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中国循环杂志 1990年第6期5卷 489-491页

作者：谭健聪祝之明刘光耀第三军医大学第三附属医院高血压研究室

血管内皮细胞、平滑肌细胞与神经共同构成控制血管张力的三大成份。近年的研究表明,内皮细胞有重要的内分泌功能,能分泌内皮舒张因子(EDRF)和内皮收缩因子(EDCF)。二者对血管平滑肌张力有重要调节作用。现认为EDRF是氧化亚氮(NO)。

关键词：内皮素平滑肌张力血管内皮细胞舒张因子平滑肌细胞 EDRF 氧化亚氮收缩因子主动脉内皮细胞钙通道

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表达核内产物的癌基因与动脉粥样硬化

北京大学学报（医学版） 1994年第S1期32卷 262-263页

作者：杨永宗杨和平万腊香刘革修涂玉林汤健周爱儒衡阳医学院心血管病研究所北京医科大学心血管基础研究所

表达核内产物的癌基因与动脉粥样硬化衡阳医学院心血管病研究所杨永宗，杨和平，万腊香，刘革修，涂玉林北京医科大学心血管基础研究所汤健，周爱儒ｆｏｓ、ｍｙｃ和ｍｙｂ原癌基因产物均位于细胞核内，为ＤＮＡ结合蛋白，都伴随平滑肌... 详细信息

表达核内产物的癌基因与动脉粥样硬化衡阳医学院心血管病研究所杨永宗，杨和平，万腊香，刘革修，涂玉林北京医科大学心血管基础研究所汤健，周爱儒ｆｏｓ、ｍｙｃ和ｍｙｂ原癌基因产物均位于细胞核内，为ＤＮＡ结合蛋白，都伴随平滑肌细胞生长状态变化而变化。这类癌基因...

关键词：癌基因心血管病研究平滑肌细胞基础研究所汤健肌源性泡沫细胞结合蛋白类癌主动脉内皮细胞血管成形术

大鼠凝血因子Ⅶ EGFP-EGF1融合蛋白的表达及其结合功能初步研究

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中国实验血液学杂志 2008年第1期16卷 181-184页

作者：梅恒胡豫张迎红王华芳方峻郭涛魏文宁华中科技大学附属协和医院血液病研究所湖北武汉430022 湖北省生物靶向重点实验室湖北武汉430022

本研究通过融合蛋白EGFP-EGF1的表达,探讨大鼠凝血因子Ⅶ上EGF1片段与组织因子(TF)的结合功能。用RT-PCR方法自大鼠肝脏组织获得EGF1编码区基因并将其插入EGFP原核表达载体中,构建pET28a-EGFP-EGF1融合蛋白表达载体;将该重组质粒转化大... 详细信息

本研究通过融合蛋白EGFP-EGF1的表达,探讨大鼠凝血因子Ⅶ上EGF1片段与组织因子(TF)的结合功能。用RT-PCR方法自大鼠肝脏组织获得EGF1编码区基因并将其插入EGFP原核表达载体中,构建pET28a-EGFP-EGF1融合蛋白表达载体;将该重组质粒转化大肠杆菌BL21中,用IPTG诱导表达EGFP-EGF1融合蛋白;采用亲和层析方法Ni柱纯化融合蛋白,将融合蛋白作用于经脂多糖刺激表达TF的大鼠血管内皮细胞;通过荧光显微镜及流式细胞术观察和检测融合蛋白与细胞结合情况。结果表明:EGFP-EGF1在转化的大肠杆菌中获得高效表达并成功纯化,SDS-PAGE证实分子量约为36kD。荧光显微镜及流式细胞术检测显示该融合蛋白能与内皮细胞膜上的TF结合。结论:大鼠凝血因子Ⅶ上EGF1区可介导FⅦ与TF特异性结合,从而可能为分子靶向抗栓治疗研究提供部分基础。

关键词：凝血因子Ⅶ 组织因子主动脉内皮细胞重组融合蛋白

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文摘

广东解剖学通报 1989年第1期 41-46页

血管基膜衍生多功能肽基因在毕赤酵母中的表达和活性鉴定

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美国中华临床医学杂志 2005年第1期7卷 37-42页

作者：周虹戴文建彭淑平张曼周建国董琳曹建国南华大学肿瘤研究所湖南衡阳421001 中南大学肿瘤研究所湖南长沙410078 湖南湘铝公司医院湖南湘乡411400

目的利用PCR技术从含有目的基因的质粒pGEX-4T-1-VBMDMP获得带有snabⅠ和NotⅠ酶切位点并融合有GST的目的基因片段并测序鉴定。方法将PCR产物纯化、酶切、回收，克隆到pPIC9K栽体，转化入大肠杆菌DH5a扩增，用琼脂糖凝胶电泳、限制性内... 详细信息

目的利用PCR技术从含有目的基因的质粒pGEX-4T-1-VBMDMP获得带有snabⅠ和NotⅠ酶切位点并融合有GST的目的基因片段并测序鉴定。方法将PCR产物纯化、酶切、回收，克隆到pPIC9K栽体，转化入大肠杆菌DH5a扩增，用琼脂糖凝胶电泳、限制性内切酶酶切和DNA测序鉴定。BglⅡ线性新构建的表达载体pPIC9K-CST-VBMDMP，然后用原生质体转化法转化毕赤酵母细胞，并用pPIC9K空质粒也转入酵母细胞进行对照。用煮-冻-煮法裂解已转化有目的基因的毕赤酵母细胞，提取DNA并行PCR鉴定，获得阳性重组子，行多克隆筛选和表型鉴定。筛选His’Mut^8表型的转化子，在MGY液体培养基中30℃摇床培养，每24h从培养基中转移1mL培养基上清于-70℃保存，并保持培养瓶中培养基的量和培养基中甲醇0．5％的浓度不变。8d后行SDS—PACE检测表达的蛋白，用Glutathione Sepharose 4B亲和层析柱纯化获得GST-VBMDMP融合蛋白；用凝血酶切割GDT—VBMDMP并分离获得VBMDMP。结果VBMDMP能够抑制鼠主动脉内皮细胞管状结构的形成；同时VBMDMP(10、6、2mg/kg)对小鼠Lewis肺癌原发瘤具有显著抑制作用(瘤重抑制率分别为96．6％、82．1％、61．2％)。VBMDMP(GST—VBMDMP 10、6、2mg／kg)对小鼠Lewis肺癌自发性肺转移具有显著抑制作用(自发性肺转移瘤结节抑制率分别为96．8％、87．9％、75．3％)。结论、VBMDMP能够抑制鼠主动脉内皮细胞管状结构的形成，并对小鼠Lewis肺癌原发瘤和肺转移具有明显的抑制作用。

关键词：活性鉴定毕赤酵母血管基膜 Lewis肺癌主动脉内皮细胞肽基因多功能 Sepharose 琼脂糖凝胶电泳原生质体转化法衍生限制性内切酶酵母细胞抑制作用自发性肺转移目的基因管状结构 PCR技术 DNA测序 PCR鉴定阳性重组子

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内皮素对创伤性继发性脑损害的早期影响

中国医学文摘（内科学） 2003年第6期 749-751页

作者：姚洁民广西医科大学第三附院南宁市第二医院530031

颅脑损伤是临床上常见的创伤,现代颅脑损伤的患者大幅度增加,损伤程度更严重,受伤机制更复杂,救治困难更大,致残严重,死亡率高,预后不良。受伤瞬间的脑损伤多因暴力震荡、挤压、机械撕裂、负压抽吸所致,损伤程度难以控制。而伤后数小时... 详细信息

颅脑损伤是临床上常见的创伤,现代颅脑损伤的患者大幅度增加,损伤程度更严重,受伤机制更复杂,救治困难更大,致残严重,死亡率高,预后不良。受伤瞬间的脑损伤多因暴力震荡、挤压、机械撕裂、负压抽吸所致,损伤程度难以控制。而伤后数小时所发生的继发性脑缺血是促使脑组织进一步弥漫性损害的主要原因,可用人为方式干预减少其损害。有学者研究发现颅脑损伤死亡病人的90％,有明显的脑缺血性改变,也就是说各种原因所致的脑缺血才是导致脑组织进一步损害的主要原因,而内皮素(Endothelin,ET)导致的脑血管痉挛,是脑损伤早期致脑组织缺血的重要因素之一。

关键词：继发性脑损害颅脑损伤内皮素基因主动脉内皮细胞弥漫性受伤机制缺血性改变颅脑外伤脑缺血缺氧早期影响

缺氧一再给氧时家兔主动脉NO的变化及机制研究

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锦州医学院学报 1999年第5期20卷 6-8页

作者：吴秀香锦州医学院病理生理教研室

目的 :观察缺氧一再给氧时家兔主动脉一氧化氮 (nitric oxide,NO)含量的变化并探讨其机制。方法 :培养的家兔主动脉内皮细胞 (endothelialcell,EC)随机分为四组 :(1 )对照 (C)组一通入空气 ;(2 )缺氧 (H)组一通入 95% N2 与 5% CO2 气 ;... 详细信息

目的 :观察缺氧一再给氧时家兔主动脉一氧化氮 (nitric oxide,NO)含量的变化并探讨其机制。方法 :培养的家兔主动脉内皮细胞 (endothelialcell,EC)随机分为四组 :(1 )对照 (C)组一通入空气 ;(2 )缺氧 (H)组一通入 95% N2 与 5% CO2 气 ;(3 )缺氧一再给氧 (H/ R)组一在缺氧的基础上通入 95% O2 与 5% CO2 气 ;(4 )超氧化物歧化酶 (superoxide dismutase,SOD)与缺氧一再给氧 (SOD+ H/ R)组一在 3之家加入 SOD,余同 3。测定 NO- 2 含量间接反映 NO含量。结果 :缺氧、再给氧时 H、H/ R组 NO含量均降低 ,以 H/R组更加显著 ,SOD可使 NO含量增加。结论 :缺氧可损伤 EC,使 NO生成减少 ;再给氧可促进缺氧的损伤。NO减少的机制与缺氧一再给氧时自由基产生增多有关。

关键词：再灌注损伤主动脉内皮细胞缺氧一氧化氮

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肿瘤

中国农业文摘（兽医） 1994年第4期10卷 72-74页

S857.4 941398内皮素与肿瘤/于昕…(北京医科大学生物化学教研室)//生物化学与生物物理进展.-1993,20(5).-361～363内皮素(ET)是一类具有强烈缩血管和升血压作用的活性多肽,也是一类强大的平滑肌细胞的分裂剂和细胞生长因子.ET 首先由... 详细信息

S857.4 941398内皮素与肿瘤/于昕…(北京医科大学生物化学教研室)//生物化学与生物物理进展.-1993,20(5).-361～363内皮素(ET)是一类具有强烈缩血管和升血压作用的活性多肽,也是一类强大的平滑肌细胞的分裂剂和细胞生长因子.ET 首先由日本学者从猪的主动脉内皮细胞中分离得到.

关键词：生物化学教研室主动脉内皮细胞内皮素北京医科大学活性多肽平滑肌细胞生物物理直肠检查生长因子真胃

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内皮素与心衰关系的研究进展

世界核心医学期刊文摘（眼科学分册） 2002年第5期 323-325页

作者：蒋庆渊刘铭王恒大兰州医学院第一附属医院心内科甘肃兰州730000

0 引言内皮素(endothelin,ET)是1988年由 Yanagisawa等人首先在培养的猪主动脉内皮细胞分离并提纯的由21个氨基酸组成的环形多肽。ET 具有强大的收缩血管、促进血管平滑肌细胞增殖、升高血压、影响心肌收缩力,促进细胞有丝分裂,调节水... 详细信息

0 引言内皮素(endothelin,ET)是1988年由 Yanagisawa等人首先在培养的猪主动脉内皮细胞分离并提纯的由21个氨基酸组成的环形多肽。ET 具有强大的收缩血管、促进血管平滑肌细胞增殖、升高血压、影响心肌收缩力,促进细胞有丝分裂,调节水钠平衡及影响中枢和外周交感神经活性、激活 RAAS系统等作用。ET

关键词：内皮素基因心肌收缩力 endothelin 主动脉内皮细胞水钠平衡心血管系交感神经活性舒血管物质 RAAS 血管紧张素

降钙素基因相关肽和内皮素与糖尿病肾病的关系

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中华糖尿病杂志（1006-6187） 2005年第1期13卷 74-76页

作者：何伟李英河北省人民医院肾内科石家庄050000 河北医科大学第三医院肾内科

降钙素基因相关肽(CGRP)是1983年由Rosenfold等在人和哺乳动物体内发现的一种生物多肽,是目前已知的最强的内源性舒血管肽之一.内皮素(ET)是1988年日本学者Yanagisawa等从猪主动脉内皮细胞培养液中分离纯化的由21个氨基酸残基组成的一... 详细信息

降钙素基因相关肽(CGRP)是1983年由Rosenfold等在人和哺乳动物体内发现的一种生物多肽,是目前已知的最强的内源性舒血管肽之一.内皮素(ET)是1988年日本学者Yanagisawa等从猪主动脉内皮细胞培养液中分离纯化的由21个氨基酸残基组成的一种多肽,是目前所知体内作用最强的缩血管肽之一.CGRP和ET均具有广泛的生物活性.研究表明,CGRP能够拮抗ET所诱导的促血管收缩作用,是一种极有效的ET的内源性拮抗剂,二者可能共同参与了糖尿病肾病(DN)的发病过程[1].现将这方面的研究进展作一综述.

关键词： CGRP 降钙素基因相关肽内皮素(ET) 体内糖尿病肾病血管收缩内皮素内源性抗E 主动脉内皮细胞