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大蒜素对胆管癌细胞上皮间质化的影响研究

大蒜素对胆管癌细胞上皮间质化的影响研究

作者：郑世勤南京医科大学

学位级别：硕士

目的:旨在探讨大蒜素对胆管癌细胞上皮间质化的影响及其作用机制,为大蒜素应用于胆管癌的治疗提供理论依据。方法:采用MTT法检测大蒜素对人胆管癌RBE细胞的增殖抑制作用,将其作用24h后IC数值作为大蒜素给药浓度,将其分为空白对照组、大... 详细信息

目的:旨在探讨大蒜素对胆管癌细胞上皮间质化的影响及其作用机制,为大蒜素应用于胆管癌的治疗提供理论依据。方法:采用MTT法检测大蒜素对人胆管癌RBE细胞的增殖抑制作用,将其作用24h后IC数值作为大蒜素给药浓度,将其分为空白对照组、大蒜素组(IC)、TGF-b组(10ng/mL)和大蒜素+TGF-b组(IC+10ng/mL);采用划痕实验和Transwell小室试验分别检测大蒜素作用于RBE细胞24h后迁移及侵袭能力;采用Western blot分别检测各组EMT相关蛋白分子(E-Cadherin、N-Cadherin、Vimentin、Snail)及NF-kB信号通路相关蛋白表达水平。结果:大蒜素以剂量依赖性方式抑制RBE细胞增殖,24h的IC约为130.7μmol/L;划痕实验显示大蒜素作用24h后,与空白对照组(28.19%±0.66%)及TGF-b组(49.22%±0.27%)迁移率相比,大蒜素组(9.25%±0.36%)及大蒜素+TGF-b组(13.91%±0.75%)均下降(P上皮间质化的发生。大蒜素亦能抑制TGF-b诱导的人胆管癌细胞发生上皮间质化,这对于抗胆管癌药物的研发具有一定的潜在价值。

关键词：胆管癌大蒜素上皮间质化核转录因子

TrkB通过调控PI3K/AKT途径诱导喉癌Hep-2细胞上皮间质化发生的作用机制研究

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中国耳鼻咽喉头颈外科 2020年第7期27卷 372-376页

作者：周韶胡建道曹澄江文博李睿宁波大学附属人民医院耳鼻咽喉头颈外科浙江宁波315000 安徽省医学科学研究院药理毒理研究所安徽合肥230061

目的观察TrkB如何通过PI3K/AKT通路诱导喉癌Hep-2细胞上皮间质化发生的作用机制并探讨其意义。方法分别用含0、100、500、1000 nmol/L抑制剂K252a作用于Hep-2细胞,CCK-8法检测细胞的增殖活性,划痕法检测细胞的迁移能力,Transwell小室法... 详细信息

目的观察TrkB如何通过PI3K/AKT通路诱导喉癌Hep-2细胞上皮间质化发生的作用机制并探讨其意义。方法分别用含0、100、500、1000 nmol/L抑制剂K252a作用于Hep-2细胞,CCK-8法检测细胞的增殖活性,划痕法检测细胞的迁移能力,Transwell小室法检测细胞的侵袭能力,同时用Western-blot检测Hep-2细胞中p-Akt、p-c-Src、E-cadherin蛋白的表达情况。结果100 nmol/L组在各时间点对Hep-2细胞增殖的抑制率分别为17.8%、20.5%、19.7%;500 nmol/L组在各时间点对Hep-2细胞增殖的抑制率分别为48.2%、46.8%、45.9%;1000 nmol/L组在各时间点对Hep-2细胞增殖的抑制率分别为51.3%、83.0%、81.5%;K252a(1000 nmol/L)组迁移率及穿膜细胞数分别为21%及46,对照组迁移率及穿膜细胞数分别为69%和221,差异均具有统计学意义(t=1.235、t=3.416,P均<0.01);与对照组比较,K252a(1000 nmol/L)组Hep-2细胞中p-Akt及p-c-Src蛋白表达量显著降低,分别为0.93±0.12、0.21±0.05、0.72±0.09、0.14±0.02,差异均有统计学意义(t=3.578、2.634,P均<0.01);且对照组中E-cadherin蛋白表达量为0.14±0.02,K252a(1000 nmol/L)组Hep-2细胞中E-cadherin蛋白表达量为0.75±0.08,差异有统计学意义(t=2.852,P<0.01)。结论TrkB可能通过激活PI3K/Akt信号通路来诱导喉癌细胞EMT的发生。

关键词：喉肿瘤细胞增殖酪氨酸激酶受体B 上皮间质化磷脂酰肌醇3激酶/苏氨酸激酶信号通路

ABCG2过表达对乳腺癌细胞上皮间质化能力的影响

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重庆医学 2016年第26期45卷 3622-3623,3626页

作者：聂伟王小毅邱干蒋勇倪贵生武警重庆总队医院甲乳血管外科 400061 重庆医科大学附属第一院普外科 400016

目的探讨三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)过表达对乳腺癌细胞上皮间质转化(EMT)能力的影响。方法构建ABCG2稳定过表达乳腺癌细胞株,检测ABCG2稳定过表达前后MCF-7乳腺癌细胞中E-cadherin蛋白和Ncadherin蛋白的表达情况。结果... 详细信息

目的探讨三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)过表达对乳腺癌细胞上皮间质转化(EMT)能力的影响。方法构建ABCG2稳定过表达乳腺癌细胞株,检测ABCG2稳定过表达前后MCF-7乳腺癌细胞中E-cadherin蛋白和Ncadherin蛋白的表达情况。结果 E-cadherin蛋白表达在ABCG2过表达MCF-7乳腺癌细胞中明显低于常规MCF-7细胞(P<0.05),而N-cadherin蛋白表达在ABCG2过表达MCF-7乳腺癌细胞中明显高于常规MCF-7细胞(P<0.05)。结论 ABCG2过表达可以通过调控EMT相关蛋白的表达进而增强乳腺癌细胞的EMT能力,可能与乳腺癌的转移密切相关。

关键词：乳腺肿瘤肿瘤转移上皮间质化三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2

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膀胱癌上皮间质化相关基因的表达研究

江苏医药 2014年第17期40卷 2061-2062页

作者：曹广鑫张一心王小林南通大学附属肿瘤医院外科江苏省226361

目的探讨膀胱癌上皮间质化(EMT)相关基因E-cadherin(CDH1)、N-cadherin(CDH2)、Fibronectin(FN1)、Twist1、Snail、VIM的表达情况。方法采用实时定量PCR(RT-PCR)法,检测病理分型不同的膀胱癌细胞株及正常膀胱尿路上皮细胞,测定其中与EM... 详细信息

目的探讨膀胱癌上皮间质化(EMT)相关基因E-cadherin(CDH1)、N-cadherin(CDH2)、Fibronectin(FN1)、Twist1、Snail、VIM的表达情况。方法采用实时定量PCR(RT-PCR)法,检测病理分型不同的膀胱癌细胞株及正常膀胱尿路上皮细胞,测定其中与EMT相关基因表达,分析EMT相关基因在膀胱癌中的表达情况。结果 EMT相关基因Snail1、FN1、VIM、CDH2等在多个膀胱癌细胞系中高表达,表达强度高于正常膀胱上皮细胞。结论 EMT相关基因在膀胱癌细胞中表达高于正常上皮细胞。

关键词：膀胱癌上皮间质化

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上皮间质化与肿瘤相关性的研究进展

检验医学与临床 2014年第8期 1107-1108页

作者：郭轶尹江燕重庆市中医院普外科重庆医科大学附属第一医院超声科

预防肿瘤远处转移是提高恶性肿瘤治疗效果的关键,但因其机制尚不明确,当前尚无确切有效的治疗手段。近期许多研究发现,上皮间质化(EMT)与肿瘤的进展及转移密不可分[1]。多种生物因子参与EMT过程,包括上皮特异性分子、间质特异性分子、... 详细信息

预防肿瘤远处转移是提高恶性肿瘤治疗效果的关键,但因其机制尚不明确,当前尚无确切有效的治疗手段。近期许多研究发现,上皮间质化(EMT)与肿瘤的进展及转移密不可分[1]。多种生物因子参与EMT过程,包括上皮特异性分子、间质特异性分子、转化因子等[2]。本文对EMT在恶性肿瘤发展及转移过程中的作用的相关文献进行综述,以进一步指导研究恶性肿瘤的进展和转移机制。1 EMT与肿瘤转移EMT和上皮来源的恶性肿瘤转移均为复杂的分子生物过程[3]。EMT主要表现为细胞上皮特性减少、细胞间质特性增

关键词：肿瘤转移上皮间质化研究进展

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上皮间质转化在克罗恩病肠壁纤维化中的作用

世界华人消化杂志 2011年第11期19卷 1160-1164页

作者：王宝偲陶庆松嵇振岭东南大学附属中大医院普外科江苏省南京市210009

克罗恩病(Crohn'sdisease,CD)患者的肠壁慢性炎症可导致肠道产生大量细胞外基质沉积,从而引起瘢痕收缩式狭窄.目前CD中肠道纤维化机制尚不明确且临床尚无有效的治疗方案,药物治疗的效果仍不理想.上皮间质转化存在于多种慢性疾病(如肾纤... 详细信息

克罗恩病(Crohn'sdisease,CD)患者的肠壁慢性炎症可导致肠道产生大量细胞外基质沉积,从而引起瘢痕收缩式狭窄.目前CD中肠道纤维化机制尚不明确且临床尚无有效的治疗方案,药物治疗的效果仍不理想.上皮间质转化存在于多种慢性疾病(如肾纤维化)的发病以及肿瘤的浸润转移过程中.有关上皮间质转化在其他器官纤维化过程中作用报道较多,在肠纤维化过程中研究较少,本文就上皮间质转化在CD患者肠壁纤维化过程中作用的研究进展作一概述.

关键词：上皮间质化克罗恩病肠纤维化

Sox5促进胰腺癌细胞迁移侵袭和上皮间质化

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微循环学杂志 2018年第4期28卷 20-25,31页

作者：余伟马达刘礼军张志标湖北省汉川市人民医院普外科二科汉川431600 湖北省汉川市人民医院急诊科汉川431600

目的:探讨Sox5对胰腺癌细胞迁移侵袭和上皮间质化的影响。方法:人正常胰腺细胞HPDE6-C7(HPDE6-C7组)、胰腺癌细胞PANC-1(PANC-1组)和AsPC-1(AsPC-1组)正常培养至对数生长期,采用qRT-PCR法和Western blot法分别检测各组细胞中Sox5mRNA和... 详细信息

目的:探讨Sox5对胰腺癌细胞迁移侵袭和上皮间质化的影响。方法:人正常胰腺细胞HPDE6-C7(HPDE6-C7组)、胰腺癌细胞PANC-1(PANC-1组)和AsPC-1(AsPC-1组)正常培养至对数生长期,采用qRT-PCR法和Western blot法分别检测各组细胞中Sox5mRNA和蛋白水平。将shSox5、shControl、pcDNA 3.1-Sox5和载体pcDNA 3.1以脂质体法转染胰腺癌细胞PANC-1,分别标记为shSox5组、shControl组、pcDNA 3.1-Sox5组和Scrambled组,采用qRT-PCR法检测各组细胞中Sox5、E-cadherin、N-cadherin、Vimetin、Snail和Twist1的mRNA表达;Western blot检测各组细胞中Sox5、E-cadherin、N-cadherin、Vimetin、Snail和Twist1的蛋白表达;Transwell法检测各组细胞的迁移和侵袭。结果:与HPDE6-C7组相比,PANC-1组和AsPC-1组中Sox5mRNA和蛋白水平均升高(P<0.01);与shControl组比较,shSox5组Sox5、N-cadherin、Vimetin、Snail和Twist1的mRNA和蛋白以及细胞迁移和侵袭水平均显著降低(P<0.01),E-cadherin mRNA和蛋白水平均显著升高(P<0.01);与Scrambled组比较,pcDNA-3.1-Sox5组Sox5、N-cadherin、Vimetin、Snail和Twist1的mRNA和蛋白以及细胞迁移和侵袭水平均显著升高(P<0.01),E-cadherin mRNA和蛋白水平均显著降低(P<0.01)。结论:Sox5可促进胰腺癌细胞迁移、侵袭和EMT,将为胰腺癌的靶点治疗提供新靶标。

关键词： Sox5 胰腺癌细胞迁移侵袭上皮间质化

缺氧诱导因子1α抑制microRNA-92a调控上皮细胞间质化

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武警后勤学院学报（医学版） 2018年第6期27卷 461-466页

作者：曾宪焕高宏生彭悦刘晓伟赵化冰王毅铮杨震龚艳华韩泽民武警后勤学院军事预防医学教研室天津300309 武警后勤学院附属医院口腔科天津300162 职业与环境危害防控天津市重点实验室天津300309 武警北京市总队医院北京100027

【目的】探讨缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)通过抑制microRNA-92a(miR-92a)调控口腔黏膜上皮细胞间质化的机制。【方法】15只健康雌性Wistar大鼠分为常氧对照组、缺氧12 h组、缺氧24 h组。常氧对照组常氧饲养... 详细信息

【目的】探讨缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)通过抑制microRNA-92a(miR-92a)调控口腔黏膜上皮细胞间质化的机制。【方法】15只健康雌性Wistar大鼠分为常氧对照组、缺氧12 h组、缺氧24 h组。常氧对照组常氧饲养,后两组大鼠缺氧饲养,均放置于抽取到相当于海拔7 000 m的低压缺氧舱,分别持续缺氧12、24 h。3组大鼠麻醉处死后提取口腔黏膜上皮,HE染色观察上皮组织形态,qPCR测定miR-92a、HIF-1α、E-钙黏蛋白、波形蛋白基因表达水平,Western blotting测定其相应蛋白表达水平。【结果】缺氧12 h组、缺氧24 h组同常氧对照组相比,缺氧组钉突变短、基底膜增生,HIF-1αm RNA表达比分别为1.273、1.212,蛋白表达比分别为2.575、1.860;miR-92a表达比分别为0.238、0.465;E-钙黏蛋白mRNA表达比为0.774、0.702,蛋白表达比为0.768、0.773;波形蛋白mRNA表达比为1.253、1.307,蛋白表达比为2.722、3.476。【结论】缺氧条件下HIF-1α通过抑制miR-92a诱导口腔黏膜上皮间质化。

关键词：缺氧 microRNA-92a 上皮间质化

shRNA干扰TTF-1基因对肺腺癌细胞EGFR-TKI敏感性及细胞上皮间质化的影响

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浙江医学 2019年第22期41卷 2374-2378,I0004页

作者：吕昕周林水陈瑞琳杨珺超王真浙江中医药大学附属第一医院呼吸内科

目的探讨甲状腺转录因子(TTF-1)对肺腺癌细胞表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)药物敏感性及细胞上皮间质化的影响。方法将培养后的肺腺癌HCC827细胞分为空载体组、阴性质粒转染(NC-sh RNA)组和阳性质粒转染(TTF-1-sh RNA)组... 详细信息

目的探讨甲状腺转录因子(TTF-1)对肺腺癌细胞表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)药物敏感性及细胞上皮间质化的影响。方法将培养后的肺腺癌HCC827细胞分为空载体组、阴性质粒转染(NC-sh RNA)组和阳性质粒转染(TTF-1-sh RNA)组,通过sh RNA干扰技术抑制细胞中的TTF-1基因表达,用流式细胞仪测定转染前后细胞凋亡率和细胞周期变化。不同浓度的吉非替尼(10、20、40、60μmol/ml)作用各组细胞72h,CCK-8法检测细胞生长抑制率。5ng/ml转化生长因子-β1(TGF-β1)作用各组细胞48h,细胞出现上皮间质化,Western blot法测定TTF-1、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达。结果与NC-sh RNA组、空载体组比较,TTF-1-sh RNA组细胞凋亡率明显增加,G0/G1相百分比升高,S相和G2/M相百分比降低(均P化不明显,差异无统计学意义(P>0.05)。结论sh RNA干扰TTF-1基因可增加肺腺癌HCC827细胞对EGFR-TKI药物敏感性,并部分抑制细胞上皮间质化。

关键词：肺腺癌 TTF-1 上皮间质化 EGFR-TKI HCC827