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丹蒌片抗痰瘀互结型动脉粥样硬化大鼠炎症反应及机制

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中国中西医结合杂志 2016年第6期36卷 703-708页

作者：陈洁蔡宏文缪静徐晓明毛威浙江中医药大学附属第一医院心内科杭州310006 浙江中医药大学第一临床医学院杭州310053

目的观察丹蒌片对痰瘀互结型动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)大鼠炎症因子以及脂蛋白相关磷脂酶A2(lipoprotein-associated phospholipase A2,LP-PLA2)和分泌型磷脂酶A2(secretory phospholipase A2,s PLA2)表达的影响,分析其可能机制。方法 40只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、西药组、丹蒌低剂量组(低剂量组)、丹蒌高剂量组(高剂量组),每组8只。正常组大鼠喂食基础饲料12周,余4组均采用高糖高脂饮食联合维生素D3腹腔注射复制大鼠痰瘀互结型AS模型。模型组、西药组、低剂量组、高剂量组分别给予生理盐水、阿托伐他汀钙混悬液[1.8 mg/(kg·d)]、丹蒌片低剂量[450 mg/(kg·d)]、高剂量混悬液[900 mg/(kg·d)]灌胃干预8周。观察大鼠一般情况。灌胃结束后,处死大鼠取血清,检测大鼠血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C、IL-6、TNF-α、单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein,MCP-1)、氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)、LP-PLA2、s PLA2,HE染色观察大鼠胸主动脉病理学改变,Western blot和荧光定量PCR法分别检测大鼠胸主动脉内LP-PLA2、s PLA2蛋白及mRNA表达。结果与正常组比较,模型组大鼠精神萎靡,反应迟钝,胸主动脉可见典型的AS斑块,血清TC、TG、LDL-C、IL-6、TNF-α、MCP-1、ox-LDL、LP-PLA2、s PLA2水平升高(P丹蒌片可能通过抑制LP-PLA2的表达,减少ox-LDL生成,从而发挥其抗炎、抗AS的作用。

关键词：丹蒌片动脉粥样硬化炎症反应脂蛋白相关磷脂酶A2 分泌型磷脂酶A2

丹蒌片通过铁死亡途径减轻非酒精性脂肪性肝病模型小鼠肝脏氧化损伤

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中国病理生理杂志 2021年第12期37卷 2180-2188页

作者：张新陈文娜宋囡朱敬轩刘雨彤辽宁中医药大学研究生院辽宁沈阳110000 辽宁中医药大学医学检验学院辽宁沈阳110000

目的:探讨丹蒌片是否通过铁死亡途径影响非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)模型小鼠肝脏氧化损伤。方法:取16只ApoE-/-小鼠随机分为模型组和丹蒌片组,每组8只,另取8只C57BL/6J小鼠作为正常对照组。正常对照组饲喂普通饲料,其他组饲喂高脂饲料制... 详细信息

目的:探讨丹蒌片是否通过铁死亡途径影响非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)模型小鼠肝脏氧化损伤。方法:取16只ApoE-/-小鼠随机分为模型组和丹蒌片组,每组8只,另取8只C57BL/6J小鼠作为正常对照组。正常对照组饲喂普通饲料,其他组饲喂高脂饲料制备NAFLD模型。造模8周后丹蒌片组(680 mg·kg^(-1)·d^(-1))灌胃给药4周,正常对照组与模型组给予等体积生理盐水灌胃4周。12周后全自动生化分析仪检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平;HE及油红O染色观察肝脏病理情况和脂质沉积情况;免疫组化观察小鼠肝脏组织形态及蛋白表达水平;试剂盒检测肝脏肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)和肝脏Fe2+水平;Western blot及RT-qPCR法检测谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、铁反应元件结合蛋白2(IREB2)和铁蛋白重链(FTH1)的蛋白和mRNA表达。结果:与正常对照组相比,模型组小鼠血清LDLC、TG、TC、ALT、AST及Fe2+水平显著升高,HDL-C水平显著降低(P丹蒌片干预后,小鼠血清TC、TG、LDL-C、ALT、AST及Fe2+水平显著降低(P0.05);肝细胞肿胀变性情况减轻,脂肪空泡及橘红色脂滴数量显著减少;GPX4和FTH1蛋白表达水平升高,棕黄色较深,IREB2蛋白表达水平减低,棕黄色较浅;肝组织GSH和SOD水平显著升高,MDA、TNF-α和IL-6水平显著降低(P丹蒌片能够抑制NAFLD模型小鼠的肝脏氧化损伤和脂质代谢异常,这可能与干预肝细胞铁死亡相关因子有关。

关键词：丹蒌片铁死亡氧化应激非酒精性脂肪性肝病

丹蒌片及血府逐瘀颗粒抗大鼠动脉粥样硬化作用及机制研究

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中国中西医结合杂志 2016年第1期36卷 80-84页

作者：缪静周鑫斌毛威陈洁徐晓明浙江中医药大学第一临床医学院杭州310053 浙江中医药大学附属第一医院心内科杭州310006

目的观察丹蒌片及血府逐瘀颗粒对动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)模型大鼠血脂、血小板源性生长因子(platelet derived growth factor,PDGF)、血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)增殖及胞外信号调控激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)信号通路的影响,探讨其抗AS的可能机制。方法 40只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、他汀组、丹蒌组、血府组,每组8只。正常组大鼠喂食基础饲料12周,余4组均采用高糖高脂饮食加维生素D3腹腔注射方法复制AS模型。模型组、他汀组、丹蒌组、血府组分别给予生理盐水、阿托伐他汀混悬液(0.18mg/mL)、丹蒌片混悬液(45mg/mL)、血府逐瘀颗粒混悬液(1g/mL)灌胃干预8周。采用ELISA法检测血清TC、TG、LDLC、HDL-C、PDGF水平,HE染色观察胸主动脉病理学改变,Western blot法检测大鼠胸主动脉血管内ERK1/2、pERK1/2蛋白表达。结果与正常组比较,模型组血清TC、TG、LDL-C、PDGF,血管ERK1/2及pERK1/2蛋白表达水平升高(P丹蒌组TG、LDL-C水平降低(P丹蒌组及血府组血管ERK1/2及pERK1/2蛋白表达降低(P丹蒌片及血府逐瘀颗粒均能减小斑块面积,减轻大鼠AS病变程度,延缓AS病情进展,其作用机制可能是通过降低血清血脂水平,减少PDGF释放,抑制ERK信号通路活化及VSMC增殖。

关键词：血府逐瘀颗粒丹蒌片动脉粥样硬化胞外信号调控激酶信号通路平滑肌细胞

丹蒌片对短暂心肌缺血再灌注诱导的心律失常模型大鼠的保护作用及机制

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中国中西医结合杂志 2014年第9期34卷 1125-1129页

作者：郭丽丽王阶林飞何永侠中国中医科学院广安门医院心血管病证结合实验室北京100053 湖北中医药大学临床医学院武汉430065 郑州大学药学院药理学系郑州450001

目的探讨丹蒌片对短暂心肌缺血再灌注诱导的心律失常模型大鼠的保护作用及机制。方法将45只健康成年Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、丹蒌片组,每组15只。假手术及模型组以O.1 mL/(kg·d)蒸馏水灌胃,丹蒌片组以0.53 g/mL浓度的... 详细信息

目的探讨丹蒌片对短暂心肌缺血再灌注诱导的心律失常模型大鼠的保护作用及机制。方法将45只健康成年Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、丹蒌片组,每组15只。假手术及模型组以O.1 mL/(kg·d)蒸馏水灌胃,丹蒌片组以0.53 g/mL浓度的丹蒌片混悬液0.1 mL/(kg·d)灌胃,连续给药10天,末次灌胃1 h后进行心肌缺血再灌注实验。描记结扎前、缺血和再灌注时心电图,全程监测各组大鼠颈动脉血压。观察各组大鼠心肌缺血再灌注不同时间ST段变化,再灌注30 min内大鼠心室颤动、室性早搏、室性心动过速的发生次数及持续时间,并检测心肌组织匀浆Na^+-K^+-ATP酶及Ca^(2+)-ATP酶的活性。结果丹蒌片组大鼠颈动脉血压及心率略低于模型组,两组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与假手术组比较,模型组缺血0、5、7 min ST段明显抬高(P丹蒌片组ST段抬高程度显著降低(P丹蒌片组抬高程度仍明显低于模型组(P0.05)。再灌注0 min时,模型组及丹蒌片组ST下降超过缺血时1/2,两组大鼠心肌缺血程度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与模型组比较,丹蒌片组致命性及非致命性室颤发生率、室性心动过速、室性早搏的发生频率及持续时间明显减少(P丹蒌片对短暂心肌缺血再灌注诱导的心律失常有显著的保护作用,其作用可能与降低心肌缺血程度,增加离子转运通道相关酶活性有关。

关键词：丹蒌片心肌缺血/再灌注心律失常

丹蒌片对心血管疾病的作用及相关成分的生物网络关系的探讨

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中草药 2015年第5期46卷 774-777页

作者：王富江张鹏于春泉朱彦天津中医药大学天津国际生物医药联合研究院天津300457

通过查阅Pub Med、中国知网、万方等数据库搜集相关文献,同时采用生物反应路径分析(ingenuity pathway analysis,IPA)系统推测丹蒌片与相关疾病的作用靶点,预测相关的作用机制。近几年对丹蒌片的研究主要集中在高脂血症及动脉粥样硬化... 详细信息

通过查阅Pub Med、中国知网、万方等数据库搜集相关文献,同时采用生物反应路径分析(ingenuity pathway analysis,IPA)系统推测丹蒌片与相关疾病的作用靶点,预测相关的作用机制。近几年对丹蒌片的研究主要集中在高脂血症及动脉粥样硬化等疾病方面,一些已知的化学成分可能是通过环加氧酶2(PTGS2)、瘦素蛋白(LEP)、一氧化氮合酶3(NOS3)和低密度脂蛋白受体(LDLR)起作用。明确丹蒌片化学成分及其药理作用还具有一定的困难,生物化学与网络药理学的结合有助于了解丹蒌片对心血管疾病治疗的作用机制。

关键词：丹蒌片网络药理学心血管疾病高脂血症动脉粥样硬化

丹蒌片对SAMP8小鼠认知功能和脑微血管连接蛋白表达的影响

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中药新药与临床药理 2023年第4期34卷 480-486页

作者：姚晰晨高爱社田浩张振强宋军营陈芳河南中医药大学医学院河南郑州450018 河南中医药大学中医药科学院河南郑州450018

目的观察丹蒌片对SAMP8小鼠认知功能、紧密连接蛋白表达的影响。方法取5月龄雄性SAMP8小鼠36只,随机分为模型组、丹蒌片组(1.35 g·kg^(-1))和多奈哌齐组(0.747 mg·kg^(-1)),另以SAMR1小鼠设为正常对照组,每组均为12只。灌胃给药2个月... 详细信息

目的观察丹蒌片对SAMP8小鼠认知功能、紧密连接蛋白表达的影响。方法取5月龄雄性SAMP8小鼠36只,随机分为模型组、丹蒌片组(1.35 g·kg^(-1))和多奈哌齐组(0.747 mg·kg^(-1)),另以SAMR1小鼠设为正常对照组,每组均为12只。灌胃给药2个月后,进行Morris水迷宫实验和Y迷宫实验,检测小鼠空间探索能力;透射电镜观察小鼠海马区脑微血管的超微结构;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测海马区紧密连接蛋白(Claudin-5、Occludin、ZO-1)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达。结果与正常对照组相比,模型组的平均逃避潜伏期延长(P丹蒌片组及多奈哌齐组逃避潜伏期明显缩短(P丹蒌片组和多奈哌齐组小鼠进臂总次数均增加(P丹蒌片组和多奈哌齐组细胞间紧密连接的膜结构清晰;丹蒌片组紧密连接蛋白(Claudin-5、Occludin、ZO-1)表达上调(P丹蒌片能够改善SAMP8小鼠学习记忆功能,其机制可能与丹蒌片能降低MMP-9的表达,减少脑微血管内皮细胞紧密连接蛋白的降解,保护血脑屏障有关。

关键词：丹蒌片 SAMP8小鼠阿尔茨海默病紧密连接蛋白血脑屏障

丹蒌片与血府逐瘀颗粒对ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化斑块影响的比较研究

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中国中西医结合杂志 2021年第5期41卷 577-582页

作者：缪静周鑫斌毛威陈洁浙江大学医学院附属邵逸夫医院重症医学科杭州310016 浙江中医药大学附属第一医院心内科杭州310006

目的比较丹蒌片与血府逐瘀颗粒对ApoE基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠动脉粥样硬化(AS)斑块的影响。方法40只雄性ApoE^(-/-)小鼠随机分为正常组、模型组、他汀组、丹蒌组和血府组,每组8只。正常组ApoE^(-/-)小鼠喂食基础饲料12周,余各组均采... 详细信息

目的比较丹蒌片与血府逐瘀颗粒对ApoE基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠动脉粥样硬化(AS)斑块的影响。方法40只雄性ApoE^(-/-)小鼠随机分为正常组、模型组、他汀组、丹蒌组和血府组,每组8只。正常组ApoE^(-/-)小鼠喂食基础饲料12周,余各组均采用高糖高脂饮食制备AS模型。模型组、他汀组、丹蒌组、血府组分别给予生理盐水、阿托伐他汀片混悬液(1.5 mg/mL)、丹蒌片混悬液(0.34 g/mL)、血府逐瘀颗粒混悬液(0.64 g/mL)灌胃干预8周。干预结束后,ELISA检测各组血脂、ox-LDL、内皮素(ET-1)、IL-6及TNF-α含量;油红"O"染色观察主动脉内膜斑块;HE染色观察主动脉病理形态学改变,并计算内膜厚度及斑块面积;透射电镜观察主动脉血管平滑肌细胞(VS M C)超微结构改变。结果与正常组比较,模型组血清TC、TG、LDL-C、ox-LDL、ET-1、IL-6和TNF-α水平升高(P丹蒌组血清TC、TG、LDL-C、ox-LDL、ET-1和IL-6水平下降(P0.05),血府组TC、TG、ox-LDL、ET-1和IL-6水平下降(P0.05)。油红"O"染色可见各给药组主动脉亦有呈鲜红色的AS斑块,但AS脂肪区域面积明显减小,HE染色可见内膜增厚及斑块面积明显减小,透射电镜下可见各给药组中膜合成型VSMC较模型组明显减少。结论丹蒌片和血府逐瘀颗粒均可降低AS模型ApoE^(-/-)小鼠炎症因子的表达及稳定AS斑块,但丹蒌片调节血脂代谢异常的作用优于血府逐瘀颗粒。

关键词：丹蒌片血府逐瘀颗粒 ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化

丹蒌片对Aβ1-40致脑微血管内皮细胞损伤保护作用的机制研究

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中药新药与临床药理 2021年第2期32卷 234-239页

作者：高爱社杨洒张振强宋军营张鹏飞史占江河南中医药大学基础医学院河南郑州450018 河南中医药大学中医药科学院河南郑州450018

目的研究丹蒌片对β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)诱导脑微血管内皮细胞(BMEC)损伤的保护作用。方法(1)将大耳白兔BMEC培养在含10%胎牛血清和1%青霉素/链霉素的完全培养基中,用Aβ1-40建立BMEC损伤模型。实验分正常组(C)、模型组(M)和晚期糖... 详细信息

目的研究丹蒌片对β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)诱导脑微血管内皮细胞(BMEC)损伤的保护作用。方法(1)将大耳白兔BMEC培养在含10%胎牛血清和1%青霉素/链霉素的完全培养基中,用Aβ1-40建立BMEC损伤模型。实验分正常组(C)、模型组(M)和晚期糖基化终末产物受体(RAGE)中和抗体组(RAGE-Ab),24 h后使用Western Blot法检测各组血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、巨噬细胞炎性蛋白-1β(MIP-1β)、趋化因子受体-5(CCR5)的表达。(2)用丹蒌片制备含药血清,实验分为正常组(10%空白血清培养)、模型组、低浓度用药组(10%丹蒌片低浓度含药血清+Aβ1-40)、高浓度用药组(10%丹蒌片高浓度含药血清+Aβ1-40),24 h后用Western Blot法测定各组细胞上述因子的表达水平。结果(1)与正常组相比,模型组RAGE、VCAM-1、MIP-1β、CCR5表达显著增加(P丹蒌片含药血清组各因子的表达显著降低(P丹蒌片含药血清具有保护Aβ1-40诱导的BMEC损伤的作用,其机制可能与抑制Aβ和RAGE诱发的BMEC趋化反应有关。

关键词：丹蒌片脑微血管内皮细胞 β淀粉样蛋白1-40 阿尔茨海默病兔

丹蒌片对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化的疗效研究

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中国中西医结合杂志 2020年第11期40卷 1367-1372页

作者：缪静周鑫斌毛威陈洁浙江大学医学院附属邵逸夫医院重症医学科杭州310016 浙江中医药大学附属第一医院心内科杭州310006

目的观察丹蒌片对ApoE基因敲除(ApoE-/-)小鼠动脉粥样硬化(AS)的作用。方法32只雄性ApoE-/-小鼠随机分为空白组、模型组、他汀组、丹蒌组,每组8只。空白组喂饲基础饲料,余各组采用高糖高脂饲料连续喂饲12周制备AS模型。模型组、他汀组... 详细信息

目的观察丹蒌片对ApoE基因敲除(ApoE-/-)小鼠动脉粥样硬化(AS)的作用。方法32只雄性ApoE-/-小鼠随机分为空白组、模型组、他汀组、丹蒌组,每组8只。空白组喂饲基础饲料,余各组采用高糖高脂饲料连续喂饲12周制备AS模型。模型组、他汀组及丹蒌组于第5周时分别给予生理盐水、阿托伐他汀混悬液(1.5 mg/mL)、丹蒌片混悬液(0.34 mg/mL)连续灌胃干预8周。干预结束后,ELISA检测血清血脂、一氧化氮(NO)、内皮素(ET)及IL-6含量;油红“O”染色观察主动脉内膜斑块;HE染色观察小鼠主动脉内膜厚度及斑块面积;透射电镜观察血管平滑肌细胞(VSMC)结构。结果与空白组比较,模型组血清TC、TG、LDL-C、IL-6、ET水平、内膜厚度、面积及内/中膜厚度面积比升高(P丹蒌组血清TC、TG、LDL-C、ET水平、内膜厚度、面积及内/中膜厚度面积比下降(P丹蒌组血清IL-6水平下降(P丹蒌组AS脂肪区域面积减少,主动脉合成型VSMC减少。结论丹蒌片可显著降低血清血脂、炎症因子水平,保护血管内皮功能,抑制VSMC异常增殖,从而延缓AS的发生发展。

关键词：丹蒌片 ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化