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中国药理学通报 2004年第12期20卷 1346-1352页

作者：陈冬梅汪海军事医学科学院毒物药物研究所北京100850

目的　研究激活乙酰胆碱作用靶标 (ETA)对血管内皮细胞基因表达的影响。方法　采用人类cDNA表达谱芯片 ,比较氨甲酰胆碱和毛果芸香碱对人冠脉内皮细胞基因表达的影响及其生物学功能。结果　既激活ETA又激活M受体的氨甲酰胆碱 ,以及仅激... 详细信息

目的　研究激活乙酰胆碱作用靶标 (ETA)对血管内皮细胞基因表达的影响。方法　采用人类cDNA表达谱芯片 ,比较氨甲酰胆碱和毛果芸香碱对人冠脉内皮细胞基因表达的影响及其生物学功能。结果　既激活ETA又激活M受体的氨甲酰胆碱 ,以及仅激活M受体的毛果芸香碱 ,在 10 0μmol·L-1浓度下与内皮细胞共孵育 10h ,以含有 14 0 0 0条人类unigene的BiostarH 14 112ScDNA表达谱芯片检测内皮细胞基因表达的变化 ,发现差异基因共 80 1条。两药共同诱导的差异基因 4 91条 ,上调 2 0 5条 ,下调 2 86条。两药诱导差异基因存在很大差别 ,其中氨甲酰胆碱诱导上调基因 119条 ,下调基因 191条 ,这些差异基因均不受毛果芸香碱的影响。进一步分析氨甲酰胆碱特异性诱导差异基因的功能 ,发现有受体与G蛋白、离子通道、血栓、动脉粥样硬化相关基因等七大类。结论　氨甲酰胆碱特异性诱导的差异基因与ETA及其效应器系统以及激活ETA产生抗动脉粥样硬化和抗血栓的分子机制相关。

关键词：乙酰胆碱作用靶标氨甲酰胆碱毛果芸香碱 M受体表达谱芯片

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大、小动脉内皮细胞乙酰胆碱作用靶标药理学特性的比较

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中国应用生理学杂志 2002年第3期18卷 252-256页

作者：贾国栋龙超良刘国树汪海军事医学科学院毒物药物研究所北京100850 解放军总医院南楼心肾科北京100853

目的 :比较大、小动脉内皮细胞乙酰胆碱作用靶标药理学特性的差异。方法 :采用大鼠尾动脉螺旋状血管条和主动脉离体血管环两种组织 ,对比观察乙酰胆碱 (ACh)诱发大、小动脉内皮依赖性舒张反应特征的差异 ,从而进一步研究小动脉内皮细胞... 详细信息

目的 :比较大、小动脉内皮细胞乙酰胆碱作用靶标药理学特性的差异。方法 :采用大鼠尾动脉螺旋状血管条和主动脉离体血管环两种组织 ,对比观察乙酰胆碱 (ACh)诱发大、小动脉内皮依赖性舒张反应特征的差异 ,从而进一步研究小动脉内皮细胞乙酰胆碱作用靶标的药理学特性。结果 :氯化钾 (6 0mmol/L)预致血管收缩的尾动脉和主动脉对不同浓度ACh (10 -8～ 10 -4mol/L)产生内皮依赖性舒张反应 ,且呈剂量依赖性。L Nω 硝基精氨酸甲酯 (L NAME :10 -4mol/L)或美蓝 (MB :10 -5mol/L)与吲哚美辛 (Indo :10 -4mol/L)联用仅可部分地阻断ACh诱发尾动脉内皮依赖性舒张反应 ;而L NAME或MB可完全阻断ACh诱发主动脉内皮依赖性舒张反应。结论 :ACh激活大、小动脉上内皮细胞乙酰胆碱作用靶标诱发内皮依赖性舒张反应的药理学性质不同 ,在小动脉上 ,除了NO和PGI2介导外 ,还有一种非NO和非PGI2 的舒血管因子参与 ;在大动脉上。

关键词：小动脉内皮细胞乙酰胆碱作用靶标药理学特性比较尾动脉主动脉内皮依赖性舒张大动脉

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血管内皮细胞乙酰胆碱作用靶标相关新基因的电子克隆

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生物技术通讯 2004年第4期15卷 359-362页

作者：山丽梅张锦超赵艳玲俞炜源汪海解放军第302医院药学部北京100039 军事医学科学院生物工程研究所北京100071 军事医学科学院毒物药物研究所北京100850

血管内皮细胞乙酰胆碱作用靶标(ETA)作为特异性血管内皮细胞药物作用新靶点具有良好的抗动脉粥样硬化应用前景。通过培养前后血管内皮细胞表达差异基因的筛选,有可能分离获得ETA或其相关基因。在利用抑制削减杂交技术获得14个牛未知基... 详细信息

血管内皮细胞乙酰胆碱作用靶标(ETA)作为特异性血管内皮细胞药物作用新靶点具有良好的抗动脉粥样硬化应用前景。通过培养前后血管内皮细胞表达差异基因的筛选,有可能分离获得ETA或其相关基因。在利用抑制削减杂交技术获得14个牛未知基因片段基础上,采用电子克隆途径,使6个未知基因片段得以延伸,并在GenBank的非冗余基因库中找到了对应或同源基因,其中3个延伸出了全长阅读框,另外3个延伸出部分长度;对于延伸出全长阅读框的基因,设计特异性引物进行PCR扩增,验证了电子延伸的可信性,同时也克隆了整个阅读框架区。

关键词：血管内皮细胞乙酰胆碱作用靶标基因电子克隆阅读框架区

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