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中期因子调控巨噬细胞活化在肾间质纤维化中的作用

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中国医科大学学报 2022年第1期51卷 33-37页

作者：罗钢祝雪妍朱迪辽宁省妇幼保健院儿科沈阳110005 中国医科大学附属第一医院儿科沈阳110001

目的探讨中期因子(MK)调控巨噬细胞活化在肾间质纤维化(RIF)中的作用。方法通过单侧输尿管结扎(UUO)建立小鼠RIF模型。将小鼠分为假手术组、UUO 7 d组、UUO 14 d组,通过Masson染色、流式细胞术、实时荧光定量PCR和体外细胞培养技术检测... 详细信息

目的探讨中期因子(MK)调控巨噬细胞活化在肾间质纤维化(RIF)中的作用。方法通过单侧输尿管结扎(UUO)建立小鼠RIF模型。将小鼠分为假手术组、UUO 7 d组、UUO 14 d组,通过Masson染色、流式细胞术、实时荧光定量PCR和体外细胞培养技术检测各组小鼠受损肾脏胶原纤维沉积、巨噬细胞变化情况以及MK、炎性细胞因子、精氨酸酶-1(Arg-1)的变化情况。结果纤维化的肾组织中MK表达显著上调。小鼠RIF模型的肾组织中巨噬细胞数量增多,炎性细胞因子白细胞介素-1b(IL-1b)、IL-6、IL-4和Arg-1 mRNA表达水平升高。体外研究显示,MK显著促进RAW264.7巨噬细胞中IL-6 mRNA表达水平升高,但IL-1b、IL-4和Arg-1 mRNA表达水平未升高。结论靶向阻断MK可抑制M1样巨噬细胞的活化,改善RIF程度,进而抑制慢性肾脏病的进程。

关键词：肾间质纤维化中期因子巨噬细胞

中期因子（Midkine）在阿尔茨海默病中的血清学表达及其在小鼠神经干细胞体外增殖中的调控作用

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中期因子（Midkine）在阿尔茨海默病中的血清学表达及其在小鼠神...

作者：石淑贤沈阳医学院

学位级别：硕士

目的阿尔茨海默病(Alzheimer’s Disease,AD)是一种常见的神经退行性疾病,其发病机制复杂,目前尚无明确的治疗方法。然而,神经干细胞(NSCs)以其自我更新、增殖、迁移和分化的能力,成为了AD治疗的潜在靶标。近年来,中期因子(Midkine,MK)... 详细信息

目的阿尔茨海默病(Alzheimer’s Disease,AD)是一种常见的神经退行性疾病,其发病机制复杂,目前尚无明确的治疗方法。然而,神经干细胞(NSCs)以其自我更新、增殖、迁移和分化的能力,成为了AD治疗的潜在靶标。近年来,中期因子(Midkine,MK)作为一种生长因子,其在多种细胞生长过程中的作用,以及在神经系统和炎症性疾病中的重要作用越来越受到关注。我们的研究主要探讨了MK在神经干细胞增殖过程中的作用及其生物学机制,并进一步探索了MK在阿尔茨海默病(AD)患者血清中的表达特点及其临床意义,以期为阿尔茨海默病的早期筛查和治疗提供新的科学依据。研究方法本研究利用原代神经球培养的方法获取了体外实验用的小鼠神经干细胞,并通过体外实验检测MK对NSCs增殖分化的影响,同时利用了免疫化学荧光染色、Western Blotting、RT-PCR等实验方法,检测了MK对NSCs增殖的影响以及相关基因的表达。同时,我们还以附属中心医院正常体检老年人群及门诊AD患者作为研究对象,采集血液标本后,通过酶联免疫分析法(ELISA)试剂盒检测各组人群的血液样本,得出血清中MK的含量。研究结果本研究发现敲除MK后,NSC的体外神经球增殖能力显著降低,而补充MK后的NSCs增殖状况明显改善。此外,我们发现培养基中添加MK组的NSCs可以激活其受体PTPζ,刺激Akt增殖信号通路,诱导神经干细胞的增殖,抑制细胞凋亡。在血清中MK的检测方面,我们发现正常60岁以上老年体检人群的血清中未检出MK;MCI组部分患者的血清中出现了MK,而所有AD组患者血清中均检出MK,且血清MK含量与病程严重程度成正相关。结论综合以上研究,MK在神经干细胞的增殖过程中起到了关键的促进作用,激活其受体PTPζ,并刺激Akt增殖信号通路,诱导神经干细胞的增殖并抑制细胞凋亡。此外,MK在AD及MCI的诊断及评估病情方面具有一定的临床应用价值,可能是AD早期阶段的有效血清标志物,为阿尔茨海默病的早期筛查和治疗提供了新的科学思路。

关键词：神经干细胞中期因子阿尔茨海默病血清标志物

中期因子和微血管密度在涎腺腺样囊性癌组织中的表达

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华西口腔医学杂志 2016年第2期34卷 189-193页

作者：陈俊李姬梅李伟胡红梅井冈山大学附属医院口腔科吉安343000 江西省吉水县人民医院妇产科吉水331600 井冈山大学医学院解剖学与组织胚胎学教研室吉安343000

目的探讨中期因子(MK)、微血管密度(MVD)在涎腺腺样囊性癌(SACC)组织中的表达和意义,以及两者之间表达的相关性。方法采用免疫组织化学方法(SP法)检测60例SACC组织及26例正常涎腺组织中MK、MVD的表达状况及两者之间的相关性。结果 MK在S... 详细信息

目的探讨中期因子(MK)、微血管密度(MVD)在涎腺腺样囊性癌(SACC)组织中的表达和意义,以及两者之间表达的相关性。方法采用免疫组织化学方法(SP法)检测60例SACC组织及26例正常涎腺组织中MK、MVD的表达状况及两者之间的相关性。结果 MK在SACC组织中高表达,阳性表达率为70.0%(42/60),正常组织中未见MK表达,二者间差异有统计学意义(P0.05);与肿瘤的大小、淋巴结转移、TNM分期有关(P<0.05)。MK和MVD在SACC中的表达具有正相关性(r=0.560,P<0.05)。结论 MK蛋白的表达、MVD计数的增加与SACC的发生有关,可能是SACC早期诊断指标之一。

关键词：涎腺腺样囊性癌中期因子微血管密度免疫组织化学涎腺

血清中期因子、胸苷激酶1、异常凝血酶原及甲胎蛋白对原发性肝癌的诊断价值的研究

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血清中期因子、胸苷激酶1、异常凝血酶原及甲胎蛋白对原发性肝癌...

作者：潘岚月华中科技大学

学位级别：硕士

目的:1.本研究第一部分通过对血清中期因子(Midkine,MDK)、胸苷激酶1(Thymidine kinase 1,TK-1)、异常凝血酶原(Des-gamma carboxy prothrombin,DCP)及甲胎蛋白(α-fetoprotein,AFP)四种肿瘤标志物对肝癌的诊断价值比较,初步筛选诊断效能最高的肝脏肿瘤标志物。2.肝癌以外其他疾病所致的异常凝血酶原升高常干扰临床诊断,目前针对异常凝血酶原升高的疾病分布相关真实世界研究尚比较少。各权威指南尚未推荐异常凝血酶原用于鉴别良恶性肝病的最佳临床界值。此外异常凝血酶原在慢性肝病中升高的临床意义尚不清楚。本研究第二部分旨在通过真实世界研究,探索导致异常凝血酶原升高的疾病以及其对肝癌的诊断价值和慢性肝病预后的预测价值。方法:第一部分连续收集2019年03月至2021年06月华中科技大学同济医学院附属同济医院住院患者临床资料和血液标本。经过严格筛选纳入122例患者并分为原发性肝癌初治组和慢性肝病组(包括肝硬化和慢性肝炎)。通过双抗体夹心酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定患者血清中MDK、TK-1的表达水平。DCP及AFP表达水平自临床资料中获取。比较MDK、TK-1、DCP、AFP在肝癌诊断和预后方面的应用价值。第二部分回顾性收集2019年6月至2019年12月于华中科技大学同济医学院附属同济医院进行DCP水平检测的住院患者资料,筛选出DCP水平升高的患者(>40 m AU/ml),对1125例DCP水平升高的患者资料进行进一步筛选,最终纳入569例。统计分析纳入患者的病因及各病种血清DCP水平表达差异,利用ROC曲线评估DCP用于诊断肝癌的效能和最佳临床界值。结果:第一部分122例患者中原发性肝癌初治患者46例,肝硬化患者45例,慢性肝炎31例。肝癌初治患者与慢性肝病患者相比,DCP、AFP、TK-1水平升高,差异有统计学意义。两组血清MDK水平差异无统计学意义。TK-1、DCP、AFP三个指标在不同肿瘤大小、肿瘤数目、有无血管侵犯、肝硬化、肝功能状态以及肿瘤临床分期的亚组中,表达水平差异无统计学意义。不同大小的肿瘤MDK水平具有显著差异,但MDK水平和肿瘤大小无正线性相关关系。治疗前MDK、TK-1、DCP、AFP水平和治疗效果无明显相关性。MDK、TK-1、DCP、AFP用于鉴别肝癌和所有慢性肝病的曲线下面积(Area under curve,AUC)分别为0.59,0.64,0.87,0.63;MDK、TK-1、DCP、AFP四个指标鉴别早期肝癌和肝硬化的AUC分别为0.62,0.68,0.88,0.74。四个指标中DCP对肝癌具有较高的诊断价值。第二部分1.569例患者中,可出现DCP水平升高的疾病有肝脏肿瘤(n=315)、非肝脏肿瘤的其他肿瘤(n=19)、肝硬化(n=100)、各种病因所致肝炎(n=81)、胆石症(n=23)、肝脓肿及脓毒血症等感染性疾病(n=19)、良性占位(n=7)以及烧伤、创伤及血液系统疾病等(n=5)。肝细胞癌组DCP水平显著高于其他非肝细胞癌组(Mann-Whitney U检验,P<0.01),中位水平为903.0(Q1-Q3:170.0-6265.0)。其他病种之间,DCP水平差异无统计学意义。2.DCP水平与肝细胞癌患者肿瘤大小(Spearman r=0.3805,P<0.0001)以及BCLC分期相关(Spearman r=0.3889,P<0.0001)。但DCP水平在不同肿瘤数、肝硬度状态和child-pugh分级的肝细胞癌患者间差异无统计学意义(P=0.3923、0.5103、0.3984)。HBs Ag与HBs Ag患者DCP水平在肝细胞癌组无明显差异(Mann-Whitney U检验,双尾P=0.6626),在肝硬化组亦无显著差异(Mann-Whitney U检验,双尾P=0.1879)。3.DCP和AFP用于鉴别肝细胞癌及慢性肝病的AUC分别为0.7971和0.7024,DCP诊断效能优于AFP(De Long检验,P=0.0084)。在约登指数最大处,DCP水平为256.5 m AU/ml时,敏感性和特异性分别为68.59%和79.17%。AFP联合DCP诊断时,AUC达到0.8218,但与DCP单独诊断的ROC曲线比较,两者曲线无显著差异(De Long检验,P=0.1579)。对早期肝癌和肝硬化组绘制ROC曲线,曲线示DCP单独用于诊断、AFP单独用于诊断、AFP和DCP联合诊断的AUC分别为0.6368、0.6775、0.6743。4.145例慢性肝病患者的单因素分析显示,DCP水平和ALT/AST比值(Spearman r=-0.4032,双尾P<0.0001)、child-pugh分级(Spearman r=0.2237,双尾P=0

关键词：原发性肝癌肿瘤标志物异常凝血酶原甲胎蛋白中期因子胸苷激酶1

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中期因子在炎症发生中的作用研究进展

中华内科杂志 2018年第4期57卷 306-308页

作者：常炜徐静媛杨毅东南大学附属中大医院重症医学科南京210009

炎症是组织细胞对病原体、损伤细胞及刺激物等多种有害刺激的一组复杂的生物反应，多种细胞及细胞因子参与炎症反应的各个阶段，目的在于清除病原微生物及坏死组织并实现损伤组织的修复。

关键词：炎症反应中期因子病原微生物组织细胞生物反应有害刺激损伤细胞细胞因子

中期因子Midkine水平与儿童过敏性紫癜关系的Meta分析

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新疆医学 2023年第4期53卷 407-410页

作者：何凤霞高烁烁广州中医药大学第一附属医院药学部广州510405 广州中医药大学第一附属医院儿科广州510405

目的评价中期因子(Midkine)水平与儿童过敏性紫癜(Henoch Schonlein purpura,HSP)的关系。方法检索CNKI、CBM、CAJD、维普VIP、WangFang Data、PubMed、EMBase、Cochrane等数据库(检索时限截止至2021年10月),选择符合标准的临床试验,用Newcastle-Ottawa scale法对纳入研究的文献进行评估,用RevMan5.4软件进行Meta分析。结果共纳入6篇文献,分3个亚组进行Meta分析,结果显示儿童血清中的MK水平,过敏性紫癜组(HSP)明显高于健康对照组(HC)、过敏性紫癜合并肾损害组(HSPN)明显高于健康对照组(HC)、HSPN组明显高于HSP组,且差异均有统计学意义(P <0.0001)。结论 HSP患儿及HSPN患儿的MK水平显著高于健康儿童,且HSPN患儿的MK水平显著高于HSP患儿,提示可以通过血清MK水平的变化,诊断儿童过敏性紫癜并预测患儿是否出现肾损害。但由于本研究纳入文献量有限,质量一般,因此仍有待开展多样本、多区域联合的临床试验进一步验证。

关键词：过敏性紫癜中期因子 Meta分析

中期因子诱导肝癌细胞Hep3B抵抗失巢凋亡

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中国肿瘤生物治疗杂志 2013年第5期20卷 565-568页

作者：赵琳琳翟蓓蓓孙斌陈磊钱海华施乐华殷正丰苏州大学医学部临床医学院肿瘤学系江苏苏州215006 第二军医大学东方肝胆外科医院分子肿瘤研究室上海200438 第二军医大学东方肝胆外科医院肝外四科上海200438

目的:探讨肝素结合分子中期因子(midkine,MK)对肝癌细胞Hep3B抵抗失巢凋亡的影响。方法:采用悬浮培养法建立人肝癌来源细胞系Hep3B失巢凋亡模型,以不同质量浓度(10、50、100 ng/ml)MK或PBS(对照组)处理失巢培养的肝癌细胞Hep3B,采用流... 详细信息

目的:探讨肝素结合分子中期因子(midkine,MK)对肝癌细胞Hep3B抵抗失巢凋亡的影响。方法:采用悬浮培养法建立人肝癌来源细胞系Hep3B失巢凋亡模型,以不同质量浓度(10、50、100 ng/ml)MK或PBS(对照组)处理失巢培养的肝癌细胞Hep3B,采用流式细胞术检测Hep3B细胞的凋亡,采用Western blotting检测凋亡相关蛋白Bcl-2和caspase-3的表达。结果:随着悬浮培养时间的延长,肝癌细胞Hep3B失巢凋亡率逐渐升高,培养72 h后悬浮培养的Hep3B细胞凋亡率显著高于贴壁培养的Hep3B细胞凋亡率[(38.76±4.23)%vs(6.76±1.43)%,P<0.01]。不同质量浓度MK处理24 h后,悬浮培养Hep3B细胞的凋亡率均明显低于对照组,且与MK的浓度呈负相关关系(r=0.951,P=0.049);同时,MK处理后Hep3B细胞内抗凋亡蛋白Bcl-2表达明显增加,而促凋亡蛋白caspase-3则明显下降。结论:MK可能通过上调Bcl-2蛋白表达和下调caspase-3蛋白的表达来提高肝癌细胞Hep3B在失巢状态下抵抗凋亡的能力。

关键词：肝癌 Hep3B细胞中期因子失巢凋亡凋亡 Bcl-2 caspase-3

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中期因子在胃癌中的表达与细胞增殖的关系

中国肿瘤临床 2010年第14期37卷 785-788页

作者：徐莹莹金锋王振宁曲秀娟徐玲曲晶磊中国医科大学附属第一医院肿瘤外科沈阳市110001 中国医科大学附属第一医院肿瘤内科沈阳市110001

目的:研究中期因子(midkine,MK)在人胃癌组织中的表达情况,探讨其与胃癌细胞增殖的关系及分子机制。方法:收集70例临床胃癌组织标本及其配对癌旁正常胃黏膜组织标本,应用实时定量PCR技术检测中期因子mRNA表达水平。构建中期因子逆转录... 详细信息

目的:研究中期因子(midkine,MK)在人胃癌组织中的表达情况,探讨其与胃癌细胞增殖的关系及分子机制。方法:收集70例临床胃癌组织标本及其配对癌旁正常胃黏膜组织标本,应用实时定量PCR技术检测中期因子mRNA表达水平。构建中期因子逆转录病毒载体,经DNA测序正确后,应用脂质体转染法将病毒载体转染GP293病毒包装细胞,48h后收集病毒上清。分别用不同浓度的病毒上清感染人胃癌SGC7901细胞,应用MTT法检测细胞增殖速率。应用免疫印迹技术检测中期因子影响胃癌细胞增殖的分子机制。结果:有65.7%(46/70)胃癌组织中中期因子表达量为癌旁正常胃黏膜组织2倍以上,而仅有11.4%(8/70)癌旁正常胃黏膜组织中中期因子表达量为胃癌组织2倍以上,二者统计学有显著性差异(P中期因子蛋白表达水平逐渐增加,同时SGC7901细胞增殖速率逐渐加快。随着MK蛋白表达水平的增加,泛素连接酶CBL、CBL-b蛋白表达水平下降,磷酸化Akt蛋白表达水平增加。结论:中期因子在胃癌组织中呈高表达;应用其逆转录病毒感染SGC7901细胞可显著促进胃癌细胞增殖;中期因子以剂量依赖性方式下调泛素连接酶CBL、CBL-b表达,同时伴有Akt活性的上调,推测中期因子通过下调CBL、CBL-b蛋白表达,解除其对PI3激酶的泛素化降解作用,从而激活PI3K/Akt信号通路,促进肿瘤细胞的生长。

关键词：中期因子胃癌增殖泛素连接酶磷酸化Akt

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过敏性紫癜患儿血清中期因子变化的临床意义

中国实验血液学杂志 2017年第1期25卷 181-185页

作者：李沫民柳旎张淼薛海蓉南阳市中心医院儿科河南南阳473000

目的:探讨过敏性紫癜患儿血清中期因子(midkine,MK)变化的临床意义。方法:以本院2013年3月至2016年3月收治的106例过敏性紫癜患儿(henoch-sch(o|¨)nlein purpura,HSP)为研究对象,同期行健康体检的80例志愿者为对照组。酶联免疫吸附试验... 详细信息

目的:探讨过敏性紫癜患儿血清中期因子(midkine,MK)变化的临床意义。方法:以本院2013年3月至2016年3月收治的106例过敏性紫癜患儿(henoch-sch(o|¨)nlein purpura,HSP)为研究对象,同期行健康体检的80例志愿者为对照组。酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定外周血MK、白介素2(IL-2)、IL-4、IL-6、IL-10、肿瘤坏死因子(TNF)、γ干扰素(IFN-γ)和IL-17。分析患儿生化指标包括白细胞计数(WBC)、血小板(Plt)、C反应蛋白(CRP)、血沉(ESR)、D-二聚体(D-Dimer)、免疫球蛋白A(IgA)、IgE、IgG、IgM等临床资料。结果:106例患儿中42例患者合并肾损害(孤立性血尿4例、孤立性蛋白尿17例、血尿合并蛋白尿21例)。过敏性紫癜患儿和对照者MK水平分别为291.70(248.50-396.41)pg/ml和217.30(198.98-243.65)Pg/ml(P因子差异均无统计学意义。Pearson相关分析结果显示,MK与IL4、IL-6、IL-17、IgA和IgE均呈正相关(P<0.05)。ROC曲线分析显示,MK的AUC为0.902,95%,CI为0.841-0.963(P<0.001),阈值为295.50 pg/ml。MK预测过敏性紫癜肾炎的敏感性和特异性分别为80.60%和88.30%。结论:血浆MK在过敏性紫癜和过敏性紫癜伴肾炎的发生发展中起着重要作用。血浆MK可作为旱期诊断HSP和预测肾损害的有效指标。

关键词：过敏性紫癜儿童中期因子临床意义