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基于网络药理学和巨噬细胞活性探讨五加皮治疗类风湿关节炎的作用机制

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中国免疫学杂志 2024年

作者：李俊霖钱怡云杨迎刘萍韦敏南京中医药大学江苏省中国科学院植物研究所

目的：通过网络药理学和细胞实验揭示五加皮（AC）治疗类风湿关节炎（RA）的作用机制。方法：文献检索确定AC化学成分，TCMSP和SwissADME数据库获取活性成分和靶点，利用GeneCards、DrugBank数据库检索RA疾病靶点，取AC与RA的交集靶点... 详细信息

目的：通过网络药理学和细胞实验揭示五加皮（AC）治疗类风湿关节炎（RA）的作用机制。方法：文献检索确定AC化学成分，TCMSP和SwissADME数据库获取活性成分和靶点，利用GeneCards、DrugBank数据库检索RA疾病靶点，取AC与RA的交集靶点，运用STRING 11.5 数据库和Cytoscape 3.7.2 软件构建蛋白相互作用网络，CytoNCA筛选核心靶点，再进行GO和KEGG富集分析，使用AutoDockTools和PyMOL软件将AC活性成分与核心靶点进行分子对接。通过CCK-8、ELISA、RT-qPCR实验验证AC治疗RA的作用机制的相关靶点。结果：获得AC与RA交集靶点55个，核心靶点有CDK2、PPARG等；GO富集分析显示主要涉及细胞内受体信号通路、信号转导、凋亡等生物学过程；KEGG富集分析发现与RA治疗相关的信号通道主要为JAK-STAT、PI3K-Akt和MAPK信号通路等；分子对接表明AC活性成分与关键靶点结合紧密；CCK-8实验结果显示AC活性成分对RAW264.7细胞无毒性；ELISA结果显示AC活性成分能调节炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α和IL-10的表达水平；RT-qPCR结果显示槲皮素(Quercetin， Que)和山奈酚(Kaempferol， Kae)均可影响CDK2的mRNA表达，异贝壳杉烯酸(Kaurenoic acid， KA)、芝麻素（Sesamin， Ses）分别影响PPARG、MCL1的mRNA表达，从而调控细胞因子的释放，发挥抗炎作用。结论：AC中Que、Kae、KA和Ses通过作用于CDK2、PPARG、MCL1等靶点，干预JAK-STAT、PI3K-Akt、MAPK等信号通路，发挥治疗RA的作用。

关键词：网络药理学五加皮类风湿关节炎分子对接炎症因子

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易混淆中药地骨皮、香加皮、五加皮鉴别研究

山东中医药大学学报 2024年第1期48卷 91-99页

作者：秦露吕绪桢刘亚丽赵天伦王晨曦战瑞雪冯帅李峰山东中医药大学山东济南250355 山东省高校中药质量控制与全产业链建设协同创新中心山东济南250355

目的:探讨区分鉴别易混淆皮类中药地骨皮、香加皮、五加皮的方法。方法:采用性状、微性状、显微、荧光鉴别等方法对地骨皮、香加皮、五加皮进行鉴别研究。结果:地骨皮、香加皮、五加皮在性状和微性状方面的主要鉴别点是外表面、断面和气... 详细信息

目的:探讨区分鉴别易混淆皮类中药地骨皮、香加皮、五加皮的方法。方法:采用性状、微性状、显微、荧光鉴别等方法对地骨皮、香加皮、五加皮进行鉴别研究。结果:地骨皮、香加皮、五加皮在性状和微性状方面的主要鉴别点是外表面、断面和气味;显微鉴别的重点是草酸钙结晶不同。传统荧光法在紫外灯下观察三者的荧光现象区别不明显,但是二维荧光和三维荧光等方面均有较大差异。二维荧光光谱结果显示,三种药材的水提取液均只有一个荧光峰,三者的峰位、峰强度和峰形有很大差别;三维荧光光谱结果显示,地骨皮有三个荧光峰,香加皮和五加皮有两个荧光峰,三者的峰位和峰强度有明显差异。结论:传统鉴别方法可用于地骨皮、香加皮、五加皮的鉴别,二维荧光光谱法和三维荧光光谱法可快速、准确地区分三种药材。

关键词：地骨皮香加皮五加皮微性状鉴别法二维荧光光谱法三维荧光光谱法

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气相色谱法测定五加皮中7种掺伪香精

西北药学杂志 2024年第4期39卷 11-15页

作者：王锋崔艳华王冰洁顾璇邹子爵李灿西安交通大学医学部附属三二〇一医院汉中723000 湖南省产商品质量检验研究院长沙410007

目的建立气相色谱法测定五加皮中7种香精成分的分析方法。方法对提取溶剂、分流比及色谱柱型号等参数进行考察,利用氢火焰离子化检测器(flame ionization detector,FID)检测,采用外标法定量分析。结果将乙酸乙酯作为提取溶剂,CD624毛细... 详细信息

目的建立气相色谱法测定五加皮中7种香精成分的分析方法。方法对提取溶剂、分流比及色谱柱型号等参数进行考察,利用氢火焰离子化检测器(flame ionization detector,FID)检测,采用外标法定量分析。结果将乙酸乙酯作为提取溶剂,CD624毛细管色谱柱分离,分流比为5∶1条件最优,7种香精成分能实现完全分离,线性关系良好,相关系数r均大于0.999。平均加标回收率为87.33%~93.66%,相对标准偏差(n=6)均低于5%。结论该方法简单、快速、准确,可满足五加皮中7种香精成分的检测。

关键词：气相色谱法五加皮掺伪香精

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五加皮中二萜类化学成分及其抗炎活性研究

中草药 2023年第23期54卷 7709-7716页

作者：张雪解盈盈刘琦关永霞赵淑秀刘青芝林永强郭东晓山东省食品药品检验研究院国家药监局胶类产品质量评价重点实验室山东省中药标准创新与质量评价工程实验室中药配方颗粒共性技术山东省工程研究中心山东济南250101 山东现代学院山东济南250104 经方与现代中药融合创新全国重点实验室山东临沂276006 山东中医药大学山东济南250355

目的对五加皮Acanthopanacis Cortex的二萜类化学成分及抗炎活性进行研究。方法通过MCI树脂柱、硅胶柱、薄层色谱、半制备HPLC等方法对五加皮药材中化学成分进行提取分离,采用核磁共振波谱、质谱、红外光谱等方法,对单体化合物的结构... 详细信息

目的对五加皮Acanthopanacis Cortex的二萜类化学成分及抗炎活性进行研究。方法通过MCI树脂柱、硅胶柱、薄层色谱、半制备HPLC等方法对五加皮药材中化学成分进行提取分离,采用核磁共振波谱、质谱、红外光谱等方法,对单体化合物的结构进行鉴定。采用Griess法测试脂多糖诱导小鼠单核巨噬细胞RAW264.7细胞释放炎症因子模型,对化合物进行抗炎活性评价。结果从五加皮70%乙醇提取物中分离得到13个二萜类化合物,包括7个对映海松烷型二萜7β-羟基-8(14),15-二烯-19-异海松烷酸(1)、7-酮基-8(14),15-二烯-19-异海松烷酸(2)、7β-甲氧基-8(14),15-二烯-19-异海松烷酸(3)、6,8(14),15-三烯-19-异海松羧酸(4)、14-酮基-8,15-二烯-19-异海松羧酸(7)、14-羟基-16-乙烯基-8,11,13-三烯-17-异海松羧酸(8)、7α-羟基-8(14),15-二烯-19-异海松烷酸(11);以及6个对映贝壳杉烷型二萜16α,17-二羟基-19-异贝壳杉烷羧酸(5)、17-羟基-19-异贝壳杉烷羧酸(6)、异贝壳杉烯酸(9)、17-醛基-19-异贝壳杉烯酸(10)、17-醛基-15-烯-19-异贝壳杉烷酸(12)和17-羟基-15-烯-19-异贝壳杉烷酸(13)。其中化合物8为新化合物,命名为细柱五加酸G1;3和4为首次从细柱五加植物中分离得到。体外抗炎活性研究表明,13个化合物均具有一定的抗炎活性,其中化合物1~3、7的活性较好。海松烷型二萜类化合物抗炎活性较贝壳杉烷型二萜强,海松烷型二萜类化合物7位取代活性强弱顺序为β-OH>β-OCH_(3)>Δ^(6)双键>C=O>α-OH。结论五加皮分离鉴定的化合物及其活性研究为五加皮专属性质控方法建立、药用资源合理开发和利用提供了依据。

关键词：五加皮二萜类抗炎活性细柱五加酸G1 7β-甲氧基-8(14),15-二烯-19-异海松烷酸 6,8(14),15-三烯-19-异海松羧酸

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经典名方中五加皮的本草考证

中国实验方剂学杂志 2023年第12期29卷 26-37页

作者：张万祥张水寒刘浩詹志来湖南中医药大学长沙410208 湖南省中医药研究院中药资源研究所长沙430013 中国中医科学院中药资源中心北京100700

通过对五加皮古今文献的考证和分析,梳理五加皮药材的品种、产地、采收、炮制及古代品质评价方法,厘清其常见混伪品香加皮混入历史脉络,为含五加皮的经典名方开发提供依据。五加皮以“五加”之名始载于《神农本草经》,自《雷公炮炙论》... 详细信息

通过对五加皮古今文献的考证和分析,梳理五加皮药材的品种、产地、采收、炮制及古代品质评价方法,厘清其常见混伪品香加皮混入历史脉络,为含五加皮的经典名方开发提供依据。五加皮以“五加”之名始载于《神农本草经》,自《雷公炮炙论》以“五加皮”为正名,历代皆沿用;根据本草中五加花序着生位置与果实形态描述,判断历代所用五加皮主流基原为五加科植物细柱五加Acanthopanax gracilistylus;民国时期,因杠柳Periploca sepium的根皮(香加皮)符合“类地骨皮,轻脆芳香”而混做五加皮;五加皮历代著录的产地集中在长江中下游地区,主产于湖北、河南、安徽等地;逐步形成了五加皮以皮厚、色白、气香为佳的传统品质评价;传统五加皮采收加工为五月、七月采茎,十月采根,阴干。现代五加皮为夏、秋二季采挖根部,洗净,剥取根皮,晒干;历代炮制有酒制、吴茱萸煮、姜汁制等方法,现代多为净制后切厚片生品入药。根据考证结果,建议经典名方中五加皮基原选用细柱五加的根皮,根据具体处方要求炮制入药。此外,建议恢复香加皮“羊桃”的药材名称,降低其混做五加皮药用的影响。

关键词：经典名方五加皮基原植物香加皮羊桃产地变迁品质评价

基于多波长切换HPLC同时测定五加皮中10个成分研究

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药物分析杂志 2023年第4期43卷 558-563页

作者：王力弘钱怡云韦敏宋萍萍杨迎王鑫伟南京中医药大学南京210023 江苏省植物资源研究与利用重点实验室江苏省中国科学院植物研究所(南京中山植物园)南京210014

目的:建立多波长切换HPLC法同时测定五加皮多指标质量评价方法。方法:采用Waters AtlantisTMT3色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B),梯度洗脱(0~15 min,10%A→20%A;15~25 min,20%A→40%A;25~30 min,40%A→85%A;30~45 min,85%A),流速1.0 mL·min^(-1),柱温35℃,检测波长为277 nm(0~30 min,检测新绿原酸、松柏苷、紫丁香苷、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、1,3-二咖啡酰奎宁酸、异绿原酸A、异绿原酸C)、202 nm(30~45 min,检测异贝壳杉烯酸),进样量为20μL。结果:在优化的色谱条件下,新绿原酸、松柏苷、紫丁香苷、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、1,3-二咖啡酰奎宁酸、异绿原酸A、异绿原酸C、异贝壳杉烯酸的质量浓度分别在1~100μg·mL^(-1)(r=1.000)、0.5~50μg·mL^(-1)(r=1.000)、0.25~25μg·mL^(-1)(r=1.000)、3.75~375μg·mL^(-1)(r=0.9999)、0.25~25μg·mL^(-1)(r=0.9999)、0.25~25μg·mL^(-1)(r=0.9999)、0.25~25μg·mL^(-1)(r=1.000)、2~200μg·mL^(-1)(r=0.9998)、0.5~50μg·mL^(-1)(r=0.9999)、14.45~1445μg·mL^(-1)(r=0.9998)范围内均呈现良好的线性关系,精密度、重复性和稳定性的RSD均加样回收率(n=6)为90.4%~104.0%,RSD为0.4%~2.4%。11批样品中上述成分含量范围分别为0.03~0.19,0.06~0.87、0.02~0.48、0.16~4.51、0.04~0.20、0.04~0.13、0.02~0.45、0.04~3.03、0.22~1.03、5.26~21.18 mg·g-1。结论:所建立的五加皮多指标质量评价方法快速、准确,有较好的重现性和稳定性,可用于五加皮的质量评价研究。

关键词：五加皮绿原酸类松柏苷紫丁香苷咖啡酸异贝壳杉烯酸高效液相色谱法多波长切换法含量测定

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五加皮对环氧化酶的影响

中国中药杂志 2006年第4期31卷 316-319页

作者：邱建波龙启才姚美村广州侨光制药有限公司研究所广东广州510140 中山大学药学院临床药理研究所广东广州510089 中山大学药学院药物分析与质量评价实验室广东广州510089

目的:探讨五加皮在体外和体内对环氧化酶的影响。方法:测定新生小公牛主动脉内皮细胞6-keto-PGF1α、小鼠腹腔巨噬细胞PGE2和大鼠胃壁组织6-keto-PGF1α的含量;观察大鼠胃黏膜溃疡指数的变化。结果:五加皮对环氧化酶-1(COX-1)和环氧化酶... 详细信息

目的:探讨五加皮在体外和体内对环氧化酶的影响。方法:测定新生小公牛主动脉内皮细胞6-keto-PGF1α、小鼠腹腔巨噬细胞PGE2和大鼠胃壁组织6-keto-PGF1α的含量;观察大鼠胃黏膜溃疡指数的变化。结果:五加皮对环氧化酶-1(COX-1)和环氧化酶-2(COX-2)都有抑制作用。在剂量相同时,对COX-2的抑制率大于COX-1;五加皮灌胃给药对健康大鼠的胃黏膜无损害,但能加重乙醇诱导的胃损伤。结论:抑制环氧化酶可能是五加皮祛风湿的机理之一。

关键词：五加皮环氧化酶-1 环氧化酶-2 胃黏膜损伤

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五加皮药材及饮片的质量分析及监管建议

中国食品药品监管 2022年第3期 66-73页

作者：杨建波张文娟程显隆王雪婷魏锋马双成中国食品药品检定研究院

目的:介绍五加皮药材及饮片存在的质量问题。方法:根据《中国药典》和地方药材标准,再结合2018年全国中药材及饮片专项抽验及市场调研结果,阐述五加皮的真伪优劣等问题。结果:通过性状特征、薄层色谱及聚合酶链式反应法,能够准确鉴定五... 详细信息

目的:介绍五加皮药材及饮片存在的质量问题。方法:根据《中国药典》和地方药材标准,再结合2018年全国中药材及饮片专项抽验及市场调研结果,阐述五加皮的真伪优劣等问题。结果:通过性状特征、薄层色谱及聚合酶链式反应法,能够准确鉴定五加皮中的伪品。64批专项抽验样品中55批为五加皮正品、7批为香加皮、2批为穗序鹅掌柴的干燥根皮;15批专项抽验五加皮样品中浸出物合格率仅为33.3%,总灰分合格率为80%;13批采集于湖北省的五加皮,浸出物合格率为92.3%,总灰分合格率为100%。结论:建议修改部分省中药饮片炮制规范标准,规范种植细柱五加,加强对五加皮品种监管,从而保障人民群众用药安全与有效。

关键词：五加皮聚合酶链式反应法穗序鹅掌柴浸出物总灰分

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五加皮Age蛋白的药动学研究

中草药 2007年第3期38卷 401-405页

作者：赵学涛单保恩张静河北医科大学第四医院科研中心暨河北省肿瘤基因诊断预防和治疗重点实验室河北石家庄050011

目的研究五加皮Age蛋白的药动学特征。方法采用氯胺T法用125I标记Age蛋白,形成125I-Age复合物。S180荷瘤小鼠iv给药后,采用同位素示踪法结合SDS-PAGE电泳测定血浆中Age蛋白质量浓度。用3P87药动学软件分析血浆中Age蛋白的药动学参数。... 详细信息

目的研究五加皮Age蛋白的药动学特征。方法采用氯胺T法用125I标记Age蛋白,形成125I-Age复合物。S180荷瘤小鼠iv给药后,采用同位素示踪法结合SDS-PAGE电泳测定血浆中Age蛋白质量浓度。用3P87药动学软件分析血浆中Age蛋白的药动学参数。结果小鼠iv125I-Age后,Age蛋白在体内的代谢符合二房室分布模型。按剂量50、100、200μg/kgiv后,测得Age蛋白分布相半衰期(t1/2α)分别为0.34、0.45、0.26h,消除相半衰期(t1/2β)为14.13、16.49、17.42h,全身清除率(CLs)为0.0454、0.0491、0.0533mL/(h·kg)。结论Age蛋白在荷瘤小鼠体内药动学行为符合线性二室模型,在体内的分布和消除均较慢。

关键词：五加皮 Age蛋白 ^125I—Age 药动学 SDS—PAGE电泳法