检索结果-南通市图书馆

生物学杂志 2013年第1期30卷 59-63页

作者：孙冰谢明树陈松林赵文大连海洋大学辽宁省水生生物学重点实验室大连116023 中国水产科学研究院黄海水产研究所农业部海洋渔业可持续发展重点开放实验室青岛266071

基因组表观遗传重组出现在细胞发育潜能发生变化的时期。早期植入前胚胎的表观遗传重新编程对于细胞分化和胚胎的生长发育是至关重要的,这涉及到表观遗传印记(尤其是DNA甲基化)的消除和重建过程。脊椎动物许多物种中,DNA复制起始前父系... 详细信息

基因组表观遗传重组出现在细胞发育潜能发生变化的时期。早期植入前胚胎的表观遗传重新编程对于细胞分化和胚胎的生长发育是至关重要的,这涉及到表观遗传印记(尤其是DNA甲基化)的消除和重建过程。脊椎动物许多物种中,DNA复制起始前父系基因组通常要经历主动去甲基化,而母系基因组则可以保持甲基化的状态不变,直到在随后的卵裂过程中被动去甲基化。综述了脊椎动物父系基因组主动去甲基化的机制,这种去甲基化在脊椎动物各物种间的差异,以及影响这种主动去甲基化机制的因素。另外,研究外源基因表达的表观调控机制(尤其是表观遗传重编程的异常现象)有利于理解转基因克隆水产动物中普遍存在的授精成功率较低,基因整合率较低,以及胚胎发育异常等现象,有利于更好地应用转基因克隆技术。

关键词：主动去甲基化 DNA甲基化父系基因组脊椎动物

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DNA主动去甲基化相关通路的研究进展

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检验医学 2013年第3期28卷 243-247页

作者：金巧智蔡志毅温州医学院第一临床医学院浙江温州325000 台州市立医院耳鼻咽喉-头颈外科浙江台州318000

对于DNA去甲基化的研究以往都是以DNA甲基转移酶（DNA methyhransferase，DNMT）为靶向分子，通过抑制DNMT来恢复抑癌基因的功能，从而达到治疗肿瘤的目的。去甲基化药物就是通过抑制DNMT的活性使复制后的DNA不能再次甲基化，从而导致... 详细信息

对于DNA去甲基化的研究以往都是以DNA甲基转移酶（DNA methyhransferase，DNMT）为靶向分子，通过抑制DNMT来恢复抑癌基因的功能，从而达到治疗肿瘤的目的。去甲基化药物就是通过抑制DNMT的活性使复制后的DNA不能再次甲基化，从而导致所有等位基因表现为去甲基化，使抑癌基因得以恢复表达，抑制肿瘤的生长。

关键词：主动去甲基化通路因子

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AID、ELP3与TET3在小鼠植入前胚胎中的动态表达

AID、ELP3与TET3在小鼠植入前胚胎中的动态表达

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作者：王杰内蒙古大学

学位级别：硕士

DNA甲基化作为一种表观遗传标记,调节基因转录,异常的DNA甲基化与肿瘤发生相关。哺乳动物早期胚胎发育、配子发生、体细胞重编程等过程中,DNA甲基化均呈现出动态的变化,即DNA甲基化存在擦除和重建。哺乳早期胚胎发育存在两次明显的DNA... 详细信息

DNA甲基化作为一种表观遗传标记,调节基因转录,异常的DNA甲基化与肿瘤发生相关。哺乳动物早期胚胎发育、配子发生、体细胞重编程等过程中,DNA甲基化均呈现出动态的变化,即DNA甲基化存在擦除和重建。哺乳早期胚胎发育存在两次明显的DNA去甲基化过程。最早的一次主动DNA去甲基化发生在受精后的原核期胚胎中,即卵母细胞胞质中的去甲基化因子对父源基因组进行的快速、广泛的去甲基化。这一过程对于父源基因组的激活及早期胚胎发育的顺利进行具有重要意义。另一个时期发生在原始生殖细胞的形成和迁移过程中。研究表明,哺乳动物中主动DNA去甲基化涉及到多条调节途径,其中包括：其中包括DNA甲基化转移酶介导的DNA去甲基化,TET(ten-eleven translocation)家族的三种蛋白(TET1,TET2,TET3)成员参与其中催化5mC的羟基化作用;与DNA修复通路关联的主动去甲基化途径,激活诱导胞苷脱氨酶(activation-induced cytidine deaminase,AID)即参与其中;以及其他蛋白,如延伸复合体3蛋白(elongator complex3,ELP3)等介导以及由其他因子所介导的去甲基化途径。本实验利用实时荧光定量PCR和免疫荧光染色的方法,检测了小鼠卵母细胞成熟及受精过程中,参与主动去甲基化的Aid、Elp3、Tet3三种基因的mRNA和蛋白水平的变化,研究其在植入前胚胎主动去甲基化中的表达及相互作用。主要研究结果如下： 1.Aid基因的mRNA在GV期卵母细胞中开始表达,MII期卵母细胞中进一步积累,受精后开始消耗,待合子基因组激活后重新开始合成。而在孤雌激活胚胎中,Aid基因的转录在2细胞期不被重新启动,说明父源基因组的存在与激活对Aid基因的表达有重要作用。免疫荧光染色发现在卵母细胞、合子和2-细胞胚胎中均能检测到AID蛋白在胞质中的信号,没有明显的核质定位。并且AID的荧光强度在PN4期有所增强,到2细胞又下降。在孤雌激活得到的2细胞胚胎中几乎检测不到荧光信号。结合AID在卵母细胞中的表达及卵母细胞自身特点,即卵母细胞在成熟过程中要积累大量的mRNA和蛋白,故推测MII期Aid基因的大量表达AID可能作用于随后发生的受精过程。 2.Elp3基因的mRNA在卵母细胞中开始积累,受精后原核期mRNA表达量显著升高,合子基因组激活后表达量出现降低。免疫荧光染色显示,在GV和MII期卵母细胞及PN2、PN4和2细胞胚胎中,均检测到ELP3蛋白的荧光信号,并且荧光信号在胞质和原核中均有分布,提示ELP3可能参与雄原核的主动去甲基化;在MII期卵母细胞中,ELP3荧光信号还出现了与纺锤体共定位的现象,提示其有可能作为一种微管结合蛋白,对减数分裂进程中纺锤体结构的动态改变及功能执行起到调节作用。 3.Tet3基因的mRNA在卵母细胞中开始转录,受精后PN2期mRNA表达量显著升高,进入2细胞后表达量显著降低。推测Tet3基因可能参与雄原核的主动去甲基化过程中。检测TET3蛋白的荧光信号,发现其在胞质中弥散状分布。在MII期开始到2细胞期胚胎中均表现出与纺锤体的共定位现象。推测TET3除了具有主动去甲基化作用外,可能在特定时期通过调控一些分裂相关因子参与减数分裂调控,或者是否能够作为一种微管结合蛋白参与减数分裂进程中纺锤体结构的动态变化及功能调节。 4.对早期胚胎发育各时期中Aid、Elp3和Tet3三基因的表达进行对比,发现在卵母细胞中三种基因都有一定量的mRNA储备,并且Aid和Elp3基因的表达水平显著低于Tet3基因。受精后进入原核阶段,Aid基因即不发生转录,而Tet3基因的表达量仍显著高于Elp3基因。故推测在受精后雄原核主动去甲基化过程中,Tet3基因可能是作为主要作用因子参与,而Aid和Elp3基因可能更多的是作为辅助因子参与。纵向分析三种基因在各个时期中的表达变化,发现Aid除了在卵母细胞和2细胞中检测到表达外,其他时期都没有检测到。推测其在雄原核的主动去甲基化过程中的作用可能不是很强。2细胞后的各个时期中,Elp3和Tet3基因的表达水平均出现显著降低,直至囊胚阶段都处于较低水平。推测随着雄原核主动去甲基化的完成,卵裂期母源基因组的去甲基化过程中所研究的三种基因不起主要作用,即可能更多的是发挥其除了去甲基化之外的其他作用。

关键词：主动去甲基化 AID ELP3 TET3

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精子染色质在卵母细胞质中的主动去甲基

精子染色质在卵母细胞质中的主动去甲基

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第一届中华医学会生殖医学分会、中国动物学会生殖生物学分会联合年会

作者：姚慧苟克勉高绍荣中国农业大学农业生物技术国家重点实验室生物学院北京生命科学研究所

受精后小鼠卵子中父本基因组的主动去甲基化对于植入前的胚胎发育是非常重要的。然而植入前胚胎主动去甲基化的机制仍不甚明了,DNA 去甲基化酶是否确实存在于 MⅡ卵母细胞胞质中还是源自母本基因组也未有确切结论。

关键词：主动去甲基化孤雄胚胎免疫染色 CpG

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