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不稳定膀胱逼尿肌兴奋性及收缩性改变的实验研究

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第三军医大学学报 2003年第24期25卷 2229-2231页

作者：卢根生格次宋波金锡御第三军医大学附属西南医院全军泌尿专科中心重庆400038 西藏武警总队医院外一科拉萨850000

目的　探讨不稳定膀胱逼尿肌兴奋性、收缩性改变及不稳定膀胱的发病机制。方法　对前列腺增生患者行前列腺摘除术取逼尿肌组织 ,根据尿动力学检查结果分为逼尿肌稳定组 (DS)和逼尿肌不稳定组 (DI) ,各取 8例患者行离体逼尿肌条机械牵拉 ... 详细信息

目的　探讨不稳定膀胱逼尿肌兴奋性、收缩性改变及不稳定膀胱的发病机制。方法　对前列腺增生患者行前列腺摘除术取逼尿肌组织 ,根据尿动力学检查结果分为逼尿肌稳定组 (DS)和逼尿肌不稳定组 (DI) ,各取 8例患者行离体逼尿肌条机械牵拉 ,电及胆碱类药物刺激试验。结果　DI组及DS组逼尿肌条出现收缩时的最小张力分别为 ( 0 3 2 4±0 13 2 )、( 0 82 2± 0 2 16)g ,DI组较DS组明显降低 (P <0 0 5 ) ;逼尿肌条张力为 1 2 5g时 ,DI组及DS组收缩频率分别为( 2 63 7± 1 12 0 )和 ( 1 0 2 1± 0 3 62 )次 min ,DI组较DS组肌条收缩频率明显增大 (P <0 0 5 ) ;DI组与DS组相比 ,电刺激及胆碱类药物刺激逼尿肌条产生的收缩力明显减弱 (P <0 0 5 )。结论　DI逼尿肌兴奋性增高 ,而收缩力明显减弱。

关键词：不稳定膀胱兴奋性收缩性

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不稳定膀胱与间隙连接相关性的实验研究

不稳定膀胱与间隙连接相关性的实验研究

作者：周德荣汕头大学

学位级别：硕士

背景与目的:良性前列腺增生(BPH)是老年男性常见病,不稳定膀胱是BPH 引起的主要病理变化之一,其是临床上产生尿频、尿急、急迫性尿失禁的主要原因。严重地困扰着BPH患者,临床上对其有效地控制是非常急迫的。然而,有关BPH引起不稳定膀... 详细信息

背景与目的:良性前列腺增生(BPH)是老年男性常见病,不稳定膀胱是BPH 引起的主要病理变化之一,其是临床上产生尿频、尿急、急迫性尿失禁的主要原因。严重地困扰着BPH患者,临床上对其有效地控制是非常急迫的。然而,有关BPH引起不稳定膀胱的发病机制至今尚未完全清楚,给临床治疗带来困难。近年来有越来越多的研究表明,BPH引起不稳定膀胱的发病机制可能涉及逼尿肌细胞超微结构特性的改变。本实验通过建立大鼠不稳定膀胱模型,从分子生物学及形态学上研究阐明细胞间信号传导在不稳定膀胱发生和病情进展中的作用。材料与方法:成年Wistar大鼠实验组40只建立下尿路梗阻模型,对照组10 只,只行尿道分离术而不作结扎术。之后行充盈性膀胱测压,确定不稳定膀胱组(DI), 提取膀胱逼尿肌组织,取正常大鼠逼尿肌作对照,采用western blot技术、HE染色光镜观察,双重标记的荧光免疫组织化学以及激光共聚焦显微镜技术,直接观测并定量分析间隙连接蛋白的变化。数据以x±s表示,组间差异用方差分析,并作样本均数两两比较的t检验。结果: 1.实验组存活大鼠37只中13只出现不稳定性膀胱,不稳定性膀胱发生率为35.1%(1 3/37),对照组无逼尿肌不稳定。DI组膀胱最大容量1.63±0.20ml较对照组0.28± 0.12ml差异有显著意义(P膀胱最大压力55.75±10.54 cmHO较对照组 23.12±7.65cmHO差异有显著意义(P不稳定组逼尿肌细胞大小不一,形状多样,有些呈半月形或不规则形,排列紊乱,细胞核密度降低。 *** blot检测结果

关键词：不稳定膀胱间隙连接连接蛋白43 免疫印迹技术激光共聚焦显微镜

双重免疫荧光标记及激光共聚焦显微镜技术对不稳定膀胱逼尿肌间隙连接蛋白43的定量和定位实验

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中国临床康复 2005年第26期9卷 155-157,i0007页

作者：周德荣章振保汕头大学医学院第二附属医院泌尿外科广东省汕头市515041

目的:建立一种应用荧光免疫组织化学双重标记技术和激光扫描共聚焦显微镜观察不稳定膀胱逼尿肌连接蛋白43表达和分布模式的方法。方法:实验于2003-09/2004-06在汕头大学医学院病理实验室完成。选择健康清洁级wistar大鼠50只,随机分成两... 详细信息

目的:建立一种应用荧光免疫组织化学双重标记技术和激光扫描共聚焦显微镜观察不稳定膀胱逼尿肌连接蛋白43表达和分布模式的方法。方法:实验于2003-09/2004-06在汕头大学医学院病理实验室完成。选择健康清洁级wistar大鼠50只,随机分成两组,对照组10只,不稳定膀胱组40只。建立膀胱出口梗阻模型之后行充盈性膀胱测压,确定不稳定膀胱组13只。对照组只行尿道分离术而不作结扎术。麻醉未醒即处死大鼠,取下膀胱分离出逼尿肌组织。①荧光免疫组织化学双重标记:应用罗丹明麦芽凝集素标记逼尿肌肌细胞膜,异硫氰酸荧光素素标记间隙连接蛋白43。②激光共聚焦显微镜技术:使用ACAS/Ultima312型激光共聚焦显微镜的检测器1和检测器2同时分别检测连接蛋白43和细胞膜(当只开通检测通道1时,仅显示代表连接蛋白43的绿色小短杆状或小点状荧光斑;当仅开通检测通道2时,仅显示被染成红色的细胞膜,清楚地显示了细胞的外形轮廓,胞浆及胞核则不显示;当两个通道同时开通时,绿色的连接蛋白43与红色细胞膜重叠后变成黄色)。主要参数如下:小孔孔径225μm,X轴扫描点数390,Y轴扫描点数390,扫描步径0.6μm,镜扫描速度10mm/s,扫描强度85%,激光强度360mW,每点采样次数30,物镜40倍,检测器1(最适波长488nm)灵敏度62%,检测器2(最适波长514nm),灵敏度58%。③激光共聚焦显微镜图像分析法:应用ImageAnalysis程序进行图像分析。以连接蛋白43的像素值占总像素值的百分比值作为连接蛋白43的像素密度,其大小代表连接蛋白43量的大小;以连接蛋白43荧光斑面积的大小反映连接蛋白43量的大小。结果:不稳定膀胱组中出现不稳定膀胱的13只和对照组10只进入结果分析。①两组大鼠逼尿肌连接蛋白43的像素密度和荧光斑面积比较:不稳定膀胱组连接蛋白43象素密度值较对照组象素密度值明显增多(3.45±1.58,0.85±0.44,t=5.037,P不稳定膀胱组荧光斑面积较对照组显著增大犤(19.92±8.61)μm2,(11.46±2.55)μm2,t=2.995,P不稳定膀胱组细胞大小不一,形状多样,排列紊乱,连接蛋白43数量较对照组明显增多,表现在密度增大,荧光斑面积增大,连接蛋白43的表达主要出现在细胞与细胞连接处。结论:采用双重标记的荧光免疫组织化学和激光共聚焦显微镜技术,抗连接蛋白43单克隆抗体特异地与间隙连接蛋白43结合,在组织原位上准确地标记间隙连接,同时显示细胞膜,既能对其进行定量分析,又能同时对其进行定位。

关键词：膀胱疾病缝隙接合部连接蛋白43 荧光免疫技术激光共聚焦显微镜技术间隙连接蛋白43 不稳定膀胱膀胱逼尿肌免疫荧光标记病理实验室

大鼠不稳定膀胱与MR亚型密度改变关系的实验研究

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第三军医大学学报 2002年第12期24卷 1437-1438页

作者：卢根生宋波熊恩庆金锡御第三军医大学附属西南医院全军泌尿中心重庆400038

目的　探讨毒蕈碱受体 (MR)亚型密度变化与不稳定膀胱发生之间的关系。方法　建立不稳定膀胱大鼠模型 ,采用RT PCR方法测定不稳定膀胱及对照组逼尿肌毒蕈碱受体 (MR)亚型密度。结果　对照组和不稳定膀胱组逼尿肌组织均含有m2 RNA和m3RN... 详细信息

目的　探讨毒蕈碱受体 (MR)亚型密度变化与不稳定膀胱发生之间的关系。方法　建立不稳定膀胱大鼠模型 ,采用RT PCR方法测定不稳定膀胱及对照组逼尿肌毒蕈碱受体 (MR)亚型密度。结果　对照组和不稳定膀胱组逼尿肌组织均含有m2 RNA和m3RNA ,没有检测到m1 、m2 和m3亚型的mRNA。正常对照组膀胱逼尿肌m2 RNA(1 67± 0 42 )含量明显多于m3RNA(0 64± 0 19) ,两者之比约 2 5 9∶1;不稳定膀胱逼尿肌中m2 和m3密度均增加 ,分别为 (2 0 3± 0 65 )和 (1 5 3± 0 46) ,m3增加更明显 (P 不稳定膀胱产生与MR亚型密度上调及M2 R、M3R亚型之间的比例失调有关。

关键词：实验研究不稳定膀胱毒蕈碱受体亚型密度

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辣椒辣素预防前列腺术后不稳定膀胱的研究

中华泌尿外科杂志 2003年第2期24卷 131-133页

作者：关志忱赵雷暨南大学附属深圳市人民医院泌尿外科 518020

目的　探讨辣椒辣素预防良性前列腺增生 (BPH)患者前列腺切除术后不稳定膀胱的作用。　方法　BPH拟行前列腺切除术患者 40例 ,随机分为对照组 (A组 )和膀胱灌注辣椒辣素组 (B组 ) ,对照组 (C组 )和硬膜外腔注入辣椒辣素组 (D组 ) ,每组... 详细信息

目的　探讨辣椒辣素预防良性前列腺增生 (BPH)患者前列腺切除术后不稳定膀胱的作用。　方法　BPH拟行前列腺切除术患者 40例 ,随机分为对照组 (A组 )和膀胱灌注辣椒辣素组 (B组 ) ,对照组 (C组 )和硬膜外腔注入辣椒辣素组 (D组 ) ,每组 10例。A、B两组分别于术前膀胱灌注生理盐水和 1mmol/L辣椒辣素盐溶液 10 0ml,3 0min后排空。C、D两组分别于硬膜外注入生理盐水 10ml(C组 )、1mmol/L辣椒辣素 10ml(D组 ) ,比较 4组患者手术前后的尿动力学指标、膀胱稳定性变化。　结果　B、D组患者膀胱稳定性明显增强 ,不稳定膀胱发生例数、持续时间以及冲洗液转清时间和导尿管拔除时间分别少于A、C组 ,疼痛程度明显减轻 ,差异有显著性 (P 膀胱容量、最大逼尿肌压力、剩余尿量较术前明显好转。其中膀胱容量和最大逼尿肌压力改变较对照组差异有显著性 (P 膀胱灌注或硬膜外注入辣椒辣素可以提高逼尿肌稳定性 ,缓解前列腺切除术后膀胱痉挛性疼痛。

关键词：前列腺增生辣椒素不稳定膀胱

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Rho激酶与大鼠不稳定膀胱关系的实验研究

第三军医大学学报 2005年第10期27卷 978-980页

作者：贾卓敏卢根生宋波李文刚文前军江海红第三军医大学西南医院全军泌尿外科中心重庆400038

目的　探讨Rho激酶与不稳定膀胱发生之间的关系。方法　建立不稳定膀胱大鼠模型;采用RT PCR方法测定不稳定膀胱及对照组逼尿肌Rho激酶亚型密度的变化;Rho激酶特异选择性抑制剂Y 2 763 2对逼尿肌肌条自发性收缩频率和收缩力的影响。结果... 详细信息

目的　探讨Rho激酶与不稳定膀胱发生之间的关系。方法　建立不稳定膀胱大鼠模型;采用RT PCR方法测定不稳定膀胱及对照组逼尿肌Rho激酶亚型密度的变化;Rho激酶特异选择性抑制剂Y 2 763 2对逼尿肌肌条自发性收缩频率和收缩力的影响。结果　①DI组ROCKⅠmRNA的表达(0 93±0 14 )明显高于对照组(0 60±0 0 3 ) (P 0 0 5 ) ;③Rho激酶抑制剂Y 2 763 2 (3 μmol/L)可以显著降低DI组膀胱的自发性收缩频率和自发性收缩张力,对照组无明显影响。结论　Rho激酶与不稳定膀胱的发生有关。

关键词：不稳定膀胱 Rho激酶 Y-27632 大鼠

硝苯甲氧乙基异丙啶治疗不稳定膀胱的疗效分析

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中华泌尿外科杂志 2002年第6期23卷 349-350页

作者：叶利洪陈永良蒋茂荣马国锋浙江省绍兴市第四医院轻纺城医疗中心泌尿外科 312030 绍兴县卫生局

目的　探讨钙通道阻滞剂尼莫通治疗不稳定膀胱的疗效。　方法　采用硝苯甲氧乙基异丙啶 (尼莫通 )微泵静脉输注方法治疗不稳定膀胱 81例 ,其中开放前列腺摘除术后 2 7例 ,经尿道前列腺切除术后 4 8例 ,膀胱部分切除术后 4例 ,膀胱肿瘤... 详细信息

目的　探讨钙通道阻滞剂尼莫通治疗不稳定膀胱的疗效。　方法　采用硝苯甲氧乙基异丙啶 (尼莫通 )微泵静脉输注方法治疗不稳定膀胱 81例 ,其中开放前列腺摘除术后 2 7例 ,经尿道前列腺切除术后 4 8例 ,膀胱部分切除术后 4例 ,膀胱肿瘤旷置术后 2例。　结果　根据临床症状评分显示有效率 96 .3% ,膀胱初感尿量及最大容量均明显增加、膀胱内压明显降低。　结论　尼莫通对不稳定膀胱治疗作用强烈、确切 ,对顽固性。

关键词：硝苯甲氧乙基异丙啶不稳定膀胱疗效钙通道阻滞剂尼莫通

梗阻性不稳定膀胱逼尿肌细胞内Ca^(2+)及N型Ca^(2+)通道的变化及意义

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中国老年学杂志 2007年第17期27卷 1648-1651页

作者：程文高建平张征宇葛京平南京军区南京总医院泌尿外科南京210002

目的对Ca2+和N型Ca2+通道在兔不全梗阻性不稳定膀胱逼尿肌细胞中的变化进行研究。方法成年同龄雄性新西兰白兔30只,随机分两组,15只中膀胱出口不全梗阻8w尿流动力学证实为不稳定膀胱者为实验组,15只为对照组(成年雄性新西兰白兔仅仅手... 详细信息

目的对Ca2+和N型Ca2+通道在兔不全梗阻性不稳定膀胱逼尿肌细胞中的变化进行研究。方法成年同龄雄性新西兰白兔30只,随机分两组,15只中膀胱出口不全梗阻8w尿流动力学证实为不稳定膀胱者为实验组,15只为对照组(成年雄性新西兰白兔仅仅手术游离兔膀胱颈而不做结扎梗阻为对照组)。采用急性酶法分离及传代培养的方法获得单个膀胱逼尿肌细胞,采用激光共聚焦显微镜观察模型膀胱逼尿肌细胞静态Ca2+浓度;运用共聚焦显微镜及免疫组织化学方法观察N型Ca2+通道在梗阻性不稳定膀胱逼尿肌细胞中的变化。结果静息状态下不全梗阻性不稳定膀胱组逼尿肌细胞内游离钙离子浓度明显增高(Ca2+超负荷);共聚焦显微镜及免疫组化均证实不稳定膀胱逼尿肌细胞膜之N钙离子通道数量明显增多。结论膀胱逼尿肌细胞Ca2+及其N型Ca2+通道病理性改变是出现不稳定膀胱的重要因素。

关键词： Ca^2+ N型Ca^2+通道兔不全性膀胱出口梗阻不稳定膀胱

电针对大鼠不稳定膀胱逼尿肌及膀胱颈氮能神经递质的影响

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中西医结合学报 2006年第1期4卷 73-75页

作者：陈跃来岑珏侯文光高志强虞先敏马雪梅上海中医药大学岳阳中西医结合医院针灸科

目的:观察电针治疗对大鼠不稳定膀胱模型下尿路组织氮能神经递质的影响。方法:制作大鼠不稳定膀胱模型,电针会阳、中膂俞7d后,采用免疫组织化学法检测大鼠膀胱逼尿肌、膀胱颈平滑肌神经源性一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase... 详细信息

目的:观察电针治疗对大鼠不稳定膀胱模型下尿路组织氮能神经递质的影响。方法:制作大鼠不稳定膀胱模型,电针会阳、中膂俞7d后,采用免疫组织化学法检测大鼠膀胱逼尿肌、膀胱颈平滑肌神经源性一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase,nNOS)、内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide syn-thase,eNOS)和诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)阳性细胞并计数。结果:不稳定膀胱模型其膀胱逼尿肌、膀胱颈平滑肌中氮能神经递质明显下降,而电针治疗则可促进氮能神经递质的生成和分泌。结论:电针促进膀胱组织中氮能神经递质的生成和分泌可能是电针治疗改善不稳定膀胱功能的主要机制之一。

关键词：电针不稳定膀胱氮能神经递质动物实验