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Toll样受体在人眼角膜上皮和永生化人角膜上皮细胞系的表达及功能研究

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中华医学杂志 2005年第32期85卷 2269-2273页

作者：高建鲁吴欣怡山东大学齐鲁医院眼科济南250012

目的探讨Toll样受体(TLR)1～9在人眼角膜上皮和上皮细胞系的表达及其功能性。方法以健康人外周血单个核细胞(PBMC)为阳性对照,收集20例健康青年人角膜上皮标本和培养永生化人角膜上皮细胞系(THCE)细胞,用半定量反转录聚合酶链反应检测T... 详细信息

目的探讨Toll样受体(TLR)1～9在人眼角膜上皮和上皮细胞系的表达及其功能性。方法以健康人外周血单个核细胞(PBMC)为阳性对照,收集20例健康青年人角膜上皮标本和培养永生化人角膜上皮细胞系(THCE)细胞,用半定量反转录聚合酶链反应检测TLR1～9mRNA表达;Western印迹检测TLR2、4的蛋白质表达;TLR3和TLR4的配体对THCE刺激后酶联免疫检测分泌IL8的变化,结合抗体封闭实验,研究角膜上皮TLR的功能性。结果与PBMC比较,人角膜上皮强表达TLR1、2、3、5、6、9,弱表达TLR8,微弱表达TLR4;20例角膜上皮标本中发现1例TLR3、4、6、8阴性表达,1例TLR5微弱表达;人角膜上皮在蛋白质水平表达TLR2、4;THCE细胞与人角膜上皮有相似的TLR表达谱;LPS和PolyI:C刺激THCE1、4、8h后IL8分泌增加,8h时分别达到对照组的10倍和7倍(均P上皮表达TLR1～9,但不同TLRs表达水平有差异。THCE是研究人角膜上皮TLR表达和功能的良好细胞系。

关键词：上皮,角膜角膜疾病角膜炎基因表达 Toll样受体眼角膜上皮上皮细胞系人角膜永生化功能研究

人乳头状瘤病毒16型DNA诱导的永生化人喉上皮细胞系的建立

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中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2006年第2期41卷 139-141页

作者：柯朝阳吴展元暨南大学第二临床医学院(深圳市人民医院)耳鼻咽喉头颈外科深圳518020 武汉大学人民医院耳鼻咽喉头颈外科

人乳头状瘤病毒（human papillomavirus，HPV）是目前已知的三大DNA致癌病毒之一，具有嗜上皮寄生的特性，其中16型、18型是高危致癌型。许多学者利用HPV的这一致癌特性，相继建立了人口腔、食管、支气管、子宫颈等上皮的永生化细胞株... 详细信息

人乳头状瘤病毒（human papillomavirus，HPV）是目前已知的三大DNA致癌病毒之一，具有嗜上皮寄生的特性，其中16型、18型是高危致癌型。许多学者利用HPV的这一致癌特性，相继建立了人口腔、食管、支气管、子宫颈等上皮的永生化细胞株，为研究这些部位的肿瘤提供了良好的体外模型。HPV也可能与喉癌的发生密切相关，但一直缺乏直接的证据。本实验应用含有HPV16 DNA的质粒转染正常人喉上皮细胞，试图建立永生化人喉上皮细胞系并确证HPV与喉癌的发生有无因果关系。

关键词：人乳头状瘤病毒16型上皮细胞系永生化 DNA 人喉 HPV16 致癌病毒喉上皮细胞体外模型实验应用

小鼠胸腺髓质上皮细胞系MTEC1对3G11^-6C10^-CD4^+CD8^-胸腺髓质细胞亚群的作用

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科学通报 1999年第9期44卷 963-968页

作者：葛青陈慰峰北京医科大学免疫系北京100083

3G1 1 -6C1 0 -CD4+CD8-胸腺髓质细胞是CD4单阳性 (SP)胸腺细胞中的亚群之一 ,表型为TCRαβ+CD6 9loHSAmed/lo,可接受ConA刺激产生增殖应答和细胞因子分泌所分泌的细胞因子以Th2型为主 ,还有少量IFNγ存在 ,是处于CD4SP成熟过程的中... 详细信息

3G1 1 -6C1 0 -CD4+CD8-胸腺髓质细胞是CD4单阳性 (SP)胸腺细胞中的亚群之一 ,表型为TCRαβ+CD6 9loHSAmed/lo,可接受ConA刺激产生增殖应答和细胞因子分泌所分泌的细胞因子以Th2型为主 ,还有少量IFNγ存在 ,是处于CD4SP成熟过程的中后期 ,Th0向Th2转化的过渡型细胞为探讨胸腺微环境中基质细胞对这一亚群细胞的作用 ,在研究体系中加入一株胸腺髓质型上皮细胞系MFEC1 ,发现MTEC1可促进ConA刺激的 3G1 1 -6C1 0 -CD4+CD8-胸腺髓质细胞增殖和IL 6分泌 ,但IL 4及IL 1 0的产生部分地受到抑制 ,不增加IFNγ分泌 ,亦不诱导IL

关键词：上皮细胞系 MTEC1 胸腺髓质细胞细胞增殖

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小鼠胸腺上皮细胞系的细胞学鉴定

解剖学报 1990年第4期21卷 408-410页

作者：吴江声张兰芬傅爱华陈慰峰北京医科大学组织学胚胎学教研室北京100083 北京医科大学免疫学教研室北京100083

本文报道小鼠胸腺上皮细胞系(MTEC_1系)的细胞学鉴定。细胞为多角形,呈上皮样排列,用抗角蛋白抗体显示细胞胞质内均含角蛋白。电镜观察可见胞质内含成束的张力细丝,相邻细胞间有桥粒结构。用抗小鼠上皮细胞单克隆抗体进行免疫组织化学染... 详细信息

本文报道小鼠胸腺上皮细胞系(MTEC_1系)的细胞学鉴定。细胞为多角形,呈上皮样排列,用抗角蛋白抗体显示细胞胞质内均含角蛋白。电镜观察可见胞质内含成束的张力细丝,相邻细胞间有桥粒结构。用抗小鼠上皮细胞单克隆抗体进行免疫组织化学染色,几乎全部MTEC_1细胞均为MTS33阳性,提示MTEC_1细胞是来源于胸腺體质的上皮样细胞。大多数MTEC_1细胞有正常小鼠染色体数(40)条。本文结果表明,MTEC_1细胞系属正常小鼠胸腺上皮细胞。

关键词：胸腺上皮细胞系细胞学鉴定

三氧化二砷抑制人晶状体上皮细胞系HLE—B3作用的研究

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中华眼科杂志 2008年第12期44卷 1118-1121页

作者：刘平葛红岩张红石广森冷非哈尔滨医科大学第一附属临床医学院眼科

三氧化二砷（arsenic trioxide，As2O3）是中药砒霜的有效成分，我国学者应用As2O3作为抗肿瘤药物临床治疗急性早幼粒细胞性白血病，取得了满意的疗效。近年来，国内外研究As2O3作用实体瘤细胞的报道较多，研究发现其作用机制主要是诱... 详细信息

三氧化二砷（arsenic trioxide，As2O3）是中药砒霜的有效成分，我国学者应用As2O3作为抗肿瘤药物临床治疗急性早幼粒细胞性白血病，取得了满意的疗效。近年来，国内外研究As2O3作用实体瘤细胞的报道较多，研究发现其作用机制主要是诱导细胞凋亡。白内障术后后囊膜混浊的主要病理改变是术后残留的晶状体上皮细胞迁徙到后囊膜，随之发生上皮细胞过度增殖所致。已研究得出As2O3能够抑制体外培养的兔晶状体上皮细胞的生长，同时在水分离时应用As2O3抑制兔眼后囊膜混浊。

关键词：上皮细胞系三氧化二砷人晶状体急性早幼粒细胞性白血病晶状体上皮细胞 HLE As2O3 后囊膜混浊

地高辛抑制豚鼠心室肌细胞Na^+,K^+-ATP酶和人胚肾上皮细胞系HERG钾通道电流

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基础医学与临床 2012年第1期32卷 92-93页

作者：陈秋韩圣娜张雨段彦彦张莉蓉郑州大学基础医学院药理学教研室河南郑州450001

强心苷类药对Na^＋,K^＋-ATP酶的作用在低浓度时为兴奋、在高浓度时呈抑制作用[1]。应用膜片钳技术观察地高辛（Digoxin）对豚鼠心室肌细胞Na^＋,K^＋-ATP酶电流（Ip）的作用还未见报道。此外,由于很多药物的心脏不良反应是通过抑制人et... 详细信息

强心苷类药对Na^＋,K^＋-ATP酶的作用在低浓度时为兴奋、在高浓度时呈抑制作用[1]。应用膜片钳技术观察地高辛（Digoxin）对豚鼠心室肌细胞Na^＋,K^＋-ATP酶电流（Ip）的作用还未见报道。此外,由于很多药物的心脏不良反应是通过抑制人ether-a-go-go-related基因（HERG）编码的快速激活的延迟整流钾通道（IKr）而引起QT间期延长和尖端扭转性室速（TdP）。

关键词：心室肌细胞钾通道电流 ATP酶地高辛上皮细胞系 HERG 豚鼠人胚肾

氢气能减少人肺上皮细胞系缺氧/复氧损伤后炎性因子释放

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基础医学与临床 2014年第6期34卷 851-852页

作者：刘军肖韩晨燕付国俊河北省人民医院呼吸内科河北石家庄050051 河北省直机关第一门诊部保健科河北石家庄050051 沧州市人民医院皮肤科河北沧州061000

肺部良好的血液循环是组织细胞摄取氧及保证细胞生存的基本条件，肺部缺血、缺氧诱发过度的炎性反应，是肺损伤重要病理过程。近年来，研究发现氢气具有抗炎作用，减轻缺血再灌注损伤等炎性因子过量释放。本实验拟探讨氢气对肺细胞缺氧... 详细信息

肺部良好的血液循环是组织细胞摄取氧及保证细胞生存的基本条件，肺部缺血、缺氧诱发过度的炎性反应，是肺损伤重要病理过程。近年来，研究发现氢气具有抗炎作用，减轻缺血再灌注损伤等炎性因子过量释放。本实验拟探讨氢气对肺细胞缺氧复氧损伤后炎性反应的影响，进一步证明氢气对肺细胞缺氧复氧后炎性因子的作用。

关键词：缺氧复氧损伤炎性因子上皮细胞系氢气人肺缺血再灌注损伤气能缺氧复氧损伤

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牦牛乳腺上皮细胞系的建立与生物学特性研究

牦牛乳腺上皮细胞系的建立与生物学特性研究

作者：郝明超甘肃农业大学

学位级别：硕士

本研究目的是建立牦牛乳腺上皮细胞体外培养体系，为在细胞水平上研究牦牛乳腺发育和泌乳生理功能的调控机制奠定基础，同时为牦牛体细胞克隆实验提供核供体。实验以泌乳期牦牛乳腺组织为材料，进行了如下研究：（1）选取泌乳期牦... 详细信息

本研究目的是建立牦牛乳腺上皮细胞体外培养体系，为在细胞水平上研究牦牛乳腺发育和泌乳生理功能的调控机制奠定基础，同时为牦牛体细胞克隆实验提供核供体。实验以泌乳期牦牛乳腺组织为材料，进行了如下研究：（1）选取泌乳期牦牛的乳腺组织，采用组织块接种法和酶消化法分离培养了原代牦牛乳腺上皮细胞，然后经差速消化法和差速贴壁法分离纯化，最后建立了牦牛乳腺上皮细胞系-YMEC和牦牛乳腺肌上皮细胞系-YMM。YMEC细胞可在含10%胎牛血清的DMEM/F12培养液中长期培养（35代/6个月）。YMEC细胞呈典型的“铺路石样”形态，接种24h后呈岛屿状生长，随着细胞增殖，出现“lumen-like”结构;正常培养条件培养25代后，细胞逐渐分化成2种形态。YMM体外培养半年后（40代）仍保持旺盛的生长能力;形态上YMM细胞呈特殊的“星状”结构，胞体两端有长短不一的丝状伪足;细胞长满后，细胞之间有间隙，不形成膜与膜的联系;15代后细胞变为“多角”形。（2）研究了YMEC细胞的活力、生长曲线、群体倍增时间、核型分析、超微结构;激素对YMEC细胞β-酪蛋白mRNA表达的影响;以及YMEC细胞的立体培养;并通过免疫细胞化学、PT-PCR法对其进行鉴定。YMEC细胞生长曲线呈“S”形，群体倍增时间为45～48h;染色体2n=60，包括29对常染色体和一对性染色体X;污染检测结果为阴性;细胞表面有丰富的微绒毛，细胞质内含丰富的线粒体和粗面内质网;角蛋白和波形蛋白染色结果都呈阳性，α-肌动蛋白染色结构为阴性;在激素诱导培养时，检测到了β-酪蛋白mRNA的表达;立体培养后YMEC细胞可形成立体的“腺管样”或“球形”结构。（3）研究了YMM细胞的活力、生长曲线、群体倍增时间、核型分析;并通过免疫细胞化学法和催产素反应对其进行鉴定。YMM细胞生长曲线呈“S”形，群体倍增时间为66～68h，形态改变后倍增时间缩短到59-61h;染色体2n=60，包括29对常染色体和一对性染色体X;污染检测结果为阴性;加入催产素后出现收缩反应，角蛋白、α-肌动蛋白和波形蛋白染色结果都呈阳性。

关键词：牦牛乳腺上皮细胞系肌上皮细胞系生物学特性

中草药对人低分化鼻咽癌上皮细胞系(CNE-2Z)裸小鼠移植瘤的实验治疗

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湛江医学院学报 1988年第1期 8-12页

作者：赵明伦黄培根沈淑静唐慰萍陈锦莫梅英湛江医学院肿瘤研究室湛江医学院肿瘤研究室

作者用体外筛选有抑制CNE-2Z细胞生长作用的中草药861、862及863,作用于CNE-2Z裸小鼠移植瘤模型,观察其抑瘤率、瘤细胞形态及细胞分裂周期变化、局部组织反应及对全身的影响,了解其在体内的作用。结果表明三种实验药物中,861与氟脲嘧啶... 详细信息

作者用体外筛选有抑制CNE-2Z细胞生长作用的中草药861、862及863,作用于CNE-2Z裸小鼠移植瘤模型,观察其抑瘤率、瘤细胞形态及细胞分裂周期变化、局部组织反应及对全身的影响,了解其在体内的作用。结果表明三种实验药物中,861与氟脲嘧啶作用相近,抑瘤率分别为50.9％及50.2％,对全身损伤较小。862的抑瘤率最高(67.0％),但对全身损害也较大。863则不仅对机体损伤较大,抑瘤作用也不明显。

关键词：裸小鼠 CNE-2Z 实验治疗上皮细胞系移植瘤模型抑瘤作用实验药物瘤细胞机体损伤氟脲嘧啶