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不同直径胶体金结合霍乱毒素B亚单位的逆行轴浆转运及其应用

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中国神经免疫学和神经病学杂志 1996年第1期3卷 1-7页

作者：石葛明万选才谭会兵刘克中国医学科学院中国协和医科大学解剖学及神经生物学室

不同直径胶体金结合霍乱毒素Ｂ亚单位复合物（ＣＢ－Ａｕ）注射于大鼠不同部位，观察对神经元的标记效果。实验结果：（１）ＣＢ－Ａｕ较ＣＢ－ＨＲＰ注射靶区扩散范围小，经银加强后ＣＢ－Ａｕ呈黑色致密的圆颗粒。（２）肌肉注射以５... 详细信息

不同直径胶体金结合霍乱毒素Ｂ亚单位复合物（ＣＢ－Ａｕ）注射于大鼠不同部位，观察对神经元的标记效果。实验结果：（１）ＣＢ－Ａｕ较ＣＢ－ＨＲＰ注射靶区扩散范围小，经银加强后ＣＢ－Ａｕ呈黑色致密的圆颗粒。（２）肌肉注射以５ｎｍ和１０ｎｍＣＢ－Ａｕ对神经元的标记效果较好，１７ｎｍＣＢ－Ａｕ几乎难以标记神经元。在中枢神经系统，此三种直径ＣＢ－Ａｕ标记效果相似。（３）银加强标认神经元后可复合免疫细胞化学（ＩＣＣ）方法，双标记神经元的银颗粒与ＩＣＣ反应产物极易分辨；由此发现大鼠ｃａｌ－ｂｉｎｄｉｎ－Ｄ２８Ｋ阴性和阳性的红核脊髓投射神经元。（４）ＣＢ－Ａｕ滞留神经元内至少３５ｄ，故可行慢性实验。因此在比目鱼肌注射ＣＢ－Ａｕ的第５天切除该肌，３０ｄ后经银加强复合用ＣＧＲＰＩＣＣ仍能清晰分辨标认的神经元。结果表明，ＣＢ－Ａｕ为一很好的轴浆转运示踪剂尤适合复合ＩＣＣ的双标研究。

关键词：霍乱毒素B 亚单位神经元解剖周围神经

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霍乱毒素的化学:亚单位结构

广东卫生防疫资料 1979年第2期 7-15页

作者：张焕泽深圳卫生检疫所

霍乱弧菌毒素于5％甲酸葡聚糖凝胶（即Sephadex G75）过滤分离出两个亚单位。此两型亚单位命名为A和B。经氨基酸分析指出亚单位B符合类霍乱原。复制的亚单位B对整个霍乱毒素分子具有相同的抗原性,然而复制的亚单位A是没有抗原性的。在8... 详细信息

霍乱弧菌毒素于5％甲酸葡聚糖凝胶（即Sephadex G75）过滤分离出两个亚单位。此两型亚单位命名为A和B。经氨基酸分析指出亚单位B符合类霍乱原。复制的亚单位B对整个霍乱毒素分子具有相同的抗原性,然而复制的亚单位A是没有抗原性的。在8克分子尿素中用碘醋酸盐还原和S—羧甲基化,亚单位A分离两个大小不等而放射性相等的多肽A1和A2。另一方面亚单位B仍然为一个单独的分子类型。在硫酸尿素钠盐缓冲液中由聚丙烯酰胺凝胶电泳形成的多肽A1,A2,和B的分子量采用氨基酸分析仪分别得出20,000,7,500,和9,500道尔顿。亚单位B羧化末端发现是旦氨酸一丙氨酸一天门冬氨酸。用溴化氰处理霍乱毒素后,此单肽丙氨酸天门冬氨酸能分离和定量。从这些资料说明在一个霍乱毒素分子中多肽B的数量估计为6个。霍乱毒素即产生腹泻的因子,从霍乱弧菌培养滤液中分离是一个旦白质,据报告其分子量是84,000道尔顿。毒素在小肠上皮细胞形成并刺激其腺苷环化酶的活性因而引起液体迅速增加。霍乱毒素除作用肠上皮外,其本身在此得到纯化,用毒素进行体外处理实际上整个哺乳动物细胞腺苷环化酶都激活。这些发现和行之有效的方法对毒素大量提纯,并为研究其构造和机能制造出一个极满意的旦白质模型。为研究一个聚合的旦白质构造,复合多肽链首先必须断裂和表示其特性。左硫酸钠盐（SDS）凝胶电泳的结果指出霍乱毒素中存在两种类型亚单位,并经近来亚单位的离解和天然素重组合,上述两种类型亚单位得到证实。在本论文中我们报告了霍乱毒素中两类型亚单位A和B的离析和特性以及在亚单位A中两个多肽链似乎是通过单独的二硫键联结。我们也拿出化学的证据说明天然的霍乱毒素的亚单位复合物是AB6形式。

关键词：霍乱毒素抗原性霍乱菌素亚单位霍乱原

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IgM和亚单位的分离纯化及其抗血清的制备

浙江大学学报(医学版) 1986年第4期 145-149+191-192页

作者：吕新法徐晓何南祥王可宁浙江医科大学传染病研究所

自一例巨球蛋白血症病人血清,经盐析、冻融过滤、超速、亲和层析、Sephadex G-200凝胶过滤分离纯化获得IgM;进而将IgM经还原剂及烷化剂处理分离纯化获得μ链。用它作多点皮内注射和肌肉加强注射免疫家兔,制备了高滴度的抗μ链血清。经... 详细信息

自一例巨球蛋白血症病人血清,经盐析、冻融过滤、超速、亲和层析、Sephadex G-200凝胶过滤分离纯化获得IgM;进而将IgM经还原剂及烷化剂处理分离纯化获得μ链。用它作多点皮内注射和肌肉加强注射免疫家兔,制备了高滴度的抗μ链血清。经与丹麦Dako、上海第二医学院抗μ链血清核对,证实为μ链特异。在分离纯化IgM过程中,用IgM实际含有量替代Van Dalen等人原方法中以投入纯化的血清原体积计数法,使IgM得率提高10倍;在化学裂解拆链过程中,发现两种常用的肽链洗脱剂即pH8.0,0.01M Tris-HCl,0.01M SDS液和0.1M丙酸4M尿素均使肽链有所降解,肽链得率不高是由于未能及时去除蛋白质变性剂之故。

关键词： IgM 病人血清分离纯化巨球蛋白血症血蛋白异常抗血清亚单位

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端粒酶组分亚单位研究进展

中国耳鼻咽喉颅底外科杂志 2000年第1期6卷 60-63页

作者：王行炜肖健云湖南医科大学附属湘雅医院耳鼻咽喉科湖南长沙410008

目的　简述端粒酶亚单位的研究情况与端粒酶活性的关系。方法　参阅相关文献 ,并作综述性报道。结果　端粒酶是一种特殊的逆转录酶 ,由RNA和蛋白组成的核糖核蛋白 (ribonucleoprotein)复合体。目前已经克隆了人类端粒酶亚单位 (subunit... 详细信息

目的　简述端粒酶亚单位的研究情况与端粒酶活性的关系。方法　参阅相关文献 ,并作综述性报道。结果　端粒酶是一种特殊的逆转录酶 ,由RNA和蛋白组成的核糖核蛋白 (ribonucleoprotein)复合体。目前已经克隆了人类端粒酶亚单位 (subunit)基因 ,分别为端粒酶RNA(hTR) ,端粒酶结合蛋白 (hTP1)和端粒酶活性催化亚单位 (hTERT)。研究发现 ,端粒酶活性与其亚单位关系密切。结论　为端粒酶的激活可能与其亚单位特别是端粒酶活性催化亚单位的表达、调控有关。但这方面的研究刚刚起步。

关键词：端粒酶亚单位激活克隆 TP1 RNA

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佐剂化腺病毒亚单位疫苗免疫性研究

吉林医学 1991年第5期12卷 274-275页

作者：崔俊生姜崇陈远耀白求恩医科大学病理解剖教研室

本文利用动物实验方法检测了百日咳疫苗佐剂化的腺病毒亚单位成分的免疫效果,并与其他免疫方法进行了对比研究。结果发现,百日咳疫苗对腺病毒的亚单位成分有良好的辅佐作用,可以使抗体水平明显升高,并可使抗体的持续时间延长。与其他方... 详细信息

本文利用动物实验方法检测了百日咳疫苗佐剂化的腺病毒亚单位成分的免疫效果,并与其他免疫方法进行了对比研究。结果发现,百日咳疫苗对腺病毒的亚单位成分有良好的辅佐作用,可以使抗体水平明显升高,并可使抗体的持续时间延长。与其他方法相比无副作用,且有良好的免疫效果。故此,本实验的结果为腺病毒日后大范围的免疫防治提供了一个新的途径。

关键词：百日咳疫苗佐剂化腺病毒亚单位

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禽霍乱亚单位苗研究的近况

江西畜牧兽医杂志 1984年第1期 16-19页

作者：孟繁盛宋树才温树德辽宁省畜牧兽医研究所

巴氏杆菌是巴斯德于1880年首次发现的。其中对禽类危害较大的是多杀性巴氏杆菌(***)。它除了引起禽类(家禽和野禽)霍乱外,尚能引起家畜及野生动物的败血性疾病。为预防禽霍乱所应用的疫苗大体上分为两类:一类是灭活苗,国外更常应用,国... 详细信息

巴氏杆菌是巴斯德于1880年首次发现的。其中对禽类危害较大的是多杀性巴氏杆菌(***)。它除了引起禽类(家禽和野禽)霍乱外,尚能引起家畜及野生动物的败血性疾病。为预防禽霍乱所应用的疫苗大体上分为两类:一类是灭活苗,国外更常应用,国内近年来也有新报导。使用灭活苗往往剂量大,无交互性免疫;再加上使用时多辅以佐剂,组织刺激性强。另一类是弱毒活菌苗,国内普遍采用。但为获取毒性小而免疫性强

关键词：多杀性巴氏杆菌可溶性抗原硫氰酸钾多杀性巴氏德氏菌巴氏杆菌属无机杀菌剂动物细菌病禽霍乱火鸡亚单位免疫原性保护率

大鼠失神样癇性发作时GABA_B受体亚单位GBR1a mRNA改变

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中国临床神经科学 2001年第1期9卷 41-43页

作者：陆钦池张毅蔡琰 OCarterSneadⅢ 上海第二医科大学附属仁济医院神经科 200001 加拿大多伦多大学附属病童医院神经科

目的 :探讨GABAB 受体亚单位在失神癫发病机制中的作用。方法 :用原位杂交的方法测定AY 9944大鼠癫模型在失神样性发作时GABAB 受体亚单位GBR1amRNA在鼠脑的表达。结果 :大脑皮质 ,海马CA1、CA3 及丘脑的mRNA表达均见不同程度的升... 详细信息

目的 :探讨GABAB 受体亚单位在失神癫发病机制中的作用。方法 :用原位杂交的方法测定AY 9944大鼠癫模型在失神样性发作时GABAB 受体亚单位GBR1amRNA在鼠脑的表达。结果 :大脑皮质 ,海马CA1、CA3 及丘脑的mRNA表达均见不同程度的升高 ,而以大脑皮质及海马CA3 区尤为显著。结论 :GABAB 受体亚单位GBR1a可能参与失神性癫的发病机制。

关键词：失神样癫痫 AY-9944 GABAB受体 GBR1a 亚单位 mRNA 大鼠

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流感与风疹病毒亚单位的免疫原性

国外医学.预防.诊断.治疗用生物制品分册 1985年第6期 273-274页

作者：殷绥亚

病毒疫苗研究进展之一为制备亚单位疫苗,它不含核酸,仅含能起保护作用的病毒抗原。有囊膜的病毒的表面糖蛋白可诱生保护抗体。溶解这些膜蛋白的最有效方法之一为应用不使蛋白变性的离子去污剂β-D-辛糖苷。应用这种去污剂可较好地控制... 详细信息

病毒疫苗研究进展之一为制备亚单位疫苗,它不含核酸,仅含能起保护作用的病毒抗原。有囊膜的病毒的表面糖蛋白可诱生保护抗体。溶解这些膜蛋白的最有效方法之一为应用不使蛋白变性的离子去污剂β-D-辛糖苷。应用这种去污剂可较好地控制裂解的病毒膜蛋白的聚合,并可使它于去污剂透析后嵌入合成脂质小泡的两层脂质内。这种病毒样结构称为病毒小体(Virosomes)或免疫

关键词：亚单位免疫原性风疹病毒流感流行性感冒

多阶段抗原的结核分枝杆菌亚单位疫苗SHP／TMD的免疫原性及保护性研究

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中国基层医药 2016年第24期23卷 3713-3718,I0002-I0004页

作者：王晓春许礼发韦琴琴李月亮王凤龙张超安徽理工大学医学院病原生物学教研室安徽省淮南232001 安徽理工大学医学院生物化学教研室安徽省淮南232001

目的：设计构建包含结核分枝杆菌（***）感染多阶段抗原的融合蛋白亚单位疫苗 SHP，在中国 *** 感染者和小鼠模型中评价其免疫原性和抗感染保护性。方法选择 *** 复制期分泌抗原 Rv0577、休眠期抗原 Rv2623和 PE ／PPE 家族抗原 Rv3478... 详细信息

目的：设计构建包含结核分枝杆菌（***）感染多阶段抗原的融合蛋白亚单位疫苗 SHP，在中国 *** 感染者和小鼠模型中评价其免疫原性和抗感染保护性。方法选择 *** 复制期分泌抗原 Rv0577、休眠期抗原 Rv2623和 PE ／PPE 家族抗原 Rv3478，构建并原核表达融合蛋白 SHP；以基于 TB-IGRA 的全血IFN-γ分析试验（WBIA）检测 SHP 及其亚组分蛋白诱导中国 *** 感染者和健康对照者外周血淋巴细胞产生的特异性 IFN-γ水平及其差异；以 SHP 联合佐剂 TMD 皮下免疫 C57BL／6小鼠，9周后处死并检测特异性抗体滴度、脾淋巴细胞培养上清中特异性 Th1型细胞因子水平以及肺脏 IFN-γ、TNF-α、IL-10和 iNOS 的表达水平；以 *** H37Rv 毒株攻毒4周后评价 SHP／TMD 的抗感染保护性。结果成功构建、表达融合蛋白 SHP，SHP及其亚组分蛋白刺激 *** 感染者淋巴细胞产生的 IFN-γ浓度均显著性高于健康对照者[如 SHP 刺激值分别为（1420．0±253．9）pg／mL 和（236．1±95．1）pg／mL，t ＝2．063，P ＜0．01]。SHP／TMD 诱导产生显著高水平的特异性 IgG 抗体及其亚类，IgG2a／IgG1趋向 Th1型应答；SHP／TMD 免疫小鼠的脾淋巴细胞诱导显著高水平的特异性 IL-2、IFN-γ和 TNF-α；SHP／TMD 免疫小鼠肺脏组织 IFN-γ、TNF-α及 iNOS 表达水平显著上升。此外， SHP／TMD 显著降低 *** 急性感染小鼠肺、脾脏荷菌量（如 SHP／TMD 组肺脏荷菌量相对 TMD 组减少了1．03 log， F ＝1518，P ＜0．05），同时肺部病理病变减轻。结论以中国 *** 感染者 T 细胞识别的多阶段优势表达抗原构建亚单位疫苗 SHP／TMD，免疫小鼠可提供显著的抗 *** 急性感染的保护性，主要与 SHP 抗原特异性CD ＋4 T h1型应答有关。

关键词：分枝杆菌结核疫苗亚单位卡介苗免疫