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维氏气单胞菌和豚鼠气单胞菌二联灭活疫苗制备及其对鲫免疫效果的评价

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维氏气单胞菌和豚鼠气单胞菌二联灭活疫苗制备及其对鲫免疫效果的...

作者：索同号吉林农业大学

学位级别：硕士

近年来,关于气单胞菌感染水生动物的报道屡见不鲜,对水产养殖行业造成了严重的经济损失。之前,对于气单胞菌引起的水生动物疾病大多使用抗生素或化学药物进行预防或是治疗,这不仅对水环境造成了严重的污染,多次使用还会增加养殖动物的... 详细信息

近年来,关于气单胞菌感染水生动物的报道屡见不鲜,对水产养殖行业造成了严重的经济损失。之前,对于气单胞菌引起的水生动物疾病大多使用抗生素或化学药物进行预防或是治疗,这不仅对水环境造成了严重的污染,多次使用还会增加养殖动物的耐药性。相比之下,细菌灭活疫苗不仅使用简单便捷,安全性高,而且绿色无污染,生产成本低,非常适合大面积推广使用。我国的水产疫苗虽然起步较晚,但是随着科研工作者们的不懈努力,也取得了较大的成就。目前我国有关水产疫苗的研究大多集中在单价疫苗,虽然保护率高,但是保护对象单一,只能预防单一的病原菌引发的疾病,而水产动物发病大多都是多种病原菌联合致病,本研究将实验室分离保存的维氏气单胞菌菌株和豚鼠气单胞菌菌株用福尔马林进行灭活,制备成二联疫苗,并将疫苗的浓度设成低浓度、中浓度和高浓度三个不同的梯度。采用腹腔注射的方式免疫鲫鱼,而后进行攻毒试验测定疫苗免疫保护率。首先,对菌液灭活时的温度和福尔马林浓度进行了探索,选取最佳灭活温度为28℃,福尔马林终浓度为0.2%,灭活时间12 h。在确定安全性后,将制备的灭活苗用PBS调节至三种不同的浓度:2.0×10CFU/m L、4.0×10CFU/m L和8.0×10CFU/m L。按浓度的不同将疫苗分为三组,同时设置空白对照组。分别在免疫前(0 d),免疫后第7 d、14 d(第二次免疫)、21 d、28 d、35 d随机挑选一定数量鲫鱼麻醉后进行尾静脉采血,采集的血液放入4℃冰箱过夜,经离心后吸取上层血清,用ELIAS试剂盒测定血清中SOD、CAT、Ig M、AKP、LZM、ACP、补体C3、补体C4的含量。采集肝、脾、肾、肠组织,进行实时荧光定量PCR检测。在第35 d进行攻毒试验,测定疫苗免疫保护率。结果显示,在第一次免疫后,所有疫苗组血清中均能产生高水平的Ig M抗体,并在第二次加强免疫后持续升高。同时血清中SOD、CAT、AKP、LZM、ACP、C3、C4的含量也在第一次免疫后显著升高,并在第二次加强免疫后持续上升,在21 d时达到最大值。PBS组在整个免疫周期内无明显变化,与疫苗组形成了显著性差异(P二次加强免疫后持续上升,21 d时达到最大值,28 d表达量有所下降。免疫保护率结果显示,中浓度疫苗组对维氏气单胞菌的保护率最高,达到了75%,低浓度与高浓度组对维氏气单胞菌的保护率相同,均为70%。对豚鼠气单胞菌保护率最高的是中浓度组,保护率为80%,保护率最低的是高浓度组,保护率为70%。本试验探究了不同的疫苗浓度对鲫鱼免疫保护率的影响,旨在为二联疫苗的制备提供基础的理论依据。

关键词：鲫鱼维氏气单胞菌豚鼠气单胞菌灭活疫苗二联疫苗

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猪圆环支原体二联疫苗临床免疫效果的评估

猪业科学 2023年第3期40卷 50-52页

作者：吴丽艳全雪容张冰洁申世川赵永旭戴江河齐小东秦云张军佳和农牧股份有限公司湖南长沙410016 法国诗华动物保健公司北京100102 诗华SSIU 浙江杭州310018

猪圆环病毒2型(Porcine Circovirus Type2,PCV2)感染可导致种猪繁殖障碍以及生长育肥猪生长缓慢、日增重降低、料重比升高,并发其他疾病,导致死亡率增加等。猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,M.hyo)遍布世界上绝大部分养猪国家,... 详细信息

猪圆环病毒2型(Porcine Circovirus Type2,PCV2)感染可导致种猪繁殖障碍以及生长育肥猪生长缓慢、日增重降低、料重比升高,并发其他疾病,导致死亡率增加等。猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,M.hyo)遍布世界上绝大部分养猪国家,是猪呼吸道综合征(PRDC)的原发性病原之一,可造成养猪生产严重的经济损失。疫苗免疫是控制这两种疾病的最重要手段,PCV2与M.hyo两种疫苗免疫时间接近,免疫持续期要求类似(越长久越好)。

关键词：猪肺炎支原体猪圆环病毒2型生长育肥猪二联疫苗猪繁殖障碍 PCV2 猪呼吸道综合征日增重

猪圆环病毒-支原体二联疫苗(诗圆静)免疫攻毒试验

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猪业科学 2023年第3期40卷 53-55页

作者：牛中伟法国诗华动物保健公司兽医服务部北京100102

猪圆环病毒2型(PCV2)和猪肺炎支原体(M.hyo)是世界范围内影响猪群健康和给牧场带来严重经济损失的两种主要病原。PCV2是猪圆环病毒相关疾病(PCVD)的主要病原,感染可导致明显的临床症状如种猪繁殖障碍以及生长育肥猪生长迟缓、日增重降... 详细信息

猪圆环病毒2型(PCV2)和猪肺炎支原体(M.hyo)是世界范围内影响猪群健康和给牧场带来严重经济损失的两种主要病原。PCV2是猪圆环病毒相关疾病(PCVD)的主要病原,感染可导致明显的临床症状如种猪繁殖障碍以及生长育肥猪生长迟缓、日增重降低、料重比升高,并发其他疾病,导致死亡率增加;也可能不表现症状,呈亚临床感染状态,导致猪群生长速度变慢,严重影响经济效益。

关键词：猪肺炎支原体猪圆环病毒亚临床感染猪群健康二联疫苗生长育肥猪猪繁殖障碍主要病原

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猪圆环支原体二联疫苗的研发和工艺创新

养猪 2022年第5期 81-85页

作者：吴竞刘灿王科文硕腾(上海)企业管理有限公司上海长宁200050 硕腾生物制药有限公司江苏苏州215127

联合疫苗是指将多种活的或灭活的微生物以及抗原成分联合配制而成的疫苗,能够预防不同病原微生物引起的多种疾病或同一种病原微生物的不同血清型引起的疾病。在联合疫苗研发的过程中,需充分考虑组分间的相容性、非活性成分对联合疫苗的... 详细信息

联合疫苗是指将多种活的或灭活的微生物以及抗原成分联合配制而成的疫苗,能够预防不同病原微生物引起的多种疾病或同一种病原微生物的不同血清型引起的疾病。在联合疫苗研发的过程中,需充分考虑组分间的相容性、非活性成分对联合疫苗的影响、佐剂对联合疫苗的影响以及联合疫苗的稳定性和有效期。联合疫苗的使用能简化免疫程序、提高接种人员的依从性以及降低疫苗的管理成本[1]。猪圆环和支原体的联合疫苗是近年来猪用疫苗中设计和研发的热点,从全国兽用生物制品批签发数量来看,圆支二联苗是市场对圆环疫苗和支原体疫苗更依赖的选择。2021年3月10日,硕腾公司的瑞圆舒®(猪圆环病毒1-2型嵌合体、支原体肺炎二联疫苗)正式获得中国农业农村部批准,成为我国首个获批的“即用型”猪用圆环支原体二联进口疫苗。瑞圆舒®适用于3周龄或3周龄以上的健康猪,用于预防猪圆环病毒2型引起的感染,减少因猪肺炎支原体感染引起的肺炎。瑞圆舒®自2013年在美国首次上市以来,其使用的安全性、经济性、有效性在全球范围内得到了广泛而充分的验证。本文介绍瑞圆舒®独特的研发和工艺特点,旨在分析其提升猪群健康福利,帮助养殖企业创造经济价值背后蕴含的科技价值。

关键词：病原微生物联合疫苗猪圆环病毒2型二联疫苗免疫程序猪群健康二联苗接种人员

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二联疫苗及药物对大菱鲆的免疫影响研究

二联疫苗及药物对大菱鲆的免疫影响研究

作者：曹宏梅中国海洋大学

学位级别：硕士

本文分为两部分,第一部分针对大菱鲆养殖过程中常见致病菌鳗弧菌(Vibrio anguillarum)和溶藻弧菌(V. alginolyticus)制备了二联疫苗,探讨其免疫效果,为生产应用提供基础数据;第二部分研究了在鳗弧菌疫苗免疫接种大菱鲆之前使用药物对疫... 详细信息

本文分为两部分,第一部分针对大菱鲆养殖过程中常见致病菌鳗弧菌(Vibrio anguillarum)和溶藻弧菌(V. alginolyticus)制备了二联疫苗,探讨其免疫效果,为生产应用提供基础数据;第二部分研究了在鳗弧菌疫苗免疫接种大菱鲆之前使用药物对疫苗的免疫效果的影响。试验在中国水产科学院黄海水产研究所麦岛试验基地进行,健康大菱鲆(Scophtalmus maximus),体重31.2±1.9g,水温18±2℃。1.通过0.3%福尔马林灭活分别制备鳗弧菌(Vibrio anguillarum)和溶藻弧菌(V. alginolyticus)2种单种疫苗,并将2种菌等量配制成二联疫苗,单次腹腔注射免疫大菱鲆(Scophtalmus maximus)。免疫剂量为0.2ml,每周采血1次,通过检测免疫后血清中替代途径补体活力、溶菌酶活力、抗体凝集效价的变化并分别进行攻毒试验比较疫苗的保护效果。结果显示,3种疫苗对所测定的各免疫指标都有一定的促进作用,但二联疫苗后期效果低于2种单苗。二联疫苗对鳗弧菌和溶藻弧菌的免疫保护率分别为83.52%、83.24%,而鳗弧菌单苗对鳗弧菌攻毒、溶藻弧菌单苗对溶藻弧菌攻毒的免疫保护率分别为80.37%、74.89%。本研究首次发现溶菌酶活力及补体旁路途径可能受到2种抗原同时免疫的影响。但免疫保护率是检验疫苗有效性的最有说服力的指标,从这个角度来讲鳗弧菌和溶藻弧菌二联疫苗是可行的。2.口灌给药大菱鲆,连续一周,磺胺间甲氧嘧啶、土霉素、氟苯尼考、左旋咪唑给药浓度分别为100mg/kg、100mg/kg、20mg/kg、10mg/kg。第8 d腹腔注射免疫大菱鲆0.2ml,疫苗为通过0.3%福尔马林灭活制备的鳗弧菌疫苗。对照组注射等量的PBS。每周采血1次,通过测定白细胞数量、血清蛋白含量、血清抗体水平及对鳗弧菌的免疫保护率比较四种药物对免疫后的大菱鲆特异、非特异免疫系统的调节作用。结果显示各测试的免疫指标在实验的第1周都有所抑制,但从第2周开始都不同程度的恢复。磺胺间甲氧嘧啶和土霉素对白细胞数量

关键词：大菱鲆二联疫苗鳗弧菌溶藻弧菌药物

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猪圆环病毒及支原体二联疫苗使用效果观察

畜牧兽医科学（电子版） 2022年第18期 6-7页

作者：李春明山西省稷山县畜牧兽医发展中心山西运城043200

圆环病毒是导致猪圆环(PCVD)的重要致病因子,分为PCV1和PCV22类。猪圆环病多表现为断奶仔猪多器官功能衰减综合征、皮炎肾病综合征、先天性震颤等疾病,对全球养猪业都有很大影响。猪圆环病毒2型可使猪免疫系统受损,导致机体免疫力下降,... 详细信息

圆环病毒是导致猪圆环(PCVD)的重要致病因子,分为PCV1和PCV22类。猪圆环病多表现为断奶仔猪多器官功能衰减综合征、皮炎肾病综合征、先天性震颤等疾病,对全球养猪业都有很大影响。猪圆环病毒2型可使猪免疫系统受损,导致机体免疫力下降,通常会导致猪的二次感染和混合感染,因此不易确诊和治疗。该文从猪圆环病毒的病原学、流行病学、临床表现、相关疫苗种类和实际使用数据进行分析,以国内某厂家圆支二联灭活疫苗与国产一种圆环疫苗进行对比,得出圆支二联疫苗接种后,猪圆环病毒的阳性和总体的离散性比只打1针圆环苗好。

关键词：猪圆环病毒二联疫苗支原体效果

鳗弧菌和溶藻弧菌二联疫苗对大菱鲆的免疫效果

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中国水产科学 2006年第3期13卷 397-402页

作者：曹宏梅李健战文斌中国海洋大学生命科学与技术学部中国水产科学研究院黄海水产研究所农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室

将鳗弧菌(Vibrio anguillarum)和溶藻弧菌(V.alginolyticus)分别用0.3%福尔马林灭活,制备成鳗弧菌和溶藻弧菌2种单苗,并将2种菌等量配制成二联疫苗,单次腹腔注射免疫大菱鲆(Scophtalmus maximus)。通过检测免疫后替代途径补体活力、溶... 详细信息

将鳗弧菌(Vibrio anguillarum)和溶藻弧菌(V.alginolyticus)分别用0.3%福尔马林灭活,制备成鳗弧菌和溶藻弧菌2种单苗,并将2种菌等量配制成二联疫苗,单次腹腔注射免疫大菱鲆(Scophtalmus maximus)。通过检测免疫后替代途径补体活力、溶菌酶活力、抗体凝集效价的变化并分别进行攻毒实验比较疫苗的免疫效果。结果显示,3种疫苗对所测定的各免疫指标都有一定的促进作用,但二联疫苗后期效果低于2种单苗。二联疫苗对鳗弧菌和溶藻弧菌的免疫保护率分别为83.52%和83.24%,而鳗弧菌单苗对鳗弧菌攻毒、溶藻弧菌单苗对溶藻弧菌攻毒的免疫保护率分别为80.37%和74.89%。可以认为2株菌具有制备二联疫苗的可能性。

关键词：大菱鲆二联疫苗鳗弧菌溶藻弧菌

H9亚型禽流感与新城疫重组二联疫苗株的构建与拯救

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中国家禽 2013年第16期35卷 16-20页

作者：丁平云陈雨昕古小兵胡顺林陈坚刘晓文王晓泉陈鸿志刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病重点开放实验室江苏扬州225009

为研制H9亚型禽流感和新城疫的重组二联活疫苗,从农业部畜禽传染病重点开放实验室2012年分离的H9亚型禽流感病毒中选取一株具有代表性的流行株A/Chicken/Jiangsu/WJ57/2012(H9N2)作为HA基因的供体。在新城疫弱毒LX株反向遗传操作平台的... 详细信息

为研制H9亚型禽流感和新城疫的重组二联活疫苗,从农业部畜禽传染病重点开放实验室2012年分离的H9亚型禽流感病毒中选取一株具有代表性的流行株A/Chicken/Jiangsu/WJ57/2012(H9N2)作为HA基因的供体。在新城疫弱毒LX株反向遗传操作平台的基础上,构建了表达该株H9亚型禽流感病毒HA基因的重组新城疫病毒基因组全长cDNA克隆pLX-H9HA。拯救出的重组嵌合体病毒rLX/H9HA经间接免疫荧光鉴定,并对其生物学特性、安全性和免疫原性进行测定。结果表明:获救的重组病毒呈典型弱毒特征,同时保持了亲本毒株的高滴度生长特性和遗传稳定性,可作为H9亚型禽流感和新城疫二联活疫苗的候选株。

关键词：新城疫病毒禽流感病毒反向遗传二联疫苗

嗜水气单胞菌和河弧菌二联疫苗对鲫的免疫效果

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水生生物学报 2002年第1期26卷 52-56页

作者：李爱华吴玉深蔡桃珍卢全章中国科学院水生生物研究所淡水生态与生物技术国家重点实验室武汉430072

在采用正交试验设计优化了 Aeromonas hydrophila和 Vibrio fluvialis二联全菌疫苗制备工艺的基础上 ,研究了采用该工艺所制备的疫苗对鲫的免疫保护效果。结果表明注射免疫鲫4周后 ,抗 A.hydrophila和 V.fluvialis血清凝集效价分别为 :1... 详细信息

在采用正交试验设计优化了 Aeromonas hydrophila和 Vibrio fluvialis二联全菌疫苗制备工艺的基础上 ,研究了采用该工艺所制备的疫苗对鲫的免疫保护效果。结果表明注射免疫鲫4周后 ,抗 A.hydrophila和 V.fluvialis血清凝集效价分别为 :1∶ 4— 1∶ 3 2和 1∶ 2— 1∶ 1 6 ,平均都为 1∶ 1 0 ,但对攻毒均具有有效的保护作用。浸泡免疫、高渗浸泡免疫或加多糖浸泡免疫在免疫 4周后 ,对 A.hydrophila攻毒均无保护作用 ;然而 ,加多糖浸泡免疫对 V.fluvialis攻毒可产生有效的保护。免疫扩散试验表明 ,在煮沸并经超声波处理后的 A.hydrophila或V.fluvialis菌液中均存在两种优势抗原。

关键词：二联疫苗嗜水气单胞菌河弧菌鲫鱼免疫效果