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上皮细胞钠离子通道各亚基表达与子痫前期发病时间的相关性

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中华实用诊断与治疗杂志 2021年第8期35卷 845-847页

作者：黄莺隋霜冯国惠李小英新疆维吾尔自治区人民医院产科新疆维吾尔自治区乌鲁木齐830001

目的探讨上皮细胞钠离子通道(epithelial Na+channel,ENaC)各个亚基表达在维吾尔族子痫前期胎盘组织中的表达及意义。方法定期产检并分娩或终止妊娠的维吾尔族子痫前期孕妇122例,根据发病时间分为早发型(孕周0.05)。早发型组孕妇胎盘组... 详细信息

目的探讨上皮细胞钠离子通道(epithelial Na+channel,ENaC)各个亚基表达在维吾尔族子痫前期胎盘组织中的表达及意义。方法定期产检并分娩或终止妊娠的维吾尔族子痫前期孕妇122例,根据发病时间分为早发型(孕周0.05)。早发型组孕妇胎盘组织SCNN1B mRNA(0.880±1.090)和其编码的ENaCβ蛋白(0.728±0.345)相对表达量均低于对照组(3.490±1.020、1.201±0.621)和晚发型组(3.99±2.12、1.424±0.134)(P0.05)。结论ENaCβ亚基表达在维吾尔族早发型子痫前期呈低表达,ENaCβ亚基可能成为预测早发型子痫前期的指标。

关键词：子痫前期上皮细胞钠离子通道维吾尔族

MicroRNA-7-5p通过mTORC2/SGK-1信号通路负向调控人肺泡上皮细胞钠离子通道

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川北医学院学报 2023年第4期38卷 440-443页

作者：秦克李同林宫帅江美芳三六三医院呼吸与危重症医学科四川成都610000

目的:探讨microRNA-7-5p通过哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物2(mTORC2)/血清糖皮质激素诱导激酶-1(SGK-1)信号通路负向调控人肺泡上皮细胞钠离子通道(ENaC)的机制。方法:对人类非小细胞肺癌肺泡上皮细胞系A549细胞转染microRNA-7-5p模拟剂... 详细信息

目的:探讨microRNA-7-5p通过哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物2(mTORC2)/血清糖皮质激素诱导激酶-1(SGK-1)信号通路负向调控人肺泡上皮细胞钠离子通道(ENaC)的机制。方法:对人类非小细胞肺癌肺泡上皮细胞系A549细胞转染microRNA-7-5p模拟剂,设为microRNA-7-5p组,阴性对照组A549细胞转染与目的基因序列无同源性的不表达microRNA-7-5p的阴性对照剂。雷帕霉素组在A549细胞培养基中加入雷帕霉素。PP242组在A549细胞培养基中加入PP242。空白对照组仅加入lipo fectamineTM 2000试剂。采用RT-qPCR检测各组SGK-1 mRNA;免疫印迹法检测SGK-1蛋白、ENaC蛋白的表达量。比较各组的microRNA-7-5p表达水平、SGK-1 mRNA及蛋白表达量、ENaC蛋白表达量。结果:microRNA-7-5p组的microRNA-7-5p表达水平高于空白对照组、阴性对照组、雷帕霉素组和PP242组,A549细胞转染成功上调microRNA-7-5p表达水平(P<0.05)。microRNA-7-5p组中,SGK-1 mRNA水平、SGK-1及ENaC-α、ENaC-β、ENaC-γ蛋白表达量均低于空白对照组、阴性对照组、雷帕霉素组(P<0.05)。结论:microRNA-7-5p可能通过mTORC2/SGK-1信号通路负向调控ENaC。

关键词： microRNA-7-5p 上皮细胞钠离子通道哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物2 血清糖皮质激素诱导激酶-1

黄芪注射液对人Ⅱ型肺泡上皮细胞系A549钠离子通道表达的影响及其机制

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微循环学杂志 2014年第4期24卷 8-15页

作者：王敏李柯魏蕾刘永明武汉大学基础医学院病理生理学教研室武汉430071

目的:探讨黄芪注射液(AI)对肺泡上皮细胞钠离子通道(ENaC)表达的影响及其作用机制。方法:选择典藏A549细胞,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测AI对其增殖的影响,采用Western Blot筛查AI促进ENaC蛋白各亚基(α、β、γ)高水平表达的最佳... 详细信息

目的:探讨黄芪注射液(AI)对肺泡上皮细胞钠离子通道(ENaC)表达的影响及其作用机制。方法:选择典藏A549细胞,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测AI对其增殖的影响,采用Western Blot筛查AI促进ENaC蛋白各亚基(α、β、γ)高水平表达的最佳浓度和最佳作用时间。继而将培养A549细胞分为自身空白对照组、AI组、抑制剂组和AI+抑制剂组,在对应培养细胞中加入不同抑制剂孵育2h,再加入AI孵育12h后,采用Western Blot检测抑制剂AG490、PDTC、SB203580和Wortmannin对AI处理的A549细胞中α、β、γENaC蛋白表达的影响,统计比较它们之间的差异。结果:AI对A549细胞的增殖无明显影响,但能上调α-ENaC、β-ENaC和γ-ENaC的表达,最佳浓度为8mg/ml,最佳作用时间为12h。PDTC可抑制AI上调的β-ENaC(t=3.01,P细胞的ENaC表达;对研究AI调节肺内水钠平衡,防治肺水肿等有积极作用。

关键词：黄芪注射液上皮细胞钠离子通道核因子-κB 磷脂酰肌醇 3-激酶水钠平衡

三子利水颗粒对心衰肺水肿大鼠肺组织液体转运相关蛋白表达的影响

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中国中医急症 2024年第6期33卷 968-972,976页

作者：张晓华赵宏宇宋智冰刘淑荣钱锋王玉于清华李雪梅王邵鹏杜星辰吉林省中医药科学院第一临床医院吉林长春130031 长春中医药大学吉林长春130021

目的通过观察三子利水颗粒对心衰肺水肿大鼠肺组织病理组织学、AQP1、AQP5、ENaC蛋白及mRNA表达的影响探讨其治疗心衰肺水肿的机制。方法选择雄性SD大鼠,通过结扎腹主动脉、腹腔注射氯化铵造成心衰急性肺水肿模型,随机分为模型组、西药... 详细信息

目的通过观察三子利水颗粒对心衰肺水肿大鼠肺组织病理组织学、AQP1、AQP5、ENaC蛋白及mRNA表达的影响探讨其治疗心衰肺水肿的机制。方法选择雄性SD大鼠,通过结扎腹主动脉、腹腔注射氯化铵造成心衰急性肺水肿模型,随机分为模型组、西药组、中药低剂量组、中药高剂量组、中药低剂量+西药组、中药高剂量+西药组。给药1周后观察各组大鼠肺组织含水率、病理组织学及AQP1、AQP5、ENaC蛋白及mRNA表达水平。结果与模型组比较,各给药组肺含水量均减少(P细胞间的炎性浸润和肺泡间的充血症状均改善。AQP1、AQP5蛋白表达均不同程度地升高,中药低剂量组AQP1差异有统计学意义(P0.05),其余给药组差异有统计学意义(P0.05)。AQP1、AQP5mRNA表达均不同程度地升高,中药低剂量组+西药组、中药高剂量组+西药组差异有统计学意义(P0.05)。结论三子利水颗粒可通过升高AQP1、AQP5、ENaC蛋白表达及mRNA表达含量来改善上皮细胞病理组织形态,达到清上焦肺水,缓解心衰肺水肿体征的目的。

关键词：肺水肿三子利水颗粒水通道蛋白1 水通道蛋白5 上皮细胞钠离子通道大鼠

上皮细胞离子通道对雌性生殖道内液体微环境的调节作用：对生殖与不孕的影响(英文)

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生理学报 2007年第4期59卷 495-504页

作者：陈小章何琼 AJONUMA Louis-Chukwuemeka 王晓飞香港中文大学医学院生理学系上皮细胞生物学研究中心中国海洋大学海洋生命科学学院青岛266003

雌性生殖道内适宜的液体微环境对一系列生殖事件起至关重要的作用。位于生殖道上皮细胞顶膜或基底膜的一系列离子通道和转运体,通过对水、电解质的跨膜转运,从而调节雌性生殖道内液体的分泌与吸收。本综述着重探讨了上皮细胞钠离子通道... 详细信息

雌性生殖道内适宜的液体微环境对一系列生殖事件起至关重要的作用。位于生殖道上皮细胞顶膜或基底膜的一系列离子通道和转运体,通过对水、电解质的跨膜转运,从而调节雌性生殖道内液体的分泌与吸收。本综述着重探讨了上皮细胞钠离子通道和囊性纤维化跨膜电导调节体对雌性生殖道内液体容量和成分的调节以及它们在不同生殖事件,比如精子获能及着床中的重要作用。同时对因离子通道失活或失调引起的雌性生殖道内液体微环境稳态失衡导致的一系列病理改变,如卵巢过度刺激综合征、输卵管积水以及不孕提出了新的见解。

关键词：囊性纤维化跨膜电导调节体上皮细胞钠离子通道上皮细胞精子获能着床感染

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护骨胶囊含药血清对成骨细胞功能的影响

中华中医药杂志 2017年第12期32卷 5558-5562页

作者：陈珺林思慧钟佳贤林泽苗曹祺曹克广龙世松李青南广东药科大学生命科学与生物制药学院广州510006 广东安诺药业股份有限公司广东揭阳515300

目的:研究护骨胶囊含药血清对大鼠成骨细胞增殖、分化及成骨能力的影响,并初步探讨其调节成骨细胞功能的可能机制。方法:酶消化法体外培养并鉴定大鼠成骨细胞,血清药理学方法制备护骨胶囊含药血清和空白血清对成骨细胞进行干预,CCK-8试... 详细信息

目的:研究护骨胶囊含药血清对大鼠成骨细胞增殖、分化及成骨能力的影响,并初步探讨其调节成骨细胞功能的可能机制。方法:酶消化法体外培养并鉴定大鼠成骨细胞,血清药理学方法制备护骨胶囊含药血清和空白血清对成骨细胞进行干预,CCK-8试剂盒和碱性磷酸酶试剂盒分别检测成骨细胞的增殖和分化情况,半定量RT-PCR法和Western blot法检测成骨功能指标基因和上皮细胞钠离子通道(ENa C)基因的m RNA和蛋白表达。结果:与空白血清组比较,5%、10%护骨胶囊含药血清可显著促进成骨细胞增殖(P细胞分化(P细胞的增殖、分化和骨形成能力,且同时上调了成骨细胞上ENa C基因的m RNA和蛋白表达,提示护骨胶囊可能通过ENa C介导的调节途径改善成骨细胞功能,为明确其药效机制提供了新思路。

关键词：护骨胶囊血清药理学骨质疏松成骨细胞成骨功能上皮细胞钠离子通道

脂氧素A4缓解脂多糖诱导急性肺损伤的机制研究

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脂氧素A4缓解脂多糖诱导急性肺损伤的机制研究

作者：刘颖暨南大学

学位级别：硕士

目的:目前已知脂氧素A4（LXA4）可缓解脂多糖（LPS）诱导的急性肺损伤（ALI）和急性呼吸窘迫综合征（ARDS）,但是,LXA4究竟是通过介导哪个候选基因促进肺上皮细胞钠离子通道（ENaC）开放而发挥其作用的详细机制尚不够明确。本研究主要探... 详细信息

目的:目前已知脂氧素A4（LXA4）可缓解脂多糖（LPS）诱导的急性肺损伤（ALI）和急性呼吸窘迫综合征（ARDS）,但是,LXA4究竟是通过介导哪个候选基因促进肺上皮细胞钠离子通道（ENaC）开放而发挥其作用的详细机制尚不够明确。本研究主要探索LXA4究竟是通过介导哪个候选基因来调控ENaC的亚基表达?以及LXA4究竟是通过何种信号通路实现其对ENaC进行调控的?方法:1.建立ALI肺上皮细胞模型。将LPS应用于A549细胞（腺癌人类肺泡基底上皮细胞）培养液中建立ALI肺上皮细胞模型,并通过q RT-PCR（实时荧光定量PCR）测定并记录A549细胞ENaC亚基转录水平的变化。2.观察LXA4对A549细胞ENaC亚基转录水平的影响。将LXA4应用于A549细胞培养液中,通过q RT-PCR测定并观察ENaC亚基转录水平的变化。3.观察LXA4对已建立的ALI肺上皮细胞模型的ENaC亚基转录水平的影响。将LXA4添加到已含有LPS的A549细胞培养液中,通过q RT-PCR测定并观察A549细胞ENaC亚基转录水平的变化。4.对处理后的A549细胞进行转录组测序分析。通过对A549细胞组之间m RNA表达谱的比较,探寻LXA4发挥其治疗ALI作用所介导的潜在候选基因。5.通过q RT-PCR测定并观察其潜在候选基因m RNA的动态变化,以此寻找出可能的候选基因。6.采用q RT-PCR测定并观察经过LPS、LXA4、LXA4+LPS处理后的A549细胞组候选基因转录水平的变化情况。7.将不同浓度的LXA4应用于经LPS处理过的A549细胞培养液中,通过q RT-PCR测定并观察候选基因m RNA水平与LXA4浓度之间的关系,并通过western blot（蛋白质印迹法）测定并分析候选基因蛋白水平和LXA4浓度之间的关系。8.通过western blot测定和观察LXA4在不同时间间隔（0、1、2、4、6、8h）所处理的A549细胞候选基因蛋白水平与LXA4不同时间间隔处理之间的变化趋势。9.将LXA4受体（ALX）抑制剂（BOC-2）添加到LPS+LXA4处理过的A549细胞培养液中,通过western blot测定和分析候选基因和ENaC蛋白水平与BOC-2之间的关系。10.应用候选基因的si RNA对A549细胞进行处理,然后通过CCK-8（细胞计数试剂盒-8）测定并观察候选基因对A549细胞存活率的影响,并通过western blot测定并分析其对ENaC亚基表达水平的影响。11.通过利用PI3K（磷酸酰肌醇-3-激酶）抑制剂（LY294002）来明确PI3K信号通路是否参与了调控LXA4诱导候选基因的表达。结果:我们的实验结果显示:***抑制A549细胞ENaC亚基m RNA的表达,而LXA4则可增强A549细胞ENaC亚基m RNA表达,并且LXA4还可拮抗LPS对A549细胞ENaC亚基m RNA表达的抑制作用,此表明LXA4可有效缓解LPS所致的ALI。2.通过对处理后的A549细胞进行转录组测序分析后发现,潜在候选基因为PLIN2、ANGPTL4、LRP1及NDRG1等,而可能性较大的候选基因则为NDRG1。***可抑制NDRG1 m RNA的表达,而LXA4则可拮抗LPS的这种抑制作用,并可增强NDRG1 m RNA的表达。***1m RNA表达水平随LXA4浓度的增加而升高,且NDRG1的蛋白表达水平与LXA4的浓度呈正相关;此外,LXA4还可以时间依赖性方式诱导NDRG1的蛋白表达。***-2可抑制LXA4诱导的NDRG1和ENaC的蛋白表达。***1 si RNA不仅可抑制ENaC亚基的表达,而且还可降低A549细胞的存活率。***294002不仅抑制NDRG1和ENaC亚基的表达,而且还抑制了SGK1磷酸化水平,从而揭示了LXA4介导候选基因NDRG1表达的信号通路为PI3K信号通路。结论:LXA4经由PI3K信号通路介导NDRG1的表达,增强A549细胞ENaC的表达水平,促进肺上皮细胞钠离子通道（ENaC）的开放,进而促进肺上皮细胞内的水分子排除,减轻肺水肿。本研究结果将为临床上治疗ALI/ARDS等呼吸急重症患者提供帮助,并为研究及开发治疗此类疾病的新药提供一定的理论支持。

关键词：急性肺损伤脂多糖脂氧素A4 上皮细胞钠离子通道 N-myc下游调节基因-1(NDRG1)

UTB对高盐小鼠脑脊液钠离子浓度的影响及其机制

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UTB对高盐小鼠脑脊液钠离子浓度的影响及其机制

作者：宋金萍吉林大学

学位级别：硕士

背景:有研究发现,盐敏感性高血压与脑脊液钠离子浓度([Na])密切相关,给予高盐刺激后,[Na]升高先于血压升高,说明[Na]升高在盐敏感性高血压的发展中发挥重要作用。CSF由脑组织脉络丛上皮细胞(CPECs)产生并分泌,ENa Cs位于CPECs的顶端膜... 详细信息

背景:有研究发现,盐敏感性高血压与脑脊液钠离子浓度([Na])密切相关,给予高盐刺激后,[Na]升高先于血压升高,说明[Na]升高在盐敏感性高血压的发展中发挥重要作用。CSF由脑组织脉络丛上皮细胞(CPECs)产生并分泌,ENa Cs位于CPECs的顶端膜和基底膜,ENa Cs负责[Na]从血液转运至CSF,参与调控[Na]的平衡。课题组前期研究发现,小鼠尿素通道蛋白B(UTB)基因缺失,给予高盐饮食4w后,[Na]显著增加,血压明显升高,小鼠脑组织脉络丛ENa C-α表达明显增加,提示UTB基因缺失与脑组织CPECs的ENa C-α表达升高有关。UTB由SLC14α1编码,在脑、肾脏、红细胞、睾丸和心脏等器官中表达,主要参与尿浓缩[2]、性成熟[3]及心肌肥大[4]等过程的调节。然而,UTB基因在脑组织的作用尚不明确。为探讨表达于脑组织中UTB的作用,阐明脑组织脉络丛中UTB与ENa Cs的关系,本研究选取小鼠CPECs,通过转染UTB-sh RNA质粒下调UTB的表达,观察下调UTB对小鼠CPECs细胞膜ENa C-α的影响;并以UTB基因缺失小鼠为研究对象,给予4w高盐饮食后,观察UTB基因缺失对高盐饮食小鼠脑组织ENa C-α的影响并探讨其可能机制;为临床上盐敏感性高血压的防治提供实验数据和治疗新靶点。研究目的:探讨下调UTB的表达对小鼠脑脉络丛上皮细胞ENa C-α的影响;并阐明UTB基因参与调控小鼠[Na]的可能机制。方法与结果:(一)体外实验:以小鼠脑组织CPECs为模型,探讨下调CPECs的UTB表达对ENa C-α的影响1.小鼠脑组织CPECs的鉴定TTR是特异性表达于小鼠CPECs的蛋白,细胞免疫荧光结果发现:胞浆表达TTR,证实细胞为小鼠CPECs。2.下调小鼠CPECs中UTB表达以小鼠CPECs为细胞模型,转染sh RNA-scramble质粒为阴性对照,UTB抑制剂PU14为阳性对照,将sh RNA-UTB质粒转染入小鼠CPECs细胞中,转染48 h后,细胞免疫荧光结果显示:细胞转染效率为60%;RT-PCR结果显示:sh RNA-UTB质粒的抑制率达到65.7%;免疫荧光和Western-blot结果显示:小鼠CPECs转染sh RNA-UTB质粒48 h后,UTB蛋白表达明显降低(P细胞免疫荧光、RT-PCR和Western-blot结果发现:小鼠CPECs转染sh RNA-UTB质粒48 h后,ENa C-α的m RNA和蛋白表达明显增加(P细胞免疫荧光染色、RT-PCR和Western-blot结果发现:小鼠CPECs转染sh RNA-UTB质粒组48h后,p-s GK(Ser422)/s GK、p-s GK(Thr256)/s GK和p-Nedd4-2(Ser328)/Nedd4-2磷酸化水平增加(P钠离子浓度的影响及机制***基因缺失小鼠的获得利用杂合子小鼠交配繁殖获得遗传背景相同的子代小鼠,提取小鼠基因组DNA进行基因型鉴定,PCR结果显示:野生型小鼠,在400bp处显示一条目的片段;杂合子小鼠,在250bp及400bp处有两条目的片段;而UTB基因缺失型小鼠,在250bp处显示一条目的片段。***基因缺失对高盐饮食小鼠脑脊液钠离子浓度的影响利用钠离子试剂盒检测小鼠[Na]变化,结果显示:与对照组相比,UTB基因缺失小鼠给予4w高盐饮食后,[Na]显著增加(P<0.05)。***基因缺失对高盐饮食小鼠脑组织脉络丛ENa C-α表达的影响RT-PCR、Western-blot和免疫组织化学结果发现:UTB基因缺失小鼠给予4w高盐饮食后,脑组织脉络丛ENa C-α的m RNA和蛋白的表达水平显著增加(P<0.05)。***基因缺失增强高盐饮食小鼠脉络丛ENa C-α表达的可能机制RT-PCR、Western-blot和免疫组织化学结果发现:UTB基因

关键词：尿素通道蛋白B 小鼠脉络丛上皮细胞脑脊液钠离子浓度上皮细胞钠离子通道

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α-ENaC在呼吸系统疾病中的研究进展

国际呼吸杂志 2023年第8期43卷 981-987页

作者：马畅张念贾姣姣任文杰安珍白义春新乡医学院公共卫生学院新乡453000 新乡医学院健康中原研究院新乡453000

上皮细胞钠离子通道(ENaC)是广泛分布于全身各上皮细胞膜表面的离子通道,在呼吸道主要分布于肺泡上皮细胞和气管上皮细胞中,具有调节细胞内Na+浓度、维持体液平衡的功能。人类的ENaC由α、β、γ和δ4个亚单位构成,其中α-ENaC作为ENaC... 详细信息

上皮细胞钠离子通道(ENaC)是广泛分布于全身各上皮细胞膜表面的离子通道,在呼吸道主要分布于肺泡上皮细胞和气管上皮细胞中,具有调节细胞内Na+浓度、维持体液平衡的功能。人类的ENaC由α、β、γ和δ4个亚单位构成,其中α-ENaC作为ENaC发挥功能的必需元件,是Na+转运的限速步骤。本文就近年来有关α-ENaC的结构、功能异常与呼吸系统相关疾病间的关系及潜在调节机制进行系统综述,并对不同药物的治疗效果进行总结,以期为揭示呼吸系统相关疾病的发病机制、促进新型药物的研发提供理论依据。

关键词：呼吸系统疾病上皮细胞钠离子通道结构功能