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中华实验外科杂志 2015年第12期32卷 3207-3208页

作者：郑健斌王戈陶建平张剑珲广州市妇女儿童医疗中心儿科重症监护室 510623 广东省武警总医院心脏外科第四军医大学西京医院心血管外科

本研究旨在观察丙酮酸乙酯（EP）对HT22神经元细胞株缺氧复氧（H／R）损伤的影响，探讨内质网应激（ERS）在其中的作用。

关键词：内质网应激反应丙酮酸乙酯缺氧损伤细胞株神经元介导拮抗缺氧复氧

丙酮酸乙酯通过抑制内质网应激反应拮抗乳鼠心肌细胞缺氧复氧损伤

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中华实验外科杂志 2015年第5期32卷 1097-1100页

作者：王戈陈浩易蔚杨阳李悦蒋帅易定华第四军医大学西京医院心血管外科西安710032 第四军医大学生物医学工程系第四军医大学航空航天医学系

目的观察丙酮酸乙酯（EP）对SD大鼠乳鼠心肌细胞缺氧复氧（SIR）损伤的影响,并探讨内质网应激（ERS）在这一过程中的作用.方法乳鼠心肌细胞经EP（5或10 mmol/L）处理2h后,接受模拟缺氧复氧（SIR）损伤（缺氧2h,复氧4h）,噻唑蓝比色（... 详细信息

目的观察丙酮酸乙酯（EP）对SD大鼠乳鼠心肌细胞缺氧复氧（SIR）损伤的影响,并探讨内质网应激（ERS）在这一过程中的作用.方法乳鼠心肌细胞经EP（5或10 mmol/L）处理2h后,接受模拟缺氧复氧（SIR）损伤（缺氧2h,复氧4h）,噻唑蓝比色（MTT）法检测细胞活力,专用试剂盒检测细胞培养液中丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）含量,Western blot检测ERS相关蛋白葡萄糖调节蛋白78（GRP78）、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白（CHOP）表达变化.随后,EP处理时加入ERS激动剂毒胡萝卜素（THA）,观察其对EP抗心肌细胞SIR损伤的影响.结果 5、10 mmol/L EP均可以显著升高心肌细胞SIR后细胞活力（分别增加到0.424±0.016和0.517±0.020）,降低培养液中MDA水平[分别降低到（16.17±1.75）和（11.45±1.20） μmol/L],但SOD水平升高[分别升高到（58.61 ±4.70）和（72.60 ±4.35） U/L,与SIR组比较,P＜0.05].SIR后细胞中GRP78和CHOP表达水平升高（与对照组比较,P＜0.05）,EP还可以逆转SIR上调的GRP78和CHOP表达水平（与SIR组比较,P＜0.05）.进一步研究结果显示,ERS激动剂THA可以逆转EP对心肌细胞的保护作用,降低心肌细胞活力,增加GRP78和CHOP表达水平（与EP＋ SIR组比较,P＜0.05）.结论 EP可显著减轻乳鼠心肌细胞的SIR损伤,其机制与抑制异常激活的ERS反应有关.

关键词：丙酮酸乙酯心肌细胞缺氧复氧损伤内质网应激

丙酮酸乙酯对全脑缺血再灌注损伤大鼠血清S100B蛋白的影响

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广东医学 2011年第2期32卷 161-163页

作者：彭镌宝倪玉霞徐卫财江朝秀刘敬臣广西医科大学第一附属医院麻醉科南宁530021

目的探讨丙酮酸乙酯对全脑缺血再灌注损伤大鼠血清S100B蛋白表达的影响,为进一步的研究提供依据。方法采用二血管阻断加低血压法制作大鼠全脑缺血再灌注模型。SD大鼠72只,随机分成假手术组(F组)、缺血再灌注组(IR组)和丙酮酸乙酯处理组... 详细信息

目的探讨丙酮酸乙酯对全脑缺血再灌注损伤大鼠血清S100B蛋白表达的影响,为进一步的研究提供依据。方法采用二血管阻断加低血压法制作大鼠全脑缺血再灌注模型。SD大鼠72只,随机分成假手术组(F组)、缺血再灌注组(IR组)和丙酮酸乙酯处理组(EP组),每组24只;各组再分成再灌注1、12、24 h 3个亚组,EP组于恢复血流即刻腹腔注射丙酮酸乙酯40 mg/kg,然后每隔6 h注射1次,其余两组给予等量生理盐水;各亚组均在相应时点取股动脉血,酶联免疫法(ELISA)检测血清S100B蛋白水平,然后断头取脑,取海马区制作切片,在光镜下观察损伤细胞。结果 F组3个亚组的血清S100B蛋白比较差异无统计学意义(P>0.05);IR组、EP组两组组内比较,随着再灌注时间的延长,S100B蛋白逐渐升高(P丙酮酸乙酯对大鼠全脑缺血再灌注损伤有保护作用。

关键词：丙酮酸乙酯全脑缺血再灌注损伤 S100B

丙酮酸乙酯对脓毒症大鼠血清HMGB1表达的影响及其作用的研究

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中国急救医学 2009年第5期29卷 442-445,482页

作者：马艳梅霍正禄梅冰詹剑勇王美堂张玲何建解放军第二军医大学附属长海医院急诊科上海200433

目的观察丙酮酸乙酯（EP）对脓毒症大鼠血清高迁移率族蛋白1表达水平的影响，及其对动物多器官功能的干预作用。方法采用雄性Wistar大鼠，以盲肠结扎穿孔法（CLP）建立脓毒症大鼠模型。80只大鼠随机分为假手术组（n=20）、脓毒症组（n=2... 详细信息

目的观察丙酮酸乙酯（EP）对脓毒症大鼠血清高迁移率族蛋白1表达水平的影响，及其对动物多器官功能的干预作用。方法采用雄性Wistar大鼠，以盲肠结扎穿孔法（CLP）建立脓毒症大鼠模型。80只大鼠随机分为假手术组（n=20）、脓毒症组（n=20）、EP早期治疗组（n=20）和EP晚期治疗组（n=20）。各组分别于模型建立后24h和48h颈动脉置管留取标本后活杀，检测血清高迁移率族蛋白1（HMGB1）水平以及24h丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、肌酸激酶（CK）及动脉氧分压（PaO2）等各器官功能指标的变化。结果脓毒症组、EP治疗组各时相点血清HMGB1水平均较假手术组高（P〈0．01）；EP早期组和EP晚期组HMGBl均较同时相点脓毒症组显著降低（P〈0．01）。与脓毒症组相比，EP治疗组血清ALT、AST、BUN、Cr、CK、PaO，水平均明显改善（P〈0．01）；脓毒症组24h血清HMGB1与血清ALT、AST、BUN、Cr、CK、PaO2水平的变化之间存在显著相关性（P〈0．01）。结论EP对脓毒症大鼠的重要器官功能具有保护作用，其机制可能与EP抑制HMGB1的释放有关。

关键词：丙酮酸乙酯脓毒症器官功能高迁移率族蛋白-1

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丙酮酸乙酯对裸鼠胰腺癌生长的抑制作用

丙酮酸乙酯对裸鼠胰腺癌生长的抑制作用

作者：李倩倩山东大学

学位级别：硕士

背景：在世界上与癌症相关性的死亡原因中胰腺癌占第四位,且其预后很差。它的5年生存率仅在5%左右,且确诊后存活时间仅6个月。直到现在,胰腺癌的治疗方案仍停留在外科切除术上。但由于胰腺癌的侵袭性,大部分胰腺癌患者在确诊时已发生早... 详细信息

背景：在世界上与癌症相关性的死亡原因中胰腺癌占第四位,且其预后很差。它的5年生存率仅在5%左右,且确诊后存活时间仅6个月。直到现在,胰腺癌的治疗方案仍停留在外科切除术上。但由于胰腺癌的侵袭性,大部分胰腺癌患者在确诊时已发生早期转移,仅有少数患者具备手术条件。即使在有条件进行手术治疗的患者中,由于早期复发及转移的发生,该类患者的长期预后结果并不令人满意。尽管在胰腺癌的生物学认知方面取得很大进展,但涉及到早期转移、复发以及术后恢复等方面的分子及细胞机制仍知之甚少。在我国,随着人们生活水平的提高,胰腺癌发病率有逐年增高的趋势。近年来,大量研究发现,炎症在肿瘤形成、生长和转移中发挥重要作用,而免疫细胞如巨噬细胞、NK细胞、树突细胞和中性粒细胞则通过分泌大量细胞因子促进肿瘤生长和转移,这些细胞因子包括早期释放的因子如血清肿瘤坏死因子-a(TNF-α)、白细胞介素(ID-1β、IL-6和晚释放因子高迁移率族蛋白(HMGB)1。这些炎症因子不仅为肿瘤的生长提供了所需的微环境,且在诱发及促进肿瘤的发展及转移中发挥了重要的作用。丙酮酸乙酯(EP)是一种化工原料,大量研究发现,丙酮酸乙酯能够降低脓毒症及系统性炎症对小鼠的致死率,并且在休克、缺血-再灌注损伤及急性胰腺炎等动物模型中具备改善器官损伤及功能紊乱的作用。EP不仅在机体内外都可阻止NF-κB信号通道的激活亦可抑制炎症因子如TNF-α、IL-1β、IL-6、HMGB-1的释放。我们体外研究发现,EP通过抑制HMGB1的表达,进而抑制胰腺癌细胞增殖和诱导细胞凋亡,本研究在前期体外研究基础上,有理由推测EP在有机体内也可能通过抑制炎症因子的释放从而抑制肿瘤的生长。故构建异位移植胰腺癌动物模型,探索EP在体内对胰腺癌生长的抑制作用。目的：探索丙酮酸乙酯对裸鼠胰腺癌的生长抑制作用及其可能机制。方法：选用人胰腺癌细胞系SW1990构建裸鼠胰腺癌动物模型,不同剂量的丙酮酸乙酯(50mg/kg和100mg/kg)在裸鼠注射人胰腺癌细胞系SW1990后1小时开始应用(早期治疗组),腹腔注射,每日一次,连续14天;另组动物在细胞注射制模12天开始(晚期治疗组)给予丙酮酸乙酯(100mg/kg,,腹腔注射,每日一次,连续14天),肿瘤体积每周测量两次。细胞注射33天,处死动物,取出肿瘤称重,计算抑瘤率,ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6和高迁移率族蛋白(HMGB)1。结果：丙酮酸乙酯能明显抑制裸鼠胰腺癌生长,治疗组无论是在肿瘤体积和肿瘤重量上都有显著差异(P均丙酮酸乙酯(100mg/kg)抑瘤作用明显强于低剂量治疗组(50mg/kg)(P丙酮酸乙酯能明显抑制胰腺癌的生长,有望成为治疗胰腺癌有用的药物,其机制可能是抑制多种细胞因子的分泌。

关键词：胰腺癌丙酮酸乙酯细胞因子炎症

丙酮酸乙酯对大鼠全脑缺血再灌注损伤的影响及作用机制的实验研究

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丙酮酸乙酯对大鼠全脑缺血再灌注损伤的影响及作用机制的实验研究

作者：徐卫财广西医科大学

学位级别：硕士

第一部分丙酮酸乙酯对大鼠全脑缺血再灌注损伤海马区SOD、NO、iNOS和TNF-a、ICAM-1的影响目的探讨丙酮酸乙酯对大鼠全脑缺血再灌注损伤大脑海马区组织细胞因子SOD、NO、iNOS、TNF-a, ICAM-1表达的影响,为进一步的研究提供依据。方法本... 详细信息

第一部分丙酮酸乙酯对大鼠全脑缺血再灌注损伤海马区SOD、NO、iNOS和TNF-a、ICAM-1的影响目的探讨丙酮酸乙酯对大鼠全脑缺血再灌注损伤大脑海马区组织细胞因子SOD、NO、iNOS、TNF-a, ICAM-1表达的影响,为进一步的研究提供依据。方法本实验采用二血管阻断加低血压法制作大鼠全脑缺血再灌注模型。SD大鼠24只,随机被分成3组,每组8只：(1)假手术组(F组)：只分离股动脉和双侧颈总动脉,不降压,不夹闭双侧颈总动脉。(2)缺血再灌注组(IR组)：股动脉放血使血压降至基础血压的50-60%,夹闭双侧颈总动脉10min再开放。(3)丙酮酸乙酯处理组(EP组)：与IR组处理相同。EP组于恢复血流即刻腹腔注射丙酮酸乙酯40mg／kg,其余两组给予等量生理盐水,再灌注后6h断头取脑,测定海马区组织SOD、NO、iNOS、TNF-a、ICAM-1含量。同时,制作光镜标本,行海马CA1区形态学和病理组织学观察。结果IR组SOD、NO、iNOS. TNF-a ICAM-1的表达水平均高于F组,差异有统计学意义(P丙酮酸乙酯可能通过减轻氧化应激反应和炎症反应对大鼠全脑缺血再灌注细胞损伤起保护作用。第二部分丙酮酸乙酯对大鼠全脑缺血再灌注损伤细胞凋亡及Bax、Bcl-2表达的影响目的观察丙酮酸乙酯对大鼠全脑缺血再灌注损伤海马CA1区细胞凋亡及凋亡调控基因Bcl-2、Bax表达的影响,为进一步的研究提供依据。方法本实验采用二血管阻断加低血压法制备大鼠全脑缺血再灌注模型。SD大鼠24只,随机被分成3组,每组8只：(1)假手术组(F组)：只分离股动脉和双侧颈总动脉,不降压,不夹闭双侧颈总动脉;(2)缺血再灌注组(IR组)：股动脉放血使血压降至基础血压的50-60%,夹闭双侧颈总动脉10min再放开;(3)丙酮酸乙酯处理组(EP组)：与IR组处理相同。EP组于恢复血流即刻腹腔注射丙酮酸乙酯40mg／kg,其余两组给予等量生理盐水,每隔6h注射一次;再灌注24h后断头取脑,用原位末端转移酶标记(TUNEL)法检测细胞凋亡指数(AI),免疫组化法检测海马CA1区Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果IR组和EP组AI和Bcl-2、Bax蛋白表达水平均明显高于F组,差异有统计学意义(P丙酮酸乙酯可抑制大鼠全脑缺血再灌注损伤细胞凋亡,此作用可能与其减轻氧化应激、上调Bcl-2和下调Bax蛋白表达水平有关。

关键词：全脑缺血再灌注损伤丙酮酸乙酯 SOD NO iNOS TNF-a ICAM-1 全脑缺血再灌注损伤丙酮酸乙酯细胞凋亡 Bcl-2 Bax

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丙酮酸乙酯对高原肺水肿的防治作用

丙酮酸乙酯对高原肺水肿的防治作用

作者：张益锦州医科大学

学位级别：硕士

目的高原肺水肿(high-altitude pulmonary edema,HAPE)一般发生在初次进入海拔超过3000m高原环境时,由于机体不适应高原低压低氧环境发生一系列危重病理生理变化,HAPE的发病机制复杂,尚未完全阐明。近年来有关HAPE的研究显示,氧化应激... 详细信息

目的高原肺水肿(high-altitude pulmonary edema,HAPE)一般发生在初次进入海拔超过3000m高原环境时,由于机体不适应高原低压低氧环境发生一系列危重病理生理变化,HAPE的发病机制复杂,尚未完全阐明。近年来有关HAPE的研究显示,氧化应激、炎症可能在高原病发病中扮演重要角色。目前HAPE的治疗包括氧气治疗、NO治疗及各种药物治疗,如氨茶碱、地塞米松等,临床一般根据病情与现场条件不同采用药物或药物联合加吸氧治疗,可以起到一定的缓解作用。丙酮酸乙酯(ethyl pruvate,EP)作为丙酮酸的脂类衍生物,EP作用十分广泛,不但可以改善氧化还原反应导致的组织细胞损伤,减少促炎因子的分泌,而且还可以在不同的环境或条件下有抑制凋亡或促进凋亡的作用,增强抗肿瘤免疫因此我们推测EP可以通过抗氧化和抗炎作用来抑制HAPE的发生发展。本研究通过模拟高原低压低氧环境,检测分别在缺氧环境暴露不同时间大鼠氧化应激状态变化,建立实验性大鼠高原肺水肿模型,并探讨EP对HAPE的防治作用,以寻求有效的HAPE治疗方法,并探索其潜在的可能机制。方法一、大鼠高原肺水肿模型的建立24只雄性SD大鼠随机分为平原对照组(N组)、模拟高原低压低氧(H)1d、2d、3d组(n=6,1d=24h),H1d、H2d、H3d组大鼠置于低压氧舱内模拟6000m海拔分别暴露1d、2d、3d,24h/d,连续减压。N组大鼠同时平原环境正常饲养。相应处理后分别检测各组大鼠肺组织湿/干比(W/D)、微量还原型谷胱甘肽(GSH)含量、丙二醛(MDA)水平和超氧化物歧化酶(SOD)活力,肺组织病理学检查。二、探讨丙酮酸乙酯对高原肺水肿的防治作用30只雄性SD大鼠体重(200±10)g随机分为正常对照组(Control组)、HA PE模型组(H3d组)、丙酮酸乙酯不同剂量组(EP 1mg/kg、EP 5mg/kg、EP 10mg/kg组)(n=6)。Control组大鼠腹腔注射乳酸林格钠注射液1ml/只,1次/d,持续注射两天,平原环境正常饲养;H3d组动物腹腔注射乳酸林格钠注射液1ml/只,1次/d,持续注射两天,然后置于低压氧舱内模拟高原6000m海拔暴露3d,24h/d;E P 1mg/kg组、EP 5mg/kg组、EP 10mg/kg组大鼠分别接受腹腔注射丙酮酸乙酯1mg/kg、5mg/kg、10mg/kg,1次/d,连续注射2d,期间动物自由饮水进食,第2天注射完成后将动物置于高原低压氧舱内模拟高原6000m海拔连续暴露3d,24h/d。应用ELISA试剂盒分别检测各组大鼠血清IL-6、IL-10、IL-1β、TNF-α含量,Weste rn印迹检测大鼠肺组织p65、IL-6、COX-2、STAT3蛋白表达,肺组织病理学检查。结果一、大鼠高原肺水肿模型的建立1、高原缺氧条件下氧化应激指标变化与N组大鼠相比,大鼠肺组织湿/干比(W/D)以及大鼠肺组织匀浆MDA含量在高原海拔6000m暴露1d、2d、3d逐渐增加,与其它组相比,H3d组增加最明显(P丙酮酸乙酯对高原肺水肿的防治作用1、ELISA检测血清炎症因子水平与对照组(Control组)相比,高原海拔6000m暴露3d组血清IL-6、IL-1β、T NF-α水平明显增加(P<0.01),注射EP 1mg/kg组和5mg/kg组血清促炎因子水平IL-6、IL-1β、TNF-α有所下降,EP 10mg/kg组明显减少(P<0.01)。高原6000m海拔暴露3d组(H3d组)血清IL-10较对照组降低(P<0.01),注射EP预防后,E P 1mg/kg组和5mg/kg组血清抗炎因子IL-10增加(P<0.01),EP 10mg/kg组增加更为显著(P<0.01)。2、形态学观察HE切片显微镜下观察发现,H3d组大鼠肺组织呈现HAPE的病理学变化,肺泡腔出现均匀粉染的渗出液,肺泡壁毛细血管显著扩张充血,肺间质纤维母细胞增生,少许中性粒细胞、淋巴细胞为主的炎细胞浸润。经EP预防用药后,1mg/kg、5mg/k g、10mg/kg组随EP剂量增加,与H3d组相比,大鼠肺水肿、毛细血管扩张充血逐渐减少,炎细胞浸润消失。3、Western Blot检测肺组织p65、IL-6、COX-2、STAT3

关键词：高原肺水肿高原病丙酮酸乙酯氧化应激炎症 p65 IL-6 STAT3

丙酮酸乙酯对严重腹腔感染大鼠肠屏障功能的影响

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丙酮酸乙酯对严重腹腔感染大鼠肠屏障功能的影响

作者：李锟第一军医大学

学位级别：硕士

目的通过复制SD大鼠严重腹腔感染模型，观察小肠黏膜的病理变化、小肠黏膜上皮细胞晚期糖基化终产物受体(Receptor of Advanced GlycationEnd-products，RAGE)的免疫组化染色情况、小肠和血清丙二醛(Maleic Dialdehyde，MDA)及小肠髓... 详细信息

目的通过复制SD大鼠严重腹腔感染模型，观察小肠黏膜的病理变化、小肠黏膜上皮细胞晚期糖基化终产物受体(Receptor of Advanced GlycationEnd-products，RAGE)的免疫组化染色情况、小肠和血清丙二醛(Maleic Dialdehyde，MDA)及小肠髓过氧化物酶(Myelopetoxidase，MPO)的变化情况;研究严重腹腔感染时小肠的病理损伤程度、小肠黏膜上皮细胞RAGE的表达变化、小肠及血液的过氧化损伤情况，以及应用丙酮酸乙酯(Ethyl Pyruvate，EP)治疗后的变化;探讨严重腹腔感染时小肠黏膜的损伤机制、小肠黏膜上皮细胞RAGE的表达及其意义，阐明丙酮酸乙酯对严重腹腔感染大鼠肠屏障功能的影响。方法 SD大鼠36只，随机分成腹腔感染组、治疗组和对照组，每组12只。腹腔感染组(CLP组)采用盲肠结扎加穿孔(cecal ligation plus puncture，CLP)手术制作严重腹腔感染模型;治疗组(EP组)行CLP后应用EP治疗;对照组仅行单纯剖腹手术。每组分别于术后24h、48h各6只取小肠及血清标本，各组均行病理学观察及病理损伤评级、晚期糖基化终产物受体免疫组化染色及RAGE指数测定、小肠及血清MDA测定、小肠MPO检测。结果 (1)肠黏膜病理改变：对照组光镜下小肠黏膜各层结构完整，肠绒毛排列整齐。电镜下可见肠黏膜微绒毛形态正常;CLP组光镜下有小肠黏膜水肿、充血，中性粒细胞浸润及黏膜上皮脱落等表现，电镜下观察肠上皮细胞间结构松弛，肠上皮细胞微绒毛部分脱落;EP组光镜下未见小肠黏膜上皮脱落，电镜

关键词：腹腔感染丙酮酸乙酯 RAGE指数肠屏障功能

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丙酮酸乙酯对樱桃保鲜效果的研究

丙酮酸乙酯对樱桃保鲜效果的研究

作者：赵宇瑛山西大学

学位级别：硕士

樱桃(Prunus avium L.)为蔷薇科李属,含有丰富的活性物质、维生素和人体必需的微量元素,樱桃鲜果营养丰富却不易储存,釆后极易出现软化、褐变、腐烂乃至果实劣化的现象,成为其消费市场流通的最大阻碍,造成巨大的经济损失。本文以“红玛... 详细信息

樱桃(Prunus avium L.)为蔷薇科李属,含有丰富的活性物质、维生素和人体必需的微量元素,樱桃鲜果营养丰富却不易储存,釆后极易出现软化、褐变、腐烂乃至果实劣化的现象,成为其消费市场流通的最大阻碍,造成巨大的经济损失。本文以“红玛瑙”樱桃为研究材料,丙酮酸乙酯(Ethyl Pyruvate,简称EP)处理后,通过测定果实贮藏期间的感官品质、理化性质及生物活性成分等相关生理指标,探求其变化相关性,从而了解樱桃成熟软化生理变化过程,为丙酮酸乙酯在“红玛瑙”樱桃的采后保鲜效果及贮藏运输应用方面提供科学依据及理论指导。本研究的主要内容及结果如下:1.丙酮酸乙酯对樱桃采后品质变化的影响:樱桃采后会有一系列品质变化,随着贮藏时间的延长,果实成熟度逐渐增加直至衰老劣化。通过900 mL保鲜盒内壁吸水纸浸润300μL EP进行处理,对果实的硬度、质量损失率、色度、褐变及腐烂率等感官品质的变化、理化性质与生物活性物质含量的变化进行检测,并探讨变化相关性。结果显示,EP能减缓果实的硬度下降,35 d时EP处理组MDA含量比对照组低61.3%,42 d时EP组樱桃相对电导率比对照组低10.7%,并对腐烂指数和质量损失率的上升有抑制作用,但贮藏末期42 d时差异不显著。2.辛烯基琥珀酸酯化淀粉(Starch octenylsuccinate)-丙酮酸乙酯微胶囊的制备及对樱桃采后保鲜效果的影响:以EP为芯材,辛烯基琥珀酸酯化淀粉为包埋壁材,通过冷冻干燥法制备成淡黄色粉末状保鲜材料,提高了EP的稳定性,延长了EP作用时间,RP-HPLC法测定其包埋率为73.7%。处理组900 mL保鲜盒内分别放置为3 g、6 g、9 g微胶囊保鲜剂,即有效EP含量分别为700μL、1400μL、2100μL·900mL,对处理后樱桃果实的硬度、色泽等感官品质、理化性质以及生物活性物质的含量进行测定。结果表明,淀粉-EP微胶囊2100μL EP效果较好,贮藏末期64 d时,淀粉壁材组腐烂指数比空白组低24.7%,淀粉-EP微胶囊处理组的腐烂指数比空白组低45.7%,淀粉-EP微胶囊处理组樱桃的MDA含量比空白组低12.3%。3.壳聚糖(Chitosan)-丙酮酸乙酯微胶囊的制备及对樱桃采后保鲜效果的影响:以EP为芯材,壳聚糖为包埋壁材,冷冻干燥法制备成粉末状保鲜材料,RP-HPLC法测定其包埋率为84.6%。处理组900 mL保鲜盒内分别放置为3 g、6 g、9 g微胶囊保鲜剂,即有效EP含量分别800μL、1600μL、2400μL·900 mL,对处理后樱桃的品质变化进行检测分析。结果表明,壳聚糖-EP微胶囊1600μL EP处理保鲜效果较好,经济高效,64 d时1600μL EP组的果实硬度比空白组和对照组分别高27.3%、36.4%;24 d时空白组腐烂指数已经上升至23.1%,但1600μL EP组仅为14.4%;34 d时空白组可滴定酸含量比1600μL EP处理组低19.2%,对照比1600μL EP处理组低12.4%,且1600μL EP处理组果实的总多酚含量为空白组的1.05倍。4.为了进一步筛选壁材及确定芯材的使用浓度,从而达到最佳保鲜效果,比较了贮藏64 d时两种壁材的微胶囊的包埋效果、缓释效果以及对樱桃的保鲜效果。结果表明,与淀粉相比,壳聚糖包埋率较高为84.6%;64 d时壳聚糖-EP组果实的硬度比空白组高27.3%,比淀粉-EP处理组高7.7%;壳聚糖-EP组果实的褐变指数比淀粉-EP低7.3%。综上所述,壳聚糖更适合做EP微胶囊的壁材。

关键词：樱桃采后保鲜丙酮酸乙酯辛烯基琥珀酸酯化淀粉壳聚糖微胶囊

丙酮酸乙酯对大鼠原位肝移植缺血再灌注损伤的保护作用

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丙酮酸乙酯对大鼠原位肝移植缺血再灌注损伤的保护作用

作者：于建健天津医科大学

学位级别：硕士

第一部分大鼠原位肝移植(ROLT)模型的建立目的：探讨大鼠原位肝移植(Rat Orthotopic Liver Transplantation, ROLT)模型的建立,为肝移植的相关实验研究提供理想的动物模型。方法：采用Kamada’s二袖套法,并在此模型基础上做相应改良,... 详细信息

第一部分大鼠原位肝移植(ROLT)模型的建立目的：探讨大鼠原位肝移植(Rat Orthotopic Liver Transplantation, ROLT)模型的建立,为肝移植的相关实验研究提供理想的动物模型。方法：采用Kamada’s二袖套法,并在此模型基础上做相应改良,施行了80例大鼠原位肝脏移植手术,观察手术成功率和并发症。结果：经过50例的训练,成功建立大鼠肝移植模型。在定型的30例肝移植术中,供肝热缺血时间(0-1)min,受体平均无肝期时间为(16-21)min,受体平均手术时间38-46min,手术成功率90%(27/30),术后两周存活率83%(25/30)。结论：改良二袖套法肝移植术成功率高,重复性强,为成熟稳定的大鼠肝移植理想术式,可为肝移植相关的基础与临床研究提供理想的动物模型。第二部分丙酮酸乙酯对大鼠原位肝移植缺血再灌注损伤的保护作用目的：探讨丙酮酸乙酯(Ethyl Pyruvate, EP)对大鼠肝移植缺血再灌注损伤的保护作用及相关机制。方法：采用“二袖套”法大鼠原位肝移植模型,选取SPF级成年雄性SD大鼠104只,采用随机数字表法,将大鼠随机分为假手术组8只、原位肝移植组和丙酮酸乙酯(EP)治疗组各48只。假手术组(S组)仅行单纯开关腹手术,原位肝移植组(O组)及丙酮酸乙酯治疗组(EP组)分别行“二袖套”法原位肝移植术,EP组受体于切皮前1h给予EP40mg/kg, O组受体于切皮前1h给予与EP组等体积的林格氏液。分别于再灌注后2h、6h和24h检测大鼠血清ALT和AST活性,黄嘌呤氧化酶法测定肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)活性,硫代巴比妥酸(TBA)法测定丙二醛(MDA)含量,ELISA法检测血清中TNF-α和IL-6浓度。数据应用SPSS17.0进行统计分析处理。结果：与S组比较,O组各时点和EP组再灌注后2h,6h MDA含量升高,SOD活性降低(P丙酮酸乙酯预处理后,血清的ALT和AST水平明显下降,减轻了移植肝的缺血再灌注损伤。主要通过减少氧自由基的生成,降低了抗氧化物质SOD的消耗,脂质过氧化终产物MDA生成减少,有效抑制脂质过氧化反应;显著降低血清中炎性细胞因子TNF-α和IL-6水平,从而对大鼠肝移植缺血再灌注损伤起保护作用。

关键词：丙酮酸乙酯肝移植大鼠缺血再灌注 TNF-α IL-6 丙二醛超氧化物歧化酶