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枳菊解郁汤对抑郁小鼠学习记忆及NCAM表达的影响

枳菊解郁汤对抑郁小鼠学习记忆及NCAM表达的影响

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作者：肖婧珊曲阜师范大学

学位级别：硕士

本研究采用(高台、电击足底、斜笼实验、禁水、禁食、冷水刺激、通宵照明)多因素慢性不可预知应激建立抑郁动物模型,应激持续21天,并对各组小鼠采用中药复方枳菊解郁汤以及单味药物枳实和石菖蒲进行灌胃处理。将青年小鼠分为对照组,模型... 详细信息

本研究采用(高台、电击足底、斜笼实验、禁水、禁食、冷水刺激、通宵照明)多因素慢性不可预知应激建立抑郁动物模型,应激持续21天,并对各组小鼠采用中药复方枳菊解郁汤以及单味药物枳实和石菖蒲进行灌胃处理。将青年小鼠分为对照组,模型组,中药复方组、氟西汀组、与两个单味药枳实组与石菖蒲组。采用开场实验检测小鼠自发活动和探究行为,采用悬尾实验检测小鼠情绪行为变化,采用Morris水迷宫实验检测小鼠空间学习记忆能力的变化;进行酶活实验,检测小鼠海马及前脑皮层CAT和MAO活性变化;HE染色,观察小鼠海马和前脑皮层神经元形态学改变;采用免疫组化检测神经细胞黏附分子(neural cell adhesion molecule,NCAM)在海马和前脑皮层表达,以探讨中药复方的抗抑郁作用及其机制。实验结果:1.开场行为:模型组小鼠与对照组相比,直立次数、穿越格数、修饰次数均减少,中央格停留时间延长,排便粒数增多。相比于模型组小鼠,中药复方枳菊解郁汤能够改善抑郁小鼠对新环境的适应能力,自发活动和探究行为,缓解对新环境的紧张情绪,而其中的单味药枳实,石菖蒲对小鼠的开场行为改善效果较弱。2.悬尾实验:相比于对照组小鼠,模型组小鼠后4分钟累积不动时间增加,第一次静止不动时间显著减小。相比于模型组小鼠,氟西汀组、中药复方组小鼠后四分钟累计不动时间减少,第一次静止不动时间明显增加,绝望程度得到缓解;而枳实组与石菖蒲组小鼠第一次静止不动时间与累积不动时间则无显著性差异。3.水迷宫实验:相比于对照组小鼠,定位航行实验中模型组小鼠寻找平台的时间显著延长;空间搜索实验中,模型组小鼠在平台象限停留时间显著减少。相比于模型组小鼠,氟西汀组、中药复方枳菊解郁汤组小鼠逃避潜伏期均明显减少。氟西汀组、中药复方组小鼠在平台象限停留的时间明显增加。而枳实组与石菖蒲组并没有得到明显改善。4.酶活性实验:与对照组小鼠相比,模型组小鼠脑内CAT活性显著降低、MAO活性明显升高;相比于模型组小鼠,氟西汀组与中药复方组小鼠脑内CAT活性明显升高,MAO的活性明显降低,然而枳实组小鼠与石菖蒲组小鼠CAT活性与MAO活性并无显著性差异。***染色:对照组、氟西汀组和中药复方组小鼠海马CA1、CA3与DG区细胞数量较多,没有或者极少的变形细胞,大小基本相同,细胞结构比较完整,细胞排列整齐紧密,细胞核基本位于细胞的中央,结构明显并且边缘清楚。细胞核染色比较深。前脑皮层神经元细胞排列整齐,形态规整并且染色清晰,少有细胞变形现象。模型组、枳实组以及石菖蒲组小鼠海马CA1,CA3区的神经细胞出现萎缩,并且出现了变形,细胞数量减少,细胞之间的空隙变大,胞核固缩等现象。前脑皮层细胞出现在形态不规则现象,数量减少并且层次松散,出现三角形细胞和梭形细胞,细胞与细胞出现中断现象,染色淡并且着色不匀。***免疫组化:与对照组小鼠相比,模型组小鼠NCAM阳性细胞数在海马各区和前脑皮层均明显减少,平均目标灰度值增大,表达明显减弱。相比于模型组小鼠,NCAM阳性细胞数在氟西汀组和中药复方组小鼠在海马DG区和前脑皮层表达较多,平均目标灰度值降低,但在海马CA1区、CA3区的表达相对较少;枳实组与石菖蒲组NCAM阳性细胞数相对较少。实验结论:1.中药复方枳菊解郁汤明显改善由慢性应激导致的小鼠抑郁样行为;显著增强抑郁模型小鼠的学习记忆能力,表现出一定的抗抑郁作用。2.中药复方枳菊解郁汤能够明显提高抑郁模型小鼠CAT活性和降低MAO活性,以减弱神经元的损伤。3.中药复方枳菊解郁汤显著提高抑郁模型小鼠海马和前脑皮层的NCAM表达,缓解和改善海马和前脑皮层神经元结构和功能的损伤。

关键词：慢性不可预知应激中药复方枳菊解郁汤抑郁症行为学习记忆海马前脑皮层 CAT MAO NCAM

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