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乳大鼠灌胃给药方法之改进

中国药理学通报 1994年第6期10卷 470-471页

作者：范志刚于晓凤张芙翠曲绍春吕怡芳白求恩医科大学药理教研室山西省临汾卫生学校黑龙江省大兴安岭地区卫生学校

乳大鼠灌胃给药方法之改进范志刚，于晓凤，张芙翠，曲绍春，吕怡芳（白求恩医科大学药理教研室，长春１３００２１）近年来，乳大鼠在医药学科研工作中，尤其是在药物对动物生长发育的影响研究中的应用越来越多。而有关这种乳大鼠的解... 详细信息

乳大鼠灌胃给药方法之改进范志刚，于晓凤，张芙翠，曲绍春，吕怡芳（白求恩医科大学药理教研室，长春１３００２１）近年来，乳大鼠在医药学科研工作中，尤其是在药物对动物生长发育的影响研究中的应用越来越多。而有关这种乳大鼠的解剖生理及灌胃方法的介绍甚少。过去多...

关键词：乳大鼠灌胃给药方法动物实验

乳大鼠、乳小鼠大脑皮层神经元原代培养及汉坦病毒体外感染

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乳大鼠、乳小鼠大脑皮层神经元原代培养及汉坦病毒体外感染

作者：崔继红第四军医大学

学位级别：硕士

汉坦病毒(HTV)属于布尼亚病毒科汉坦病毒属,是引起肾综合征出血热(HFRS)和汉坦病毒肺综合征(HPS)的致病病毒。HTV是一种泛嗜性病毒,病毒抗原在体内多种器官和多种类型细胞中分布。脑组织也是HFRS病毒感染的重要靶器官之一。我们以往的... 详细信息

汉坦病毒(HTV)属于布尼亚病毒科汉坦病毒属,是引起肾综合征出血热(HFRS)和汉坦病毒肺综合征(HPS)的致病病毒。HTV是一种泛嗜性病毒,病毒抗原在体内多种器官和多种类型细胞中分布。脑组织也是HFRS病毒感染的重要靶器官之一。我们以往的研究证实HTV感染乳鼠脑神经细胞中NP抗原免疫组化染色阳性,定位于胞浆内,分布于皮层、海马回、小脑蒲肯野细胞层等部位。本实验首先建立了乳小鼠、乳大鼠大脑皮层神经元体外培养的体系,以此作为病毒感染的靶细胞,在体外对HTV在脑皮层神经元中的感染以及病毒感染对神经元的影响进行初步研究。实验中采用出生后24hr之内的乳大鼠、乳小鼠,在无菌条件下取大脑皮层组织,做神经元的原代培养,在此基础上感染HTVL99株,分别于感染后1d、2d、3d、4d、5d、6d、7d、8d、9d收集细胞,进行HE染色和免疫细胞化学染色,观察神经元的生长状况和病毒抗原的表达。结果显示,病毒感染后1d即可在大鼠神经元中检测到病毒抗原,而在小鼠神经元中最早检测到病毒抗原时间为感染后2d,病毒抗原呈细小颗粒状出现于感染细胞胞浆中,随着感染时间的推移,HTV NP表达的阳性强度和神经元阳性率逐渐增加(P<0.01)。神经元从感染第二天开始就可以见到有少数细胞漂浮,突起减

关键词：汉坦病毒乳大鼠乳小鼠皮层神经元原代培养免疫组化

乳大鼠表皮细胞体外培养及环孢素A对其增殖抑制作用

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中国临床药理学与治疗学杂志 1998年第3期3卷 181-183页

作者：杨燕吴铁刘刚何康广东医学院药理教研室湛江524023

目的观察无表皮生长因子(EGF)条件下体外培养乳大鼠表皮细胞生长特点,及不同浓度的环孢表A(CSA)对细胞增殖的影响。方法用单细胞悬液法体外培养出生24h内的乳大鼠的表皮细胞 ,观察其生长曲线和CSA对细胞增殖的抑制作用。结果在无EGF条件... 详细信息

目的观察无表皮生长因子(EGF)条件下体外培养乳大鼠表皮细胞生长特点,及不同浓度的环孢表A(CSA)对细胞增殖的影响。方法用单细胞悬液法体外培养出生24h内的乳大鼠的表皮细胞 ,观察其生长曲线和CSA对细胞增殖的抑制作用。结果在无EGF条件下 ,细胞培养的最长时间为15天。接种24h开始贴壁 ,第2天开始生长 ,第5～7天达高峰 ,第10天开始在胞浆中出现空泡 ,以后逐渐死亡。1μg/mlCSA在24h、48h对细胞增殖无明显抑制作用 ,72h时的抑制率为15 %;3μg/mlCSA在24h也无抑制作用 ,48h和72h的抑制率分别达18 %和30 %;6μg/mlCSA培养24h、48h、72h后抑制率分别为16 %、40 %和65 %。结论无EGF时培养的乳大鼠表皮细胞在5～7天生长达高峰 ,最长培养时间为15天。CSA对细胞增殖有抑制作用 ,且有明显的浓度和时间依赖性。

关键词：环孢素A 表皮细胞组织培养细胞增殖乳大鼠

汉坦病毒体外感染乳大鼠大脑皮层星形胶质细胞

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中华传染病杂志 2008年第7期26卷 420-424页

作者：贺帅杨守京崔继红第四军医大学西京医院病理科西安710032

目的证实乳大鼠大脑皮层星形胶质细胞是汉坦病毒属（HV）汉滩病毒（HTNv）和汉城病毒（SEOV）感染的靶细胞，观察病毒感染星形胶质细胞后的动态变化。方法建立乳大鼠大脑皮层星形胶质细胞的体外培养体系，用HTNV76-118和SEOVL99分别感... 详细信息

目的证实乳大鼠大脑皮层星形胶质细胞是汉坦病毒属（HV）汉滩病毒（HTNv）和汉城病毒（SEOV）感染的靶细胞，观察病毒感染星形胶质细胞后的动态变化。方法建立乳大鼠大脑皮层星形胶质细胞的体外培养体系，用HTNV76-118和SEOVL99分别感染乳大鼠大脑皮层星形胶质细胞，免疫荧光染色、Western印迹和RT-PCR检测病毒感染细胞后病毒NP和S基因片段的变化。结果成功建立了乳大鼠大脑皮层星形胶质细胞的体外培养体系，并通过免疫荧光染色、Western印迹和RT-PCR证实HTNV76—118和SEOVL99可以感染离体培养的乳大鼠大脑皮层星形胶质细胞，随感染时间推移，病毒感染细胞数和病毒量显著增加。结论乳大鼠大脑皮层星形胶质细胞可作为HTNV和SEOV感染的靶细胞，这为研究。肾综合征出血热发病机制提供了实验平台。

关键词：汉坦病毒乳大鼠大脑皮质星形细胞核壳蛋白质类染色与标记荧光抗体技术,间接印迹法,蛋白质反转录聚合酶链反应

慢病毒-基质细胞衍生因子-1α-绿色荧光蛋白载体转染大鼠心肌成纤维细胞

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解剖学报 2017年第1期48卷 43-47页

作者：朱占占侯宾孙雯雯院慧芳张永春蔡新华新乡医学院医用组织再生重点实验室河南新乡453003 河南省平顶山市第二人民医院心内科河南平顶山467000 新乡医学院第一附属医院感染科河南卫辉453003 新乡医学院第一附属医院心内科河南卫辉453003

目的探讨慢病毒-基质细胞衍生因子-1α-绿色荧光蛋白(LV-SDF-1α-GFP)对心肌成纤维细胞影响,最佳感染条件及目的蛋白表达和分泌特点。方法差速贴壁法分离培养乳大鼠心肌成纤维细胞,观察和免疫荧光鉴定。不同滴度及条件的LV-SDF-1α-GFP... 详细信息

目的探讨慢病毒-基质细胞衍生因子-1α-绿色荧光蛋白(LV-SDF-1α-GFP)对心肌成纤维细胞影响,最佳感染条件及目的蛋白表达和分泌特点。方法差速贴壁法分离培养乳大鼠心肌成纤维细胞,观察和免疫荧光鉴定。不同滴度及条件的LV-SDF-1α-GFP转染心肌成纤维细胞,观察荧光表达,探索最佳转染条件。LV-SDF-1α-GFP目的基因病毒以及阴性对照CON145病毒的转染心肌成纤维细胞,绘制生长曲线,探索转染对心肌成纤维细胞的增殖有无明显影响。利用最佳转染剂量组转染心肌成纤维细胞,斑点印迹法(Dot blotting)检测SDF-1α目的蛋白分泌。计量资料进行统计学分析。结果心肌成纤维细胞具很高活性,传至4代纯度高,折光度好,无自发性搏动。LV-SDF-1α-GFP最佳转染感染复数(MOI)值为10,添加感染增强液,聚凝胺组感染效果最好,效率达80%。LV-SDF-1α-GFP组以及阴性对照CON145组对心肌成纤维细胞毒性作用小,细胞形态无明显变化,与非转染组生长曲线相似,差异无统计学意义(P>0.05)。转染LV-SDF-1α-GFP的心肌成纤维细胞培养至第4天SDF-1α蛋白分泌量达最高值,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 LV-SDF-1α-GFP载体对心肌成纤维细胞具很高的转染效率,细胞毒性小,并能够分泌SDF-1α目的蛋白。

关键词：心肌成纤维细胞慢病毒-基质细胞衍生因子-1α绿色荧光蛋白载体转染斑点印迹法乳大鼠

乳鼠心肌细胞缺血预适应模型的建立及电镜下超微结构的改变

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实用临床医药杂志 2005年第3期9卷 18-20,24页

作者：奚群英祝宝华刘晨东南大学医学院附属扬州医院江苏扬州225001

目的探讨培养乳鼠心肌细胞建立缺血预适应(IPC)模型的方法及对细胞超微结构的影响。方法出生1～2d的SD大鼠用改良法分离培养心肌细胞,检测模拟缺血各时间点乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、细胞死亡率,据此建立预适应模型并与单纯缺血/再灌注组... 详细信息

目的探讨培养乳鼠心肌细胞建立缺血预适应(IPC)模型的方法及对细胞超微结构的影响。方法出生1～2d的SD大鼠用改良法分离培养心肌细胞,检测模拟缺血各时间点乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、细胞死亡率,据此建立预适应模型并与单纯缺血/再灌注组比较其LDH、细胞死亡率和超微结构的改变。结果乳鼠心肌细胞在模拟缺血4h以后LDH、细胞死亡率与对照组相比有明显差异(P 乳鼠心肌细胞对缺血有较强耐受力,模拟缺血4h以上才有明显损伤。模拟缺血90min ,再灌60min能成功建立IPC模型,且维持超微结构完整性。

关键词：缺血预适应,心肌乳大鼠细胞培养超微结构

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乳鼠心肌细胞酶消化培养和贴块培养法的比较

中国比较医学杂志 2006年第1期16卷 38-40,F0002页

作者：王琼郭勇余鸿刘广益吴雨岭杨晓红刘新民泸州医学院中心实验室泸州646000 泸州医学院组胚教研室泸州646000 中国协和医科大学药用植物研究所北京100094

目的探索经济、简单易行的心肌细胞培养方法。方法选用新生乳大鼠心肌细胞进行0.25%胰酶分离培养和贴块培养两种培养方法。结果用0.25%胰酶消化培养可获得大量的单细胞,但是酶对细胞的损伤比较大,酶消化所受的影响因素比较多,此过程获... 详细信息

目的探索经济、简单易行的心肌细胞培养方法。方法选用新生乳大鼠心肌细胞进行0.25%胰酶分离培养和贴块培养两种培养方法。结果用0.25%胰酶消化培养可获得大量的单细胞,但是酶对细胞的损伤比较大,酶消化所受的影响因素比较多,此过程获取单细胞所需的时间比较长;贴块培养法简便易行,得到的细胞结构完整、存活率高,且经济实惠、适合长期研究且需细胞量不多的实验。结论酶分离培养和贴块培养各有优劣势,应根据不同的实验目的选用不同的培养方法。

关键词：细胞培养胰酶消化法贴块法心肌细胞乳大鼠