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基于核糖体基因分析的中华血吸虫分子种系发生研究

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2001年第4期19卷 201-204页

作者：张广军邱持平邱东川常正山秦志辉夏明仪中国预防医学科学院寄生虫病研究所世界卫生组织疟疾血吸虫病和丝虫病合作中心卫生部病原与媒介生物学重点实验室上海200025 四川省寄生虫病研究所成都610041 淮南矿务局卫生处淮南232001

目的　测定中华血吸虫细胞核核糖体基因 r DNA- ITS2和 L SU序列 ,并根据这些序列 ,构建基因树 ,探讨中华血吸虫在裂体属内的系统发生位置。　方法　以 GNT- K法抽提基因组 DNA后 ,用特异引物 ,PCR扩增目的基因。扩增后的 PCR产物经纯... 详细信息

目的　测定中华血吸虫细胞核核糖体基因 r DNA- ITS2和 L SU序列 ,并根据这些序列 ,构建基因树 ,探讨中华血吸虫在裂体属内的系统发生位置。　方法　以 GNT- K法抽提基因组 DNA后 ,用特异引物 ,PCR扩增目的基因。扩增后的 PCR产物经纯化后克隆于载体质粒 p T- adv中再次扩增后 ,提取并纯化质粒 DNA,并以此作模板 ,使用通用测序引物 M13 (F/ R)于 L icor测序仪上进行测序。检索 Gen Bank,查找曼氏血吸虫相关血吸虫两基因序列 ,将有关血吸虫同一基因排序、比较分析后 ,以毛毕吸虫和杜氏小裂体吸虫作为外群 ,使用 PHYL IP和 MEGA以邻接法和最大简约法绘制系统发生树。　结果　克隆并测定了中华血吸虫的 r DNA - ITS2和 L SU ,毛毕吸虫的r DNA- ITS2序列 ,以及根据这些序列构建系统发生树。　结论　中华血吸虫 ITS2和 L SU基因的系统发生树结果一致 ,均提示中华血吸虫归属于亚洲血吸虫种群。

关键词：中华血吸虫毛毕吸虫内部转录间隔子核糖体大亚基基因系统发生分析

基于线粒体基因分析的中华血吸虫分子种系发生研究

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2002年第1期20卷 10-13页

作者：张广军邱持平邱东川夏明仪中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所四川省寄生虫病研究所成都610041

目的　测定中华血吸虫线粒体细胞色素 C氧化酶亚基 1(CO1)和 NADH脱氢酶亚基 1(ND1)基因序列 ,并根据这些序列构建分子系统发生树 ,探讨中华血吸虫在裂体属内的系统发生位置。　方法　以 GNT- K法抽提虫体基因组 DNA,用特异引物 PCR扩... 详细信息

目的　测定中华血吸虫线粒体细胞色素 C氧化酶亚基 1(CO1)和 NADH脱氢酶亚基 1(ND1)基因序列 ,并根据这些序列构建分子系统发生树 ,探讨中华血吸虫在裂体属内的系统发生位置。　方法　以 GNT- K法抽提虫体基因组 DNA,用特异引物 PCR扩增目的基因。PCR扩增产物经纯化后克隆于质粒载体 ,以纯化后的阳性质粒 DNA作为模板 ,M13(F/ R)为引物于 L icor测序仪测序。检索 Gen Bank,查找曼氏血吸虫等相关血吸虫两线粒体基因序列 ,作基因排序及比较分析后 ,用 PHYL IP和 MEGA以邻接法和最大简约法绘制系统发生树。　结果　克隆了中华血吸虫的 CO1和 ND1基因片段 ,并测定了两基因片段的核苷酸序列 ,根据这些序列构建了系统发生树。　结论　中华血吸虫 CO1和ND1基因的系统发生树结果一致。

关键词：中华血吸虫 CO1 ND1 系统发生分析线粒体基因分析

日本血吸虫和中华血吸虫尾蚴外部形态及运动方式比较

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中国血吸虫病防治杂志 2024年第4期36卷 384-387页

作者：宋静张宗亚沈美芬周济华李春英杨早改董毅杜春红云南省地方病防治所、云南省自然疫源性疾病防控技术重点实验室云南大理671000 昆明医科大学

目的了解日本血吸虫和中华血吸虫尾蚴外部形态特征与运动方式差异。方法对日本血吸虫和中华血吸虫尾蚴分别进行热固定,随机选取形态舒展较好的两种尾蚴各50条,测量其体长、体宽、尾干长、尾叉长,比较两种血吸虫尾蚴外部形态特征。对日... 详细信息

目的了解日本血吸虫和中华血吸虫尾蚴外部形态特征与运动方式差异。方法对日本血吸虫和中华血吸虫尾蚴分别进行热固定,随机选取形态舒展较好的两种尾蚴各50条,测量其体长、体宽、尾干长、尾叉长,比较两种血吸虫尾蚴外部形态特征。对日本血吸虫感染钉螺和中华血吸虫感染拟钉螺压碎镜检,比较两种血吸虫尾蚴的运动方式。结果日本血吸虫尾蚴平均体长、体宽、尾干长、尾叉长分别为(0.16±0.01)、(0.05±0.01)、(0.14±0.01)mm和(0.06±0.01)mm,中华血吸虫尾蚴平均体长、体宽、尾干长、尾叉长分别为(0.13±0.01)、(0.05±0.01)、(0.13±0.01)mm和(0.06±0.01)mm,两种血吸虫尾蚴体长(t=14.583,P0.05)、尾叉长(t=-0.454,P>0.05)差异均无统计学意义。镜下观察发现,两种血吸虫尾蚴运动方式均表现为尾部左右摆动,无明显差异。结论中华血吸虫与日本血吸虫尾蚴外部形态及运动方式相似度较高。

关键词：日本血吸虫中华血吸虫尾蚴钉螺拟钉螺外部形态运动方式

中华血吸虫和土耳其斯坦东毕吸虫结节变种扫描电镜观察及与其它血吸虫的比较

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中国兽医寄生虫病 2001年第3期9卷 1-5,F002,F003页

作者：张广军邱东川王春仁夏明仪中国预防医学科学院寄生虫病研究所上海200025 四川省寄生虫病研究所成都610041 黑龙江省兽医科学研究所富裕161200

中华血吸虫和土耳其斯坦东毕吸虫结节变种分别收集于四川和黑龙江省 ,按常规电镜方法处理后 ,以日立 JSM- 80 0扫描电镜观察并摄片。观察显示中华血吸虫体表无结节 ,其雄性成虫体表结构近似于日本血吸虫等亚洲血吸虫 ,与文献描述的采集... 详细信息

中华血吸虫和土耳其斯坦东毕吸虫结节变种分别收集于四川和黑龙江省 ,按常规电镜方法处理后 ,以日立 JSM- 80 0扫描电镜观察并摄片。观察显示中华血吸虫体表无结节 ,其雄性成虫体表结构近似于日本血吸虫等亚洲血吸虫 ,与文献描述的采集于泰国的中华血吸虫也无明显差异。观察同时表明土耳其斯坦东毕吸虫结节变种与程氏东毕吸虫基本无差别 ,二者的感觉球种类与土耳其斯坦东毕吸虫一致 ,但数目较后者为多。同时结合已发表的有关裂体属血吸虫 SEM研究结果 ,对裂体属血吸虫 SEM超微结构特点列表进行了比较。按照 Rollinson的分组方法 ,中华血吸虫属于无结节组 ,而东毕吸虫属于不带棘的有结节组。

关键词：中华血吸虫土耳其斯坦东毕吸虫节变种 SEM 超微结构

以中华血吸虫为模型建立日本血吸虫病原学检测参考品的实验研究

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以中华血吸虫为模型建立日本血吸虫病原学检测参考品的实验研究

作者：宋静大理大学

学位级别：硕士

目的:针对中华血吸虫和日本血吸虫的多方面相似性,且中华血吸虫样本制备获取便捷,安全不感染人的特点,拟探索用中华血吸虫为模型制备日本血吸虫检测的相关阳性参考和质控品的可行性,为有效便捷地获取低生物安全风险的日本血吸虫检测阳... 详细信息

目的:针对中华血吸虫和日本血吸虫的多方面相似性,且中华血吸虫样本制备获取便捷,安全不感染人的特点,拟探索用中华血吸虫为模型制备日本血吸虫检测的相关阳性参考和质控品的可行性,为有效便捷地获取低生物安全风险的日本血吸虫检测阳性参考品,并规范应用于实验室检测提供创新性思路并打下前期基础。方法:实验室成功完成中华血吸虫和日本血吸虫动物感染实验,获取研究所需要的样本材料。1.压碎镜检法中感染性拟钉螺替代感染性钉螺进行观察的阳性参考品的可行性:通过设置感染日本血吸虫的钉螺、感染中华血吸虫的拟钉螺样本,按照双盲原则,用压碎镜检法对30名有5年以上血吸虫病检测经验的检测人员进行盲测;分别收集日本血吸虫和中华血吸虫尾蚴,热固定后利用显微成像系统对舒展形态较好的尾蚴进行拍照,测量其体长、体宽、尾长、尾叉长4个指标,利用统计软件SPSS对4组数据进行两独立样本T检验分析。2.中华血吸虫虫卵替代日本血吸虫虫卵进行孵化的阳性参考品的可行性:对感染中华血吸虫的野鼠肠内容物和实验室感染中华血吸虫的小鼠粪便进行尼龙绢袋集卵孵化法,将日本血吸虫感染小鼠肝脏研磨液做为尼龙绢袋集卵孵化法的平行对照;设置不同的虫卵浓度、p H值、温度等孵化条件对感染中华血吸虫的野鼠肝研磨液和感染日本血吸虫的小鼠研磨液开展毛蚴孵化对比实验。3.感染中华血吸虫小鼠血清替代感染日本血吸虫小鼠血清间凝实验质控品的可行性:分别采集感染日本血吸虫、中华血吸虫的小鼠血清开展间接血球凝集实验检测日本血吸虫抗体,对可行性进行评价。结果:1.压碎镜检盲测实验:30名血吸虫病检测人员对9个样本的阴性样本均判断正确,3个感染日本血吸虫的钉螺和3个感染中华血吸虫的拟钉螺均被判定为日本血吸虫感染性钉螺。2.尾蚴外部形态学指标测量:两种尾蚴的4个指标的两独立样本T检验结果为:T=0.000,T=0.372,T=0.000,T=0.651,可认为两种尾蚴的体长、尾干长的差值均有统计学差异,而体宽、尾叉长的差值均无统计学意义。3.毛蚴孵化结果:在永胜县捕获鼠类111只,共有15只鼠类肝脏结节组织压片可见中华血吸虫虫卵,其中尼龙绢集卵孵化法有2只鼠类孵化出毛蚴,加藤镜检法有5只鼠类检出中华血吸虫虫卵。平行对照的日本血吸虫感染小鼠的肝组织研磨液孵化出毛蚴。两种毛蚴的运动方式相似;7只感染中华血吸虫小鼠肝脏结节压片均检出虫卵,收集粪便用尼龙绢集卵孵化法均未孵化出毛蚴,其中2只小鼠粪便沉渣涂片均发现虫卵,平行对照的日本血吸虫感染小鼠的粪便孵化出毛蚴;毛蚴孵化对比实验:日本血吸虫虫卵均可见毛蚴孵出、中华血吸虫虫卵孵化均未见毛蚴孵出。4.血清抗体交叉实验:日本血吸虫小鼠血清抗体滴度为1:10～1:10240;中华血吸虫小鼠血清抗体滴度为阴性～1:10。结论:本次研究成功完成了本地实验室中华血吸虫和日本血吸虫动物感染实验,为获取便捷及低生物安全风险的日本血吸虫检测阳性参考品提供了良好思路,为替代实验方法的规范建立及验证打下基础。特别是用中华血吸虫感染性拟钉螺替代日本血吸虫感染性钉螺作压碎法镜检的阳性参考及质控品的可行性较高,中华血吸虫虫卵、中华血吸虫感染动物阳性血清做为日本血吸虫虫卵孵化、血清抗体检测的参考品及质控品的可行性仍需进一步研究其替代条件。

关键词：日本血吸虫中华血吸虫实验室检测阳性参考品质控品

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中华血吸虫在广西那坡县的发现

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2003年第1期21卷 59-59页

作者：胡文庆刘登宇周世祜广西医科大学寄生虫学教研室南宁530021

1989年12月

关键词：中华血吸虫广西那坡县

云南省血吸虫病流行区野鼠感染中华血吸虫状况调查

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热带医学杂志 2024年第12期 1777-1780+1788页

作者：孙佳昱王丽芳张云张宗亚周济华宋静袁敏维杜春红云南省地方病防治所云南省自然疫源性疾病防控技术重点实验室内蒙古大学生命科学学院

目的调查云南省日本血吸虫病流行区野鼠感染中华血吸虫状况，为进一步开展相关研究奠定基础。方法根据云南省日本血吸虫病流行情况，2022-2023年以7个历史疫情较重的县（市）(丽江市的永胜县、大理州的洱源县、南涧县、鹤庆县、巍山... 详细信息

目的调查云南省日本血吸虫病流行区野鼠感染中华血吸虫状况，为进一步开展相关研究奠定基础。方法根据云南省日本血吸虫病流行情况，2022-2023年以7个历史疫情较重的县（市）(丽江市的永胜县、大理州的洱源县、南涧县、鹤庆县、巍山县、大理市、弥渡县)为调查范围，采用夹夜法捕获野鼠，取肝组织压片镜检、肠内粪便作Kato-Katz法和毛蚴孵化法病原学检测，其中一种方法检出阳性即判定为感染。结果共投放了8 062个鼠夹，成功回收7 893个，捕获1 025只野鼠，其中1 006只样本有效。捕获野鼠中涉及3目5科10属20种，以齐氏姬鼠332只（33.00%）、灰麝鼩191只（18.99%）、大绒鼠98只（9.74%）居多。野鼠密度平均为12.99%（1 025/7 893），各县间野鼠密度比较差异有统计学意义（χ2=168.204,P中华血吸虫，感染率为4.87%；其中永胜县、弥渡县野鼠中华血吸虫感染率最高，分别为14.41%、13.87%，各县间感染率比较差异有统计学意义（χ2=62.728,P吸虫和日本血吸虫，检出野鼠数分别为34、16、9、8、7、1、5只，感染率分别为3.38%、1.59%、0.89%、0.80%、0.70%、0.10%、0.50%；并存在混合感染（1.19%）。结论日本血吸虫病流行区广泛存在野鼠感染中华血吸虫情况，且野鼠感染的寄生虫种类多。

关键词：中华血吸虫野鼠血吸虫病云南