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尾加压素Ⅱ诱导体外培养的乳鼠心肌细胞肥大的研究

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第一军医大学学报 2004年第6期24卷 642-645页

作者：左辉华洪介民郭衡山韦建瑞何艳华李志樑暨南大学第四附属院/广州市红十字会医院心内科广东广州510220 暨南大学第四附属院/广州市红十字会医院中心实验室广东广州510220 第一军医大学珠江医院心内科广东广州510282

目的研究尾加压素Ⅱ(UⅡ)能否诱导体外培养的乳鼠心肌细胞肥大。方法心肌细胞体外培养40 h后,换无血清DMEM继续培养24 h,应用流式细胞仪和3H-亮氨酸(3H-Leu)掺入法观察不同浓度UⅡ作用24 h后对心肌细胞大小和蛋白掺入率的影响。结果10-7... 详细信息

目的研究尾加压素Ⅱ(UⅡ)能否诱导体外培养的乳鼠心肌细胞肥大。方法心肌细胞体外培养40 h后,换无血清DMEM继续培养24 h,应用流式细胞仪和3H-亮氨酸(3H-Leu)掺入法观察不同浓度UⅡ作用24 h后对心肌细胞大小和蛋白掺入率的影响。结果10-7 mol/L的UⅡ能增加心肌细胞的大小(P=0.021)和3H-Leu掺入率(P=0.015)。结论UⅡ能诱导体外培养的乳鼠心肌细胞肥大。

关键词：尾加压素Ⅱ 诱导体外培养乳鼠心肌细胞肥大流式细胞术同位素标记

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乳鼠雪旺细胞对自体颅骨组织生长的影响

中国现代医学杂志 2017年第29期27卷 1-5页

作者：李钟鹏庞芳河广西医科大学附属口腔医院综合门诊广西南宁530021 广西医科大学附属口腔医院口腔种植科广西南宁530021

目的探讨乳鼠雪旺细胞对自体颅骨组织生长的影响。方法体外培养和纯化乳鼠雪旺细胞,取乳鼠颅骨组织分为对照组和观察组。对照组颅骨组织单独培养,观察组颅骨组织与雪旺细胞共同培养,培养第1、2和3周时免疫组织化学法测定颅骨组织骨钙素... 详细信息

目的探讨乳鼠雪旺细胞对自体颅骨组织生长的影响。方法体外培养和纯化乳鼠雪旺细胞,取乳鼠颅骨组织分为对照组和观察组。对照组颅骨组织单独培养,观察组颅骨组织与雪旺细胞共同培养,培养第1、2和3周时免疫组织化学法测定颅骨组织骨钙素和骨桥蛋白水平,酶联免疫法吸附法测定培养液中骨碱性磷酸酶活性含量。结果雪旺细胞在体外被成功培养,纯度>89%。不同时间点骨钙素水平有差别(P0.05);观察组和对照组骨桥蛋白水平无差别(P>0.05);观察组和对照组骨桥蛋白水平变化趋势无差别(P>0.05)。不同时间点骨碱性磷酸酶活性有差别(P<0.05);观察组和对照组骨碱性磷酸酶活性有差别(P<0.05),观察组骨碱性磷酸酶活性比对照组高;观察组和对照组骨碱性磷酸酶活性变化趋势有差别(P<0.05)。结论雪旺细胞可以提高颅骨组织骨钙素水平和骨碱性磷酸酶活性,促进颅骨组织的生长。

关键词：乳鼠雪旺细胞颅骨组织生长组织工程

高能微波对体外培养乳鼠心肌细胞生长活力的影响

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兽医大学学报 2003年第3期23卷 277-277,280页

作者：邓桦刘杰曹晓哲高亚兵吴小红王德文军事医学科学院放射医学研究所北京100850

体外培养的心肌细胞可保持心肌结构及功能上的诸多特点，有自发性节律性搏动，且不受神经、体液等体内因素的影响，因而在实验研究上得到广泛应用。目前，乳鼠心肌细胞的培养方法较多~[1]，但由于心脏细胞成分复杂，心肌细胞培养过程较... 详细信息

体外培养的心肌细胞可保持心肌结构及功能上的诸多特点，有自发性节律性搏动，且不受神经、体液等体内因素的影响，因而在实验研究上得到广泛应用。目前，乳鼠心肌细胞的培养方法较多~[1]，但由于心脏细胞成分复杂，心肌细胞培养过程较为繁琐，应根据实验目的摸索简便快捷的培养方法。随着微波技术的应用，微波污染也日益增多，并成为日常影响人畜身体健康的主要物理因素之一~[2]。本试验对乳鼠心肌细胞的培养方法作了改进，并观察了高能微波对乳鼠心肌细胞生长活力的影响。

关键词：高能微波体外培养乳鼠心肌细胞生长活力

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乳鼠心肌成纤维细胞培养方法的改进

江苏医药 2005年第3期31卷 189-190,F002页

作者：陈勇兵陈如坤陈力吴明施立杨文涛钱永跃苏州大学附属第二医院胸心外科 215004 浙江大学附属第二医院胸心外科

　目的　建立乳鼠心肌成纤维细胞培养模型。方法　通过对经典的差速贴壁分离法稍作改进,采用每次贴壁60 min、两次差速贴壁分离法收集、培养心肌成纤维细胞。结果　形态学观察和免疫细胞化学染色鉴定显示,成功培养心肌成纤维细胞,纯度达... 详细信息

　目的　建立乳鼠心肌成纤维细胞培养模型。方法　通过对经典的差速贴壁分离法稍作改进,采用每次贴壁60 min、两次差速贴壁分离法收集、培养心肌成纤维细胞。结果　形态学观察和免疫细胞化学染色鉴定显示,成功培养心肌成纤维细胞,纯度达 95%以上。结论　该研究成功建立乳鼠心肌成纤维细胞培养模型,为高纯度心肌成纤维细胞的获得和对其病理生理学的进一步研究打下良好基础。

关键词：乳鼠心肌成纤维细胞细胞培养免疫细胞化学染色

七氟醚和缺氧预适应对乳鼠心肌细胞生存和凋亡的影响

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中华麻醉学杂志 2002年第6期22卷 358-361页

作者：唐英王泉云毛咏秋中南大学湘雅医院麻醉科长沙市410008 四川大学华西医院麻醉科四川大学华西医院肿瘤生物科

目的探讨七氟醚预处理和缺氧预处理诱导乳鼠心肌细胞产生预适应的差异。方法第2代心肌细胞随机分为正常对照组（C组）、缺氧/复氧组（A/R组）、缺氧预适应组（IP组）和七氟醚组（S组）,每组均缺氧2h,复氧48h。取复氧1h心肌细胞用电镜... 详细信息

目的探讨七氟醚预处理和缺氧预处理诱导乳鼠心肌细胞产生预适应的差异。方法第2代心肌细胞随机分为正常对照组（C组）、缺氧/复氧组（A/R组）、缺氧预适应组（IP组）和七氟醚组（S组）,每组均缺氧2h,复氧48h。取复氧1h心肌细胞用电镜观察细胞超微结构变化;分别取复氧0、l、12、24、36和48h的细胞用MTT法测定细胞生存情况、流式细胞仪测定细胞凋亡率。结果（1）S组和IP组细胞超微结构改变不明显,未见凋亡细胞;A/R组改变明显,可见凋亡细胞;（2）在各个时点,S组和IP组的细胞生存能力显著低于C组（P0.05）;随着复氧时间的延长,S组和IP组的细胞生存能力有上升的趋势;（3）在各个时点,S组和IP组的细胞凋亡率显著高于C组（P<0.01）,显著低于A/R组（P<0.01）;S组和IP组间的细胞凋亡率只是在复氧0h和1h处有显著性差异;随着复氧时间的延长,S组和IP组的细胞凋亡率有下降的趋势,A/R组的则逐渐升高;（4）S组和IP组中的细胞生存力和凋亡之间存在着负相关关系。结论七氟醚预适应和缺氧预适应对缺氧/复氧损伤细胞可产生早期和延迟保护作用,且两者之间的作用相似,提示在体外实验中七氟醚预适应可取代缺氧预适应。

关键词：七氟醚缺氧预适应乳鼠心肌细胞细胞存活细胞凋亡实验研究

灯盏花素对缺氧/复氧诱导培养乳鼠心肌细胞凋亡的抑制作用

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中成药 2009年第12期31卷 1823-1827页

作者：周晓慧龚明玉闫凤霞承德医学院生化教研室河北承德067000

目的:探讨灯盏花素对缺氧/复氧诱导乳鼠心肌细胞凋亡的抑制作用及其作用机制。方法:利用原代培养的SD乳鼠心肌细胞建立模拟心肌缺血再灌注(MI/R)模型,分正常对照组,模型组和灯盏花素3个剂量(25、50、100mg/L)预处理组。用MTT法测定细胞... 详细信息

目的:探讨灯盏花素对缺氧/复氧诱导乳鼠心肌细胞凋亡的抑制作用及其作用机制。方法:利用原代培养的SD乳鼠心肌细胞建立模拟心肌缺血再灌注(MI/R)模型,分正常对照组,模型组和灯盏花素3个剂量(25、50、100mg/L)预处理组。用MTT法测定细胞存活率,用AnnexinⅤ-FITC/PI双标记法测定细胞凋亡率;用免疫组化法检测Bcl-2蛋白的表达;用Western-blot法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3的表达及细胞色素C(CytC)的释放。结果:缺氧复氧损伤后,与正常对照组比较,细胞存活率降低,细胞凋亡率升高,灯盏花素3个剂量预处理后,细胞存活率增加,细胞凋亡率降低,且显示剂量依赖性。另外,缺氧复氧损伤,可使心肌细胞Bcl-2蛋白表达减少,CytC释放增加,Caspase-3活性增强,灯盏花素预处理后,Bcl-2表达增强,CytC释放减少,Caspase-3活性降低。结论:灯盏花素可抑制模拟缺血再灌注损伤心肌细胞凋亡,其抗细胞凋亡作用可能与其增加Bcl-2蛋白表达,减少CytC的释放,抑制Caspase-3活性有关。

关键词：灯盏花素心肌细胞缺氧/复氧细胞凋亡 Bcl-2 Caspase-3 CytC 乳鼠

外源性精胺对缺氧诱导乳鼠心肌细胞凋亡的影响及其机制

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中国应用生理学杂志 2018年第3期34卷 193-196,288页

作者：袁迪王跃虹袁辉邵毅英范玉琪邵小婷扈敬魏璨徐长庆哈尔滨医科大学病理生理学教研室哈尔滨150086

目的:观察外源性精胺对缺氧所致的乳鼠心肌细胞凋亡的影响,并探讨其机制。方法:复制原代培养乳鼠心肌细胞缺氧损伤模型(使用pH=6.8的Hank's平衡盐溶液作为细胞培养基,排出氧气,然后在缺氧箱中培养24 h),细胞随机分为正常对照(Control)... 详细信息

目的:观察外源性精胺对缺氧所致的乳鼠心肌细胞凋亡的影响,并探讨其机制。方法:复制原代培养乳鼠心肌细胞缺氧损伤模型(使用pH=6.8的Hank's平衡盐溶液作为细胞培养基,排出氧气,然后在缺氧箱中培养24 h),细胞随机分为正常对照(Control)组、缺氧(Hypoxia)组和精胺干预(Hypoxia+Sp)组。Western blot检测心肌细胞多胺代谢关键酶(ODC、SSAT)蛋白质表达;CCK-8,Hoechst 33342染色观察细胞凋亡情况;光吸收法检测细胞(或培养液)内T-SOD和Caspase-3/-9活性,MDA、GSH含量;DCFH-DA染色观察细胞内活性氧(ROS)生成。结果:与正常组相比,Hypoxia组SSAT蛋白质表达、细胞凋亡率、MDA含量以及细胞内ROS生成增加,而ODC蛋白质表达、SOD活性、GSH含量降低;与Hypoxia组比较,Sp处理可减轻上述指标的变化。结论:外源性精胺可减轻缺氧引起的乳鼠心肌细胞损伤和凋亡,其机制与恢复多胺稳态和清除活性氧有关。

关键词：精胺心肌细胞活性氧凋亡缺氧乳鼠

七氟醚和缺氧预适应诱导乳鼠心肌细胞HSP_(70)表达的改变

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湖南医科大学学报 2003年第2期28卷 129-132页

作者：唐英王泉云中南大学湘雅医院麻醉科长沙410008 四川大学华西医院麻醉科成都610041

目的 :探讨七氟醚预适应和缺氧预适应对乳鼠心肌细胞热休克蛋白 70表达的影响。方法 :第 2代培养心肌细胞随机分为正常对照组 (C组 )、缺氧 /复氧组 (A/R组 )、缺氧预适应组 (IP组 )和七氟醚预适应组 (S组 ) ,每组均缺氧 2h ,复氧 48h... 详细信息

目的 :探讨七氟醚预适应和缺氧预适应对乳鼠心肌细胞热休克蛋白 70表达的影响。方法 :第 2代培养心肌细胞随机分为正常对照组 (C组 )、缺氧 /复氧组 (A/R组 )、缺氧预适应组 (IP组 )和七氟醚预适应组 (S组 ) ,每组均缺氧 2h ,复氧 48h。分别取复氧 0 ,1,12 ,2 4,36和 48h的细胞 ,用免疫组化染色检测HSP70 表达并进行图象分析。结果 :在各个时间点 ,S组和IP组间的HSP70 表达均显著高于A/R组和C组 (P 0 .0 5 )。随着复氧时间的延长 ,S组和IP组间的HSP70 表达从 1h开始增加 ,2 4h表达最强 ,与 1h相比差异具有显著性 (P 乳鼠心肌细胞HSP70 在延迟相呈高表达 ,提示HSP70 参与了七氟醚预适应和缺氧预适应的延迟保护相。

关键词：缺氧预适应诱导乳鼠心肌细胞 HSP-70 表达七氟醚预适应

转导组织型纤溶酶原激活剂基因大鼠乳鼠心肌成纤维细胞的功能表达

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中华医学杂志 2006年第39期86卷 2786-2788页

作者：陈勇兵施立杨文涛钱永跃 215004 苏州大学附属第二医院胸心外科 15004 苏州大学附属第二医院胸心外科

组织型纤溶酶原激活剂（tissue-type plasminogen activator，tPA）是一种理想的溶栓药物，其基因已被成功转入血管内皮细胞、平滑肌细胞及血管组织，但将tPA基因转导大鼠乳鼠（简称乳鼠）心肌成纤维细胞后功能表达如何尚未见报道。本... 详细信息

组织型纤溶酶原激活剂（tissue-type plasminogen activator，tPA）是一种理想的溶栓药物，其基因已被成功转入血管内皮细胞、平滑肌细胞及血管组织，但将tPA基因转导大鼠乳鼠（简称乳鼠）心肌成纤维细胞后功能表达如何尚未见报道。本研究通过采用新型假型逆转录病毒载体，介导tPA基因转导乳鼠心肌成纤维细胞，旨在观察转基因后心肌成纤维细胞的功能表达，为心血管外科手术后抗血栓基因治疗的进一步研究提供实验依据。

关键词：心肌成纤维细胞纤溶酶原激活剂 A基因转导功能表达组织型乳鼠大鼠 activator