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逍遥散加减方对高催乳素血症肝郁脾虚型模型大鼠下丘脑多巴胺能神经元细胞程序性坏死的影响

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中医杂志 2024年第3期65卷 317-323页

作者：李燕李燕刘凯鑫代康莉刘晓杨惠罗丹贵州中医药大学贵州省贵阳市550001

目的探讨逍遥散加减方治疗肝郁脾虚型高催乳素血症(HPRL)的可能作用机制。方法96只SD雌性大鼠随机分为正常组16只,造模组80只。造模组大鼠采用慢性不可预知应激联合甲氧氯普胺腹腔注射构建HPRL肝郁脾虚型模型大鼠。将80只造模成功的大... 详细信息

目的探讨逍遥散加减方治疗肝郁脾虚型高催乳素血症(HPRL)的可能作用机制。方法96只SD雌性大鼠随机分为正常组16只,造模组80只。造模组大鼠采用慢性不可预知应激联合甲氧氯普胺腹腔注射构建HPRL肝郁脾虚型模型大鼠。将80只造模成功的大鼠随机分为模型组,逍遥散加减方高、中、低剂量组和甲磺酸溴隐亭组,每组16只。逍遥散加减方高、中、低剂量组分别给予逍遥散加减方60、30、15 g/(kg·d)灌胃,甲磺酸溴隐亭组予以甲磺酸溴隐亭片1 mg/(kg·d)灌胃,正常组及模型组给予生理盐水10 ml/(kg·d)灌胃,连续给药14天。ELISA法检测血清催乳素(PRL)含量;免疫组化测定大鼠下丘脑肿瘤坏死因子α(TNF-α)和酪氨酸羟化酶(TH)表达;采用Western blot法检测下丘脑肿瘤坏死因子受体1(TNFR1)蛋白表达;RT-PCR法检测下丘脑受体相互作用蛋白激酶3(RIP3)mRNA表达;免疫荧光法检测RIP3和多巴胺能神经元的共表达情况。结果与正常组比较,模型组血清PRL含量升高,下丘脑TNF-α、TNFR1、RIP3mRNA及RIP3与多巴胺能神经元共表达阳性细胞数显著升高,TH表达降低(P下丘脑TNF-α表达降低,甲磺酸溴隐亭组和逍遥散加减方中、高剂量组TH表达显著升高,逍遥散加减方各剂量组和甲磺酸溴隐亭组血清PRL含量,下丘脑TNFR1、RIP3 mRNA,RIP3与多巴胺能神经元共表达阳性细胞数均显著降低(P下丘脑RIP3 mRNA表达降低,逍遥散加减方高剂量组RIP3与多巴胺能神经元共表达阳性细胞数显著升高(P下丘脑多巴胺能神经元细胞程序性坏死,影响DA表达,从而调节PRL水平,可能是其治疗HPRL肝郁脾虚型的机制之一。

关键词：高催乳素血症逍遥散下丘脑多巴胺能神经元疏肝健脾法程序性坏死

下丘脑神经干细胞调控能量平衡与肥胖的研究进展

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南京医科大学学报（自然科学版） 2024年第5期44卷 738-742页

作者：马震武朱浩王晓东南京医科大学第一附属医院内分泌科江苏南京210029

近年来,作为能量代谢的中枢,下丘脑在肥胖发生发展中的作用已愈发得到重视。下丘脑中存在一类控制神经发生的干细胞,称为下丘脑神经干细胞(hypothalamic neural stem cell,htNSC),其除了具有成体神经发生的作用外,还可感受机体代谢状态... 详细信息

近年来,作为能量代谢的中枢,下丘脑在肥胖发生发展中的作用已愈发得到重视。下丘脑中存在一类控制神经发生的干细胞,称为下丘脑神经干细胞(hypothalamic neural stem cell,htNSC),其除了具有成体神经发生的作用外,还可感受机体代谢状态并作出反应,表现为改变分化方向与分泌外泌体功能、抑制炎症通路活化等,从而调节机体能量代谢平衡。通过对下丘脑及htNSC的研究,可深入了解肥胖时机体能量代谢紊乱背后的机制,并寻找针对肥胖及代谢综合征的潜在治疗靶点。

关键词：肥胖能量平衡下丘脑神经干细胞外泌体

牛下丘脑CART转录后调控关键miRNA的筛选与鉴定

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生物工程学报 2024年

作者：成俊丽闫俊蓉侯淑宁朱芷葳李鹏飞山西农业大学动物科学学院山西农业大学生命科学学院

本研究旨在探究微RNA (microRNA， miRNA)对牛下丘脑可卡因-苯丙胺调节转录肽(cocaine- and amphetamine-regulated transcript peptide， CART)的转录后调控作用，并筛选调控关键miRNA。通过生物信息学分析来预测与牛CART 3′非翻译区(... 详细信息

本研究旨在探究微RNA (microRNA， miRNA)对牛下丘脑可卡因-苯丙胺调节转录肽(cocaine- and amphetamine-regulated transcript peptide， CART)的转录后调控作用，并筛选调控关键miRNA。通过生物信息学分析来预测与牛CART 3′非翻译区(3′ untranslated regions， 3′UTR)结合的潜在miRNA，发现CART 3′UTR存在7个miRNA结合位点，即bta-miR-377、bta-miR-331-3p、bta-miR-491、bta-miR-493、bta-miR-758、bta-miR-877和bta-miR-381；使用逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription-PCR， RT-PCR)技术检测CART基因与靶miRNA在牛下丘脑内源性表达情况，发现它们均在牛下丘脑组织内表达；通过双荧光素酶报告实验验证CART 3′UTR与靶细胞miRNA结合位点，证明了CART 3′UTR与7个miRNA均具有靶向结合关系；通过细胞实验检测靶miRNA对外源性CART基因与CART蛋白表达的影响并筛选调控关键miRNA，结果表明，7个miRNA均能抑制外源CART信使RNA (messenger RNA， mRNA)的表达，其中以bta-miR-491的抑制作用最强，bta-miR-377、bta-miR-331-3p、bta-miR-491、bta-miR-493及bta-miR-381均能抑制外源性CART蛋白表达，其中以bta-miR-381的抑制作用最强；通过动物活体实验研究调控关键miRNA对下丘脑CART基因、CART蛋白表达及血清CART浓度的影响，结果表明，miR-491和miR-381可结合CART 3′UTR位点、调节下丘脑CART内源性表达并影响其血清浓度。这些结果说明，miR-491和miR-381是调节牛下丘脑CART表达的主要miRNA，可通过调节CART内源性表达进而影响血清CART浓度。

关键词：牛下丘脑 CART miR-491/381 摄食

交泰丸对高脂饮食诱导肥胖小鼠下丘脑炎症的改善作用

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中成药 2024年

作者：王晖袁琳胡娜林敏姜逸陆敏王啸南陆雄钟霄毓上海中医药大学科技实验中心细胞生物与组织病理学实验室

目的研究交泰丸及单味药对高脂饮食诱导肥胖小鼠下丘脑炎症的作用。方法将C57BL/6J小鼠随机分为正常组（15只）与高脂组（75只），高脂饮食造模12周后随机分为模型组、交泰丸组、黄连组、肉桂组、二甲双胍组，每组15只。给药6周后检测... 详细信息

目的研究交泰丸及单味药对高脂饮食诱导肥胖小鼠下丘脑炎症的作用。方法将C57BL/6J小鼠随机分为正常组（15只）与高脂组（75只），高脂饮食造模12周后随机分为模型组、交泰丸组、黄连组、肉桂组、二甲双胍组，每组15只。给药6周后检测小鼠体质量及空腹血糖（FBG）水平，RT-qPCR法检测下丘脑IL-1β、IL-6、TNF-α、Socs3mRNA表达，Western blot法检测下丘脑TLR4、MyD88、IKKβ和活化NF-κB蛋白表达，免疫组化法检测下丘脑Iba1、GFAP表达，透射电镜观察神经组织的超微结构变化。结果与模型组比较，各用药组下丘脑IL-1β、IL-6、TNF-α、Socs3mRNA表达降低（P＜0.01），神经细胞在透射电镜下数量和形态上有所改善，交泰丸组、黄连组和二甲双胍组小鼠体质量和FBG水平降低（P＜0.05），TLR4、MyD88、IKKβ、p-NF-κB蛋白表达均降低（P＜0.05），下丘脑星形胶质细胞和小胶质细胞减少（P＜0.05），肉桂组p-NF-κB蛋白表达降低（P＜0.05）。结论交泰丸及其单味药均具有一定改善高脂饮食诱导肥胖小鼠下丘脑炎症的作用。

关键词：交泰丸下丘脑炎症神经胶质细胞 TLR4/NF-κB信号通路

更欣汤对围绝经期失眠模型大鼠血清雌激素水平及下丘脑雌激素受体的影响

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中华中医药杂志 2024年第1期39卷 147-151页

作者：王艺璇汤玲孙天琳史梅莹陆义芹李修恒成都中医药大学成都610032 北京中医药大学东直门医院北京100700 北京市第一中西医结合医院北京100000 中国中医科学院望京医院北京100102

目的:探讨国医大师肖承悰教授临床验方“更欣汤”对围绝经期失眠模型大鼠行为、血清雌激素水平及下丘脑雌激素受体表达的影响。方法:选取60只7周龄雌性SD大鼠,采用雷公藤多苷溶液灌胃联合对氯苯丙氨酸(PCPA)混悬液腹腔注射诱导围绝经期... 详细信息

目的:探讨国医大师肖承悰教授临床验方“更欣汤”对围绝经期失眠模型大鼠行为、血清雌激素水平及下丘脑雌激素受体表达的影响。方法:选取60只7周龄雌性SD大鼠,采用雷公藤多苷溶液灌胃联合对氯苯丙氨酸(PCPA)混悬液腹腔注射诱导围绝经期失眠大鼠模型。将26只造模成功的大鼠随机分为模型组和中药组各13只,另设空白组12只;中药组每日予更欣汤颗粒剂溶液1.8 g/kg灌胃,空白组和模型组大鼠每日予等量0.9%氯化钠溶液灌胃,周期14 d。利用旷场实验(OFT)观察大鼠行为学改变,放射免疫分析法检测大鼠血清雌二醇(E2)水平,Western Blot法检测大鼠下丘脑雌激素受体(ER)蛋白表达,RT-qPCR法检测大鼠下丘脑ERα、βmRNA表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠OFT水平与垂直活动得分均显著降低(P下丘脑ERα、ERβ蛋白表达显著下降(P下丘脑ERβ蛋白表达显著升高(P下丘脑ER不同亚型蛋白表达,从而改善大鼠睡眠状态。

关键词：更欣汤围绝经期失眠矿场实验下丘脑雌激素雌激素受体

新西兰兔下丘脑qPCR内参基因的筛选和验证

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畜牧与兽医 2024年第9期56卷 48-55页

作者：姜幸慧陈晶张洺瑞邱水玲甘乾福福建农林大学动物科学学院福建福州350002

为筛选适合新西兰白兔下丘脑的最佳内参基因,试验选定甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)、肌动蛋白β(ACTB)、β-2-微球蛋白(B2M)、酪氨酸3-单加氧酶(YWHAZ)、次黄嘌呤磷酸核糖转移酶1(HPRT1)、核糖体蛋白L4(RPL4)和TATA-box结合蛋白(TBP)共7... 详细信息

为筛选适合新西兰白兔下丘脑的最佳内参基因,试验选定甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)、肌动蛋白β(ACTB)、β-2-微球蛋白(B2M)、酪氨酸3-单加氧酶(YWHAZ)、次黄嘌呤磷酸核糖转移酶1(HPRT1)、核糖体蛋白L4(RPL4)和TATA-box结合蛋白(TBP)共7个候选内参基因,利用实时荧光定量PCR(qPCR)技术对不同年龄、性别及发情状态的新西兰白兔下丘脑组织的基因表达水平进行检测;通过RefFinder在线软件综合ΔCt、GeNorm、NormFinder和BestKeper等4种算法的分析结果来评估内参基因表达的稳定性,并选取在下丘脑表达的功能基因雌激素受体(ER1)、孕激素受体(PGR)和RFamide神经肽VF(NPVF)对候选内参基因稳定性和评价结果的可靠性进行验证。结果:不同年龄的雌性新西兰白兔下丘脑稳定表达的内参基因是YWHAZ和GAPDH;雄性新西兰白兔下丘脑稳定性表达的内参基因YWHAZ和TBP,而不同发情期新西兰白兔适合使用HPRT1和YWHAZ作为内参基因。当使用不同内参基因进行标准化时,目的基因表达水平受到样本不同生理状态而出现明显变化,强调了先行验证内参基因对于qPCR研究基因表达水平的重要性。

关键词：新西兰白兔下丘脑内参基因稳定性评价和验证

双峰驼繁殖与非繁殖季下丘脑、垂体差异基因筛选与分析

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内蒙古农业大学学报(自然科学版) 2024年

作者：谢望为刘鹤洁吉木斯娜哈雅哈斯高娃张永昌 TSERENNADMID Sodnompi 士惠杰张馨娜娜仁花内蒙古农业大学动物科学学院

下丘脑－垂体－性腺轴（Hypothalamus-pituitary-gonad axis，HPGA）是双峰驼繁殖过程中重要的神经内分泌调节中枢。双峰驼HPGA上下丘脑、垂体季节性繁殖相关基因未得到充分研究。本研究以繁殖（BS组）与非繁殖季节（NBS组）的双峰驼母... 详细信息

下丘脑－垂体－性腺轴（Hypothalamus-pituitary-gonad axis，HPGA）是双峰驼繁殖过程中重要的神经内分泌调节中枢。双峰驼HPGA上下丘脑、垂体季节性繁殖相关基因未得到充分研究。本研究以繁殖（BS组）与非繁殖季节（NBS组）的双峰驼母驼下丘脑、垂体组织为研究对象，通过酶联免疫法（ELISA）测定组织上促性腺激素释放激素（GnRH）、褪黑素（MLT）、促卵泡素（FSH）、促黄体素（LH）、雌激素（E2）和孕激素（PROG）等生殖激素的浓度差异，通过转录组测序技术筛选影响季节性繁殖关键基因，使用RT-qPCR（Quantitative real-time PCR）检测在双峰驼下丘脑、垂体组织上关键基因的mRNA水平。结果显示，在繁殖与非繁殖季节上下丘脑、垂体组织分别检测出553个和891个差异表达mRNA，在下丘脑筛选出GUCY1A2、RORA、PLA2G4F和IGF1等关键候选基因，在垂体中筛选出PLD1、FBXL3、APC、CDC20等关键候选基因，这些基因可能在生殖激素分泌、排卵、细胞周期卵泡发育、卵母细胞减数分裂、昼夜节律夹带和昼夜节律生物钟等方面参与调控双峰驼季节性繁殖并起到重要作用。经RT-qPCR技术验证，上述8个关键候选基因的表达模式与转录组测序结果相一致，为揭示双峰驼季节性繁殖的调控机制以及提高繁殖力提供理论依据。

关键词：双峰驼下丘脑垂体生殖激素繁殖和非繁殖季节转录组测序

红光和白光条件下京海黄鸡下丘脑组织转录组分析

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中国家禽 2024年

作者：李婉晴刘超王一曼王莹王金玉扬州大学动物科学与技术学院

研究通过比较红光和白光条件下京海黄鸡下丘脑的转录组测序，筛选红光影响下丘脑生殖激素分泌的关键基因。试验将300只16周龄京海黄鸡母鸡随机分为2组，饲养于红光（660 nm）和白光（400～760 nm）条件下，每组随机选择3只京海黄鸡，采... 详细信息

研究通过比较红光和白光条件下京海黄鸡下丘脑的转录组测序，筛选红光影响下丘脑生殖激素分泌的关键基因。试验将300只16周龄京海黄鸡母鸡随机分为2组，饲养于红光（660 nm）和白光（400～760 nm）条件下，每组随机选择3只京海黄鸡，采集下丘脑组织，进行转录组测序和分析。结果显示：与白光组相比，红光组共获得172个差异表达基因（DEGs），其中63个DEGs上调，109个DEGs下调；结合GO和KEGG数据库对DEGs进行功能注释和通路分析显示，DEGs显著富集到神经活性配体一受体相互作用、酪氨酸代谢、钙离子信号通路和间隙连接通路等信号通路；RT-qPCR对随机挑选的6个基因验证结果与测序结果一致。结果表明，TPH2、VAX1、EOMES、CFTR和STRA6 5个差异基因与下丘脑生殖激素分泌相关，其可能在红光影响京海黄鸡下丘脑生殖激素分泌中发挥重要作用。

关键词：京海黄鸡红光下丘脑转录组

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饥饿胁迫下罗非鱼下丘脑转录组研究

四川大学学报(自然科学版) 2024年 1-10页

作者：刘天强孙才云王亚军通威农业发展有限公司四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室西昌学院动物科学学院

有鉴于鱼类摄食调控具明显种属差异性，为解析吉富罗非鱼（Oreochromis niloticus）食欲调控机制，本研究采用RNA-Seq测序技术，通过对罗非鱼禁饲3 d和6 d以模拟长短期饥饿胁迫压力，针对其下丘脑组织进行转录组分析.发现饥饿胁迫下多... 详细信息

有鉴于鱼类摄食调控具明显种属差异性，为解析吉富罗非鱼（Oreochromis niloticus）食欲调控机制，本研究采用RNA-Seq测序技术，通过对罗非鱼禁饲3 d和6 d以模拟长短期饥饿胁迫压力，针对其下丘脑组织进行转录组分析.发现饥饿胁迫下多个基因差异表达，针对这些基因的聚类分析、KEGG分析、GO分析以及蛋白互作分析支持罗非鱼黑皮质素系统参与罗非鱼下丘脑食欲的核心调控，此外，多个下丘脑核心调控因子包括食欲肽，促生长激素神经肽等在饥饿胁迫下差异表达，共同参与罗非鱼摄食调控.以上分析结果初步解析了罗非鱼饥饿胁迫下下丘脑差异基因表达图谱.

关键词：罗非鱼饥饿胁迫禁食下丘脑转录组