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乙酰胆碱及其拮抗剂对人SK-N-SH细胞增殖及mAchR1表达的影响

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实验生物学报 2005年第4期38卷 287-296页

作者：胡昕吕建新温州医学院细胞与分子生物研究所温州325035

用CCK-8比色法和流式细胞术,检测乙酰胆碱(acetylcholine,Ach)及拮抗剂阿托品(at-ropine,Atro)对SK-N-SH细胞增殖活性和周期分布的调节作用;进一步用荧光定量PCR、免疫印迹和流式细胞间接免疫荧光技术,分析SK-N-SH细胞毒蕈碱受体亚型Ⅰ... 详细信息

用CCK-8比色法和流式细胞术,检测乙酰胆碱(acetylcholine,Ach)及拮抗剂阿托品(at-ropine,Atro)对SK-N-SH细胞增殖活性和周期分布的调节作用;进一步用荧光定量PCR、免疫印迹和流式细胞间接免疫荧光技术,分析SK-N-SH细胞毒蕈碱受体亚型Ⅰ型(mAchR1)和c-fos的表达差异。结果表明,1mmol/LAch对SK-N-SH细胞有明显促增殖作用,而1mmol/LAtro阻滞细胞从S期向G_2/M期移行;1mmol/LAch与1mmol/LAtro均反馈调节mAchR1的蛋白水平,但mAchR1mRNA的表达不受影响;1mmol/LAch显著上调c-fosmRNA和Fos蛋白的表达,但这种作用可被Atro逆转。提示胆碱类受体参与配基对肿瘤细胞的促增殖作用。

关键词：乙酰胆碱拮抗剂人SK-N-SH 细胞增殖 mAchR1表达胆碱受体途径中枢神经信息传递物质

乙酰胆碱对大鼠海马神经细胞内钙信号及细胞间通讯的影响

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北京大学学报（医学版） 2004年第4期36卷 357-360页

作者：王丽珺胡白和何其华樊景禹北京大学基础医学院生物物理学系北京100083 北京大学医学部医药卫生分析中心北京100083

目的 :探讨乙酰胆碱 (acetylcholine,Ach)对大鼠海马细胞间通讯 (gapjunctionalintercellularcommunication ,GJIC)的影响。方法 :原代混合培养海马细胞 ;利用激光共聚焦扫描显微镜观察Ach作用后细胞内游离钙的变化 ;用荧光染料的刮除... 详细信息

目的 :探讨乙酰胆碱 (acetylcholine,Ach)对大鼠海马细胞间通讯 (gapjunctionalintercellularcommunication ,GJIC)的影响。方法 :原代混合培养海马细胞 ;利用激光共聚焦扫描显微镜观察Ach作用后细胞内游离钙的变化 ;用荧光染料的刮除负载法检测Ach作用后GJIC的变化。结果 :Ach(0 .0 5～ 0 .1 0mmol/L)可引起海马细胞内钙离子浓度变化。共聚焦扫描显微镜观察显示Ach作用后细胞内钙离子浓度升高 ,该变化大小依赖于Ach浓度 ,并能被东莨菪碱拮抗。荧光染料的刮除负载法检测发现细胞与 0 .0 5mmol/LAch共同孵育 6 0h后GJIC明显增强。结论

关键词：乙酰胆碱大鼠海马神经神经细胞 Ach 钙信号细胞间通讯信号传递

乙酰胆碱对大鼠丘脑束旁核和中脑网状结构痛反应神经元电活动的影响

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生理学报 1988年第4期40卷 326-334页

作者：赵涤尘徐屯孙明智哈尔滨医科大学生理教研室哈尔滨医科大学生理教研室

在54只大鼠上,用两支微电极同时记录神经元放电的方法,研究了脑室注射乙酰胆碱(ACh)对丘脑束旁核(Pf)和中脑网状结构(RF)痛反应神经元电活动的影响。结果表明,当脑内ACh含量增加时,Pf和RF中两个痛兴奋神经元(PEN)的电活动同时减弱,两个... 详细信息

在54只大鼠上,用两支微电极同时记录神经元放电的方法,研究了脑室注射乙酰胆碱(ACh)对丘脑束旁核(Pf)和中脑网状结构(RF)痛反应神经元电活动的影响。结果表明,当脑内ACh含量增加时,Pf和RF中两个痛兴奋神经元(PEN)的电活动同时减弱,两个痛抑制神经元(PIN)的电活动同时加强,Pf中一个PEN电活动减弱的同时RF中一个PIN电活动加强,或者相反。阿托品可以阻断ACh的上述作用。这提示,ACh对不同中枢痛反应神经元的电活动的影响是通过M胆碱能受体而实现的。

关键词：乙酰胆碱脑室注射丘脑束旁核中脑网状结构痛兴奋神经元痛抑制神经元

乙酰胆碱对小剂量辐射小鼠脾细胞增殖反应的影响

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辐射研究与辐射工艺学报 1996年第4期14卷 231-238页

作者：赵勇龚守良刘树铮白求恩医科大学放射生物教研室

采用７５ｍＧｙＸ射线全身和离体照射昆明系雄性小鼠脾细胞，观察乙酰胆碱（Ａｃｈ）对其增殖反应的影响。其结果发现，Ａｃｈ增强脾细胞自发增殖能力及对ＣｏｎＡ反应性；７５ｍＧｙＸ射线全身和离体照射后脾细胞增殖反应变化不同，全... 详细信息

采用７５ｍＧｙＸ射线全身和离体照射昆明系雄性小鼠脾细胞，观察乙酰胆碱（Ａｃｈ）对其增殖反应的影响。其结果发现，Ａｃｈ增强脾细胞自发增殖能力及对ＣｏｎＡ反应性；７５ｍＧｙＸ射线全身和离体照射后脾细胞增殖反应变化不同，全身照射后早期增殖更为显著，而离体照射时似较未受照射细胞为差。提示，Ａｃｈ可刺激脾细胞增殖反应，并在一定程度上具有小剂量辐射早期的刺激作用，但其在全身和离体照射对脾细胞增殖反应不同，推测与脾细胞微环境不同有关。

关键词： X辐射小剂量乙酰胆碱增殖反应免疫增强剂

乙酰胆碱对大鼠慢性压迫背根节神经元放电的影响

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南方医科大学学报 2006年第11期26卷 1568-1570页

作者：杨红军胡三觉广州军区广州总医院神经内科广东广州510010 第四军医大学神经科学研究所陕西西安710033

目的研究乙酰胆碱(ACh)对大鼠慢性压迫背根节(DRG)神经元放电的影响。方法采用单纤维记录神经元自发放电的方法,在DRG慢性压迫模型上观察ACh对受损DRG神经元自发放电的影响。结果受损DRG神经元有丰富的自发放电,77.9%有自发放电的受损DR... 详细信息

目的研究乙酰胆碱(ACh)对大鼠慢性压迫背根节(DRG)神经元放电的影响。方法采用单纤维记录神经元自发放电的方法,在DRG慢性压迫模型上观察ACh对受损DRG神经元自发放电的影响。结果受损DRG神经元有丰富的自发放电,77.9%有自发放电的受损DRG神经元对ACh有反应,其中反应类型有单纯兴奋和先兴奋后抑制两种形式,而且反应的幅度随ACh浓度的延长而逐渐增大。结论在慢性压迫DRG神经元有大量的自发放电,ACh可明显影响受损DRG神经元的自发放电。

关键词：乙酰胆碱背根节神经元自发放电

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乙酰胆碱对培养T细胞功能的作用

生理学报 1995年第3期47卷 275-280页

作者：邱一华彭聿平张清泉王健鹤南通医学院生理教研室

本文研究不同浓度（１０－１０—１０－４ｍｏｌ／Ｌ）乙酰胆碱（ＡＣｈ）对离体培养的大鼠脾脏Ｔ淋巴细胞增殖的影响，并探讨其作用机制。实验结果表明：１０－９—１０－４ｍｏｌ／ＬＡＣｈ可显著增强Ｔ细胞由刀豆素Ａ（ＣｏｎＡ）诱... 详细信息

本文研究不同浓度（１０－１０—１０－４ｍｏｌ／Ｌ）乙酰胆碱（ＡＣｈ）对离体培养的大鼠脾脏Ｔ淋巴细胞增殖的影响，并探讨其作用机制。实验结果表明：１０－９—１０－４ｍｏｌ／ＬＡＣｈ可显著增强Ｔ细胞由刀豆素Ａ（ＣｏｎＡ）诱导的增殖反应，以１０－７—１０－６ｍｏｌ／Ｌ时最强。淋巴细胞先用ＡＣｈ刺激１ｈ或者刺激１ｈ后洗弃ＡＣｈ，再用ＣｏｎＡ诱导７２ｈ，增殖反应亦加强，但ＡＣｈ不能加强被ＣｏｎＡ诱导６ｈ的Ｔ细胞的增殖。１０－７—１０－６ｍｏｌ／Ｌ阿托品可完全阻断１０－９ｍｏｌ／Ｌ或１０－５ｍｏｌ／ＬＡＣｈ的免疫增强效应，１０－６ｍｏｌ／Ｌ阿托品可阻断１０－７ｍｏｌ／ＬＡＣｈ的作用。上述结果提示，ＡＣｈ在较广的浓度范围内均可促进细胞免疫功能，这种调节作用发生于Ｔ细胞激活前或激活的早期，是通过Ｍ型胆碱能受体实现的。

关键词：乙酰胆碱 T细胞神经递质细胞免疫

α7亚基烟碱乙酰胆碱受体在右美托咪定防治内毒素血症小鼠谵妄中的作用

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中华危重病急救医学 2016年第2期28卷 127-133页

作者：张雪艳李志峰孙晓晨靳风刘俊廷李建国武汉大学中南医院重症医学科湖北武汉430071

目的观察d7亚基烟碱乙酰胆碱受体（α7nAChR）在右美托咪定（DEX）防治内毒素血症谵妄发生中的作用，并探讨其作用机制。方法将100只雄性C57BL／6小鼠按随机数字表法分为生理盐水对照组（Ns组）、DEX对照组、脂多糖（LPS）诱导内毒素血... 详细信息

目的观察d7亚基烟碱乙酰胆碱受体（α7nAChR）在右美托咪定（DEX）防治内毒素血症谵妄发生中的作用，并探讨其作用机制。方法将100只雄性C57BL／6小鼠按随机数字表法分为生理盐水对照组（Ns组）、DEX对照组、脂多糖（LPS）诱导内毒素血症模型组（LPS组）、DEX保护组（DEX＋LPS组）、α-银环蛇毒素拮抗组（α-BGT＋DEX＋LPS组），每组20只。采用腹腔注射LPS20mg/kg制备内毒素血症模型，Ns组和DEX对照组给予等量生理盐水。DEX对照组、DEX＋LPS组和α—BGT＋DEX＋LPS组小鼠于制模前15min腹腔注射DEX40ug／kg，α—BGT＋DEX＋LPS组于注射DEX前15min腹腔注射d7nAChR抑制剂α—BGT1ug／kg；Ns组给予等量生理盐水。制模前及制模后24h每组取10只小鼠进行旷场实验，实验结束后处死小鼠留取标本，采用酶联免疫吸附试验（ELlSA）检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和神经元特异性烯醇化酶（NSE）水平，蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测海马组织胆碱乙酰转移酶（ChAT）及乙酰胆碱酯酶（AChE）表达量。另取10只小鼠行新物体识别实验，观察训练阶段探究总时间及制模后3h和24h的偏好指数。结果Ns组和DEX对照组各项指标比较差异均无统计学意义。①旷场实验结果显示，制模前各组旷场实验观察指标均无差异。制模后24h，与NS组比较，LPS组小鼠表现为对新环境的认知、学习和记忆能力均下降，紧张度增加；DEX可明显改善小鼠的上述变化；而α-BGT可部分拮抗DEX对谵妄小鼠的保护作用。②新物体识别实验结果显示，与Ns组比较，LPS组小鼠探究新事物的能力下降；DEX可改善小鼠的探究能力；而α-BGT可拮抗DEX的保护作用。⑧ELISA结果显示，LPS组血清TNF-α和NSE水平较Ns组明显升高，DEX可抑制LPS诱导的血清TNF-α和NSE水平升高，而α-BGT可拮抗DEX的保护作用（Ns组、LPS组、DEX＋LPS组、α-BGT＋DEX＋LPS组TNF-α（ng／L）分别为23．72±3．13、808．78±87．86、192．96±31．47、829．99±80．98。NSE（-L）分别为8．70±0．74、25．90±3．03、18．10±2．14、23．12±2．21，均P〈0．01]。④WesternBlot结果显示，与Ns组比较，LPS组海马组织ChAT表达明显下降，AChE表达明显升高，DEX可逆转ChAT和AChE的表达变化，而α-BGT可拮抗DEX的保护作用[Ns组、LPS组、DEX＋LPS组、α-BGT＋DEX＋LPS组ChAT（灰度值）分别为1．536±0．150、0．381±0．138、0．914±0．173、0．628±0．088，AChE（灰度值）分别为0．382±0．201、1．843±0．325、0．898±0．155、1．470±0．220，P〈0．05或P〈0．01]。结论内毒素血症小鼠可发生谵妄等认知功能障碍；DEX可通过调节脑内神经递质AChE和ChAT的表达量而改善谵妄症状，从而起到脑保护作用，其机制可能与仅7nAChR有关。

关键词：内毒素血症谵妄右美托咪定乙酰胆碱 α7亚基烟碱乙酰胆碱受体

微电泳乙酰胆碱和阿托品对大鼠丘脑束旁核痛敏神经元电活动的影响

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生理学报 1993年第1期45卷 55-60页

作者：张立新刘祚延同济医科大学生理教研室武汉130030

在30只大鼠上,用多管微电极细胞外记录和离子微电泳方法,观察了乙酰胆碱(ACh)和阿托品对丘脑束旁核(Pf)神经元电活动的影响。结果表明,微电泳ACh可加强痛敏神经元的电活动,并使部分自发放电神经元对伤害性刺激产生反应。阿托品可以阻断... 详细信息

在30只大鼠上,用多管微电极细胞外记录和离子微电泳方法,观察了乙酰胆碱(ACh)和阿托品对丘脑束旁核(Pf)神经元电活动的影响。结果表明,微电泳ACh可加强痛敏神经元的电活动,并使部分自发放电神经元对伤害性刺激产生反应。阿托品可以阻断ACh的上述作用。微电泳阿托品能减少痛敏神经元的电活动。这些结果提示,在Pf神经元的活动中,ACh可以直接作用于M受体发挥其兴奋作用。

关键词：乙酰胆碱阿托品束旁核离子电泳

乙酰胆碱对乙酰胆碱酯酶立体结构影响的初步原子力显微观察

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中国药理学与毒理学杂志 2005年第1期19卷 53-58页

作者：陈凤婵张英鸽军事医学科学院毒物药物研究所北京100850

目的　为探索乙酰胆碱酯酶 (AChE)活性中心狭隙与其快速水解功能的适应原理 ,研究乙酰胆碱 (ACh)对AChE立体结构的影响。方法　在云母表面重组磷脂膜 ,将AChE重组到磷脂膜上 ,用原子力显微技术观察。结果　天然AChE表面平滑 ,边界清晰 ... 详细信息

目的　为探索乙酰胆碱酯酶 (AChE)活性中心狭隙与其快速水解功能的适应原理 ,研究乙酰胆碱 (ACh)对AChE立体结构的影响。方法　在云母表面重组磷脂膜 ,将AChE重组到磷脂膜上 ,用原子力显微技术观察。结果　天然AChE表面平滑 ,边界清晰 ,中间突出 ,略呈椭圆球体 ,蛋白颗粒长径为(6 2± 2 5 )nm ,短径为 (5 3± 13)nm ,高度为 (6± 2 )nm ;反应后酶蛋白表面变得粗糙 ,形态不甚规则 ,蛋白颗粒中心出现近圆形孔洞。结论　ACh对AChE立体结构具有明显影响。

关键词：显微技术,原子力乙酰胆碱酯酶乙酰胆碱结构-活性关系