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不同铜源对Caco-2细胞内铜-ATP酶二价金属离子转运体1和金属硫蛋白含量的影响

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中国兽医杂志 2016年第4期52卷 49-51页

作者：高晨朱连勤朱风华王学鑫张婷张静青岛农业大学动物科技学院山东青岛266109 德州学院农学系山东德州253023

利用Caco-2细胞模型研究不同浓度硫酸铜,微米氧化铜,纳米氧化铜(铜水平2、4、8、16 mg/L)对细胞铜-ATP酶、二价金属离子转运体1(Divalent Metal Transporter 1,DMT1)、金属硫蛋白(metallothionein,MT)含量的影响。结果显示,培养液中添... 详细信息

利用Caco-2细胞模型研究不同浓度硫酸铜,微米氧化铜,纳米氧化铜(铜水平2、4、8、16 mg/L)对细胞铜-ATP酶、二价金属离子转运体1(Divalent Metal Transporter 1,DMT1)、金属硫蛋白(metallothionein,MT)含量的影响。结果显示,培养液中添加铜离子能提高Caco-2细胞铜-ATP酶、MT含量,低浓度铜离子能提高细胞DMT1含量,高浓度铜离子降低细胞DMT1含量。纳米氧化铜对几种铜转运蛋白的作用与硫酸铜类似,但纳米氧化铜对铜-ATP酶、MT、DMT1含量的影响更加明显。

关键词：纳米氧化铜 Caco-2细胞铜-ATP酶金属硫蛋白二价金属离子转运体1

脑缺血诱导大鼠皮层和海马二价金属离子转运体1表达增加的研究

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神经解剖学杂志 2011年第3期27卷 301-306页

作者：李艳伟赵晋英黄俊李琳湖南省邵阳医学高等专科学校解剖学教研室邵阳422000 山西医科大学教育部省部共建细胞生理学实验室太原030001

目的:探讨脑缺血对大鼠皮层、海马二价金属离子转运体1(DMT1)表达的影响。方法:雄性Wistar大鼠随机分为脑缺血1、3、7、28 d和假手术组。结扎双侧颈总动脉建立脑缺血模型组,假手术组仅分离双侧颈总动脉但不结扎。采用RT-PCR测定DMT1+/-I... 详细信息

目的:探讨脑缺血对大鼠皮层、海马二价金属离子转运体1(DMT1)表达的影响。方法:雄性Wistar大鼠随机分为脑缺血1、3、7、28 d和假手术组。结扎双侧颈总动脉建立脑缺血模型组,假手术组仅分离双侧颈总动脉但不结扎。采用RT-PCR测定DMT1+/-IRE mRNA的表达;采用免疫组化染色测定大鼠皮层及海马组织DMT1的表达。结果:大鼠皮层和海马DMT1+/-IRE mRNA的表达随缺血时间的延长逐渐增加。与假手术组比较,皮层DMT1+/-IRE mRNA的表达在缺血1、3 d时无差异(P>0.05);缺血7 d时表达增加(P1),缺血28d时增加更明显(P1)。海马DMT1-IRE mRNA表达除在缺血1 d时与假手术组无差异外(P>0.05),其余时间点DMT1+/-IRE mRNA表达均高于假手术组(P1)。随缺血时间的延长,大鼠皮层、海马的锥体细胞、颗粒细胞及血管内皮细胞DMT1的表达逐渐增加。DMT1的表达除缺血1 d组与假手术组无差别外(P>0.05),其余各组均高于假手术组(P1表达升高,DMT1表达的改变可能参与了脑缺血引起大鼠脑铁含量升高及神经元铁沉积过程。

关键词：脑缺血脑铁含量二价金属离子转运体1 大鼠

谷氨酸钠、γ-氨基丁酸注入黑质对大鼠尾壳核二价金属离子转运体1和膜铁转运辅助蛋白表达的影响

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解剖学报 2008年第6期39卷 795-799页

作者：关鹏王娜段相林常彦忠河北师范大学分子神经生物学与神经药理学研究所石家庄050016 河北医科大学基础课部石家庄050091

目的探讨谷氨酸、γ-氨基丁酸(GABA)对大鼠尾壳核铁代谢的影响。方法大鼠立体定位后,向大脑黑质分别注射谷氨酸钠(MSG)和GABA,观察大鼠尾壳核铁含量,黑质多巴胺能神经元酪氨酸羟化酶(TH)的变化以及尾壳核的无铁反应元件结构的二价金属... 详细信息

目的探讨谷氨酸、γ-氨基丁酸(GABA)对大鼠尾壳核铁代谢的影响。方法大鼠立体定位后,向大脑黑质分别注射谷氨酸钠(MSG)和GABA,观察大鼠尾壳核铁含量,黑质多巴胺能神经元酪氨酸羟化酶(TH)的变化以及尾壳核的无铁反应元件结构的二价金属离子转运体1(DMT1-IRE)、膜铁转运辅助蛋白(HP)含量的变化。结果与对照组相比,MSG组大鼠尾壳核铁含量显著增加,GABA组与对照组相比没有显著差异;谷氨酸钠组和GABA组大鼠黑质TH免疫阳性细胞平均吸光度(AA)与对照组相比均无显著差异;与对照组相比,谷氨酸钠组大鼠尾壳核DMT1-IRE表达均显著增加,而GABA组DMT1-IRE表达有明显降低;谷氨酸钠组大鼠尾壳核HP表达显著降低,GABA组HP表达显著增高。结论黑质的谷氨酸和GABA可能通过影响尾壳核DMT1-IRE和HP的表达影响纹状体尾壳核的铁代谢。

关键词：谷氨酸 γ-氨基丁酸二价金属离子转运体1 膜铁转运辅助蛋白免疫组织化学大鼠

铁调素在小鼠脑内的表达及其对膜铁转运蛋白1和二价金属离子转运体1表达的影响

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解剖学报 2007年第3期38卷 265-270页

作者：付丽娟段相林于鹏钱忠明常彦忠河北师范大学分子神经生物学与神经药理学研究所石家庄050016

目的探讨铁调素(hepcidin)在小鼠脑内的表达及其对膜铁转运蛋白1(ferroportin 1)和二价金属离子转运体1(DMT1)表达的调节作用。方法应用RT-PCR技术检测铁调素在正常小鼠各脑区的表达分布,并观察了脑室内注射铁调素对DMT1、膜铁转运蛋白... 详细信息

目的探讨铁调素(hepcidin)在小鼠脑内的表达及其对膜铁转运蛋白1(ferroportin 1)和二价金属离子转运体1(DMT1)表达的调节作用。方法应用RT-PCR技术检测铁调素在正常小鼠各脑区的表达分布,并观察了脑室内注射铁调素对DMT1、膜铁转运蛋白1表达的影响结果铁调素在小鼠脑内有广泛表达,且不同脑区表达程度不同,脉络丛部分表达较高。结论侧脑室内注射铁调素后,能够显著影响DMT1、膜铁转运蛋白1表达,且具有明显的区域特异性。

关键词：脑铁代谢铁调素二价金属离子转运体1 膜铁转运蛋白1 逆转录聚合酶链反应小鼠

17β-雌二醇对星形胶质细胞中二价金属离子转运体1表达的影响

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中国组织工程研究 2015年第B5期19卷 17-18页

作者：谭旭王婷婷青岛大学医学院生理学系山东省青岛市266071

背景：17β-雌二醇能明显增加HepG2细胞中二价金属离子转运体1表达，那么其是否也影响星形胶质细胞中二价金属离子转运体1的表达水平呢？目前还不可知。目的：观察17β-雌二醇对星形胶质细胞中二价金属离子转运体1表达的影响。方法：使... 详细信息

背景：17β-雌二醇能明显增加HepG2细胞中二价金属离子转运体1表达，那么其是否也影响星形胶质细胞中二价金属离子转运体1的表达水平呢？目前还不可知。目的：观察17β-雌二醇对星形胶质细胞中二价金属离子转运体1表达的影响。方法：使用不同剂量的17β-雌二醇干预原代培养的大鼠星形胶质细胞。MTT法检测17β-雌二醇对星形胶质细胞是否有毒性。Westernblot法测定星形胶质细胞中二价金属离子转运体1的表达水平。结果与结论：10nmol／L 17β-雌二醇干预12h虽对星形胶质细胞存活率没有影响，但能明显增加星形胶质细胞中二价金属离子转运体1的表达水平。

关键词：雌激素 17β-雌二醇二价金属离子转运体1 星形胶质细胞

二价金属离子转运体对铁、铅转运作用的研究现状

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毒理学杂志 2007年第6期21卷 504-507页

作者：顾成武郑良楷霍霞汕头大学医学院中心实验室广东汕头515041

二价金属离子转运体1(divalent metal transporter 1,DMT1)又称自然抵抗相关的巨噬细胞蛋白2(natural resistance-associated macrophage protein 2,Nramp2),是一种质子依赖性金属离子转运蛋白。肠道的DMT1是已知唯一的肠腔内摄取非血红素铁的跨膜转运体,其功能主要是介导上皮细胞对铁的吸收及参与铁从内吞小体移位到胞浆的过程。[第一段]

关键词：二价金属离子转运体1 铅铁转运神经毒性

P2X4信号轴对帕金森病动物模型中铁代谢的影响

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中华神经科杂志 2020年第6期53卷 423-430,431页

作者：高金照马江南王静侯炳辉谢安木青岛大学附属医院神经内科 266003

目的阐明P2X4信号轴对用6-羟基多巴胺(6-OHDA)成功诱导的帕金森病雄性大鼠模型黑质中铁代谢的影响。方法将120只雄性大鼠采用随机数字表法随机分为对照组、6-OHDA组(帕金森病组)、携带P2X4基因病毒(P2X4-positive intervention,P2X4-PI... 详细信息

目的阐明P2X4信号轴对用6-羟基多巴胺(6-OHDA)成功诱导的帕金森病雄性大鼠模型黑质中铁代谢的影响。方法将120只雄性大鼠采用随机数字表法随机分为对照组、6-OHDA组(帕金森病组)、携带P2X4基因病毒(P2X4-positive intervention,P2X4-PI)组、P2X4基因空载病毒(P2X4-negative control,P2X4-NC)组、P2X4-PI+6-OHDA组(先注射P2X4基因病毒,2周后注射6-OHDA)以及P2X4-NC+6-OHDA组(先注射空载基因病毒,2周后注射6-OHDA),共6组,每组20只。应用脑立体定位仪分别将上述相应的分组药品定位注射于大鼠左侧黑质。造模完成2周后进行行为学实验,筛选出合格大鼠模型,并进一步通过平衡杆实验评价各组大鼠的始动性及平衡能力。将造模完成且合格的大鼠模型断头取脑,留取脑组织,进行相关处理后保存备用。采用免疫荧光染色法、蛋白质印迹法分别检测6组大鼠左侧黑质中酪氨酸羟化酶(TH)阳性多巴胺能神经元数量的变化以及P2X4嘌呤受体(P2X4R)、二价金属离子转运体1(DMT1)、膜铁转运蛋白1(FPN1)的蛋白表达水平。结果免疫荧光染色结果显示:与对照组(7942.0±461.6)相比,帕金森病组(4724.0±261.1,t=13.17,P<0.01)和P2X4-NC+6-OHDA组(4470.0±228.9,t=14.21,P<0.001)大鼠左侧黑质中TH阳性多巴胺能神经元数量明显减少;P2X4-PI+6-OHDA组(2493.0±371.6,t=8.092,P<0.01)大鼠左侧黑质中TH阳性多巴胺能神经元数量显著少于P2X4-NC+6-OHDA组。蛋白质印迹结果显示:与对照组(1.723±0.146、1.369±0.107、1.020±0.059)相比,帕金森病组(2.107±0.070,t=4.368,P<0.05;1.733±0.117,t=4.245,P<0.05;0.783±0.042,t=5.795,P<0.01)和P2X4-NC+6-OHDA组(2.104±0.110,t=4.326;1.737±0.073,t=4.291;0.804±0.037,t=5.282;均P<0.05)大鼠左侧黑质中P2X4R、DMT1蛋白表达水平上升,FPN1蛋白表达水平下降;与P2X4-NC+6-OHDA组相比,P2X4-PI+6-OHDA组(2.875±0.170,t=8.770;2.845±0.180,t=12.92;0.550±0.040,t=6.216;均P<0.01)大鼠左侧黑质中P2X4R、DMT1蛋白表达水平上升,FPN1蛋白表达水平下降。结论P2X4基因过表达可使大鼠中脑黑质中的DMT1表达上调、FPN1表达下调,从而导致中脑黑质中铁元素的沉积,可能进而对多巴胺能神经元造成损伤,最终对帕金森病的发生和发展产生影响。

关键词：帕金森病 P2X4嘌呤受体二价金属离子转运体1 膜铁转运蛋白1

柳氮磺吡啶诱导乳腺癌ZR-75-1细胞发生铁死亡及其机制研究

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肿瘤 2018年第10期38卷 933-941页

作者：喻浩宸陈锐郭世朋蹇磊李康刘胜春重庆医科大学附属第一医院内分泌乳腺外科重庆400016

目的:观察柳氮磺吡啶(sulfasalazine)对乳腺癌ZR-75-1细胞铁死亡(ferroptosis)的激活,并探讨其可能的机制。方法:采用不同浓度的柳氮磺吡啶(0、0.5、1.0和2.0 mmol/L)处理乳腺癌ZR-75-1细胞。随后,在光学显微镜下观察细胞形态的变化;CC... 详细信息

目的:观察柳氮磺吡啶(sulfasalazine)对乳腺癌ZR-75-1细胞铁死亡(ferroptosis)的激活,并探讨其可能的机制。方法:采用不同浓度的柳氮磺吡啶(0、0.5、1.0和2.0 mmol/L)处理乳腺癌ZR-75-1细胞。随后,在光学显微镜下观察细胞形态的变化;CCK-8法检测细胞的增殖抑制率;蛋白质印迹法检测谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)及胱氨酸-谷氨酸反向转运体亚基xCT蛋白的表达水平;采用荧光探针标记不同浓度柳氮磺吡啶处理后的ZR-75-1细胞,通过流式细胞仪检测细胞内的荧光强度以监测活性氧(reactive oxygen specie,ROS)含量的变化;实时荧光定量PCR法检测二价金属离子转运体1(divalent metal transporter 1,DMT1)mRNA的表达水平。结果 :柳氮磺吡啶可引起ZR-75-1细胞形态学变化和死亡。低浓度柳氮磺吡啶对ZR-75-1细胞增殖的影响不大(P> 0.05),中浓度和高浓度组的柳氮磺吡啶对细胞增殖有明显的抑制作用(P值均<0.05)。较高浓度的柳氮磺吡啶可以抑制细胞内GPX4和xCT蛋白的表达水平(P值均<0.05),也可以促进ZR-75-1细胞内ROS的累积(P值均<0.05)。柳氮磺吡啶能提高ZR-75-1细胞内DMT1 mRNA的表达水平(P <0.05)。结论 :柳氮磺吡啶通过抑制xCT和GPX4蛋白表达使ZR-75-1细胞中ROS大量累积,细胞发生铁死亡,DMT1的激活可能是其机制之一。

关键词：乳腺肿瘤柳氮磺吡啶铁死亡二价金属离子转运体1

DMT1在APP/PS1转基因小鼠小脑皮质中表达上调

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中国医科大学学报 2018年第3期47卷 193-197页

作者：王思亓李欣潞林庚王卓程晓凤刘彤彤郑玮中国医科大学临床一系沈阳110122 中国医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室沈阳110122 锦州医科大学护理学院妇儿护理学教研室辽宁锦州121001 辽宁省人民医院神经内科沈阳110016

目的研究二价金属离子转运体1(DMT1)在APP/PS1转基因小鼠小脑内的分布。方法应用免疫组织化学、免疫荧光双标染色和共聚焦激光扫描显微镜观察DMT1和β-淀粉样蛋白(Aβ)在APP/PS1转基因小鼠小脑老年斑内的定位和分布,应用Western blottin... 详细信息

目的研究二价金属离子转运体1(DMT1)在APP/PS1转基因小鼠小脑内的分布。方法应用免疫组织化学、免疫荧光双标染色和共聚焦激光扫描显微镜观察DMT1和β-淀粉样蛋白(Aβ)在APP/PS1转基因小鼠小脑老年斑内的定位和分布,应用Western blotting检测DMT1在APP/PS1转基因小鼠小脑内的蛋白表达水平。结果 DMT1和Aβ免疫阳性产物均定位于老年斑内,分子层内较多,而浦肯野细胞层和颗粒层较少。与野生型小鼠相比,DMT1蛋白表达水平在APP/PS1转基因小鼠小脑内显著升高。结论APP/PS1转基因小鼠小脑Aβ老年斑内有大量DMT1表达,提示DMT1及其参与转运的二价金属离子可能参与小脑Aβ老年斑形成。

关键词：二价金属离子转运体1 β-淀粉样蛋白 APP/PS1转基因小鼠小脑阿尔茨海默病