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Slug在调控宫颈鳞状细胞癌上皮-间充质转变中的意义

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临床与实验病理学杂志 2012年第9期28卷 975-978页

作者：王晓萌杜建层丁洋高峰王恩杰王晓梅河北医科大学第三医院病理科石家庄050051 河北医科大学第三医院妇产科石家庄050051 邢台市第三医院病理科邢台054000

目的观察宫颈鳞状细胞癌组织中Slug的表达情况,探讨其在宫颈鳞状细胞癌上皮-间充质转变(epithelial-mesenchymaltransition,EMT)中的作用机制。方法收集临床慢性宫颈炎标本25例、CIN 3级标本33例、宫颈鳞状细胞癌标本98例,分别用免疫组... 详细信息

目的观察宫颈鳞状细胞癌组织中Slug的表达情况,探讨其在宫颈鳞状细胞癌上皮-间充质转变(epithelial-mesenchymaltransition,EMT)中的作用机制。方法收集临床慢性宫颈炎标本25例、CIN 3级标本33例、宫颈鳞状细胞癌标本98例,分别用免疫组化、Western blot和实时荧光定量PCR检测Slug、E-cadherin、α-SMA蛋白及mRNA的表达情况。结果 Slug和α-SMA在宫颈鳞状细胞癌中高表达,并随恶性程度的升高而加强(P<0.01);E-cadherin在癌组织中的表达降低(P<0.01)。结论 Slug可能通过调控EMT从而在宫颈鳞状细胞癌的侵袭转移过程中发挥作用。

关键词：宫颈肿瘤鳞状细胞癌上皮-间充质转变 Slug基因

Notch信号通路与Slug在调控宫颈鳞状细胞癌上皮-间充质转变中的意义

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解剖科学进展 2012年第6期18卷 522-525页

作者：王晓萌丁洋王晓梅王恩杰高峰河北医科大学第三医院病理科石家庄050051 邢台市第三医院病理科邢台054000

目的探讨Notch信号通路与Slug在宫颈鳞状细胞癌上皮-间充质转变(EMT)中的作用机制。方法收集临床慢性宫颈炎及宫颈鳞状细胞癌标本,分别用免疫组化及Western blot检测Notch1、NICD1、Slug、E-cadherin、α-SMA蛋白表达情况,Real-Time PC... 详细信息

目的探讨Notch信号通路与Slug在宫颈鳞状细胞癌上皮-间充质转变(EMT)中的作用机制。方法收集临床慢性宫颈炎及宫颈鳞状细胞癌标本,分别用免疫组化及Western blot检测Notch1、NICD1、Slug、E-cadherin、α-SMA蛋白表达情况,Real-Time PCR检测Notch1、SlugmRNA表达情况。结果与慢性宫颈炎比较,Notch1、NICD1、Slug和α-SMA在宫颈鳞状细胞癌中表达增加(P<0.01),E-cadherin蛋白在癌组织中的表达降(P<0.01)。结论

关键词： Notch Slug 宫颈鳞状细胞癌上皮-间充质转变

百草枯诱导肺上皮细胞上皮-间充质转变机制的研究进展

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临床急诊杂志 2017年第11期18卷 862-866页

作者：谢吐秀吕菁君魏捷叶璐张东梅武汉大学人民医院急诊科武汉430060

百草枯（Paraquat,PQ）,化学名为1,1＇-二甲基-4,4＇-联吡啶阳离子盐,是一种有效且广泛使用的除草剂。一般成人PQ致死量为20%水溶液5~15ml,或口服致死剂量为30~50mg/kg。由于它毒性高、价格便宜、易于获得和缺乏有效的治疗手段,中毒后... 详细信息

百草枯（Paraquat,PQ）,化学名为1,1＇-二甲基-4,4＇-联吡啶阳离子盐,是一种有效且广泛使用的除草剂。一般成人PQ致死量为20%水溶液5~15ml,或口服致死剂量为30~50mg/kg。由于它毒性高、价格便宜、易于获得和缺乏有效的治疗手段,中毒后病死率达60%以上,已成为发展中国家中一个主要的公共卫生问题[1]。

关键词：百草枯肺纤维化中毒肺上皮细胞上皮-间充质转变

Twist1稳定表达细胞株的建立及对乳腺癌细胞上皮-间充质转变的影响

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生物技术通讯 2016年第1期27卷 36-39页

作者：宋玉华陈滢洁张亚楠刘婕罗晓丽贾晓蒙李欣姜潇丁丽华叶棋浓青岛大学附属医院乳腺中心山东青岛266003 军事医学科学院生物工程研究所北京100850

目的:构建Twist1的慢病毒真核表达载体,并建立稳定表达Twist1的乳腺癌细胞株,研究Twist1在乳腺癌中对上皮-间充质转变(EMT)的影响。方法:以乳腺文库为模板,PCR扩增Twist1编码序列,克隆到慢病毒p CDH载体,构建成p CDH-Twist1,转染293T细... 详细信息

目的:构建Twist1的慢病毒真核表达载体,并建立稳定表达Twist1的乳腺癌细胞株,研究Twist1在乳腺癌中对上皮-间充质转变(EMT)的影响。方法:以乳腺文库为模板,PCR扩增Twist1编码序列,克隆到慢病毒p CDH载体,构建成p CDH-Twist1,转染293T细胞,Western印迹鉴定p CDH载体介导的Twist1的表达;包装病毒载体,感染ZR75-1细胞,用嘌呤霉素筛选得到稳定表达Twist1的细胞株,检测ZR75-1细胞对EMT的影响。结果:经Bam HⅠ、Eco RⅠ双酶切及测序证实得到p CDH-Twist1表达载体,Western印迹实验发现Twist1在293T细胞内表达;嘌呤霉素筛选得到稳定表达Twist1的ZR75-1细胞株。结论:构建了p CDH-Twist1的真核表达载体并建立了稳定表达Twist1的ZR75-1细胞,为进一步研究Twist1在EMT过程中的机制奠定了基础。

关键词： Twist1 E-钙黏蛋白上皮-间充质转变乳腺癌细胞

ALDH3A1作为口腔鳞状细胞癌预后的标志物通过IL-6/STAT3信号通路抑制肿瘤细胞上皮-间充质转变

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ALDH3A1作为口腔鳞状细胞癌预后的标志物通过IL-6/STAT3信号通路...

JNK/AP-1信号通路在百草枯诱导肺泡上皮细胞间充质转变中的作用

2019第一届全国口腔颌面-头颈肿瘤学术大会——聚合引领、协同发展

作者：曲艺何影杨扬王雪秦力铮韩正学首都医科大学附属北京口腔医院

研究目的:乙醛脱氢酶3A1 (Aldehyde dehydrogenase 3A1, ALDH3A1)作为乙醛脱氢酶超家族成员中重要的一员,其在肝癌、肺癌、食道癌等恶性肿瘤发生、发展中发挥重要作用,并可作为判断肿瘤患者预后的生物学标志物。但是,相关研究在口腔鳞... 详细信息

研究目的:乙醛脱氢酶3A1 (Aldehyde dehydrogenase 3A1, ALDH3A1)作为乙醛脱氢酶超家族成员中重要的一员,其在肝癌、肺癌、食道癌等恶性肿瘤发生、发展中发挥重要作用,并可作为判断肿瘤患者预后的生物学标志物。但是,相关研究在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma, OSCC)中尚未见报道。本研究旨在揭示ALDH3A1在OSCC中的表达水平及其临床价值,初步探讨其在OSCC细胞系中的作用与潜在机制。

关键词：乙醛脱氢酶3A1 口腔鳞状细胞癌淋巴结转移上皮-间充质转变

来源： cnki会议评论

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环境与职业医学 2019年第1期36卷 17-25页

作者：朱晨笛郭慕真李颖颖武坷鑫黄敏宁夏医科大学公共卫生与管理学院职业卫生与环境卫生学系宁夏银川750004

[目的]探讨c-jun氨基末端激酶(JNK)/转录因子激活蛋白-1(AP-1)信号通路在百草枯致大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞间发生上皮-间充质转变(EMT)中的作用。[方法]体外培养大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞RLE-6TN,终浓度0、25、50、100、200、300、400μmol/L... 详细信息

[目的]探讨c-jun氨基末端激酶(JNK)/转录因子激活蛋白-1(AP-1)信号通路在百草枯致大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞间发生上皮-间充质转变(EMT)中的作用。[方法]体外培养大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞RLE-6TN,终浓度0、25、50、100、200、300、400μmol/L百草枯处理细胞24 h,终浓度200μmol/L百草枯分别处理细胞0、12、24、36、48、60、72 h,倒置相差显微镜观察细胞形态学的改变;四甲基偶氮唑盐(MTT)检测细胞相对存活率,确定剂量和时间-效应关系;流式细胞仪Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡;细胞划痕实验检测细胞迁移能力;Transwell小室法检测细胞侵袭能力;免疫荧光、免疫印迹法(Western blot)分别检测上皮标志蛋白E-cad、ZO-1和间质标志蛋白FSP-1、α-SMA表达水平;Western blot检测JNK/p-JNK、c-jun/p-c-jun、c-fos/p-c-fos蛋白表达水平;双荧光素酶报告基因实验检测AP-1的转录活性,评估百草枯对JNK信号通路的激活作用。[结果] 200μmol/L百草枯诱导细胞由卵圆形或多边形的上皮细胞变成长梭形的间质细胞,细胞间连接消失,且时间越长形态学改变越明显。与对照组相比,100、200、300、400μmol/L百草枯染毒组的细胞存活率明显降低(P 间(24、36、48、60、72 h)的细胞存活率明显降低(P 间(12、24、36 h):细胞凋亡率随诱导时间的延长而增加,尤其36 h诱导组的细胞凋亡率较对照组明显升高,差异有统计学意义(P 上皮细胞标记蛋白E-cad、ZO-1表达下调,且下调的趋势随时间延长更加明显(P 间质细胞标记蛋白FSP-1、α-SMA表达随时间的延长逐渐升高(P 间依赖方式影响上皮细胞活性。百草枯能够诱导大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞发生EMT,JNK/AP-1信号通路可能参与了百草枯诱导肺泡上皮细胞EMT的发生。

关键词：百草枯 Ⅱ型肺泡上皮细胞上皮-间充质转变 JNK信号通路 AP-1

CTGF在人近端肾小管上皮细胞上皮—间充质转变中的作用研究

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CTGF在人近端肾小管上皮细胞上皮—间充质转变中的作用研究

作者：张建东东南大学

学位级别：硕士

目的:肾间质纤维化是各种原因导致的终末期肾病的共同通路。最近研究表明肾小上皮细胞间充质转变(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)是肾间质纤维化中的核心事件。结缔组织生长因子(Connective Tissue Growth Factor, CTGF)是新... 详细信息

目的:肾间质纤维化是各种原因导致的终末期肾病的共同通路。最近研究表明肾小上皮细胞间充质转变(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)是肾间质纤维化中的核心事件。结缔组织生长因子(Connective Tissue Growth Factor, CTGF)是新近发现的一个重要的致纤维化因子。从蛋白结构看CTGF由4个不同的模块组成,CTGF在体内以包含不同模块的全长及不同长度的片段形式存在。人们发现CTGF具有许多复杂甚或相互矛盾的作用,联系到其多模块的结构特点,有作者开始从结构-功能学角度来探讨CTGF的作用基础。在这些先锋性的实验中提示模块4可能具有较为突出的作用。CTGF在多种慢性肾脏病中表达增高,提示CTGF与慢性肾脏病进展相关,进一步的工作发现CTGF能参与肾脏细胞的增殖、EMT及增加肾间质纤维物质堆积等多种肾脏纤维化的事件。有关CTGF在肾脏纤维化中的结构学基础如何?是否其致纤维化效应由模块4介导?目前尚未见报道。本研究采用重组的不同片段的CTGF来直接研究CTGF在EMT中的作用及其结构基础。方法:人近端肾小管上皮细胞株(human proximal tubular cell line, HPTCL) HK-2用含10%胎牛血清(fetal calf serum, FCS)的低糖型Dulbeccos’s Modified Eagle’s Medium (DMEM)培养液培养。无血清培养24小时后,用重组CTGF(C)(只包含模块4)干预细胞,通过MTT法监测细胞增殖指数,摸索出最适浓度-时间点,用流式细胞分析技术检测其对细胞周期的作用及抗CTGF抗体对这一作用的影响。选取50ng/ml rhCTGF(C)干预细胞0-48h,通过免疫细胞化学、Real-Time PCR观察其对角蛋白、波形蛋白表达的影响,同时通过倒置相差显微镜观察细胞形态改变,采用共聚焦显微镜技术观察其对纤维连接蛋白表达的影响。在此基础上我们还采用免疫细胞化学、Real-Time PCR技术观察0-72h ILK (integrin-linked kinase)mRNA和蛋白质表达时间效应关系;观察不同浓度rhCTGF(C)(0-50ng/ml)作用细胞48h后,HK-2细胞ILK mRNA和蛋白质表达的浓度效应关系。同时我们还观察了抗CTGF抗体对rhCTGF(C)的这些作用的影响以及比较了rhCTGF(N)(包含模块1,2,3不包括模块4)对这些指标的作用。结果:结果显示在50ng/ml范围内rhCTGF(C)能促进HK-2细胞增殖,呈浓度依赖性增强(P间依赖性增强。rhCTGF(C)作用48h后, G0-G1期细胞减少(p间依赖性下调CK(cytokeratin) mRNA和蛋白质表达及上调VIM(vimentin) mRNA和蛋白质表达(P分别间依赖性(P质表达,呈浓度依赖性(P质表达(P间依赖性。抗CTGF抗体可以阻断这些作用(P上皮细胞的增殖,呈浓度和时间依赖性;加速肾小管上皮细胞从G1期向S期的转变。2.重组的CTGF模块4蛋白可以诱导肾小管上皮细胞发生EMT,而rhCTGF(N)未能诱导肾小管上皮细胞发生EMT。3.重组的CTGF模块4蛋白可以促进肾小管上皮细胞细胞外基质的合成,而rhCTGF(N)未能促进细胞外基质的合成。4.在一定的浓度范围内,重组的CTGF模块4蛋白可以直接促进ILK mRNA和蛋白的表达,呈浓度和时间依赖性;rhCTGF(N)未能促进ILK的表达。

关键词：人近端肾小管上皮细胞上皮-间充质转变肾间质纤维化结缔组织生长因子整合素连接激酶

肺肉瘤样癌中血管生成拟态的形成及其与上皮间充质转化的关系

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肺肉瘤样癌中血管生成拟态的形成及其与上皮间充质转化的关系

作者：郑旭天津医科大学

学位级别：硕士

目的研究肺肉瘤样癌（pulmonary sarcomatoid carcinoma,PSC）中血管生成拟态（vasculogenic mimicry,VM）的临床意义,阐述上皮间充质转化（epithelial-to-mesenchymal transition,EMT）提高肺肉瘤样癌的恶性度及促进VM形成的相关机制。方法回顾性分析天津医科大学附属肿瘤医院1995年1月至2007年12月术前未经过放化疗的肺肉瘤样癌患者22例及肺鳞癌患者79例的临床资料,总结其临床病理特征及随访结果。对实验组肺肉瘤样癌组织切片22例和对照组肺鳞癌79例的组织切片进行HE、CD31和PAS双重染色,对EMT相关指标Twist1、 Vimentin、E-cadherin进行免疫组化染色。利用免疫组化指标CK5/6,CK8/18,p63确定实验组22例肺肉瘤样癌的组织起源,并且对实验组22例组织切片进行VE-cadherin、EphA2、MMP2、VEGF、Hif-1α免疫组化染色,分析肺肉瘤样癌中VM的临床意义及EMT促进VM形成的相关机制。结果 1.肺肉瘤样癌的组织起源在22例肉瘤样癌中肿瘤细胞含上皮细胞成分者18例CK5/6或p63阳性,2例CK8/18例阳性,2例p63和CK8/18在不同区域阳性,9例波形蛋白阳性;22例肉瘤样癌中肿瘤细胞含梭形细胞成分者17例CK5/6或p63阳性,1例CK8/18例阳性,22例波形蛋白阳性。大部分肉瘤样细胞表达鳞癌标记物。 2.两组中肿瘤EMT相关指标表达在肺肉瘤样癌组织中,Twist1、E-cadherin、Vimentin的阳性率分别为50%,36.4%,90.9%;对照组肺鳞癌组织中的阳性率分别为35.6%,75.9%,20.3%。各指标在两组间比较有明显差异性（P=0.000,P=0.000,P=0.037）。由此可以得出转录因子Twist1与EMT标记蛋白的表达关系密切,与对照组相比,肺肉瘤样癌中Twist1和Vimentin蛋白表达增高,E-cadherin蛋白表达降低。 ***、Twistl与临床病理资料之间的联系肺肉瘤样癌和肺鳞癌中都存在VM,Kaplan-Meier生存分析结果显示VM阳性患者生存时间比VM阴性患者生存时间短。Log-rank检验法比较生存曲线的差别,肺肉瘤样癌中X2=4.544,P=0.033,肺鳞癌中x2=5.846,P=0.016差异有统计学意义。不同性别、年龄、肿瘤大小、有无淋巴结转移、是否复发、患者的VM阳性情况比较差异均无统计学意义（依次为P=0.622、P=0.226、P=0.368、P=0.073、P=0.818）,TNM不同分期、有无血道转移患者VM阳性情况差异有统计学意义（分别为P=0.026、P=0.029）。不同性别、年龄、肿瘤大小、血道转移、是否复发、TNM分期患者的Twistl蛋白阳性表达差异均无统计学意义（依次为P=0.330、P=0.500、P=0.500、P=0.238、P=0.500、P=0.528）,有无淋巴结转移患者的Twistl蛋白阳性表达差异有统计学意义（P=0.040）。肺鳞癌中有4例存在VM（5.1%）,与肺肉瘤样癌（18.2%）相比两者差异有统计学意义（x2=4.06,P=0.044）。 4.肺肉瘤样癌中VM阳性组与阴性组Twist1、VM相关蛋白的表达情况检测肺肉瘤样癌中VM阳性组与阴性组中Twistl、VM相关蛋白VE-cadherin、EphA2、MMP-2、VEGF、Hif-1α的差异性表达。VM阳性组中各指标的阳性率分别为（4/4,100%;4/4,100%;4/4,100%;3/4,75%;3/4,75%;0/4,0%）。VM阴性组中各指标的阳性率分别为（7/18,38.9%;6/18,33.3%;7/18,38.9%;3/18,16.7%;10/18,55.6%;2/18,11.1%）。Twist1, VE-cadherin, EphA2,和MMP-2蛋白的表达在VM阳性组和VM阴性组间有显著差异（P=0.045,P=0.029,P=0.045,P=0.046）。而VEGF和Hif-1α蛋白的表达在VM阳性组和VM阴性组间无明显差异（P=0.616,P=0.662）。 5. Twist1的表达与VM形成相关蛋白的相关性在肺肉瘤样癌中,Twistl、血管生成拟态相关蛋白VE-cadherin, EphA2, MMP-2的阳性率分别为（11/22,50%）、（10/22,45.5%）、（11/22,50%）、（6/22,27.3%）。Twistl的表达与VE-cadherin, EphA2, MMP-2的高表达呈

关键词：肺肉瘤样癌血管生成拟态上皮-间充质转变免疫组化

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人参皂苷抗器官纤维化作用机制研究进展

中草药 2022年第7期53卷 2237-2246页

作者：李媛高睿单颖李蜀欣李梦帆赵余庆苏光悦沈阳药科大学辽宁沈阳110016 辽宁医药职业学院辽宁沈阳110101

纤维化是许多器官靶向疾病的常见特征,全世界范围内组织纤维化是许多疾病致残、致死的主要原因之一。纤维化的发病机制复杂,涉及细胞因子、信号通道和基因表达等。这些机制的相互作用导致细胞外基质过度积累,最终取代并破坏生理器官结... 详细信息

纤维化是许多器官靶向疾病的常见特征,全世界范围内组织纤维化是许多疾病致残、致死的主要原因之一。纤维化的发病机制复杂,涉及细胞因子、信号通道和基因表达等。这些机制的相互作用导致细胞外基质过度积累,最终取代并破坏生理器官结构和功能。针对发病机制,临床虽然应用了一些抗纤维化的药物,但仍未达到满意的治疗效果。因此寻找一种高效低毒的抗纤维化药物一直是临床的迫切需要。人参皂苷(ginsenosides)是从人参Panax ginseng中发现的一类糖基化三萜类天然产物,具有抗氧化、抗炎、抗纤维化和抗肿瘤等作用。归纳人参皂苷抗器官纤维化的药理作用及其机制研究进展,以期为此类化合物的抗纤维化的成药性研究提供理论依据。

关键词：人参皂苷纤维化炎症反应上皮-间充质转变氧化应激反应胶原沉积