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云南萝芙木叶吲哚生物碱

高等学校化学学报 2010年第4期31卷 731-735页

作者：耿长安刘锡葵中国科学院昆明植物研究所植物化学与西部植物资源持续利用国家重点实验室昆明650204 中国科学院研究生院北京100049

从栽培云南萝芙木(Rauvolfia yunnanensis Tsiang)叶的95%乙醇提取物中分离得到11个吲哚类生物碱:Caberine(1),19-Ethoxyl-1-demethyl-Δ1-17-acetylajmaline(2),Vellosimine(3),β-Yohimbine(4),Yohimbine(5),Vinorine(6),Picrinine(7),Nareline(8),Akuammicine(9),Strictamine(10),Reserpine(11).采用UV,IR,MS和1D,2D NMR方法对它们的结构进行了鉴定,其中化合物2为新的吲哚生物碱,化合物1,8和9为首次从该属植物中分离得到.

关键词：云南萝芙木吲哚生物碱 19-Ethoxyl-1-demethyl-Δ~1-17-acetylajmaline Caberine 利血平育亨宾

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云南萝芙木根中吲哚生物碱及其抗菌活性

中草药 2023年第4期54卷 1033-1042页

作者：吴昊宋京风范堃秦马龙胡炜彦郭瑞荣高雯张荣平李玉鹏于浩飞丁彩凤昆明医科大学药学院暨云南省天然药物药理重点实验室云南昆明650500 云南中医药大学云南昆明650500

目的研究云南萝芙木Rauvolfia yunnanensis根中的吲哚类生物碱化学成分及抗菌活性,明确该植物抗菌活性成分。方法采用硅胶柱色谱、RP-C18、Sephadex LH-20、半制备HPLC等方法进行分离纯化,结合波谱数据及文献参数对化合物进行结构鉴定... 详细信息

目的研究云南萝芙木Rauvolfia yunnanensis根中的吲哚类生物碱化学成分及抗菌活性,明确该植物抗菌活性成分。方法采用硅胶柱色谱、RP-C18、Sephadex LH-20、半制备HPLC等方法进行分离纯化,结合波谱数据及文献参数对化合物进行结构鉴定,并采用微量肉汤稀释法对单体化合物进行抗菌活性评价。结果从云南萝芙木根醋酸乙酯部位共分离得到20个吲哚类生物碱化合物,分别鉴定为维诺任碱(1)、霹雳萝芙木碱(2)、四叶萝芙木新碱(3)、萝加灵(4)、西特斯日钦碱(5)、缝籽木醇(6)、柯楠醇(7)、二氢柯楠醇(8)、毛茶碱(9)、异毛茶碱(10)、佩立任碱(11)、10-羟基-16-表-花菊醇(12)、育亨宾(13)、降马枯星碱B(14)、洛柯碱(15)、阿枯米定碱(16)、去乙酰阿枯米灵(17)、利血平(18)、哈尔满碱(19)、梅林诺宁F(20)。其中化合物20对白色念球菌表现出较好的抗菌活性,最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)值为3.12μg/mL,与临床抗真菌药物氟康唑的MIC值相同。化合物1、11对大肠杆菌,化合物11、13、20对枯草芽孢杆菌均表现出一定的抗菌活性,MIC值为6.25~12.50μg/mL,活性与植物源抗菌药物小檗碱相当。结论化合物20为首次从萝芙木属中分离得到,化合物6、8~13、16~18均为首次从该植物中分离得到,部分单体化合物表现出潜在抗菌活性。

关键词：云南萝芙木吲哚类生物碱抗菌活性梅林诺宁F 维诺任碱佩立任碱二氢柯楠醇育亨宾

云南萝芙木与催吐萝芙木HPLC指纹图谱建立及利血平测定

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中成药 2020年第8期42卷 2107-2112页

作者：唐林肖望重刘检龙红萍吴笛王宇红湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410007 中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地湖南长沙410208

目的建立萝芙木属药材HPLC指纹图谱,并测定利血平的含有量。方法样品80%乙醇提取物的分析采用C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相乙腈-0.05%三乙胺溶液,梯度洗脱;检测波长280 nm。采用UPLC-Q-TOF进行色谱峰组分鉴定。通过相似度评... 详细信息

目的建立萝芙木属药材HPLC指纹图谱,并测定利血平的含有量。方法样品80%乙醇提取物的分析采用C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相乙腈-0.05%三乙胺溶液,梯度洗脱;检测波长280 nm。采用UPLC-Q-TOF进行色谱峰组分鉴定。通过相似度评价并结合聚类分析、主成分分析及正交偏最小二乘法-判别分析对云南萝芙木与催吐萝芙木的总体质量评价。结果15批样品HPLC指纹图谱中有15个共有峰,对其中11个共有峰进行成分鉴别。相似度0.83~0.97,表明该药材总体质量较为稳定;但通过模式识别技术均发现不同批次药材质量之间存在一定的差异,且主要分为2类,最后进一步采用正交偏最小二乘法-判别分析筛选出云南萝芙木与催吐萝芙木质量差异的2种主要成分,分别为利血平、萝芙木碱。结论该方法科学、准确、可靠且简便,可系统、全面地评价萝芙木属药材的质量。

关键词：云南萝芙木催吐萝芙木指纹图谱 HPLC 化学模式识别

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云南萝芙木在怒江河谷地区试种报告

中药材 2007年第6期30卷 631-633页

作者：刘锡葵张方进祖炬雄中国科学院昆明植物研究所植物化学与西部植物资源持续利用国家重点实验室云南昆明650204 怒江方正植物生化有限公司云南怒江673100

云南萝芙木从云南省西畴县引入云南怒江干热河谷地区,经3年试种,生长良好,可终年不落叶,定植两年的植株,根鲜重可达1400 g。试种结果表明,利用干热河谷地区小气候环境,有利于扩展云南萝芙木种植区和药材资源。

关键词：云南萝芙木试种怒江河谷

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云南萝芙木叶愈伤组织诱导与植株再生

中南林业科技大学学报 2008年第3期28卷 49-54页

作者：龙绛雪曹福祥曹基武董旭杰李治平中南林业科技大学湖南长沙410004 醴陵市林业局湖南醴陵412200

研究了云南萝芙木叶愈伤组织的诱导及器官发生条件.结果表明:诱导愈伤组织的培养基为MS+2,4-D 2.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L;诱导愈伤组织芽分化和增殖的培养基分别为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L和MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;根分化... 详细信息

研究了云南萝芙木叶愈伤组织的诱导及器官发生条件.结果表明:诱导愈伤组织的培养基为MS+2,4-D 2.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L;诱导愈伤组织芽分化和增殖的培养基分别为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L和MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;根分化的最适培养基为1/2 MS+NAA 0.8 mg/L;生根苗经练苗后移栽,成活率达90%,生长良好.

关键词：云南萝芙木组织培养愈伤组织植株再生

云南萝芙木pnae基因全长克隆及其序列分析

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生物技术通报 2013年第4期29卷 75-80页

作者：郭川曹福祥刘继科冯延芝李猛中南林业科技大学生命科学与技术学院长沙410004

根据已知的其他物种PNAE酶cDNA序列设计引物,采用RT-PCR技术从云南萝芙木叶片中扩增获得pnae基因部分cDNA序列即PNAE酶基因中间大片段,再用RACE技术获得其两端序列。序列拼接得到完整的1 004 bp的PNAE酶基因,根据获得的序列,分析得到795... 详细信息

根据已知的其他物种PNAE酶cDNA序列设计引物,采用RT-PCR技术从云南萝芙木叶片中扩增获得pnae基因部分cDNA序列即PNAE酶基因中间大片段,再用RACE技术获得其两端序列。序列拼接得到完整的1 004 bp的PNAE酶基因,根据获得的序列,分析得到795 bp的开放阅读框,编码264个氨基酸。序列分析显示,云南萝芙木中PNAE酶氨基酸序列与蛇根木中的该酶氨基酸序列同源性高达90%,但和其他植物物种中的PNAE酶氨基酸序列,以及其他物种间的PNAE酶氨基酸序列同源性都不高,在40%-60%之间,表明不同物种中PNAE酶氨基酸序列不具有全序列的高度同源性。进一步序列分析发现,在各植物的PNAE酶氨基酸序列中都存在两个高度保守的氨基酸区域,表明不同物种中PNAE酶存在共同的高度保守区段。

关键词：云南萝芙木 PNAE酶基因RT-PCR RACE 序列分析

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云南萝芙木中利血平含量测定方法的建立

西部林业科学 2014年第1期43卷 110-114页

作者：龙绛雪蒋太煜徐文宣钟伏勇厦门理工学院环境科学与工程学院福建厦门361024

通过分光光度法建立了一套简便、准确检测云南萝芙木中利血平的新方法并确定其最适反应体系。该方法基于利血平芳香环结构与2，4-二硝基-6-溴苯胺重氮化盐偶合反应，其红褐色偶合产物与利血平浓度呈正相关。结果表明，该方法反应灵敏、... 详细信息

通过分光光度法建立了一套简便、准确检测云南萝芙木中利血平的新方法并确定其最适反应体系。该方法基于利血平芳香环结构与2，4-二硝基-6-溴苯胺重氮化盐偶合反应，其红褐色偶合产物与利血平浓度呈正相关。结果表明，该方法反应灵敏、专一，产物稳定性好。反应体系最适检测波长510 nm，最适反应温度和时间分别为40℃、10 min，最适反应摩尔比为1︰1，反应终止0.5 h检测适宜，体系反应过程宜遮光。利血平在0～60μg/mL遵从比尔定律。通过对萝芙木甲醇浸提物的检测结果表明，该方法与HPLC法没有明显差异，有效性高，适合萝芙木原料及产品中利血平的快速检测及其质量监控。

关键词：云南萝芙木利血平测定方法 2,4-二硝基-6-溴苯胺重氮化偶合反应分光光度法

云南萝芙木中三种生物碱含量的HPLC法测定

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湖北农业科学 2011年第11期50卷 2331-2333页

作者：邓明曹福祥龙绛雪董旭杰范海艳中南林业科技大学生命科学与技术学院长沙410004

运用高效液相色谱法(HPLC)测定云南萝芙木中育亨宾、阿吗碱、利血平3种生物碱的含量。采用岛津VP-ODS C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇-(0.004 mol/L二乙胺)水系统,梯度洗脱,流速为1 mL/min,检测波长278 nm,柱温30℃。结... 详细信息

运用高效液相色谱法(HPLC)测定云南萝芙木中育亨宾、阿吗碱、利血平3种生物碱的含量。采用岛津VP-ODS C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇-(0.004 mol/L二乙胺)水系统,梯度洗脱,流速为1 mL/min,检测波长278 nm,柱温30℃。结果表明,育亨宾在0.140～0.700μg(r=0.999 1)、阿吗碱在0.096～0.480μg(r=0.998 7)、利血平在0.104～0.520μg(r=0.998 8)范围内呈现良好的线性关系,平均加样回收率分别为96.4%、95.5%、96.3%,变异系数分别为1.15%、0.48%、1.14%。该方法可同时检测萝芙木根中育亨宾、阿吗碱、利血平3种生物碱,准确,快速,简便。

关键词：云南萝芙木高效液相色谱育亨宾阿吗碱利血平

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云南萝芙木异胡豆苷合成酶基因的克隆与分析

中南林业科技大学学报 2012年第6期32卷 128-131页

作者：许若娴曹福祥彭继庆司书斌中南林业科技大学湖南长沙410004

以云南萝芙木叶片为材料,通过RT-PCR方法首次克隆了云南萝芙木萜类吲哚生物碱(terpenoid indole alkaloids,TIAs)次生代谢的合成途径中重要的限速酶——异胡豆苷合成酶(strictosidine synthase,STR)的基因并进行了生物信息学分析。生物... 详细信息

以云南萝芙木叶片为材料,通过RT-PCR方法首次克隆了云南萝芙木萜类吲哚生物碱(terpenoid indole alkaloids,TIAs)次生代谢的合成途径中重要的限速酶——异胡豆苷合成酶(strictosidine synthase,STR)的基因并进行了生物信息学分析。生物信息学分析表明,该基因的编码区长度为1 038 bp,编码345个氨基酸的多肽,等电点为5.06,N-端有一长度为27个氨基酸参与分泌的信号肽。二级结构预测指出,延伸链和不规则盘绕是STR蛋白质最大量的结构元件,而α-螺旋和β-转角则散布于整个蛋白质。同源性分析则表明,云南萝芙木中的STR和其它植物来源的STR同源,使用MEGA5.1构建了植物的STR分子系统进化树。

关键词：云南萝芙木萜类引哚生物碱异胡豆苷合成酶 RT-PCR 生物信息学分析