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下瘀血汤对胆碱蛋氨酸缺乏诱导的小鼠非酒精性脂肪性肝炎的抑制作用

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中国肝脏病杂志（电子版） 2018年第3期10卷 48-55页

作者：吴柳张洁马文婷潘凯张玮陶乐刘成上海中医药大学附属普陀医院肝病实验室上海200062 上海中医药大学附属普陀医院感染科上海200062 上海中医药大学附属普陀医院中心实验室上海200062

目的探讨下瘀血汤对胆碱蛋氨酸缺乏(methionine-choline-deficient,MCD)诱导的小鼠非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)的抑制作用。方法将24只雄性C57/BL6小鼠按照1∶2的比例随机采用蛋氨酸胆碱充足(methionine-choline-sufficient,MCS,8只)或MCD饲料喂养(16只)。造模第4周第1天,将采用MCD喂养的16只小鼠随机分为MCD对照组(简称MCD组,8只)及MCD-下瘀血汤(Xiayuxue decoction,XYXD)组(简称XYXD组,8只)。XYXD组小鼠按70 kg成人体重临床用量等体重的10倍量经口灌胃XYXD 3周,MCD对照组小鼠以等量无菌水灌胃,6周末取血清和肝组织,检测各组小鼠的肝功能、甘油三酯(triglyceride,TG)和总胆固醇(total cholesterol,TC)水平。采用免疫印迹和RT-PCR检测核苷酸结合寡聚化结构域蛋白样受体6(nucleotide-binding oligomerization-domain protein-like receptors protein 6,NLRP6)、簇分化抗原68(cluster of differentiation-68,CD68)、单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)及转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)等的表达。采用激光共聚焦检测CD68与NLRP6的共定位。结果与MCS组相比,MCD组小鼠血清ALT、肝内TG和TC水平显著升高(P 下调,而p-NF-κB p65水平显著上调;激光共聚焦结果显示MCD组小鼠NLRP6与CD68共定位显著降低。与MCD组相比,XYXD组小鼠的肝功能显著改善,肝组织炎症及纤维化反应显著降低,NLRP6下调被抑制。结论下瘀血汤对MCD诱导的小鼠NASH有显著改善作用;调控巨噬细胞NLRP6的表达是下瘀血汤改善NASH的作用机制之一。

关键词：下瘀血汤脂肪性肝炎非酒精性胆碱蛋氨酸缺乏核苷酸结合寡聚化结构域蛋白样受体6

下瘀血汤对酒精性肝病小鼠肝脏炎症和脂肪变性的改善作用

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中国肝脏病杂志（电子版） 2021年第2期13卷 40-51页

作者：马文婷刘旭凌陶乐吴柳杨广越张玮沈东晓张洁薛冬英刘成严萍上海中医药大学附属普陀医院感染科上海200062 上海中医药大学附属普陀医院肝病实验室上海200062 上海中医药大学附属普陀医院中心实验室上海200062

目的观察下瘀血汤对酒精性肝病(alcoholic liver disease,ALD)小鼠肝脏炎症和脂肪变性的改善作用,初步探讨其可能的作用机制。方法将48只雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、对照美他多辛组、对照下瘀血汤组、酒精组、酒精美他多辛组和酒... 详细信息

目的观察下瘀血汤对酒精性肝病(alcoholic liver disease,ALD)小鼠肝脏炎症和脂肪变性的改善作用,初步探讨其可能的作用机制。方法将48只雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、对照美他多辛组、对照下瘀血汤组、酒精组、酒精美他多辛组和酒精下瘀血汤组,每组各8只。对照组、对照美他多辛组和对照下瘀血汤组造模过程中全程给予液体对照饲料。酒精组、酒精美他多辛组和酒精下瘀血汤组采用4周慢性乙醇喂养加急性乙醇灌胃法造模,造模第3周第1 d起,对照下瘀血汤组和酒精下瘀血汤组小鼠以0.4678 g/kg下瘀血汤灌胃,对照美他多辛组和酒精美他多辛组小鼠以2.857 mg/kg美他多辛灌胃。其余组小鼠以等体积蒸馏水灌胃。第32 d酒精组、酒精美他多辛组和酒精下瘀血汤组小鼠以31.5%乙醇灌胃,对照组、对照美他多辛组、对照下瘀血汤组小鼠以45%糊精灌胃。9 h后处死小鼠,留取静脉血和肝脏。计算各组小鼠肝体比值,检测丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、血清甘油三酯(triglyceride,TG)及肝脏TG水平。采用HE染色和油红染色观察肝脏病理形态学变化。采用免疫组织化学法检测中性粒细胞标志物髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)的表达。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(real time polymerase chain reaction,RT-PCR)检测肝组织白细胞介素-6(interleukin 6,IL-6)、白细胞介素1β(interleukin 1β,IL-1β)和单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemotactic protein 1,MCP1)mRNA的相对表达量。采用Western blot和RT-PCR检测脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)、肉毒碱棕榈酰基转移酶-1α(carnitine palmitoyltransferase 1α,CPT-1α)和过氧化物酶体增殖激活受体α(peroxisome proliferator-activated receptor alpha,PPARα)的表达。结果与对照组相比,酒精组小鼠肝体比值[(4.78±0.48)%vs(3.71±0.36)%]、ALT [(44.71±25.37)U/L vs(20.41±7.11)U/L]、血清TG [(4.16±1.27)mmol/L vs(1.44±0.23)mmol/L]和肝脏TG [(27.15±6.43)mmol/g vs(10.74±9.83)mmol/g]均显著升高(P均下瘀血汤组小鼠ALT[11.79(10.17,24.48)U/Lvs(16.76±1.64)U/Lvs(44.71±25.37)U/L]、血清TG[(1.89±1.54)mmol/L vs 2.40(2.39,2.67)mmol/L vs(4.16±1.27)mmol/L]及肝组织TG [(14.18±5.88)mmol/g vs 19.77(5.92,20.90)mmol/g vs(27.15±6.43)mmol/g]水平均显著降低(P均下瘀血汤组IL-6(1.16±0.42 vs 0.93±0.42 vs 1.95±0.74)、IL-1β(0.75±0.19 vs 0.59±0.07 vs 2.06±0.64)、MCP1(1.27±0.25 vs 1.23±0.50 vs 2.98±1.13)及FAS(1.41±1.05 vs 1.43±0.30 vs 2.40±0.53)mRNA相对表达量均显著降低,CPT-1

关键词：下瘀血汤酒精性肝病炎症脂肪变性

下瘀血汤调控ACE2介导的RAS自稳抑制肝纤维化实验研究

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中西医结合研究 2021年第1期13卷 24-29,32页

作者：加秀凤谢纪文朱锐华中科技大学同济医学院附属协和医院中医科武汉430022 湖北中医药大学基础医学院武汉430065

目的探讨下瘀血汤是否通过恢复或重建肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensin system,RAS)的自稳平衡抑制肝纤维化进展。方法将27只Wistar雄性大鼠随机分为5组,即正常组、模型组、去除病因组、下瘀血汤组和氯沙坦钾组。除正常组外,各实... 详细信息

目的探讨下瘀血汤是否通过恢复或重建肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensin system,RAS)的自稳平衡抑制肝纤维化进展。方法将27只Wistar雄性大鼠随机分为5组,即正常组、模型组、去除病因组、下瘀血汤组和氯沙坦钾组。除正常组外,各实验组大鼠背部皮下注射2.5 mL/kg 40%四氯化碳橄榄油混悬液造模,并以下瘀血汤及氯沙坦钾干预肝纤维化进展,应用HE染色、Masson三色胶原染色和超微病理学方法观察肝脏组织结构的改变,采用免疫组织化学染色法检测各组AT1R、TGF-β1表达,采用RT-PCR及Western-blot法检测RAS相关因子的基因和蛋白表达。结果①HE染色、Masson三色胶原染色和超微病理学结果均显示去除病因组、下瘀血汤组、氯沙坦钾组和模型组肝纤维化程度依次加重。②RT-PCR及Western-blot结果显示,与正常组相比,其他组RAS相关分子ACE2、ACE、AngⅡ、AT1R及TGF-β1的mRNA及蛋白表达均升高;除去除病因组TGF-β1基因表达差异无统计学意义(P>0.05)之外,其他组间比较均具有统计学意义(P下瘀血汤组、氯沙坦钾组RAS相关分子ACE2、ACE、AngⅡ、AT1R及TGF-β1的mRNA及蛋白表达均显著降低(P下瘀血汤组ACE2的mRNA及蛋白表达显著升高(P下瘀血汤可能通过增加ACE2的表达,抑制ACE、AngⅡ和TGF-β1的表达,使RAS中促进肝纤维化的经典通路ACE-AngⅡ-AT1R转变为抑制肝纤维化的ACE2-Ang(1-7)-Mas受体轴为主导,从而抑制肝纤维化。

关键词：下瘀血汤血管紧张素转化酶2 肾素-血管紧张素系统肝纤维化

下瘀血汤调控中性粒细胞浸润抑制脂多糖诱导肝损伤机制

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上海中医药杂志 2020年第10期54卷 87-92页

作者：杨广越陶乐沈东晓马文婷张玮吴柳刘成上海中医药大学附属普陀医院中心实验室上海200062 上海中医药大学附属普陀医院感染科肝病实验室上海200062

目的以脂多糖(LPS)诱导的急性肝损伤为载体,探讨下瘀血汤对急性肝损伤的干预作用。方法将24只雄性C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、下瘀血汤组,每组8只;下瘀血汤组按照0.4678 g/kg剂量一次性灌胃下瘀血汤药液(相当于75 kg成人体质量... 详细信息

目的以脂多糖(LPS)诱导的急性肝损伤为载体,探讨下瘀血汤对急性肝损伤的干预作用。方法将24只雄性C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、下瘀血汤组,每组8只;下瘀血汤组按照0.4678 g/kg剂量一次性灌胃下瘀血汤药液(相当于75 kg成人体质量的10倍量),正常组和模型组给予等量的双蒸水,4 h后下瘀血汤组和模型组小鼠腹腔注射LPS(10 mg/kg),18 h后取材检测肝功能、病理学,免疫组化检测中性粒细胞标记物髓过氧化物酶(MPO)及CXC趋化因子配体15(CXCL15)表达,实时定量PCR检测肿瘤坏死因子(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、CXC趋化因子配体2(CXCL2)、CC趋化因子配体3(CCL3)、CXC趋化因子受体1(CXCR1)、白介素6(IL-6)基因表达。结果与正常组比较,模型组肝功能ALT和AST水平显著升高(P下瘀血汤对LPS诱导的肝功能损伤有显著改善作用(P下瘀血汤显著抑制中性细胞浸润。实时定量PCR结果显示,模型组TNF-α、IL-6炎症因子及趋化因子MCP-1、CXCL2、CCL3、CXCR1的mRNA表达显著升高(P下瘀血汤对LPS引起的炎症/趋化因子水平升高有显著抑制作用(P下瘀血汤对LPS诱导的肝损伤有显著的抑制作用。

关键词：急性肝损伤脂多糖小鼠中性粒细胞下瘀血汤

下瘀血汤抑制胰腺巨噬细胞浸润改善肝纤维化的机制研究

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上海中医药大学学报 2019年第2期33卷 66-72,79页

作者：沈东晓马文婷吴柳张玮陶乐薛冬英张洁刘成上海中医药大学附属普陀医院中心实验室上海200062 上海中医药大学附属普陀医院感染科上海200062

目的:评价下瘀血汤对四氯化碳(CCl_4)诱导的肝纤维化模型小鼠肝脏和胰腺病变的改善作用,并探讨其相关机制。方法:24只雄性C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组和下瘀血汤组,每组8只。模型组和下瘀血汤组小鼠腹腔注射10%CCl_4诱导肝纤维... 详细信息

目的:评价下瘀血汤对四氯化碳(CCl_4)诱导的肝纤维化模型小鼠肝脏和胰腺病变的改善作用,并探讨其相关机制。方法:24只雄性C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组和下瘀血汤组,每组8只。模型组和下瘀血汤组小鼠腹腔注射10%CCl_4诱导肝纤维化模型,正常组小鼠给予等体积橄榄油,每周3次,连续6周。造模第4周起,下瘀血汤组小鼠灌胃给予0.467 8 g/kg下瘀血汤药液,正常组和模型组小鼠给予等体积蒸馏水,每日1次,连续3周。药物干预期间,每周称量各组小鼠体质量。末次给药后,腹主动脉采血,分离肝、脾、胰腺组织并称重,计算肝脏指数和脾脏指数;试剂盒检测血清ALT、AST水平,HE染色和天狼星红染色后光镜下观察肝脏和胰腺组织病理形态学变化;免疫荧光检测肝组织α-SMA蛋白表达,免疫组化检测胰腺组织CD68、MCP-1及α-SMA蛋白表达。结果:①与正常组相比,模型组小鼠体质量明显降低(P下瘀血汤组小鼠体质量显著升高,肝脏指数、脾脏指数及血清ALT、AST水平显著降低(P下瘀血汤组小鼠肝组织胶原纤维间隔较窄、排列疏松,肝细胞变性、坏死及肝和胰腺组织炎症细胞浸润明显减轻。③与正常组相比,模型组肝组织α-SMA表达明显增多,胰腺组织CD68、MCP-1及α-SMA阳性表达显著升高(P下瘀血汤干预3周后,肝组织α-SMA表达明显减少,胰腺组织CD68、MCP-1及α-SMA阳性表达显著降低(P下瘀血汤可显著减轻肝纤维化过程中胰腺巨噬细胞浸润,抑制胰腺星状细胞活化。

关键词：下瘀血汤肝纤维化胰腺巨噬细胞小鼠

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周岱翰运用下瘀血汤辨治消化道肿瘤

辽宁中医杂志 2011年第12期38卷 2338-2339页

作者：周蓓梁艳菊广西中医学院广西南宁530001 广州市中医院肿瘤科广东广州510130

周岱翰教授擅长运用下瘀血汤辨治消化道肿瘤,极大拓展了下瘀血汤原有的应用范围。脾胃气机失调,气滞血瘀、脉络不通是其共同病机,治当以"通利"为要。遣方用药,灵活配伍毋忘扶正。

关键词：肿瘤下瘀血汤老中医经验

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加味下瘀血汤治子宫内膜异位症42例

四川中医 2001年第5期19卷 49-50页

作者：朱振华孙融融浙江余姚市中医院

采用活血化瘀散症 ,佐以益气补肾法 ,以加味下瘀血汤治疗子宫内膜异位症 4 2例 ,结果治愈 2例 ,显效 12例 ,有效 2 2例 ,无效 6例 ,总有效率 85 0 7% ,其中止痛效果 90 .0 % ,盆腔肿块消失、缩小 66.5% 。

关键词：子宫内膜异位症中医药疗法下瘀血汤治疗

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下瘀血汤抑制肝癌细胞生长的研究

交通医学 2018年第1期32卷 18-22页

作者：张浩邵建国卞兆连张玉南京中医药大学江苏210023 南京中医药大学附属南通市第三人民医院南通市肝病研究所

目的:研究下瘀血汤对肝癌Hep G2细胞生长的影响,并初步探讨其作用机制。方法:选取对数期生长阶段的Hep G2细胞,分别加入不含药血清、10%含药血清、20%含药血清,通过CCK-8法检测下瘀血汤含药血清对Hep-G2细胞的增殖影响;通过流式细胞仪(F... 详细信息

目的:研究下瘀血汤对肝癌Hep G2细胞生长的影响,并初步探讨其作用机制。方法:选取对数期生长阶段的Hep G2细胞,分别加入不含药血清、10%含药血清、20%含药血清,通过CCK-8法检测下瘀血汤含药血清对Hep-G2细胞的增殖影响;通过流式细胞仪(FCM)检测下瘀血汤含药血清对Hep-G2细胞的凋亡和周期的影响;通过PCR及Western-blot检测下瘀血汤含药血清对核仁纺锤体相关蛋白1(nucleolar spindle-associated pretein 1,Nu SAP1)的抑制作用。结果 :通过CCK-8实验,发现10%、20%含药血清在48小时(P下瘀血汤含药血清可能通过抑制Nusap1表达来抑制Hep-G2细胞的增殖及周期,促进其凋亡,下瘀血汤有望成为治疗肝细胞肝癌的有效中药。

关键词：下瘀血汤 Hep-G2细胞核仁纺锤体相关蛋白1 增殖凋亡周期

下瘀血汤全药与组分处方对免疫性肝纤维化大鼠肝组织α-SMA、TGF-β1、PDGF-βR mRNA表达影响的比较研究

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中华中医药学刊 2013年第10期31卷 2227-2229页

作者：陈少丽都广礼鲁艳平陶艳艳苏敏陈德兴上海中医药大学中药学院上海201203

目的:比较下瘀血汤全药与组分处方对免疫性肝纤维化大鼠肝组织α-SMA、TGF-β1、PDGF-βRmRNA表达的作用差异,探讨下瘀血汤全药与组分处方抗肝纤维化的作用机制。方法:Wistar大鼠随机分为正常组、造模组,造模组大鼠腹腔注射猪血清复制... 详细信息

目的:比较下瘀血汤全药与组分处方对免疫性肝纤维化大鼠肝组织α-SMA、TGF-β1、PDGF-βRmRNA表达的作用差异,探讨下瘀血汤全药与组分处方抗肝纤维化的作用机制。方法:Wistar大鼠随机分为正常组、造模组,造模组大鼠腹腔注射猪血清复制肝纤维化模型,每次0.5 mL/只,每周2次,共12周。造模成功后造模组大鼠随机分为模型组、下瘀血汤组、组分处方组,第8周开始下瘀血汤组、组分处方组大鼠造模同时口服给药,按10 mL·kg-1容积,下瘀血汤组每日2.34 g·kg-1,组分处方组每日0.648 g·kg-1,连续4周。正常组、模型组大鼠给与同体积生理盐水。12周末,处死动物,获取标本,realtime-PCR检测肝组织α-SMA、TGF-β1、PDGF-βRmRNA表达。结果:与正常组相比,模型组α-SMA、TGF-β1、PDGF-βRmRNA的表达均显著升高(P下瘀血汤组、组分处方组α-SMA、TGF-β1、PDGF-βRmRNA的表达明显降低(P下瘀血汤组α-SMA、TGF-β1、PDGF-βRmRNA表达明显降低(P下瘀血汤全药与组分处方可通过抑制α-SMA、TGF-β1、PDGF-βRmRNA表达而发挥抗肝纤维化作用,且下瘀血汤全药处方作用优于组分处方。

关键词：下瘀血汤肝纤维化组分处方