菌率均达50%以上;抑菌物质对热相对敏感,超过30℃抑菌活性降低,紫外照射可能促进抑菌物质的活性,且抑菌物质无挥发性。因此确定链霉菌WY3为一株产抑真菌物质的高效生防菌。(3)通过单因素试验,明确链霉菌WY3最佳发酵条件为LB、发酵3 d、初始p H8.0-9.0、装液量50-60 m L/250 m L、最佳转速为170-180 r/min,此条件下WY3发挥最佳抑菌作用,这为链霉菌WY3应用提供了有力的支撑。(4)通过对链霉菌WY3进行全基因组测序,WY3基因组全长为8.27 Mb,共7534个完整的CDS,使用anti SMASH分析基因组共含有26个次级代谢产物合成基因簇,参与合成萜类、聚酮类、非核糖体肽类、羊毛硫肽类等多种化合物,其中已知链丝菌素(streptothticin)、烷基间苯二酚(alkylresorcinol)、羊毛硫细菌素(venezuelin)等具有抑菌作用。揭示了链霉菌WY3产生的候选抑菌活性物质。通过比较基因组分析,发现WY3与近缘菌株间的数字DNA-DNA杂交值(d DDH)最大为68.7%,小于物种判断的临界值;共有基因簇5091个,WY3特有基因簇75个,主要参与生物代谢过程;基因组之间共线性水平较低,存在较多缺失、倒位现象。(5)通过链霉菌WY3盆栽试验,结果表明WY3可以促进小麦幼苗的生长,与对照组相比,浇灌菌液后,小麦单株株高平均增长2.14 cm,根长平均增加1.49cm;WY3对接种亚洲镰孢菌的小麦有明显防治效果,平均防效为63.67%。证明链霉菌WY3作为生物肥料具备可能性。(6)通过生物相容性试验与性质测定,分别筛选硅藻土为填料、NNO为分散剂,十二烷基硫酸钠为润湿剂,粉剂含菌量8.525×10 cfu/m L、润湿时间38 s,悬浮率67.17%等均符合国标,链霉菌WY3可湿性粉剂对接种***小麦离体叶片具有良好的预防效果。综上,链霉菌WY3作为一株高效生防菌株,能够通过抑制病原菌生长与孢子萌发,分泌抑菌物质抑制病害的发生,具有广谱抑菌性,产生丰富的次生代谢产物,对小麦具有促生作用,为亚洲镰孢菌引起的小麦病害提供一种生物防治方法。

关键词：亚洲镰孢菌链霉菌生物防治基因组

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

山黧豆根腐病病原菌亚洲镰孢菌的分离鉴定

草地学报 2021年第6期29卷 1350-1356页

作者：邢会琴王春明金社林周天旺郭成河西学院农业与生态工程学院甘肃张掖734000 甘肃省农业科学院植物保护研究所甘肃兰州730070

为了明确山黧豆(Lathyrus sativus)根腐病病原菌的分类地位,本研究于2018年8月在四川省南充市采集山黧豆根腐病病样,经组织分离法进行分离纯化,采用形态学和翻译延伸因子(Translation elongation factor 1-agene,EF-1α)基因序列分析相... 详细信息

为了明确山黧豆(Lathyrus sativus)根腐病病原菌的分类地位,本研究于2018年8月在四川省南充市采集山黧豆根腐病病样,经组织分离法进行分离纯化,采用形态学和翻译延伸因子(Translation elongation factor 1-agene,EF-1α)基因序列分析相结合的方法对致病菌进行鉴定。结果表明:从采集的山黧豆根腐病病样上共分离获得39株分离物,其中3株分离物Shan-27,Shan-28和Shan-29对山黧豆具有强致病性,分离频率为7.69%;这3株致病菌在形态学上均接近于禾谷镰孢菌复合种(Fusarium graminearum species complex),而对其翻译延伸因子(EF-1α)序列分析发现,其均与亚洲镰孢菌聚在同一分支上,同源性达99%以上。因此,根据菌株形态学特征和EF-1α基因序列分析结果,将引致山黧豆根腐病的病原菌确定为亚洲镰孢菌(Fusarium asiaticum)。

关键词：山黧豆根腐病亚洲镰孢菌病原鉴定 EF-1α

我国冬小麦主产区茎基腐亚洲镰孢菌群体遗传多样性研究

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

我国冬小麦主产区茎基腐亚洲镰孢菌群体遗传多样性研究

小麦赤霉病菌琥珀酸脱氢酶C亚基遗传分化对SDHI类杀菌剂药敏性的调控研究

中国植物病理学会2017年学术年会

作者：赵芹邓渊钰李伟孙海燕陈怀谷江苏省农业科学院植物保护研究所

亚洲镰孢菌(Fusarium asiaticum)是我国冬小麦主产区茎基腐的主要病原菌,本研究应用筛选的15条简单序列重复区间(Inter-simple sequence repeat,ISSR)分子标记对我国冬小麦主产区6个省、直辖市的128份亚洲镰孢菌标样进行遗传多样性研究... 详细信息

亚洲镰孢菌(Fusarium asiaticum)是我国冬小麦主产区茎基腐的主要病原菌,本研究应用筛选的15条简单序列重复区间(Inter-simple sequence repeat,ISSR)分子标记对我国冬小麦主产区6个省、直辖市的128份亚洲镰孢菌标样进行遗传多样性研究,利用NTSYSpc version2.11进行菌株遗传相似性与聚类分析,基于POPGENE version l.32软件计算各项遗传多样性参数与群体聚类。本研究共获得229个稳定DNA片段,其中205个呈多态性,多态性比例为89.50%,平均每个引物扩增15.27个条带,扩增产物集中在150 000bp,菌株相似系数变化范围0.66.93,相似系数为0.75时,将供试菌株分为4大类,各地区菌株遗传相似性较高,河北省菌株遗传多样性较为丰富。6个地理群体多态性位点数在4086,平均为122,多态位点百分率在17.47%1.22%,平均为53.35%,有效等位基因数(Ne)在1.123 5.521 9,平均为1.345 0,Shannon’s信息指数(I)在0.105 6.433 9,平均为0.292 5;在地理种群水平上的Nei’s基因多样性指数(H)为0.072 4.295 5,平均为0.198 1,表明不同地理群体间存在一定遗传差异。河北与四川地理种群的Shannon’s信息指数和Nei’s基因多样性指数分别为最高与最低,说明这两个地区菌株间遗传多样性最丰富与最低。遗传相似性分析证明,江苏省亚洲镰孢种群和河北省种群最近,四川省种群和重庆市种群最远。6个地理群体间的遗传分化系数Gst为0.184 4,群体内为0.8749,群体内多样性明显高于群体间多样性。6个地理群体间的居群每代迁移数(Nm)为2.211 9,说明不同地理群体的亚洲镰孢菌株间存在较大基因流动。6个地理群体总基因多样度Ht为0.242 9,各地理群体内基因多样度Hs为0.188 4,地理群体间基因多样度Dst为0.198 1,说明相同地理来源的菌株具有较近亲缘关系。聚类分析将6个地理群体划分为3个不同类群,第Ⅰ类群包括江苏、河北、安徽与河南,重庆种群属于第Ⅱ类群,四川省种群为第Ⅲ类群。本研究为小麦茎基腐病抗病育种以及综合防治提供了重要理论参考,并为亚洲镰孢菌分类鉴定及系统发育研究提供依据。

关键词：小麦茎基腐亚洲镰孢菌简单序列重复区间遗传多样性

来源： cnki会议评论

在线全文

cnki会议

学校读者我要写书评

暂无评论

小麦赤霉病菌琥珀酸脱氢酶C亚基遗传分化对SDHI类杀菌剂药敏性的...

作者：毕莲玉南京农业大学

学位级别：硕士

小麦赤霉病被农业农村部列为一类农作物病害,不仅造成严重的产量损失,而且其病原菌在穗粒中分泌的脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）等毒素,对人、畜均有毒害作用。在我国,赤霉病发生最严重的江淮流域以亚洲镰孢菌（Fusarium asiaticum）为优... 详细信息

小麦赤霉病被农业农村部列为一类农作物病害,不仅造成严重的产量损失,而且其病原菌在穗粒中分泌的脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）等毒素,对人、畜均有毒害作用。在我国,赤霉病发生最严重的江淮流域以亚洲镰孢菌（Fusarium asiaticum）为优势种群。琥珀酸脱氢酶抑制剂（succinate dehydrogenase inhibitor,SDHIs）通过作用于线粒体呼吸链复合物II（琥珀酸脱氢酶）,阻碍线粒体呼吸链电子传递,减少ATP合成,从而发挥抑菌活性。琥珀酸脱氢酶复合体由黄素蛋白（Fp,SDHA）、铁硫蛋白（Ip,SDHB）和另外2种嵌膜蛋白（SDHC、SDHD）4个蛋白亚基组成,本实验室前期研究发现在赤霉病菌中存在两个SDHC亚基,分别是SDHC1（FGSG＿09012）和SDHC2（FGSG＿01981）,SDHC1与其他丝状真菌SDHC亚基的同源性要高于SDHC2。SDHC1敲除突变体对SDHI类杀菌剂的敏感性显著降低,SDHC2敲除突变体对SDHI类杀菌剂的敏感性显著增加。SDHC1和SDHC2缺失均降低ATP合成和呼吸速率,说明SDHC1和SDHC2均参与呼吸链电子传递过程。本论文进一步开展了亚洲镰孢菌SDHC亚基遗传分化对SDHI类杀菌剂药敏性的调控研究,其主要结果如下。以亚洲镰孢菌野生型菌株2021、SDHC1敲除突变体（△SDHC1-9）和SDHC2敲除突变体（△SDHC2-7）为研究对象,测定在啶酰菌胺（Boscalid）、氟吡菌酰胺（Fluopyram）、氟唑菌酰羟胺（Pydiflumetofen）三种SDHI类杀菌剂处理条件下,SDHC1和SDHC2基因表达水平的差异。结果显示,在不加药条件下SDHC1的缺失导致SDHC2表达量显著增加,但SDHC2的缺失对SDHC1的表达量没有影响,表明SDHC2对SDHC1具有补偿作用。在啶酰菌胺EC剂量下处理时,野生型菌株2021的SDHC1和SDHC2表达量均下降,但一个亚基缺失后另一个亚基表达量显著上升。用氟吡菌酰胺和氟唑菌酰羟胺EC剂量处理时,野生型菌株2021的SDHC1和SDHC2的表达量都显著上升,一个亚基缺失后另一个亚基表达量也是显著上升,但是SDHC2表达量上升倍数更大,对药剂反应更加敏感。因此,在加药处理条件下SDHC2表达水平变化幅度相比于SDHC1更大,结合之前李美霞研究中发现二者在药敏性调控中的差异,认为SDHC2在药敏性方面发挥更为重要的功能。琥珀酸脱氢酶复合体由SDHA、SDHB、SDHC和SDHD四个亚基组成,但亚洲镰孢菌SDHC遗传分化为SDHC1和SDHC2两个亚基,本文研究发现两个亚基均定位于线粒体,通过酵母双杂（Yeast two hybrid System）和免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation,Co-IP）技术验证了SDHA、SDHB、SDHC1、SDHC2、SDHD之间的互作。酵母双杂未发现各亚基存在任何互作关系,免疫共沉淀发现SDHA与SDHB之间不存在互作,而SDHC1、SDHC2、SDHD之间存在两两互作关系,且与SDHA、SDHB之间不存在互作关系,探明五个亚基之间的互作模式将有助于揭示SDHC亚基遗传分化在线粒体呼吸链电子传递及生命活动中的功能调控。本实验室前期研究发现SDHC2敲除突变体对SDHI类杀菌剂的敏感性显著增加。本文以SDHC2敲除突变体（△SDHC2-7）为研究对象,用啶酰菌胺、氟吡菌酰胺两种药剂,采用药剂驯化和紫外诱变两种方式对△SDHC2-7进行抗药性诱导,共得到14个抗性突变体,发现这些抗性突变体都能够在含啶酰菌胺或氟吡菌酰胺MIC值（△SDHC2-7对啶酰菌胺和氟吡菌酰胺的最小抑制终浓度MIC分别是30和10μg/m L）的YBA平板上生长,且抗药性能够稳定遗传。经测序发现与出发菌株△SDHC2-7相比,在SDHB、SDHC1、SDHD三个亚基均发生点突变,突变基因型为SDHB、SDHC1、SDHC1、SDHD、SDHD、SDHD。通过人工构建基因点突变载体,利用PEG介导的原生质体转化技术将点突变载体转入出发菌株△SDHC2-7,成功获得了上述7个突变基因型的人工点突变菌株,并对其进行了药敏性测定。结果显示,出发菌株△SDHC2-7在含有啶酰菌胺（30μg/m L）或氟吡菌酰胺（10μg/m L）的YBA平板上不能生长,但获得的人工突变体菌株均能正常生长,表明亚洲镰孢菌SDHB、SDHC1、SDHC1、SDHD、SDHD、SDHD等亚基的点突变均能导致亚洲镰孢菌对啶酰菌胺或氟吡菌酰胺产生抗药性。综上所述,基于前期研究成果（亚洲镰孢菌中SDHC亚基分化为SDHC1和SDHC2两个亚基,且二者在药敏性调控中存在功能差异）,本文研究了SDHC1和SDHC2在

关键词：亚洲镰孢菌琥珀酸脱氢酶抑制剂 SDHC 抗药性蛋白互作