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损毁外侧丘系背核对耳鸣小鼠下丘GAD67/NR2A表达的影响

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听力学及言语疾病杂志 2023年第3期31卷 257-261页

作者：邬信芳马春蕾王雁鹏顾晓孙文凯孙卉高伟李钦山东省临沂市人民医院耳鼻咽喉头颈外科临沂267003 滨州医学院神经科学研究所

目的探讨外侧丘系背核(dorsal nuclei of lateral lemniscus,DNLL)在耳鸣发生中的作用及可能机制。方法选取听力正常的雄性C57B/6小鼠24只,随机分为4组,每组6只。A组每天腹腔注射水杨酸钠350 mg/kg,连续14 d;B组同A组法注射等量生理盐... 详细信息

目的探讨外侧丘系背核(dorsal nuclei of lateral lemniscus,DNLL)在耳鸣发生中的作用及可能机制。方法选取听力正常的雄性C57B/6小鼠24只,随机分为4组,每组6只。A组每天腹腔注射水杨酸钠350 mg/kg,连续14 d;B组同A组法注射等量生理盐水;C组脑立体定位仪下右侧DNLL内注射10 mmol/L的红藻氨酸0.25μl造成化学损毁;D组同C组法注射等量生理盐水。处理前后检测各组小鼠ABR阈值、旷场、高架十字、强迫游泳、声刺激-跳杆反射等行为学指标;并于处理后第14 d,用Western blot法检测各组下丘组织中谷氨酸脱羧酶67(GAD67)、N-甲基-D-天冬氨酸受体2A(NR2A)的表达含量。结果与处理前相比较,处理后①ABR:A组小鼠纯音32、16、8 kHz和click声反应阈值均明显升高(P下丘组织中GAD67表达明显降低,NR2A明显升高;C组小鼠DNLL损毁侧GAD67表达明显降低,NR2A无明显变化;DNLL未损毁侧NR2A表达明显升高,而GAD67无明显变化。结论损毁DNLL可以导致小鼠耳鸣,其机制可能是通过减少对下丘抑制性神经递质的输入以下调下丘中GAD67的表达、同时上调NR2A的表达而实现的。

关键词：耳鸣外侧丘系背核下丘 GAD67 NR2A

全细胞膜片钳研究离体小鼠下丘亚核神经元电生理特性

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生理学报 2015年第4期67卷 370-378页

作者：刘玲杜小凤付欣李慧贾慧娟王欣罗峰陈其才华中师范大学生命科学学院遗传调控与整合生物学重点实验室武汉430079

下丘(inferior colliculus,IC)是听觉通路的重要中继站。本实验采用红外可视脑片全细胞膜片钳技术对昆明小鼠IC神经元的电生理特性进行研究。共记录获得88个神经元,其中背侧核(dorsal cortex of IC,ICd)神经元21个,中央核(central nucle... 详细信息

下丘(inferior colliculus,IC)是听觉通路的重要中继站。本实验采用红外可视脑片全细胞膜片钳技术对昆明小鼠IC神经元的电生理特性进行研究。共记录获得88个神经元,其中背侧核(dorsal cortex of IC,ICd)神经元21个,中央核(central nucleus of IC,ICc)神经元43个,外侧核(external cortex of IC,ICx)神经元24个。根据神经元对注入正电流的发放模式,将其分为起始型(6.8%,n=6),适应型(39.8%,n=35)和持续型(53.4%,n=47)三种类型。约一半的神经元(49/88)具有超极化电流激活的内向电流(hyperpolarization-activated inward current,Ih)。ICd和ICc神经元主要表现为持续型(61.9%和67.4%),ICx主要为适应型(75%)。比较发现,ICd、ICc及ICx神经元之间在动作电位发放阈值和膜时间常数等参数上存在显著差异。以上结果表明IC亚核神经元的电生理特性存在差异,这些差异可能与神经元的类型、它们所接受的投射以及在声信息处理中作用不同相关。

关键词：全细胞膜片钳下丘发放类型小鼠

电针对年龄相关性聋豚鼠下丘和听皮层儿茶酚氧位甲基转移酶表达的影响

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针刺研究 2017年第2期42卷 145-148页

作者：刘淑云邓力强杨烨殷泽登西南医科大学附属医院耳鼻咽喉头颈外科四川泸州646000 湖南省郴州市第一人民医院儿童耳鼻喉科湖南郴州423000 西南医科大学基础医学院生物化学教研室四川泸州646000

目的:观察D-半乳糖所致的年龄相关性聋(AHL)豚鼠下丘和听皮层儿茶酚氧位甲基转移酶(COMT)表达,探讨电针防治AHL的可能机制。方法:3月龄豚鼠随机分为对照组、模型组、电针组,每组10只,另10只18月龄豚鼠为老年组。以D-半乳糖颈背部皮下注... 详细信息

目的:观察D-半乳糖所致的年龄相关性聋(AHL)豚鼠下丘和听皮层儿茶酚氧位甲基转移酶(COMT)表达,探讨电针防治AHL的可能机制。方法:3月龄豚鼠随机分为对照组、模型组、电针组,每组10只,另10只18月龄豚鼠为老年组。以D-半乳糖颈背部皮下注射复制AHL模型。电针组造模同时予以电针"翳风"穴和"听宫"穴,每日1次,每次15min,共6周。治疗后测定各组听性脑干反应(ABR)Ⅲ波潜伏期,Western blot法检测各组下丘及听皮层COMT的表达。结果:与对照组比较,模型组和老年组ABRⅢ波潜伏期显著延长(P下丘和听皮层COMT表达显著降低(P下丘和听皮层COMT表达显著增加(P下丘和听皮层COMT表达有关。

关键词：电针年龄相关性聋下丘听皮层儿茶酚氧位甲基转移酶

小鼠中脑下丘神经元对单、双耳听觉信息突触反应的多样性研究

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听力学及言语疾病杂志 2021年第1期29卷 58-64页

作者：林涛何娜刘秀萍鄢俊广州市第一人民医院麻醉科广州510180 加拿大卡尔加里大学Cumming医学院Hotchkiss脑科研究所生理学与药理学系广州医科大学附属第二医院神经内科

目的研究小鼠中脑下丘单个神经元对单耳对侧、同侧声刺激的突触反应及双侧同时刺激的整合反应,探索其潜在的神经生理学基础与神经环路。方法52只正常C57小鼠,采用声刺激系统记录下丘单个神经元对单耳对侧、单耳同侧声刺激的频率-幅度反... 详细信息

目的研究小鼠中脑下丘单个神经元对单耳对侧、同侧声刺激的突触反应及双侧同时刺激的整合反应,探索其潜在的神经生理学基础与神经环路。方法52只正常C57小鼠,采用声刺激系统记录下丘单个神经元对单耳对侧、单耳同侧声刺激的频率-幅度反应域(frequency-amplitude response areas,FARA),获得神经元的特征频率(characteristic frequency,CF)和最低阈值(minimum threshold,MT)。采用活体全细胞膜片钳技术,在最适声刺激条件下(即声音参数为CF与MT),记录下丘同一个神经元分别对单耳对侧、单耳同侧声刺激的突触反应,以及双侧声音同时刺激时的突触整合反应,对记录到的突触反应及整合反应进行分类分析。结果共记录到146个下丘神经元,CF-对侧与CF-同侧分别为14.9±4.8、14.7±5.0 kHz,两者成直线相关且相关系数为1.0258;MT-对侧为19.3±19.3 dB,显著低于MT-同侧(45.1±18.6 dB),差异有统计学意义(P下丘双耳神经元各自具有不同的双侧突触结构和神经环路。

关键词：下丘兴奋性突触后电位抑制性突触后电位双耳整合

普氏蹄蝠下丘单反应和双反应神经元加工多普勒频移补偿信号的特点及生理机制

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生物化学与生物物理进展 2018年第7期45卷 723-735页

作者：王俏超孔慧芳程亚稳王慧美付子英陈其才唐佳华中师范大学生命科学学院遗传调控与整合生物学湖北省重点实验室武汉430079

恒频-调频(constant frequency-frequency modulation,CF-FM)蝙蝠独特的多普勒频移补偿(Doppler-shift compensation,DSC)行为可保证其对回声信息的精确提取.那么听中枢加工DSC信号的适应性机制是什么?本实验模拟CF-FM蝙蝠DSC后的回声定位信号,研究下丘(inferior colliculus,IC)神经元加工DSC信号的特点及生理机制.实验共获得117个IC神经元,在CF-FM声刺激下,神经元表现为single-on(SO,n=83)和double-on(DO,n=34)两种反应模式.无论是在蝙蝠的正向还是负向补偿过程中,SO和DO神经元对回声反应恢复到50%时的双声刺激间隔(inter-pulse interval,IPI)值,均会随补偿条件的改变而发生变化.当双声刺激由无补偿转变为最佳补偿条件时,两类神经元的50%IPI显著缩短(P<0.001),但SO神经元50%IPI缩短率超过70%的神经元数目较DO神经元多,且偏好正向补偿的IC神经元中,SO神经元的平均DSC范围也要显著宽于DO神经元(P<0.05).该研究结果提示,IC中SO神经元可能较DO神经元更能充分利用蝙蝠DSC行为,来提高对回声反应的恢复能力,以最大程度地获取猎物信息并准确判断与猎物的相对速度.

关键词：下丘单反应神经元双反应神经元多普勒频移补偿双声刺激间隔

普氏蹄蝠下丘处理多普勒频移补偿信号的强度依赖性

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普氏蹄蝠下丘处理多普勒频移补偿信号的强度依赖性

作者：韩洋洋华中师范大学

学位级别：硕士

为了应对多变的飞行环境,回声定位蝙蝠在巡航和捕食过程中进化出了主动的强度补偿和多普勒频移补偿(Doppler-shift compensation,DSC)行为,相关研究也证实听中枢在加工声信号强度与频率时,二者之间存在一定匹配关系。那么回声强度变化... 详细信息

为了应对多变的飞行环境,回声定位蝙蝠在巡航和捕食过程中进化出了主动的强度补偿和多普勒频移补偿(Doppler-shift compensation,DSC)行为,相关研究也证实听中枢在加工声信号强度与频率时,二者之间存在一定匹配关系。那么回声强度变化是否会影响听中枢对DSC相关信息的处理以及回声强度补偿与DSC之间是否存在协同作用,目前尚不清楚。本研究以恒频-调频(constant frequency-frequency modulation,CF-FM)蝙蝠——普氏蹄蝠(Hipposideros pratti)为研究对象,通过设定双声刺激以模拟在自然环境中蝙蝠发生多普勒频移补偿后的发声与回声,并运用在体细胞外电生理技术记录下丘(inferior collculus,IC)神经元在不同多普勒频移补偿值下的反应。进一步改变回声强度,探究蝙蝠IC神经元在处理多普勒频移补偿信号时是否具有强度依赖性,实验结果如下:(1)实验共记录到203个IC声敏感神经元,通过分析神经元基本参数间的关系,发现神经元的最佳频率(best frequency,BF)(P下的最佳补偿值变化情况。在回声强度分别为MT+30 dB、MT+20 dB、MT+10 dB和MT时,IC神经元的最佳补偿值的平均值分别为-2.78、-2.69、-2.47和-2.38 kHz。该结果显示随着回声强度的降低,最佳补偿值平均值有轻微降低,只有在回声强度从MT+30 dB降为MT时,神经元的最佳补偿值才呈现出显著差异(P下,随着回声强度的降低,50%IPI显著增加(P下稳定的DSC行为。

关键词：普氏蹄蝠回声强度多普勒频移补偿下丘

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水杨酸钠致耳鸣大鼠下丘GDNF的表达

听力学及言语疾病杂志 2020年第2期28卷 177-180页

作者：周爽廖华王文静杨琨汪雷杨希林武汉大学人民医院耳鼻咽喉头颈外科武汉430060

目的探究胶质细胞源性神经营养因子(glial cell-derived neurotrophic factor,GDNF)在慢性注射水杨酸钠致耳鸣大鼠模型下丘中的表达及其在耳鸣发生发展中的作用机制。方法将24只大鼠根据腹腔注射给药方式分为4组,每组6只:对照组(NS组,... 详细信息

目的探究胶质细胞源性神经营养因子(glial cell-derived neurotrophic factor,GDNF)在慢性注射水杨酸钠致耳鸣大鼠模型下丘中的表达及其在耳鸣发生发展中的作用机制。方法将24只大鼠根据腹腔注射给药方式分为4组,每组6只:对照组(NS组,生理盐水连续注射14天)、急性组(AS组,水杨酸钠200 mg/kg单次注射)、慢性组(SS组,水杨酸钠200 mg/kg连续注射14天,每天2次)、恢复组(RS组,注射方式及时间同慢性组,然后正常喂养14天)。对各组大鼠经上述处理后行听觉惊跳反射前刺激抑制试验(gap-prepulse inhibition of the acoustic startle reflex,GPIAS)检测耳鸣样行为,然后处死并迅速分离下丘,通过蛋白质印迹法(Western blot)检测下丘GNDF及其信号通路RET、P-PI3K p85α、P-AKT蛋白表达量;通过荧光定量PCR(RT-qPCR)检测下丘GDNF、RET、PI3K、AKT1mRNA表达量。结果4组大鼠中仅SS组大鼠GPIAS值在12和16 kHz明显下降,说明仅SS组大鼠出现耳鸣样行为;Western blot结果显示SS组大鼠下丘GDNF、RET、P-PI3K p85α、P-AKT蛋白表达量较NS组、AS组、RS组均降低(均为P下丘GDNF、RET、PI3K、AKT1mRNA表达量较NS组、AS组、RS组均降低(均为P下丘GDNF及其介导的GDNF/RET/PI3K/AKT信号通路表达降低,推测GDNF及其信号通路在耳鸣发生发展中有重要作用。

关键词：胶质细胞源性神经营养因子水杨酸钠耳鸣下丘大鼠

普氏蹄蝠下丘对回声定位信号恒频成分的群体加工

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兽类学报 2014年第3期34卷 217-224页

作者：徐娜李娟石青付子英唐佳陈其才华中师范大学生命科学学院遗传调控与整合生物学湖北省重点实验室武汉430079

利用听觉诱发电位和计算机叠加平均技术研究了普氏蹄蝠下丘(Inferior colliculus,IC)500–4 000μm记录深度间,神经元群对3个谐波恒频(Constant frequency,CF)声刺激(CF1-CF3)的反应。结果显示,在蝙蝠回声定位信号CF成分刺激下,其IC的... 详细信息

利用听觉诱发电位和计算机叠加平均技术研究了普氏蹄蝠下丘(Inferior colliculus,IC)500–4 000μm记录深度间,神经元群对3个谐波恒频(Constant frequency,CF)声刺激(CF1-CF3)的反应。结果显示,在蝙蝠回声定位信号CF成分刺激下,其IC的诱发电位包括2-4个波,在1 000μm以下的记录区域,3种刺激均能诱发on-off反应,on-反应的幅度均在3 000μm达最大之后减小(P0.05)和CF3(P>0.05)的潜伏期则无此单调性。结果表明神经元群体加工CF1-CF3的on-反应存在一致性变化,提示其对行为相关的声信号加工可能存在频率层间复杂的相互作用;对CF信号加工的off-反应对主频附近声较敏感,提示其可能在恒频-调频蝙蝠的多普勒频移、捕获振翅昆虫信息或种间交流中起着某种作用。

关键词：普氏蹄蝠下丘听觉诱发电位 on-off 反应

水杨酸钠致耳鸣大鼠听皮层及下丘GDNF表达变化的研究

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水杨酸钠致耳鸣大鼠听皮层及下丘GDNF表达变化的研究

作者：周爽武汉大学

学位级别：硕士

目的:探究胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）对水杨酸钠致耳鸣大鼠听皮层及下丘的影响及保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法:将24只大鼠根据腹腔注射给药方式随机分为4组,每组各6只:对照组（NS组,生理盐水连续注射14天）、急性组（A... 详细信息

目的:探究胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）对水杨酸钠致耳鸣大鼠听皮层及下丘的影响及保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法:将24只大鼠根据腹腔注射给药方式随机分为4组,每组各6只:对照组（NS组,生理盐水连续注射14天）、急性组（AS组,水杨酸钠200mg/kg单次注射）、慢性组（SS组,水杨酸钠200mg/kg连续注射14天,每天2次）、恢复组（RS组,注射方式及时间同慢性组,然后正常喂养14天）。对各组大鼠行上述处理后行听觉惊跳反射前刺激抑制试验（gap-prepulse inhibition of the acoustic startle reflex,GPIAS）检测耳鸣样行为,将各组大鼠处死并迅速分离听皮层及下丘,通过蛋白质印迹法（Western blot）检测听皮层GDNF、RET、RAS、P-ERK及下丘GNDF、RET、P-PI3K p85α、P-AKT蛋白表达量;通过荧光定量PCR（RTq PCR）检测听皮层GDNF、RET、RAS、ERK1及下丘GDNF、RET、PI3K、AKT1m RNA表达量。结果:1.各组大鼠中仅SS组大鼠GPIAS值在12k Hz和16k Hz明显下降,显示仅SS组大鼠出现耳鸣样行为,长期慢性注射水杨酸钠可致大鼠耳鸣的产生。2.Western blot结果显示SS组大鼠听皮层GDNF、RET、RAS、P-ERK及下丘GDNF、RET、P-PI3K p85α、P-AKT蛋白表达量相对于NS组、AS组、RS组均降低,差异具有统计学意义;3.RT-q PCR结果显示SS组大鼠听皮层GDNF、RET、RAS、ERK1及下丘GDNF、RET、PI3K、AKT1m RNA表达量相对于NS组、AS组、RS组均降低,差异具有统计学意义。结论:GDNF对耳鸣大鼠听皮层及下丘具有一定的保护作用,其作用机制可能与听皮层中GDNF-RET-RAS-ERK及下丘中GDNF-RET-PI3K-AKT信号通路有关。

关键词： GDNF 耳鸣水杨酸钠听皮层下丘