检索结果-南通市图书馆

黄体酮对大鼠脑创伤后神经干细胞增殖的影响(英文)

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国临床康复 2006年第33期10卷 149-152,i0005页

作者：赵红岗李东飞李东亮田梅张耀东李庆岗李明阳新乡医学院生理学与神经生物学教研室河南省新乡市453003 孟州市人民医院外科河南省孟州市454750 新乡医学院基础医学院河南省新乡市453003

背景:脑创伤一定程度上可刺激神经干细胞增殖,而黄体酮可改善脑创伤后学习记忆功能,黄体酮可能通过刺激神经干细胞增殖,促进脑创伤后神经功能的恢复。目的:观察黄体酮对弥漫性脑创伤后神经干细胞增殖的影响。设计:随机对照动物实验。单... 详细信息

背景:脑创伤一定程度上可刺激神经干细胞增殖,而黄体酮可改善脑创伤后学习记忆功能,黄体酮可能通过刺激神经干细胞增殖,促进脑创伤后神经功能的恢复。目的:观察黄体酮对弥漫性脑创伤后神经干细胞增殖的影响。设计:随机对照动物实验。单位:新乡医学院。材料:成年健康雄性SD大鼠48只,四五个月龄,体质量280～330g。方法:实验于2004-09/2005-02在新乡医学院完成。采用Marmarou弥漫性脑创伤模型。48只大鼠随机分为4组,每组12只:①假手术组,仅切开头皮后缝合。②脑创伤组,建立脑创伤动物模型。③二甲基亚砜组,脑创伤后1h及以后每天腹腔注射与黄体酮组等容量的二甲基亚砜。④黄体酮组,脑创伤后1h及以后每天腹腔注射黄体酮4mg/kg。于假手术或脑创伤手术后3,6d处死动物,苏木精-伊红染色观察大脑皮质神经元形态学变化,免疫组织化学染色检测海马和齿状回巢蛋白表达情况。主要观察指标:神经元组织形态学观察;海马和齿状回巢蛋白表达检测。结果:①假手术组大鼠皮质无神经元损伤,脑创伤3d组和6d组大鼠皮质显示明显的神经元损伤,有神经元缺失,黄体酮3d组和6d组所显示的神经元损伤均明显轻于脑创伤组。②假手术组齿状回巢蛋白呈低水平或少量表达,海马CA4区偶见巢蛋白表达。脑创伤组海马CA4区和齿状回巢蛋白表达则明显增多(P蛋白的表达与脑创伤组比较明显增多(P蛋白表达方面无明显差别(P>0.05)。结论:黄体酮减轻脑创伤作用可能与其促进神经干细胞增殖有关。

关键词：孕酮脑损伤中间丝蛋白质类大鼠

新生小鼠脊髓神经干细胞体外增殖及其多潜能分化特性

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国临床康复 2006年第41期10卷 4-6,I0001页

作者：祖波尹宗生张辉安徽医科大学第一附属医院骨科安徽省合肥市230022

目的:观察新生小鼠脊髓神经干细胞的体外增殖及其分化特性。方法:实验于2005-11/2006-02在安徽医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室完成。①在无菌条件下,利用显微解剖分离新生小鼠(出生后2d内)脊髓,采用原代机械吹打使其成... 详细信息

目的:观察新生小鼠脊髓神经干细胞的体外增殖及其分化特性。方法:实验于2005-11/2006-02在安徽医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室完成。①在无菌条件下,利用显微解剖分离新生小鼠(出生后2d内)脊髓,采用原代机械吹打使其成为单细胞悬液,离心,弃去上清液,加入干细胞培养液(含20μg/L碱性成纤维细胞生长因子,20μg/L表皮生长因子,B27辅助培养液),以1×108L-1密度接种于25mL培养瓶中,进行原代培养。②将原代培养7d左右的细胞再次离心,弃去上清,加入干细胞培养液,机械吹打成单细胞悬液,以5×107L-1密度进行传代培养,每六七天传代1次。③机械吹打制成的单细胞悬液,经过传代培养,重新增殖为神经球,采用巢蛋白抗体鉴定培养细胞,用体积分数为0.1的胎牛血清诱导神经干细胞分化后,用神经元和星型胶质细胞标志物微管相关蛋白,胶质纤维酸性蛋白相应抗体检测神经干细胞分化情况。结果:①脊髓源性神经干细胞形态学观察:在细胞培养第3,4天即可见培养基中出现由几个或十几个细胞组成的结构紧密、大小不等的悬浮细胞团块,称之为“神经细胞球”;随着培养时间的延长和多次传代换液,细胞增殖迅速,神经细胞球数目明显增多。②脊髓神经干细胞的分化与鉴定:将神经球转入含体积分数为0.1的胎牛血清的培养液中,数小时内迅速贴壁并开始分化,5d后分化的细胞呈现出3种典型的神经细胞形态;免疫细胞化学检测神经细胞球巢蛋白染色阳性及其分化的神经元和星型胶质细胞微管相关蛋白、胶质纤维酸性蛋白分别染色阳性。结论:新生小鼠脊髓存在具有多分化潜能的神经干细胞,它们可以在体外大量增殖,经过诱导可朝神经元和胶质细胞的方向分化。

关键词：脊髓干细胞细胞培养中间丝蛋白质类小鼠

丹参素和丹酚酸对胎鼠脑神经干细胞迁移的诱导

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国组织工程研究与临床康复 2007年第7期11卷 1225-1228,I0002页

作者：郭国庆沈伟哉钟世镇暨南大学医学院解剖学教研室广东省广州市510630 南方医科大学临床解剖学研究所广东省广州市510150

目的:以丹参水溶性成分丹参素、丹酚酸为干预药物,观察其对胎鼠脑神经干细胞迁移的诱导作用。方法:实验于2006-03/08在广州暨南大学医学院完成。①丹参素(粉剂,纯度大于90%,昆明长春花科技公司生产,批号1108552200203);丹酚酸(粉剂,纯... 详细信息

目的:以丹参水溶性成分丹参素、丹酚酸为干预药物,观察其对胎鼠脑神经干细胞迁移的诱导作用。方法:实验于2006-03/08在广州暨南大学医学院完成。①丹参素(粉剂,纯度大于90%,昆明长春花科技公司生产,批号1108552200203);丹酚酸(粉剂,纯度大于90%,昆明长春花科技公司生产,批号CCH601012);MBC96型趋化小室(NeuroProbe公司)。②取妊娠13.5d昆明种小鼠2只,处死后取出胎鼠,分离其胎脑神经干细胞进行传代培养。取培养至对数生长期的细胞,采用Boyden小室法观察细胞迁移情况。取单细胞悬液50μL,分别加入Boyden小室的12个上室;取分别含有5,10,20,40,80,100mg/L丹参素和5,10,20,40,80,100mg/L丹酚酸的DMEM培养基各450μL,加入Boyden小室的12个下室;另2孔以不含丹参素和丹酚酸的DMEM培养基作为空白对照。上下两室以预先包被Ⅰ型胶原的聚碳酸酯微孔滤膜相隔。将Boyden小室置于37℃、体积分数为0.05的CO2培养箱中培养24h,取出微孔滤膜,用甲醇将迁移至微孔滤膜下层的细胞固定,Nissl染色,显微镜下随机选择3个不同视野,计数膜上不同层次的细胞数。③选取昆明种小鼠18只,随机数字表法分为生理盐水对照组、丹参素组、丹酚酸组,6只/组。丹参素组于侧脑室内连续注射80mg/L丹参素5μL,丹酚酸组注射40mg/L丹酚酸5μL,生理盐水对照组注射等量生理盐水,共3d,术后14d处死,取脑,制备切片,行ABC免疫细胞化学染色,观察丹参素和丹酚酸干预后nestin阳性神经元的分布变化。结果:18只小鼠全部进入结果分析。①不同质量浓度的丹参素对神经干细胞迁移的诱导:与空白对照比较,5,10mg/L的丹参素促神经干细胞迁移的作用并不明显(t=1.037,1.374,P>0.05);20,40mg/L的丹参素可明显促进神经干细胞的迁移(t=2.894,3.468,P0.05);10,20mg/L的丹酚酸可明显促进神经干细胞的迁移(t=3.021,3.947,P<0.01);当丹酚酸质量浓度为40mg/L时促迁移作用最为强烈(t=4.342,P<0.01),之后有所减弱。③丹参素和丹酚酸对小鼠室管膜下nestin阳性神经元迁移的影响:丹参素组侧脑室内侧和外侧的nestin阳性细胞的数量多于生理盐水对照组,而且并不局限于侧脑室周围区,在脑皮质和尾壳核可见少量的阳性细胞,细胞的突起明显,伸向皮质方向,侧脑室内侧的阳性细胞有相似的特征。丹酚酸组侧脑室周围的阳性细胞数量多,而且在皮质和尾壳核检测到大量的阳性细胞。结论:丹参素和丹酚酸均具有诱导胎鼠脑神经干细胞迁移的作用,且丹酚酸的作用优于丹参素。

关键词：脑干细胞神经系统细胞学中间丝蛋白质类细胞运动

昆明小鼠胰腺干细胞分离培养及特异性标志物巢蛋白的鉴定

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国组织工程研究与临床康复 2007年第7期11卷 1282-1283,F0003页

作者：陈维平岑妍慧叶健何少健刘琼东袁路广西医科大学组织学与胚胎学教研室广西壮族自治区南宁市530021 广西壮族自治区计划生育研究中心广西壮族自治区南宁市530021

探讨胰腺干细胞的分离、培养及其特异性标志物巢蛋白鉴定的基本技术方法。选取新生昆明种小鼠25只,分离胰腺组织,V型胶原酶消化,结合自然沉降技术形成不连续密度梯度离心。分别从磷酸盐缓冲液/1.068g/L Percoll液(第一界面)、1.068g/L P... 详细信息

探讨胰腺干细胞的分离、培养及其特异性标志物巢蛋白鉴定的基本技术方法。选取新生昆明种小鼠25只,分离胰腺组织,V型胶原酶消化,结合自然沉降技术形成不连续密度梯度离心。分别从磷酸盐缓冲液/1.068g/L Percoll液(第一界面)、1.068g/L Percoll液/1.096g/L Percoll液(第二界面)、1.096g/L Percoll液/1.118g/L Percoll液(第三界面)收集细胞。各界面细胞均加入含体积分数为0.1胎牛血清的DMEM低糖培养基,置于经多聚赖氨酸处理的培养瓶中常规培养。24h后将培养基更换为不含胎牛血清的DMEM低糖培养基,并加入10mg/L的角质细胞生长因子和20μg/L的碱性成纤维细胞生长因子,观察体外培养的各界面细胞的形态学特征。胰腺的内分泌部存在β细胞,双硫腙能与β细胞分泌颗粒中的锌螯合而呈现铁红色。将收集的各界面细胞进行双硫腙染色,检测细胞来源。免疫组织化学法检测各界面巢蛋白的表达。结果第一、二界面细胞65%～90%双硫腙染色呈阳性,来源于胰腺的内分泌部;第三界面细胞双硫腙染色呈阴性,来源于胰腺的外分泌部。从胰腺的内分泌部获得的细胞聚集呈胰岛样细胞团贴壁生长,48～72h后可见许多大、圆、单个核的细胞从胰岛样细胞团中向周围长出,以附壁生长的方式在局部形成细胞集落。从胰腺的外分泌部获得的细胞主要呈上皮样生长,并逐渐汇合成片,在上皮样细胞集落的周围可见大、圆、单个核的细胞生长并形成集落。各界面大、圆、单个核的细胞,巢蛋白均呈阳性表达。提示从胰腺内、外分泌部的组织中能成功获取胰腺干细胞特异性标志Nestin表达阳性的干样细胞。

关键词：胰腺细胞学中间丝蛋白质类小鼠

巢蛋白在足突广泛融合的肾小球中表达下调及与蛋白尿程度的相关性

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华肾脏病杂志 2008年第6期24卷 405-410页

作者：尤莉陈靖苏蔚张敏敏朱蔚钰张力胤郝传明顾勇复旦大学附属华山医院肾脏科复旦大学肾脏病研究所上海200040

目的观察中间丝蛋白类的巢蛋白（nestin）在足突广泛融合的肾小球中的表达及其与足突病变动态过程和蛋白尿产生的关系。方法免疫组化法检测nestin在人正常肾组织及微小病变肾组织中的表达。构建氨基核苷嘌呤霉素肾病大鼠模型，应用免疫... 详细信息

目的观察中间丝蛋白类的巢蛋白（nestin）在足突广泛融合的肾小球中的表达及其与足突病变动态过程和蛋白尿产生的关系。方法免疫组化法检测nestin在人正常肾组织及微小病变肾组织中的表达。构建氨基核苷嘌呤霉素肾病大鼠模型，应用免疫组化、荧光实时定量PCR、Western印迹法检测注射嘌呤霉素后第1、4、10、20天大鼠肾小球中nestin的分布与表达；电镜观察肾脏足细胞改变，测定尿蛋白量（24h）。分析nestin的变化与蛋白尿的相关性。结果免疫组化显示nestin在人类微小病变肾小球中的表达较正常组织显著下调（0．93±0．08比1．65±0．12，P〈0．05）。在嘌呤霉素损伤足细胞早期，肾小球nestin的表达曾有一过性增加（mRNA和蛋白水平分别为对照组的1．23倍和1．48倍，P〈0．05），随后持续下降。nestin的mRNA水平在嘌呤霉素注射后第4天时降至对照组的35．8％；第10天时为对照组的12．1％（均P〈0．01）；病变好转后开始上升，恢复为对照组的65．8％（P〈0．05）。Western印迹检测nestin蛋白改变也有类似的趋势，嘌呤霉素注射后第4天，nestin蛋白水平有所下降，为对照组的77．0％（P〈0．05）；至大量蛋白尿的第10天，nestin蛋白水平仅为对照组的58．0％（P〈0．05）；而随着病变的恢复，嘌呤霉素注射后第20天时nestin蛋白量恢复为对照的83．4％。Pearson相关分析结果显示，注射嘌呤霉素后nestinmRNA（r=-0．667，P〈0．05）及蛋白（r=-0．621，P〈0．05）表达与尿蛋白量（24h）均呈负相关。结论在以足突广泛融合为特征的肾脏病变中，肾小球中间丝蛋白nestin表达显著减少，并与蛋白尿程度呈负相关，提示nestin可能参与了足细胞形态和功能的维持。

关键词：中间丝蛋白质类肾小球蛋白尿 nestin 足细胞微小病变肾病氨基核苷嘌呤霉素肾病

人聚角微丝蛋白基因克隆表达及其抗体在类风湿关节炎诊断中的价值

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华检验医学杂志 2010年第2期33卷 121-125页

作者：沈波徐巍李俊张晓雪袁兆林傅鹰朱敏孟哲峰浙江省台州医院检验科临海317000 复旦大学上海医学院医学分子病毒学重点实验室

目的通过克隆人聚角微丝蛋白（filaggrin）基因，构建重组表达质粒，获得具活性的纯化重组蛋白，建立人AFA间接ELISA检测法，以评价AFA在RA诊断中的价值。方法构建重组表达载体，在大肠杆菌Rosetta—gami（DE3）中表达；融合蛋白经Ni—... 详细信息

目的通过克隆人聚角微丝蛋白（filaggrin）基因，构建重组表达质粒，获得具活性的纯化重组蛋白，建立人AFA间接ELISA检测法，以评价AFA在RA诊断中的价值。方法构建重组表达载体，在大肠杆菌Rosetta—gami（DE3）中表达；融合蛋白经Ni—NAT树脂柱进行亲和层析纯化，建立间接ELISA检测AFA方法，并用于检测114例RA患者、56例SLE患者、32例OA患者及40名健康体检者血清中抗人AFA；分析AFA和抗CCP抗体诊断RA的相关性。结果扩增出321bp人filaggrin基因片段，构建了具有正确序列的质粒载体pET-28a（＋）-filaggrin，转化大肠杆菌Rosetta—gami（DE3）中经诱导产生高水平的表达产物。经SDS—PAGE分析，在相对分子质量为14000处出现新生蛋白带。用Ni—NAT树脂纯化后得到具有活性的纯化人filaggrin重组蛋白。间接ELISA检测标本血清结果显示，RA组AFA检测吸光度（A）值为0．473±0．248，与SLE组、OA组及健康对照组的A值（分别为0．160±0．088、0．050±0．018、0．121±0．040）两两组间比较，差异具有统计学意义（t值分别为12．004、14．464、18．078，P均〈0．01）。AFA在RA组、SLE组及OA组阳性率分别为48．2％、5．4％和3．1％。RA组AFA阳性率与SLE组、OA组及健康对照组比较，差异有统计学意义（χ^2=67．088，P〈0．01）。AFA与抗CCP抗体对RA的诊断呈正相关（r=0．42，P〈0．05）。AFA与抗CCP阳性一致率为70．1％，114例患者中有10例患者抗体CCP阴性，而AFA检测结果为阳性。AFA对RA诊断的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为48．2％、96．9％、93．2％和67．9％。结论用纯化filaggrin融合蛋白建立的间接ELISA检测抗人AFA的方法，对RA诊断具有较好敏感度和特异度，AFA与抗CCP抗体共同检测可提高检测阳性率。

关键词：关节炎,类风湿中间丝蛋白质类酶联免疫吸附测定

中间丝聚合蛋白基因多态性与特应性皮炎发病及临床表型的相关性

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华皮肤科杂志 2017年第11期50卷 806-809页

作者：张卉程茹虹李明姚志荣上海交通大学医学院附属新华医院皮肤科 200092

目的探讨中间丝聚合蛋白（FLG）基因多态性与特应性皮炎（AD）发病及临床表型的相关性。方法采用问卷调查的形式收集261例AD患者伴发过敏性鼻炎、哮喘病史和疾病严重度评分等资料，对部分患者进行混合食物过敏原和混合吸入性过敏原筛... 详细信息

目的探讨中间丝聚合蛋白（FLG）基因多态性与特应性皮炎（AD）发病及临床表型的相关性。方法采用问卷调查的形式收集261例AD患者伴发过敏性鼻炎、哮喘病史和疾病严重度评分等资料，对部分患者进行混合食物过敏原和混合吸入性过敏原筛选、血清总IgE抗体和嗜酸性粒细胞阳离子蛋白水平检测。采用重叠PCR和DNA测序法对上述AD患者和276例健康对照FLG基因3号外显子17个多态性位点（R444G、T454A、P478S、H519N、D836D、S1482Y、A1805V、R1891Q、1961Q、S2166S、Y2194H、H2330H、D2339N、S2366T、E2398Q、K2444E、E2652D）进行基因分型。结果二项逻辑回归分析和卡方检验未发现17种FLG多态位点与AD发病相关（均P 〉 0.05）。H519N与AD伴发哮喘相关（χ2 = 8.680，P = 0.011），AA基因型可增加AD患者发生哮喘的风险（P = 0.004，OR = 1.061， 95% CI 1.016-1.109）。S2366T和K2444E与AD患者食物敏感相关（χ2值分别为6.520和6.121，P值分别为0.038和0.047），S2366T的GG ＋ GC基因型（P = 0.012，OR = 1.396， 95% CI 1.054-1.849）和G等位基因（P = 0.037，OR = 1.350， 95% CI 1.008-1.807）可提高AD患者食物敏感的风险。K2444E的AA ＋ AG基因型（P = 0.013，OR = 1.393， 95% CI 1.049-1.850）和G等位基因（P = 0.028，OR = 1.380， 95% CI 1.025-1.857）可提高AD患者食物敏感的风险。结论中国汉族人群 FLG基因多态性可能是一些 AD相关临床表型的危险因素，H519N可能与AD伴发哮喘相关，S2366T和K2444E则可能与AD伴食物敏感相关。

关键词：皮炎特应性中间丝蛋白质类多态性单核苷酸食物过敏表型中间丝聚合蛋白基因

吗啡对小鼠室管膜上皮、中央灰质及海马结构中巢蛋白表达的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

第二军医大学学报 2007年第8期28卷 854-858页

作者：陈良富张雪梅苏筱玲王喜梅怀化医学高等专科学校组织学与胚胎学教研室怀化418000

目的:观察吗啡对小鼠脑组织巢蛋白(nestin)表达的影响。方法:20只小鼠随机分为对照组和实验组(n=10)。对照组每只小鼠每日皮下注射生理盐水0.1 ml,实验组每只小鼠每日注射吗啡0.1 ml(1 mg)。30 d后处死小鼠,开颅取脑并制成石蜡切片,免... 详细信息

目的:观察吗啡对小鼠脑组织巢蛋白(nestin)表达的影响。方法:20只小鼠随机分为对照组和实验组(n=10)。对照组每只小鼠每日皮下注射生理盐水0.1 ml,实验组每只小鼠每日注射吗啡0.1 ml(1 mg)。30 d后处死小鼠,开颅取脑并制成石蜡切片,免疫组织化学法观察不同部位脑组织nestin的表达,用图像分析系统进行分析。结果:对照组的室管膜上皮、中央灰质、室周灰质和海马结构中巢蛋白呈弱阳性表达,平均灰度值为150.982±13.31;其中有5类巢蛋白阳性细胞:第一类为室管膜上皮的基底细胞,第二类分布于室周灰质和中央灰质的深层,第三类主要分布于中央灰质的浅层、下托、海马旁回和内嗅区皮质的Ⅱ、Ⅲ层,第四类常见于顶盖与下托,第五类位于顶盖、海马、齿状回、海马旁回和内嗅区皮质的第V层;下托和内嗅区的阳性神经细胞数为(7.20±1.23)/mm^2。实验组上述部位脑组织巢蛋白呈阳性表达,平均灰度值为133.03±22.28,上述5类细胞的密度增加,下托和内嗅区的强阳性神经细胞数为(10.50±1.43)/mm^2。两组平均灰度值和阳性神经细胞数均有显著差异(P类细胞;海马锥体细胞层第三类细胞增加;顶盖和下托内第四类细胞增加。结论:吗啡可能通过促进小鼠室管膜上皮细胞、中央灰质、室周灰质及海马结构巢蛋白的表达促进神经细胞的增殖、分化与迁移。

关键词：吗啡中间丝蛋白质类室管膜水管周灰质海马

人脐带间充质干细胞和大鼠激活态雪旺细胞联合培养的实验研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

天津医药 2012年第3期40卷 251-253,I0005页

作者：朱玉海冯世庆天津医科大学总医院骨科 300052

目的:探讨体外分层共培养条件下大鼠激活态雪旺细胞对人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)生长及分化的影响。方法:分离、培养人脐带间充质干细胞和大鼠激活态雪旺细胞,通过Millicell小室实现两者体外共培养,根据共培养与否分为共培养组与对照... 详细信息

目的:探讨体外分层共培养条件下大鼠激活态雪旺细胞对人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)生长及分化的影响。方法:分离、培养人脐带间充质干细胞和大鼠激活态雪旺细胞,通过Millicell小室实现两者体外共培养,根据共培养与否分为共培养组与对照组,通过巢蛋白(Nestin)、神经丝蛋白200(NF200)免疫荧光染色分析干细胞分化情况。结果:共培养组两种细胞在Millicell小室分层共培养条件下,hUCMSCs逐渐出现类似神经细胞的形态,对照组形态无明显变化。共培养组中hUCMSCs表达神经干细胞标志物Nestin,共培养1d后逐渐降低,而对照组仅低表达Nestin,共培养8h^7d,两组间差异有统计学意义(P<0.01);共培养组细胞共培养1d后hUCMSCs表达神经元标志物NF200,而对照组始终不表达NF200。结论:人脐带间充质干细胞有向神经细胞分化的能力,分层培养条件下大鼠激活态雪旺细胞可促进其神经方向分化。

关键词：间质干细胞细胞,培养的共同培养技术细胞培养技术许旺细胞细胞分化神经组织蛋白质类中间丝蛋白质类