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有机溶剂/缓冲液双相体系中绿豆环氧化物水解酶催化环氧苯乙烯不对称水解反应

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催化学报 2011年第9期32卷 1557-1563页

作者：陈文静娄文勇王晓婷宗敏华华南理工大学生物科学与工程学院广东广州510006 华南理工大学应用生物催化实验室广东广州510640 华南理工大学轻工与食品学院制浆造纸工程国家重点实验室广东广州510640

研究了有机溶剂/缓冲液双相体系中绿豆环氧化物水解酶高立体选择性地催化外消旋环氧苯乙烯水解生成(R)-苯基乙二醇反应.结果表明,与单水相反应体系相比,有机溶剂/缓冲液双相反应体系不仅有效地抑制环氧苯乙烯的非酶水解反应,而且明显提... 详细信息

研究了有机溶剂/缓冲液双相体系中绿豆环氧化物水解酶高立体选择性地催化外消旋环氧苯乙烯水解生成(R)-苯基乙二醇反应.结果表明,与单水相反应体系相比,有机溶剂/缓冲液双相反应体系不仅有效地抑制环氧苯乙烯的非酶水解反应,而且明显提高底物的浓度,产物的收率和ee值更高.在所考察的不同有机溶剂中,正己烷不仅能较好地溶解底物,而且对酶的毒性较小,从而导致反应的初速率较快,产物的收率和ee值较高,是最适宜有机相.在两相体积比(正己烷/缓冲液)为1:1,底物浓度为20mmol/L,缓冲液pH=6.5以及35oC的最适反应条件下,反应的初速率、产物的收率和ee值分别为5.42mmol/(L·h),49.2%和94.3%.

关键词：绿豆环氧化物水解酶环氧苯乙烯 (R)-苯基乙二醇有机溶剂/缓冲液双相体系不对称水解

微生物酶不对称水解合成S(+)-布洛芬的研究 Ⅱ.反应条件和产物提取

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微生物学报 1995年第4期35卷 275-279页

作者：徐诗伟徐清曹桂芳王维庆中国科学院微生物研究所北京100080 山东新华制药厂研究院

皮状丝孢酵母具有较强不对称水解底物专一性.在试验的五种布洛芬消旋酯中,水解甲酯和异丙酯生成s(+)-布洛芬ee可达97%,乙酯为93%以上;而水解活性以乙酯最强,转化率高于30%.不对称水解最适pH6.5—7.0;温度在28—37℃范围内拆分能力无明... 详细信息

皮状丝孢酵母具有较强不对称水解底物专一性.在试验的五种布洛芬消旋酯中,水解甲酯和异丙酯生成s(+)-布洛芬ee可达97%,乙酯为93%以上;而水解活性以乙酯最强,转化率高于30%.不对称水解最适pH6.5—7.0;温度在28—37℃范围内拆分能力无明显差别.该酵母的水解酶为胞内酶,将酵母细胞制成两酮干粉进行水解可提高立体专一性.产物S(+)-布洛芬可借助于酸碱反应和有机溶剂提取得到,同时回收未水解的酯.

关键词：微生物酶合成不对称水解 S(+)-布洛芬酵母

微生物酶不对称水解合成S(+)-布洛芬的研究 Ⅰ.高度立体选择性菌株的筛选

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微生物学报 1995年第3期35卷 190-196页

作者：徐诗伟曹桂芳徐清左静王维庆中国科学院微生物研究所北京100080 山东新华制药厂研究院

从361株细菌和酵母菌中分别筛选到12株可不对称水解布洛芬乙酯生成R(-)-布洛芬的细菌(5株菌对映体过量(ee)可达85%)和15株具有不对称水解布洛芬乙酯活性的酵母菌,其中皮状丝孢酵母T158生成S(+)-布洛芬,ee可超过92%.该酵母菌最适碳源为... 详细信息

从361株细菌和酵母菌中分别筛选到12株可不对称水解布洛芬乙酯生成R(-)-布洛芬的细菌(5株菌对映体过量(ee)可达85%)和15株具有不对称水解布洛芬乙酯活性的酵母菌,其中皮状丝孢酵母T158生成S(+)-布洛芬,ee可超过92%.该酵母菌最适碳源为葡萄糖,浓度以1.0—1.5%适宜,蛋白胨浓度低于0.3%或高于0.5%对水解拆分均不利.酵母膏的加入显著提高水解活性,最适浓度0.3%.在培养基中添加表面活性剂吐温80(0.2%)既可提高拆分专一性,又能增强水解能力.

关键词：皮状丝孢酵母不对称水解布洛芬合成

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微生物酶催化布洛芬乙酯的不对称水解

中国医药工业杂志 1998年第10期29卷 444-446页

作者：刘勇罗氚芸谢金伦许坤一云南大学省工业微生物发酵工程重点实验室云南教育学院环境资源分院云南师范大学生命科学系

从７００余株微生物中筛选到一株红酵母（Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａｓｐ．）ＬＹ－９５，具有高度选择性水解布洛芬乙酯的能力。该酵母菌ＬＹ－９５在最适摇瓶发酵的培养条件下，（Ｓ）－（＋）－布洛芬产率最高达５．１６ｇ／Ｌ，ｅｅ％... 详细信息

从７００余株微生物中筛选到一株红酵母（Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａｓｐ．）ＬＹ－９５，具有高度选择性水解布洛芬乙酯的能力。该酵母菌ＬＹ－９５在最适摇瓶发酵的培养条件下，（Ｓ）－（＋）－布洛芬产率最高达５．１６ｇ／Ｌ，ｅｅ％为９０％。

关键词：红酵母不对称水解布洛芬乙酯微生物酶催化

米曲霉3042细胞催化N-乙酰-D,L-3-三甲基硅丙氨酸不对称水解的研究

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高校化学工程学报 2006年第3期20卷 412-416页

作者：彭华松宗敏华陈志峰胡洪波上海交通大学生命科学技术学院上海200240 华南理工大学生物工程系广东广州510640

研究了米曲霉3042细胞催化N-乙酰-D,L-3-三甲基硅丙氨酸不对称水解反应,系统探讨了振荡速度、缓冲液浓度、反应温度和pH值对反应速度和反应选择性的影响。结果表明,上述因素对N-乙酰-D,L-3-三甲基硅丙氨酸不对称水解反应速率和反应选择... 详细信息

研究了米曲霉3042细胞催化N-乙酰-D,L-3-三甲基硅丙氨酸不对称水解反应,系统探讨了振荡速度、缓冲液浓度、反应温度和pH值对反应速度和反应选择性的影响。结果表明,上述因素对N-乙酰-D,L-3-三甲基硅丙氨酸不对称水解反应速率和反应选择性均有较显著的影响。振荡速度以170r?min?1为宜,适宜的磷酸盐缓冲液浓度为0.10mol?L?1,合适pH值为7.0,合适反应温度为50℃。在该优化反应条件下,以1g游离的米曲霉3042菌丝体催化10mmol?L?1N-乙酰-D,L-3-三甲基硅丙氨酸不对称水解,反应初速度为0.42mmol?L?1·h?1,反应79h,底物转化率为49.5%,产物L-三甲基硅丙氨酸的e.e.为92.7%。

关键词：米曲霉3042 不对称水解 L-三甲基硅丙氨酸对映体选择性

有机溶剂-水双液相体系脂肪酶不对称水解合成S-(+)-萘普生

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分子催化 1998年第6期12卷 412-416页

作者：辛嘉英李树本徐毅沈润南尉迟力中国科学院兰州化学物理研究所羰基合成与选择氧化国家重点实验室

采用有机溶剂－水双液相体系作为反应介质，并用键合有—Ｃ６Ｈ５的无定型多孔硅胶作为分散剂增大两相间的接触面，用圆柱状假丝酵母脂肪酶对萘普生甲酯进行不对称水解．考察了酶浓度、体系ｐＨ值、温度、分散剂对反应的影响．当转化率... 详细信息

采用有机溶剂－水双液相体系作为反应介质，并用键合有—Ｃ６Ｈ５的无定型多孔硅胶作为分散剂增大两相间的接触面，用圆柱状假丝酵母脂肪酶对萘普生甲酯进行不对称水解．考察了酶浓度、体系ｐＨ值、温度、分散剂对反应的影响．当转化率为２４．３％时，产品萘普生的对映体过量值（ｅｅ）为９４．９％，剩余底物萘普生甲酯的对映体过量值（ｅｅ）为３０．５％，当以异辛烷作为有机相时，该体系酶催化水解的对映体比率（Ｅ）约为５０．

关键词：合成萘普生酶法拆分不对称水解

脂肪酶不对称水解含酯基的异核金属簇合物(英文)

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分子催化 2000年第2期14卷 151-153页

作者：张玉华徐毅陈敏东祝馨怡陈致殷元骐中国科学院兰州化学物理研究所羰基合成与选择氧化国家重点实验室兰州730000

对脂肪酶催化含酯基的异核金属簇合物的水解反应进行了初步研究 .发现脂肪酶对簇合物的酯基进行水解时确有不对称效应 ,同时簇骨架中的重金属使酶失活 .尽管不知道水解产物的 e.e.值 ,但从旋光结果可以看出。

关键词：脂肪酶催化不对称水解酯基异核金属簇合物

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盐对酶促对羟基苯甘氨酸酯不对称水解的影响

现代食品科技 2012年第8期28卷 898-902页

作者：张媛媛范晓丹宗敏华吴虹广东轻工职业技术学院食品与生物工程系广东广州510300 华南理工大学应用生物催化研究室广东广州510640

本文探讨了以盐为添加剂时,盐的种类、酶的种类及底物结构对酶促外消旋对羟基苯甘氨酸酯不对称水解的影响。结果表明,在所研究的17种盐中,盐酸盐及草酸盐对Novozym 435催化对羟基苯甘氨酸甲酯水解无影响,磷酸钾仅可加快反应速度,碳酸氢... 详细信息

本文探讨了以盐为添加剂时,盐的种类、酶的种类及底物结构对酶促外消旋对羟基苯甘氨酸酯不对称水解的影响。结果表明,在所研究的17种盐中,盐酸盐及草酸盐对Novozym 435催化对羟基苯甘氨酸甲酯水解无影响,磷酸钾仅可加快反应速度,碳酸氢盐、铵盐磷酸钠、醋酸钠均既能增加反应速度又能提高对映体选择性;其中碳酸氢铵为最适添加剂,可使产物对映体选择率E值达78。添加碳酸氢铵可分别提高蛋白酶Alcalase催化该反应的反应初速度及E值1.30倍和3倍;却使蛋白酶Papain催化同一反应的反应初速度和E值下降35%及60%。以碳酸氢铵为添加剂,Novozym 435催化对羟基苯甘氨酸乙酯和丙酯的E值可由5、23分别提高至25、28。

关键词：盐不对称水解动力学拆分脂肪酶对羟基J^Jd-氨酸酯

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有机相酶法不对称水解乳酸乙酯

有机相酶法不对称水解乳酸乙酯

作者：刘效岩河北工业大学

学位级别：硕士

本文以脂肪酶为催化剂,以有机溶剂为反应介质,在此体系中对DL-乳酸乙酯不对称水解进行初步摸索,并对反应条件进行优化,最后研究了乳酸乙酯不对称水解的动力学。首先探讨了在有机介质中酶催化外消旋乳酸乙酯不对称水解制备L-乳酸的可行... 详细信息

本文以脂肪酶为催化剂,以有机溶剂为反应介质,在此体系中对DL-乳酸乙酯不对称水解进行初步摸索,并对反应条件进行优化,最后研究了乳酸乙酯不对称水解的动力学。首先探讨了在有机介质中酶催化外消旋乳酸乙酯不对称水解制备L-乳酸的可行性。通过单因素实验研究了反应介质、不同来源的酶、摇床转速、水含量、乳酸乙酯浓度及温度等因素对反应的影响。结果表明,N435的活性和选择性较高,叔丁醇和异辛烷的混合溶剂(体积比为1:1)为最适的反应介质,其余最适条件为:摇床转数200 r/min、水含量(水与乳酸乙酯的质量比)为0.2、乳酸乙酯浓度0.27 g·mL-1、酶浓和反应温度分别为0.8 g·mol-1和60℃,在此条件下反应16h得产物ee值为90.02% ,产率为28.69%。其次在以上单因素实验的基础上,通过Plackett-Burman(PB)实验从以上六种反应条件中筛选出主要的影响因素,实验结果分析表明酶浓、温度和底物浓度是主要的影响因素。采用中心组合设计实验对主要影响因素进行进一步的优化,利用统计软件SAS对数据进行处理,确定最佳反应条件为:温度58℃,摇床转数200 r/min,酶浓度0.82 g·mol-1,底物浓度0.25 g·mL-1,水与乳酸乙酯的质量比为0.2, L-乳酸的ee值率达到94.38%,L-乳酸产率为30.02%。最后研究了乳酸乙酯不对称水解的动力学,结果表明反应符合米氏方程,属于双底物抑制的双乒乓机制,并考察了D-乳酸乙酯和D-乳酸在建立反应动力学模型时的影响。

关键词：乳酸乙酯 L-乳酸脂肪酶不对称水解有机介质反应动力学响应曲面